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石蜡切片免疫组化套染PAS在肾活检组织病理诊断中的应用 被引量:12
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作者 弓玉祥 陈平圣 杨旻宇 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期108-110,共3页
在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细... 在肾穿刺组织的病理诊断中,采用常规冷冻切片免疫荧光染色、石蜡切片HE染色、PAS染色、Masson染色、PASM染色以及电镜观察,以得到准确的病理诊断。但由于肾穿刺为有创性检查,再加上术者技术精疏有别以及患者个体差异,不仅所取组织十分细小,而且标本质量亦常不尽人意;另外,没有能力购置电镜的单位难以做超微诊断。因此需要我们摸索新的方法,以达到最大限度获得疾病信息,同时又省时、省力,且节约成本。作者实验室前期已经建立了石蜡切片免疫荧光染色法,其他学者也有相关报道[1-3]。最近又建立了肾活检组织石蜡切片免疫组化结合PAS染色方法,取得了较好的效果,现报道如下。 展开更多
关键词 肾活检 石蜡切片 PAS染色 免疫组织化学
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病理生理专业教师应切实加强临床实践 被引量:17
2
作者 余卫平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1455-1456,共2页
关键词 专业教师 临床实践 病理生理学 医学教育
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关于病理生理学“教什么”的思考
3
作者 余卫平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1884-1884,共1页
在第九届中国病理生理学会全国会员代表大会上,前学会理事长韩启德教授建议对病理生理学"是什么?教什么?何人教?何时教?"展开讨论。我们认为,在我国医学院校病理生理专业存在与发展超过半个多世纪后,再来探讨这些基本问题,必... 在第九届中国病理生理学会全国会员代表大会上,前学会理事长韩启德教授建议对病理生理学"是什么?教什么?何人教?何时教?"展开讨论。我们认为,在我国医学院校病理生理专业存在与发展超过半个多世纪后,再来探讨这些基本问题,必将有利于本专业持续发展。病理生理学"教什么"应取决于它"是什么"。2012年出版的Mosby医学词典(Mosby's Medical Dictionary)对"病理生理学"的解释是:涉及疾病时机体生理功能紊乱的研究,阐释疾病时引发症状和体征的体内过程而不直接涉及治疗。可见病理生理学既有别于介绍正常机体功能、代谢与结构的其它基础医学课程,又不同于着重于治疗的临床医学课程。病理生理学的责任是"把医学生从学习正常人体的有关知识,逐渐引向对患病机体的认识"。因此,病理生理学课程至少应教会医学生以下几方面:第一,有异于正常机体的生理平衡与自稳态,不同病因所致体内物质代谢、功能活动不平衡与自稳态紊乱是机体患病的本质;第二,疾病的发生、发展具有一定规律和基本机制;第三,认识疾病应有一定的思维模式。只要我们明确病理生理学"教什么",就易于对"何人教?何时教?"作出判断与选择。 展开更多
关键词 病理生理学 临床医学 基础医学 疾病发生机制
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含HSVtk基因重组逆转录病毒包装细胞PA317/TK的建立 被引量:13
4
作者 陈道桢 李淑锋 +7 位作者 鲁晓萱 王静 苏宁 刘璐 黄鹰 童冠圣 洪泽辉 张丽珊 《医学研究生学报》 CAS 2003年第1期1-3,共3页
目的 :研究肿瘤的自杀基因疗法 ,建立含单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSVtk)基因重组逆转录病毒包装细胞PA317/TK。 方法 :应用脂质体转移方法将逆转录病毒载体GINaTK导入PA317,经G4 18筛选阳性克隆细胞后分别用PCR和扫描电镜检测HSVtk基因... 目的 :研究肿瘤的自杀基因疗法 ,建立含单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSVtk)基因重组逆转录病毒包装细胞PA317/TK。 方法 :应用脂质体转移方法将逆转录病毒载体GINaTK导入PA317,经G4 18筛选阳性克隆细胞后分别用PCR和扫描电镜检测HSVtk基因整合和病毒颗粒分泌情况。 结果 :逆转录病毒载体GINaTK导入PA317,G4 18后筛选得到阳性克隆细胞 ,命名为PA317/TK。PCR检测PA317/TK细胞出现一特异性 4 0 4bp阳性条带 ,而PA317细胞没有扩增出相应条带。PA317/TK细胞经扫描电镜检测见其表面有颗粒状突起 ,其周围有许多呈团状的病毒颗粒。证实含HSVtk基因重组逆转录病毒存在于包装细胞中。 结论 展开更多
