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QY1骨髓多能间质干细胞系向心肌细胞和血管内皮细胞分化 被引量：3
1
作者 杨晶 谢祁阳 向红霞 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期93-98,共6页
目的:探索QY1骨髓多能间质干细胞系在体外向心肌细胞、血管内皮细胞分化的能力;优化骨髓多能间质干细胞向心肌细胞分化的体外适宜诱导条件;并初步探讨骨髓间质干细胞向成心肌成血管细胞分化的能力。方法:分别用5-氮胞苷、血管内皮生长... 目的:探索QY1骨髓多能间质干细胞系在体外向心肌细胞、血管内皮细胞分化的能力;优化骨髓多能间质干细胞向心肌细胞分化的体外适宜诱导条件;并初步探讨骨髓间质干细胞向成心肌成血管细胞分化的能力。方法:分别用5-氮胞苷、血管内皮生长因子对QY1骨髓多能间质干细胞进行定向诱导分化。利用免疫组化、RT-PCR鉴定分化后的细胞。结果:在传代培养至72h时,加入10μmol/L5-氮胞苷诱导24h后换液培养,以后每7d换液1次,培养14d进行再次诱导的条件下,细胞能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,诱导率达(39.47±0.56)%。心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达。在用血管内皮生长因子诱导48h后,出现呈直线排列的血管内皮细胞;7d后,有部分区域细胞相互连接呈血管内皮细胞网状;14d时免疫组化检测,发现诱导后的细胞血管内皮特异性表面抗体CD31和VIII因子表达阳性。结论:QY1骨髓多能间质干细胞系细胞在体外特定条件下具有分化为心肌细胞和血管内皮细胞的能力。 展开更多
关键词 QY1骨髓间质干细胞 分化 心肌细胞 血管内皮细胞
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SD大白鼠骨髓多能间质干细胞QY1细胞系的生物稳定性分析 被引量：4
2
作者 谢祁阳 杨晶 秘祖霞 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期505-511,共7页
目的：探索建立Sprague-Dawley大白鼠骨髓间质干细胞（mesenchymat stem cells，MSCs）系体外长期培养的适宜条件及其生物学特性，并分析其稳定性，为进一步研究MSCs的诱导分化和应用提供理想的细胞模型。方法：应用细胞生物学、干细胞... 目的：探索建立Sprague-Dawley大白鼠骨髓间质干细胞（mesenchymat stem cells，MSCs）系体外长期培养的适宜条件及其生物学特性，并分析其稳定性，为进一步研究MSCs的诱导分化和应用提供理想的细胞模型。方法：应用细胞生物学、干细胞组织工程学等方法培养并纯化骨髓MSCs，检测细胞生长的形态、换液时间、生长曲线、倍增时间、贴壁率、染色体、培养条件和反复冻存后复苏对其生物学特性的影响。结果：多次传代后的细胞呈均一的成纤维细胞样；骨髓MSCs原代培养10～12d时融合至80％～90％，不同的首次换液时间之间差异没有统计学意义（P〉0．05）；P1，P3，P10，P20代细胞生长曲线基本相同，细胞的倍增时间P1为34．2h；P3为33．9h；P10为31．8h；P20为30．6h。4代细胞任意两代之间的细胞数差异没有统计学意义（P〉0．05）；传代后细胞迅速贴壁，约89％的细胞贴壁主要发生在接种后10h内。4代细胞任意两代之间的贴壁率差异没有统计学意义（P〉0．05）；在浓度为20％的标准胎牛血清中，骨髓MSCs的增殖活性最高；在种植细胞密度为8×10^4／mL时，骨髓MSCs的增殖活性最高；吉姆萨染色显示P8代骨髓MSCs胞浆为淡紫红色，胞核为深蓝色，细胞内可见1～2个核仁；P8和P20代细胞染色体形态及数目均正常，染色体核型组成均为42，XY，符合大鼠正常二倍体细胞系特征；反复冻存后复苏骨髓MSCs，其活细胞数〉85％。至今已体外培养10个多月。结论：QY1细胞系是纯的、可长期传代的细胞系，可扩增并保持未分化状态，且其生物学性能稳定。 展开更多
关键词 间质干细胞 骨髓 QY1细胞系 SD大白鼠 生物学稳定性
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QY1骨髓多能间质干细胞系多向分化潜能的检测
3
作者 杨晶 谢祁阳 +2 位作者 张翼 向红霞 郭赞 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期268-275,共8页
