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三氧化二砷下调MG-63骨肉瘤细胞IEX-1基因表达的转录调控机制研究 被引量:7
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作者 肖涛 朱武 +4 位作者 姚茂金 方建珍 罗远明 曾伟 胡金玺 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第7期828-833,共6页
三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)是中国传统中药砒霜的主要有效成分,最早应用于血液系统肿瘤的治疗,随后研究表明其对实体瘤也具有抑制细胞增殖并诱导凋亡的作用.早期研究发现,1.0!mol/L的As2O3可以体外诱导骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋... 三氧化二砷(arsenic trioxide,As2O3)是中国传统中药砒霜的主要有效成分,最早应用于血液系统肿瘤的治疗,随后研究表明其对实体瘤也具有抑制细胞增殖并诱导凋亡的作用.早期研究发现,1.0!mol/L的As2O3可以体外诱导骨肉瘤细胞系MG-63细胞凋亡,进一步的cDNA芯片分析、RT-PCR、RNA印迹证实细胞凋亡与As2O3干预后IEX-1基因表达下调有关.IEX-1为早期诱导应答基因,调节细胞生长和凋亡.通过荧光素酶分析,EMSA、蛋白质印迹等实验,发现As2O3干预骨肉瘤细胞系MG-63后能诱导p53蛋白表达上调,增加的p53蛋白通过与IEX-1的启动子结合,转录抑制IEX-1的转录,导致IEX-1基因表达下调.进一步证实了IEX-1与骨肉瘤的重要关系,同时也阐明As2O3诱导IEX-1基因表达下调的转录调控机制. 展开更多
关键词 AS2O3 IEX-1 骨肉瘤 p53 转录调控
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IGF-1对IL-1诱导的兔关节软骨细胞NO和PGE2的影响 被引量:14
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作者 彭程 肖涛 +3 位作者 罗远明 刘夏君 林绵辉 胡金玺 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期197-203,共7页
目的:检测合成性细胞因子胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对损伤性细胞因子IL-1(interleukin-1)诱导的兔关节软骨细胞产生NO(nitricoxide)和前列腺素(prostaglandin E2,PGE2)的影响,探讨IGF-1在骨关节炎治疗中... 目的:检测合成性细胞因子胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对损伤性细胞因子IL-1(interleukin-1)诱导的兔关节软骨细胞产生NO(nitricoxide)和前列腺素(prostaglandin E2,PGE2)的影响,探讨IGF-1在骨关节炎治疗中的作用机制。方法:实验分为IL-1β10μg/L组、IL-1β10μg/L+IGF-11μg/L组、IL-1β10μg/L+IGF-110μg/L组、IL-1β10μg/L+IGF-150μg/L组、IL-1β10μg/L+IGF-1100μg/L组、IGF-150μg/L组和空白对照组。首先进行2月龄兔原代软骨细胞的培养并进行鉴定,然后将IL-1β10μg/L单独或与不同浓度的IGF-1共育于第2代兔关节软骨细胞,硝酸还原酶法测定实验组细胞上清液NO的含量,ELISA酶联免疫竞争法测定细胞上清液中PGE2含量,再对测定的NO和PGE2的浓度与IGF-1和IL-1的浓度进行有关的统计学分析。结果:IL-1β10μg/L组NO浓度为(89.971±10.224)μmol/L,PGE2浓度为(22.028±8.731)ng/L;空白组NO浓度为(12.404±8.809)μmol/L,PGE2浓度为(1.900±0.227)ng/L。IL-1β10μg/L组与空白组比较,NO和PGE2明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。在IL-1β均为10μg/L时,IGF-1可以呈剂量依赖地降低IL-1诱导的兔关节软骨细胞NO和PGE2的升高,并且在50μg/L时即可达到最佳浓度。结论:IL-1能增加软骨细胞培养中的NO和PGE2的产生。IGF-1在体外可以呈剂量依赖地降低IL-1诱导的兔关节软骨细胞NO和PGE2的升高,其最佳浓度为50μg/L。 展开更多
关键词 白介素-1 胰岛素样生长因子-1 一氧化氮 前列腺素E2 骨关节炎 软骨细胞
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实时荧光定量PCR检测骨性关节炎病人膝关节液中miR-140的表达 被引量:11
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作者 张明 刘立宏 +1 位作者 肖涛 郭文娟 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1210-1214,共5页