关键词 HSVtk 基因重组 逆转录病毒 包装细胞 单纯疱疹病毒胸苷激酶基因
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胃癌组织中Brg1基因突变及蛋白表达的研究 被引量:14
5
作者 李青 周晓军 +3 位作者 谢海龙 苏宁 邓红 易龙 《医学研究生学报》 CAS 2005年第10期875-878,i0009,共5页
目的:研究Brg1基因在胃腺癌组织中突变及蛋白表达意义,探讨其与肿瘤发展的关系。方法:应用聚合酶链反应及单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测37例胃腺癌和正常胃组织中Brg1基因第4和16外显子的基因突变,同时应用免疫组化技术分析30例胃... 目的:研究Brg1基因在胃腺癌组织中突变及蛋白表达意义,探讨其与肿瘤发展的关系。方法:应用聚合酶链反应及单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测37例胃腺癌和正常胃组织中Brg1基因第4和16外显子的基因突变,同时应用免疫组化技术分析30例胃癌组织B rg1蛋白的表达,初步探讨其和胃癌发生、发展及预后的关系。结果:37例胃腺癌标本中,Brg1第4和16外显子的基因突变率为零。B rg1蛋白在胃癌中的表达率为76.67%(23/30),与正常组织的表达率(44.44%)相比有明显增高,B rg1的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移及分级分期均有关。结论:Brg1基因突变在胃癌中少见且不起主要作用,但其蛋白在胃癌中高表达并对胃癌的发生、发展起重要作用。B rg1的表达可作为判断胃癌恶性程度及预后的重要指标。 展开更多
关键词 胃腺癌 Brg1蛋白 基因突变 免疫组化
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西红花酸对H_2O_2诱发心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的影响 被引量:11
6
作者 余卫平 绪广林 +1 位作者 沈成兴 钱之玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期54-57,共4页
目的:探讨西红花酸对过氧化氢(H2O2)诱导的培养心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的作用。方法:通过光镜观察细胞形态、碘化丙啶(PI)染色法和流式细胞术相结合检测培养细胞凋亡率、免疫荧光染色法和流式细胞术相结合... 目的:探讨西红花酸对过氧化氢(H2O2)诱导的培养心肌细胞凋亡及相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2表达改变的作用。方法:通过光镜观察细胞形态、碘化丙啶(PI)染色法和流式细胞术相结合检测培养细胞凋亡率、免疫荧光染色法和流式细胞术相结合检测细胞中caspase-3、Bcl-2蛋白。结果:在本实验使用浓度范围内,各浓度H2O2组细胞形态明显改变、凋亡率明显高于正常对照组,1×10-4mol·L-1H2O2可使培养心肌细胞Bcl-2蛋白表达明显减少,而caspase-3表达明显增多;各剂量西红花酸组细胞形态学改变减少、凋亡率明显低于1×10-4mol·L-1H2O2组,细胞中Bcl-2蛋白减少幅度与caspase-3增加幅度均减小,且较高浓度(5×10-5mol·L-1)西红花酸组比较低浓度(5×10-7mol·L-1)西红花酸组作用也更明显(P<0.05)。结论:西红花酸能够减轻H2O2对培养心肌细胞的损伤性凋亡作用,可能与稳定细胞内凋亡相关调控蛋白caspase-3、Bcl-2的功能有关。 展开更多
关键词 西红花酸 过氧化氢 心肌 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 蛋白质BCL-2
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外周血人类斯钙素1基因表达与消化道恶性肿瘤微转移关系的研究 被引量:3