目的:检测QY1骨髓间质干细胞系在体外向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞和神经细胞分化的能力。方法:选用第5代QY1骨髓间质干细胞系,分别用成脂培养基、成软骨培养基、成骨培养基、5?氮胞苷、血管内皮生长因子、... 目的:检测QY1骨髓间质干细胞系在体外向脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞和神经细胞分化的能力。方法:选用第5代QY1骨髓间质干细胞系,分别用成脂培养基、成软骨培养基、成骨培养基、5?氮胞苷、血管内皮生长因子、神经细胞培养液(诱导液1为10mmol/Lβ-巯基乙醇;诱导液2为2%二甲基亚砜和10-8mol/L地塞米松)对其进行定向诱导分化。采用染色法、免疫组化法、RT-PCR法鉴定分化后的细胞。结果:在成脂培养基培养21d左右出现大量含脂滴的脂肪细胞,苏丹III染色法检测脂肪细胞胞浆呈桔红色。在成软骨培养基培养21d左右有软骨结节形成,阿尔新蓝染色法将软骨结节染为深蓝色。在成骨培养基培养35d左右有凸出的骨结节形成,VonKossa染色法显示有黑色矿化结节形成。在10μmol/L5?氮胞苷诱导液中能出现自发性搏动的心肌细胞和肌管样结构,免疫组化法显示心肌特异性的表面抗体α-横纹肌肌动蛋白、心肌连接蛋白-43表达阳性,RT-PCR法检测有心肌特异性因子α-肌球蛋白重链表达。在含有50ng/mL血管内皮生长因子的诱导液中能出现呈直线排列的血管内皮细胞和血管内皮细胞网状结构,免疫组化法显示血管内皮特异性表面抗体CD31和VIII因子表达阳性。神经诱导液1处理组出现神经元,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阴性,神经元特异性核蛋白表达阳性;神经诱导液2处理组出现神经胶质细胞,免疫组化法显示胶质纤维酸性蛋白表达阳性,神经元特异性核蛋白表达阴性。结论:本研究证实QY1骨髓间质干细胞系细胞具有分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、血管内皮细胞、神经元和神经胶质细胞的潜能,提示QY1骨髓间质干细胞系具有向多个胚层、7个方向分化的多向潜能。 展开更多
关键词 QY1骨髓间质干细胞 多向分化 脂肪细胞 软骨细胞 成骨细胞 神经元 神经胶质细胞
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运动性疲劳的蛋白质变化及其蛋白质组学研究展望 被引量：4
4
作者 张松江 史绍蓉 邬力祥 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期117-120,共4页
关键词 蛋白质组学研 运动性疲劳 白质变化 分子生物学机制 能量代谢紊乱 正常生理现象 神经内分泌 运动过程
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原发性震颤的遗传学进展 被引量：3
5
作者 梁卉 虢毅 邓昊 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第1期5-10,共6页
就原发性震颤(essential tremor,ET)的遗传学基础作一探讨.ET是最常见的神经疾病之一,其临床表现复杂多样,病因机制尚不清楚.常有家族史,目前已定位3个疾病基因位点,最近发现多巴胺受体D3(the dopamine receptor D3 gene,DRD3)和LINGO1... 就原发性震颤(essential tremor,ET)的遗传学基础作一探讨.ET是最常见的神经疾病之一,其临床表现复杂多样,病因机制尚不清楚.常有家族史,目前已定位3个疾病基因位点,最近发现多巴胺受体D3(the dopamine receptor D3 gene,DRD3)和LINGO1基因变异可能与ET发病相关. 展开更多
关键词 原发性震颤 易感基因 DRD3 LINGO1 动物模型
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2型腺相关病毒转导人骨髓CD34^+细胞与间充质干细胞 被引量：1
6
作者 孙小娟 王峰 +1 位作者 谭孟群 卢光琇 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期19-23,共5页