目的:检测不同Kellgren和Lawrence X线分级骨性关节炎病人膝关节液中微小RNA-140(microRNA-140,miR-140)的表达水平,为进一步研究miR-140在骨性关节炎发生、发展中的作用提供理论依据。方法:收集骨性关节炎病人膝关节液40例[关节炎组,... 目的:检测不同Kellgren和Lawrence X线分级骨性关节炎病人膝关节液中微小RNA-140(microRNA-140,miR-140)的表达水平,为进一步研究miR-140在骨性关节炎发生、发展中的作用提供理论依据。方法:收集骨性关节炎病人膝关节液40例[关节炎组,又依据Kellgren和LawrenceX线诊断标准分为Ⅰ级亚组(10例)、Ⅱ级亚组(10例)、Ⅲ级亚组(10例)、Ⅳ级亚组(10例)],非骨性关节炎膝关节液20例(对照组,包括半月板损伤、交叉韧带损伤、外伤)。应用实时荧光定量PCR检测骨性关节炎组及对照组膝关节液中miR-140的含量。以U6snRNA为内参,求出每个样本的Ct值。结果:miR-140在所有关节液标本中都能检测到。与对照组比较,miR-140在关节炎组中的含量下降(P<0.05)。Ⅳ级亚组miR-140的表达水平与Ⅰ级亚组、Ⅱ级亚组、Ⅲ级亚组比较,差异有统计学意义(P<0.05);骨性关节炎的严重程度与miR-140的表达水平呈负相关(r=–0.917,P<0.05)。结论:人膝关节液中存在miR-140,并且可以方便地应用实时荧光定量PCR进行检测。miR-140在关节炎组膝关节液中的表达水平下调,且与骨性关节炎的严重程度呈负相关,这可能与骨性关节炎的发生、发展有关,并可为潜在的诊断提供预警的分子靶标。 展开更多
关键词 骨性关节炎 膝关节液 微小RNA 实时荧光定量PCR
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瘦素对体外培养软骨细胞分泌NO和MMP-13的影响 被引量:3
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作者 罗远明 肖涛 +3 位作者 胡金玺 曾伟 胡何佳 杨湘丞 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期978-983,共6页
目的:观察瘦素对体外培养兔关节软骨细胞分泌一氧化氮(NO)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法:获取2月龄兔原代软骨细胞,培养、鉴定、传代。将第3代软骨细胞按实验要求种板培养,饥饿12 h后,以不同浓度瘦素单独或与TNF-α联合干预4... 目的:观察瘦素对体外培养兔关节软骨细胞分泌一氧化氮(NO)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法:获取2月龄兔原代软骨细胞,培养、鉴定、传代。将第3代软骨细胞按实验要求种板培养,饥饿12 h后,以不同浓度瘦素单独或与TNF-α联合干预48或96 h,测定各组细胞上清液中NO及MMP-13的浓度。结果:不同浓度瘦素(5,10,15和20μg/mL)组NO浓度与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05);而不同浓度的瘦素与TNF-α(10 ng/mL)联合应用后,与TNF-α组差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组并未测出MMP-13的存在,不同瘦素浓度(10,50和100 ng/mL)组测得MMP-13浓度在剂量主效应和时间主效应均有统计学意义(P<0.05)。结论:瘦素在体外能协同TNF-α促进兔关节软骨细胞分泌NO和MMP-13。 展开更多
关键词 瘦素 NO MMP-13 骨关节炎 软骨细胞
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IEX-1相互作用蛋白的筛选与鉴定 被引量:1
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作者 刘立宏 李辉 +5 位作者 李洁 欧阳玉蓉 郭鸿彬 崔云鹤 刘颖颀 肖涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第5期508-514,共7页
骨肉瘤即原发于骨的恶性肿瘤,易发生早期肺转移且预后差,恶性程度高.本研究小组前期研究发现,IEX-1在骨肉瘤中具有重要作用.为了阐明其作用机制,本研究运用酵母双杂交技术筛选其相互作用蛋白,共鉴定出12个IEX-1相互作用蛋白,包括生物氧... 骨肉瘤即原发于骨的恶性肿瘤,易发生早期肺转移且预后差,恶性程度高.本研究小组前期研究发现,IEX-1在骨肉瘤中具有重要作用.为了阐明其作用机制,本研究运用酵母双杂交技术筛选其相互作用蛋白,共鉴定出12个IEX-1相互作用蛋白,包括生物氧化相关酶类、分子伴侣、信号转导相关蛋白等.并首次证实clusterin(CLU,又名载脂蛋白J)与IEX-1存在相互作用,两者在细胞中具有很好的共定位.采用RNAi干扰减低骨肉瘤细胞中内源性CLU表达水平,显著抑制了细胞增殖与细胞侵袭能力.为阐明IEX-1在骨肉瘤发生发展中的作用机制提供了重要的线索,为骨肉瘤的早期诊治及预后监测提供了新的靶点. 展开更多
关键词 IEX-1 骨肉瘤 CLUSTERIN 蛋白质相互作用 酵母双杂交
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一种独特的凋亡调节蛋白IEX-1 被引量:1
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作者 张明 朱武 肖涛 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期274-276,F0003,共4页
IEX-1基因于1993年被克隆。IEX-1在多种组织器官中表达,是一种凋亡相关调节蛋白。已有研究表明,IEX-1具有正性或负性调节细胞生长和凋亡作用,可抑制细胞生长,促进细胞凋亡;也可抑制细胞凋亡。且与病毒感染、心血管疾病有关,特别是在多... IEX-1基因于1993年被克隆。IEX-1在多种组织器官中表达,是一种凋亡相关调节蛋白。已有研究表明,IEX-1具有正性或负性调节细胞生长和凋亡作用,可抑制细胞生长,促进细胞凋亡;也可抑制细胞凋亡。且与病毒感染、心血管疾病有关,特别是在多种肿瘤中高表达。其调控机制种类繁多,过程复杂,至今尚未完全明确。深入研究其功能对理解疾病的发生机制有很重要的意义。 展开更多
关键词 凋亡 IEX-1 骨肉瘤
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