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增强型自杀基因载体治疗宫颈癌的体外实验研究
被引量：
6
1
作者
王丽娜
张雅坤
+8 位作者
周银
李剑
尹彪
李琼
潘乾
薛志刚
夏昆
梁德生
夏家辉
《中国医学工程》
2006年第6期567-570,575,共5页
目的探讨运用增强子增强hTERT启动子转录活性后,调控双自杀融合基因CDTK载体对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤作用。方法将SV40增强子、CMV增强子、CMV增强子/启动子及SV40-CMV双增强子分别与hTERT启动子组合构建成报告基因载体,转染HeLa...
目的探讨运用增强子增强hTERT启动子转录活性后,调控双自杀融合基因CDTK载体对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤作用。方法将SV40增强子、CMV增强子、CMV增强子/启动子及SV40-CMV双增强子分别与hTERT启动子组合构建成报告基因载体,转染HeLa细胞后用双荧光素酶系统分析其活性差异;然后构建pHr-SCT/CDTKG治疗载体转染HeLa细胞,用流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测融合自杀基因mRNA表达,HPLC检测5-FU浓度,MTT分析载体杀瘤的效果。结果HeLa细胞中增强子能使hTERT启动子活性提高6～13倍,其中SV40-CMV双增强子/hTERT启动子的活性最高,达到CMV增强子/启动子的近3倍;体外转染pHr-SCT/CDTKG后可检测到CDTK的mRNA的表达;细胞上清中5-FU最高浓度为50.83ug/mL;当5-FC浓度为200ug/mL、GCV浓度为10ug/mL时,HeLa细胞的相对细胞存活率为48.7%。结论SV40-CMV双增强子联合hTERT启动子能高效靶向的调控CDTK融合自杀基因杀伤宫颈癌细胞,因而是一种很有前景的基因治疗宫颈癌的策略。
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关键词
HTERT启动子
增强子
基因治疗
宫颈癌
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职称材料
题名
增强型自杀基因载体治疗宫颈癌的体外实验研究
被引量：
6
1
作者
王丽娜
张雅坤
周银
李剑
尹彪
李琼
潘乾
薛志刚
夏昆
梁德生
夏家辉
机构
中南大学中国医学遗传学国家重点实验室
出处
《中国医学工程》
2006年第6期567-570,575,共5页
文摘
目的探讨运用增强子增强hTERT启动子转录活性后,调控双自杀融合基因CDTK载体对人宫颈癌HeLa细胞的体外杀伤作用。方法将SV40增强子、CMV增强子、CMV增强子/启动子及SV40-CMV双增强子分别与hTERT启动子组合构建成报告基因载体,转染HeLa细胞后用双荧光素酶系统分析其活性差异;然后构建pHr-SCT/CDTKG治疗载体转染HeLa细胞,用流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR检测融合自杀基因mRNA表达,HPLC检测5-FU浓度,MTT分析载体杀瘤的效果。结果HeLa细胞中增强子能使hTERT启动子活性提高6～13倍,其中SV40-CMV双增强子/hTERT启动子的活性最高,达到CMV增强子/启动子的近3倍;体外转染pHr-SCT/CDTKG后可检测到CDTK的mRNA的表达;细胞上清中5-FU最高浓度为50.83ug/mL;当5-FC浓度为200ug/mL、GCV浓度为10ug/mL时,HeLa细胞的相对细胞存活率为48.7%。结论SV40-CMV双增强子联合hTERT启动子能高效靶向的调控CDTK融合自杀基因杀伤宫颈癌细胞,因而是一种很有前景的基因治疗宫颈癌的策略。
关键词
HTERT启动子
增强子
基因治疗
宫颈癌
Keywords
hTERT promoter
enhancer
suicide gene
cervix cancer
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
R737.33 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
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1
增强型自杀基因载体治疗宫颈癌的体外实验研究
王丽娜
张雅坤
周银
李剑
尹彪
李琼
潘乾
薛志刚
夏昆
梁德生
夏家辉
《中国医学工程》
2006
6
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