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毛细管电泳联合激光诱导荧光技术检测结直肠癌hMLH1基因突变 被引量：2
1
作者 陆爱国 冯波 +1 位作者 郑民华 许国旺 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-27,共3页
目的　建立毛细管电泳 (CE)联合激光诱导荧光检测 (LIF)技术 ,分析单链构象多态性 (SSCP) ,检测人结直肠癌hMLH1基因点突变的方法。方法　PCR扩增 4 2例散发性结直肠癌患者与 2 0例健康志愿者外周血基因组DNAhMLH1基因 12外显子 ,采用CE... 目的　建立毛细管电泳 (CE)联合激光诱导荧光检测 (LIF)技术 ,分析单链构象多态性 (SSCP) ,检测人结直肠癌hMLH1基因点突变的方法。方法　PCR扩增 4 2例散发性结直肠癌患者与 2 0例健康志愿者外周血基因组DNAhMLH1基因 12外显子 ,采用CE LIF进行SSCP分析 ,对异常片段进行测序鉴定 ;研究不同筛分介质 (线性聚丙烯酰胺LPA)浓度、分离温度与分离电压对CE行为的影响。结果　 4 2例患者中有 4例 (9.5 2 % )突变 ,CE测序证实为T115 1A的杂合子点突变 ;2 0例健康志愿者未发现突变。较高浓度的LPA(4 %～ 6 % ) ,2 0℃分离温度与 9kV分离电压有助于单链DNA峰分离。结论　调整适宜的LPA浓度、分离温度与分离电压可提高CE分析SSCP的效率 ,应用CE LIF技术SSCP分析检测hMLH1基因点突变快速、高效、重复性好 。 展开更多
关键词 HMLH1基因 LPA 结直肠癌 SSCP 点突变 联合 健康志愿者 测序 毛细管电泳 单链DNA
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