目的:探讨2型重组腺相关病毒(AAV2)载体能否有效转导人骨髓CD34+细胞与间充质干细胞。方法:构建、包装、纯化携带绿色荧光蛋白基因的2型重组腺相关病毒(rAAV22/GFP),转染骨髓CD34+造血干/祖细胞和间充质干细胞,转导后48 h在荧光显微镜... 目的:探讨2型重组腺相关病毒(AAV2)载体能否有效转导人骨髓CD34+细胞与间充质干细胞。方法:构建、包装、纯化携带绿色荧光蛋白基因的2型重组腺相关病毒(rAAV22/GFP),转染骨髓CD34+造血干/祖细胞和间充质干细胞,转导后48 h在荧光显微镜下观察GFP的表达,并比较羟基脲(HU)处理前后rAAV2/GFP对CD34+细胞的转染效率。结果:rAAV2/GFP对CD34+细胞的转染效率为5.3%±1.7%。经羟基脲预处理后达13.2%±2.8%,rAAV2/GFP对间充质干细胞的转染效率为23%±3.6%。结论:rAAV2对间充质干细胞的转染效率高于骨髓CD34+细胞,羟基脲预处理可以明显提高rAAV2对CD34+细胞的转染效率。 展开更多
关键词 2型重组腺相关病毒 造血干/祖细胞 间充质干细胞 绿色荧光蛋白 羟基脲 基因转导
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成体干细胞可塑性研究中的若干哲学思考 被引量：1
7
作者 尹雅玲 贺达仁 何群 《医学与哲学》 2004年第9期49-50,共2页
随着干细胞生物学研究的不断深入 ,成体干细胞被发现可以分化成组织来源与其无关的其他系统的细胞 ,即成体干细胞的可塑性。但是最近不断有学者对其提出质疑 ,认为可塑性可能是与“细胞融合”或成年组织中的“多潜能成年祖细胞”有关。... 随着干细胞生物学研究的不断深入 ,成体干细胞被发现可以分化成组织来源与其无关的其他系统的细胞 ,即成体干细胞的可塑性。但是最近不断有学者对其提出质疑 ,认为可塑性可能是与“细胞融合”或成年组织中的“多潜能成年祖细胞”有关。面对可塑性上两种截然相反的观点 ,我们在热切关注其研究进展的同时 。 展开更多
关键词 成体干细胞 横向分化 认识论 技术
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2型腺相关病毒载体介导的apoAⅠ和SR-BⅠ双基因表达对动脉硬化模型鼠保护效应的研究(英文) 被引量：2
8
作者 栗炳南 李志艳 +2 位作者 张娟 刘珍清 谭孟群 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第9期830-841,共12页
重组腺相关病毒载体(AAV)具有很多安全方面的特性,有利于其在动脉硬化方面的治疗研究.尽管如此,传统的介导单个基因的治疗效果并不是很理想,这都归因于动脉硬化疾病的发生是由于多种基因的缺陷而不是单单某一特定基因.为了克服这个问题... 重组腺相关病毒载体(AAV)具有很多安全方面的特性,有利于其在动脉硬化方面的治疗研究.尽管如此,传统的介导单个基因的治疗效果并不是很理想,这都归因于动脉硬化疾病的发生是由于多种基因的缺陷而不是单单某一特定基因.为了克服这个问题,尝试了重组腺相关病毒载体介导的双基因对动脉硬化的治疗研究.实验大鼠分为动脉硬化模型鼠和正常饮食组(即正常对照组),动脉硬化组大鼠被随机分为3组,分别进行AAV-apoAⅠ/SR-BⅠ,AAV-apoAⅠ,与AAV-GFP尾静脉注射,同时正常饮食组尾静脉注射PBS作为对照.其中目的基因mRNA检测采用RT-PCR方法,蛋白质表达的检测采用Western blotting和ELISA.由饮食诱导的动脉硬化和高胆固醇的大鼠模型在尾静脉注射后8周进行冰冻切片的荧光检测.重组AAV载体显示出较强的表达活性.尾静脉注射治疗8周后,AAV-apoAⅠ/SR-BⅠ与AAV-apoAⅠ治疗组血浆总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇浓度与AAV-GFP治疗组相比有了明显下降(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇浓度各组之间没有明显差异,彩色多普勒超声检测发现,AAV-apoAⅠ/SR-BⅠ与AAV-apoAⅠ治疗组的腹主动脉的内中膜厚度相对于AAV-GFP治疗组有了明显下降(P<0.05),血清hs-CRP和SOD的水平有了明显上升(P<0.01),血清MDA的水平有了明显的下降(P<0.01).同时也检测了动脉硬化相关基因mRNA水平的表达.结果显示,rAAV-hapoAⅠ-IRES-hSR-BⅠ治疗后可能是通过抑制NF-κB的活性发挥抗炎作用减少炎症因子的释放,增加动脉硬化板块的稳定性以及降低血浆胆固醇含量的.总之,利用2型腺相关病毒载体介导的基因转移过度表达人载脂蛋白AⅠ和SR-BⅠ可能对饮食诱发大鼠高胆固醇血症和动脉硬化的产生有利影响.这些结果可能为动脉粥样硬化基因治疗提供了一种新的研究思路. 展开更多
关键词 2型腺相关病毒载体 载脂蛋白A I B族I型清道夫受体 胆固醇逆向转运 基因治疗
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