7
作者 吴平平 黄培林 +1 位作者 郭英 谢维 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期355-357,363,共4页
目的:探讨靶基因人类斯钙索1(hSTC-1)在消化道恶性肿瘤患者外周血中的表达以及与肿瘤微转移的关系。方法:采用RT-PCR方法检测69例消化道恶性肿瘤患者外周血中的人类斯钙素1(hSTC-1)mRNA,12例健康成人、4例妊娠期妇女、14例消化道炎症疾... 目的:探讨靶基因人类斯钙索1(hSTC-1)在消化道恶性肿瘤患者外周血中的表达以及与肿瘤微转移的关系。方法:采用RT-PCR方法检测69例消化道恶性肿瘤患者外周血中的人类斯钙素1(hSTC-1)mRNA,12例健康成人、4例妊娠期妇女、14例消化道炎症疾病患者,并检测12例消化道恶性肿瘤患者手术中新鲜组织标本中的hSTC-1 mRNA。结果:69例消化道恶性肿瘤患者外周血中,食管癌组hSTC-1 mRNA的阳性率为52.9%(9/17例),胃癌组的阳性率为57.7%(15/26例),大肠癌组的阳性率为53.8%(14/26例),消化道恶性肿瘤患者手术中新鲜组织标本的阳性率为100%(12/12例);而健康成人、妊娠期妇女、消化道炎症疾病患者外周血中无1例出现阳性。将肿瘤患者hSTC-1 mRNA检测结果与临床病理结合分析发现:外周血中的hSTC-1 mRNA的表达与肿瘤的浸润深度、临床病理分期、淋巴结转移有显著相关性。结论:应用RT-PCR方法检测消化道恶性肿瘤患者外周血中的hSTC-1 mRNA具有较高的敏感性和特异性,可成为检测肿瘤外周血微转移的一个新指标。 展开更多
关键词 斯钙素1 消化道肿瘤 肿瘤微转移 人类
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Polymer双染检测技术在肿瘤研究中的应用及改进 被引量:3
8
作者 张爱凤 刘建娥 +1 位作者 刘东风 张建琼 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期499-500,共2页
关键词 免疫组织化学 Polymer双染 肿瘤
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HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗小鼠乳腺癌的研究 被引量:1
9
作者 陈道桢 张丽珊 +9 位作者 唐秋莎 鲁晓萱 赵琪 薛文群 樊启英 黄学文 苏宁 刘璐 黄鹰 童冠圣 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期267-270,274,F003,共6页
目的:探讨HSV-TK/GCV自杀基因系统对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102形成肿瘤的体内杀伤作用及其产生的旁观者效应。方法:体内实验分动物致瘤组、抑瘤实验组和治疗实验组。分别按实验组别要求接种5.0×106细胞/只于BALB/C小鼠的右腋... 目的:探讨HSV-TK/GCV自杀基因系统对小鼠乳腺癌细胞系MA782/5S-8102形成肿瘤的体内杀伤作用及其产生的旁观者效应。方法:体内实验分动物致瘤组、抑瘤实验组和治疗实验组。分别按实验组别要求接种5.0×106细胞/只于BALB/C小鼠的右腋窝皮下,观察各组肿瘤形成及肿瘤治疗情况并统计各组生存期。治疗结束后将标本制成石蜡切片进行病理学分析,RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中的表达情况。统计学处理采用SPSS软件进行完全随机的方差分析(ANOVA)。结果:实验结果显示小鼠成瘤率为100%。丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)可明显抑制MA782/5S-8102/TK细胞在BALB/C小鼠体内的肿瘤形成。经GCV治疗后,MA782/5S-8102/TK组和混合细胞组的肿瘤体积分别较对照组肿瘤体积缩小约36.7%和28.6%(均P<0.001);生存期也明显延长(P<0.001);RT-PCR检测HSV-TK基因在肿瘤组织中有表达。实验组肿瘤组织与对照组相比存在明显的病理学改变。结论:逆转录病毒可介导HSV-TK基因转入小鼠乳腺癌细胞MA782/5S-8102并获稳定表达,HSV-TK/GCV自杀基因系统在体内对乳腺癌细胞有杀伤作用,且存在明显的旁观者效应。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒胸苷激酶 丙氧鸟苷 旁观者效应 逆转录病毒载体 小鼠乳腺癌
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rhHGF/cHGF体外抑制SMMC-7721人肝细胞癌细胞生长
10
作者 余卫平 卫开斌 +3 位作者 高蕾 沈成兴 张蓉 王国桢 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期256-258,共3页
目的 :观察重组人肝细胞生长因子 (rhHGF)和天然小牛肝细胞生长因子 (cHGF)对SMMC - 772 1人肝细胞癌细胞株的生长效应。方法 :传代后处于指数生长期的SMMC - 772 1细胞经过 (HGF处理组 )或不经 (对照组 )rhHGF/cHGF处理培养 1 - 4d ,... 目的 :观察重组人肝细胞生长因子 (rhHGF)和天然小牛肝细胞生长因子 (cHGF)对SMMC - 772 1人肝细胞癌细胞株的生长效应。方法 :传代后处于指数生长期的SMMC - 772 1细胞经过 (HGF处理组 )或不经 (对照组 )rhHGF/cHGF处理培养 1 - 4d ,采用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法检测细胞数。并通过流式细胞仪对rhHGF处理细胞作细胞周期分析。结果 :rhHGF(5 - 2 0 μg/L)和cHGF(2 5 - 1 0 0mg/L)对SMMC - 772 1细胞增殖具有类似的剂量依赖性抑制作用。在实验浓度内 ,使用最高浓度时 (rhHGF为 2 0 μg/L、cHGF为 1 0 0mg/L)对细胞增殖抑制作用最强。使用不同浓度 (5μg/L、1 0 μg/L、2 0 μg/L)rhHGF处理 3d的培养细胞均有一半以上停留在G0 /G1 期。结论 :rhHGF和cHGF对SMMC - 772 1人肝细胞癌细胞的体外生长都有强烈的抑制效应。这是由于受HGF的作用细胞生长易于终止在G0 展开更多
关键词 肝细胞瘤 细胞分裂 细胞周期 rhHGF/cHGF 细胞生长 体外抑制 SMMC-7721
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TAM诱导MA782细胞凋亡与Cyclin D1、CDK4、TGF-β1的关系
11
作者 吴建芳 苏宁 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第5期437-440,共4页
目的 :探讨Tamoxifen(TAM )诱导ER(- )小鼠乳腺癌细胞MA782细胞凋亡及其分子作用机制。方法 :TAM体外作用于MA782细胞 ,用MTT法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,免疫组化检测cyclinD1、CDK4、TGF β1蛋白表达 ... 目的 :探讨Tamoxifen(TAM )诱导ER(- )小鼠乳腺癌细胞MA782细胞凋亡及其分子作用机制。方法 :TAM体外作用于MA782细胞 ,用MTT法检测细胞增殖活性、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布 ,免疫组化检测cyclinD1、CDK4、TGF β1蛋白表达 ,并用病理图像分析软件进行半定量分析。 结果 :TAM在体外能明显抑制MA782细胞生长 ,诱导细胞凋亡 ,下调cyclinD1、CDK4表达 ,上调TGF β1表达。免疫组化半定量分析显示 6μmol/L作用 72小时后 ,cyclinD1、CDK4蛋白平均灰度值分别从 132 .5± 0 .0 2、10 7.2± 0 .0 1下降至 12 6 .18± 0 .0 3、76 .2 1± 0 .0 3,10 μmol/L作用 72小时后分别为 73.5 6± 0 .0 2、72 .0 3± 0 .0 1,与对照组相比差异极其显著性 (P <0 0 1)。MA782细胞TGF β1平均灰度值为 5 9.72± 0 .0 2 ,2 μmol/L作用 4 8小时后无明显变化 ,72小时后上升到97 1± 0 .0 3,6、10 μmol/L作用 4 8小时后平均灰度值分别为 83.2± 0 .0 4、96 .83± 0 .0 2 ,72小时后分别上升到12 1 75± 0 .0 3、139.0 1± 0 .0 5 ,与对照组相比差异极其显著 (P <0 .0 1)。结论 :TAM诱导MA782细胞凋亡其分子作用机制可能与下调cyclinD1、CDK4蛋白表达 ,上调TGF β1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 TAM MA782细胞 细胞凋亡 cyclin D1 CDK4 TGF-Β1 小鼠乳腺癌
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CCl_4肝纤维化过程中肝组织金属硫蛋白与肝星状细胞MMP-2表达及活性之间相关性研究 被引量:3
12
作者 刘蕾蕾 陈平圣 刘东风 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期351-355,共5页
目的:研究金属硫蛋白(MT)在体内及体外与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达、活性之间的相关性。方法:昆明种雄性成年小鼠50只,其中实验鼠40只,对照鼠10只,用CCl4诱导小鼠肝纤维化模型。向肝星状细胞(HSCs)条件培养基(含有MMP-2)中加不同浓度... 目的:研究金属硫蛋白(MT)在体内及体外与基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达、活性之间的相关性。方法:昆明种雄性成年小鼠50只,其中实验鼠40只,对照鼠10只,用CCl4诱导小鼠肝纤维化模型。向肝星状细胞(HSCs)条件培养基(含有MMP-2)中加不同浓度MT,使之与MMP-2酶学共浴,检测MMP-2活性。制作小鼠肝组织芯片,天狼猩红染色判断肝纤维化程度。免疫组化法测肝组织MMP-2、MT蛋白表达,酶图法测鼠肝组织匀浆和培养基中MMP-2活性。结果:①模型组小鼠肝组织MMP-2和MT蛋白表达水平均随纤维化进展而呈波浪式交替升高,但二者时相变化相反。②模型组小鼠肝组织MMP-2活性随实验时间的增加而逐渐升高,亦有波动。除个别时点外,酶活性与MT表达呈负相关。③肝星状细胞条件培养基与不同浓度的MT直接作用后,MMP-2活性随MT浓度增加活性逐渐降低(P<0.01)。结论:在小鼠肝纤维化发生发展过程中,肝组织MT蛋白和MMP-2蛋白表达均有上升趋势,二者间可能存在相互作用;MT蛋白和MMP-2活性呈负相关,前者对后者可能起抑制作用。 展开更多
关键词 肝硬化 金属硫蛋白 基质金属蛋白酶-2 小鼠
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人腹水细菌培养获得菌致病机制的研究
13
作者 余卫平 张南 +4 位作者 高丽丽 姚晨 倪梦 张理超 Wang Guozheng 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2035-2035,共1页
关键词 腹水细菌培养 细菌性腹膜炎 腹水培养 急性细菌感染 尾静脉 组织学检查 细胞反应 细胞吞噬 致病性 炎性反应
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HCV结构区DNA疫苗诱发小鼠特异性细胞免疫反应的研究
14
作者 李兵 窦骏 +4 位作者 王立新 史志英 王净 印佩钦 林陵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期394-397,共4页
目的 :通过HCV结构区DNA疫苗直接免疫小鼠 ,诱发其体内特异性细胞介导的免疫反应的研究 ,为HCVDNA疫苗的研制打下基础。方法 :用重组的pBK CMV质粒体外转染小鼠骨髓瘤细胞SP2 0 ,建立了能体外表达HCV结构区蛋白的SP2 0D细胞系 ,分别用... 目的 :通过HCV结构区DNA疫苗直接免疫小鼠 ,诱发其体内特异性细胞介导的免疫反应的研究 ,为HCVDNA疫苗的研制打下基础。方法 :用重组的pBK CMV质粒体外转染小鼠骨髓瘤细胞SP2 0 ,建立了能体外表达HCV结构区蛋白的SP2 0D细胞系 ,分别用SP2 0和SP2 0D细胞攻击用空质粒或pBK CMV质粒免疫过的Balb c小鼠 ,通过肿瘤形成、肿瘤重量、肿瘤组织淋巴细胞的浸润以及不同免疫组小鼠血清中IL 2和IFN γ含量来观察小鼠体内T淋巴细胞的活性。结果 :用SP2 0和SP2 0D攻击空质粒或pBK CMV质粒免疫过的小鼠 15d后 ,SP2 0D攻击的pBK CMV质粒免疫鼠肿瘤重量〔(0 9± 0 12 )g〕明显低于空白质粒免疫组和SP2 0接种组 (P <0 0 0 1) ,且该免疫组小鼠血清中IL 2和IFN γ的浓度明显高于其它免疫组 ;此外 ,用SP2 0D攻击的pBK CMV免疫鼠 ,肿瘤病理切片中可见明显的T淋巴细胞浸润。结论 :重组的HCV结构区DNA疫苗 (pBK CMV)能诱导小鼠体内特异性T淋巴细胞反应 。 展开更多
关键词 DNA免疫 CTL活性 丙型肝炎病毒 DNA疫苗 HCV
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