DMSO和As_2O_3对人食管癌细胞增殖的抑制作用 被引量：19

1

作者 谭立军 陈新宇 +3 位作者 张岚 湯雪明 沈忠英 蔡维佳 《上海第二医科大学学报》 CAS CSCD 1999年第1期5-8,37,共5页

目的 抑制肿瘤细胞生长是治疗肿瘤的重要基础。本文比较二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）和维甲酸对人食管癌细胞生长抑制的影响。方法 用生长曲线、剂量－效应曲线、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、ＭＴＴ比色分析、细胞周期... 目的 抑制肿瘤细胞生长是治疗肿瘤的重要基础。本文比较二甲基亚砜（ＤＭＳＯ）、三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）和维甲酸对人食管癌细胞生长抑制的影响。方法 用生长曲线、剂量－效应曲线、＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入、ＭＴＴ比色分析、细胞周期的流式术检测、ＰＣＮＡ及Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１免疫组化等多项指标反映细胞增殖改变。结果 二甲基亚砜和三氧化二砷对食管癌细胞株生长的抑制作用较传统的维甲酸效果更强。结论 展开更多

关键词 二甲基亚砜 三氧化二砷 维甲酸 食管癌 抑制作用

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SLE患者CD45RA^＋和CD45RO^＋T细胞亚群的变化 被引量：13

2

作者 周同 江永梯 +4 位作者 姚建 董德长 石学耕 史桂英 汤雪明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第6期374-376,共3页

利用流式细胞术及免疫双荧光染色法，检测３５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞亚群。结果表明，ＳＬＥ患者ＣＤ４￣＋细胞降低，ＣＤ８￣＋细胞增高，ＣＤ４￣＋／ＣＤ８￣＋降低；ＣＤ... 利用流式细胞术及免疫双荧光染色法，检测３５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞亚群。结果表明，ＳＬＥ患者ＣＤ４￣＋细胞降低，ＣＤ８￣＋细胞增高，ＣＤ４￣＋／ＣＤ８￣＋降低；ＣＤ４￣＋ＣＤ４５ＲＡ￣＋细胞在病情活动期降低，在稳定期回升；ＣＤ４￣＋ＣＤ４５ＲＯ￣＋细胞则在活动期有增高倾向，在稳定期下降；ＣＤ８￣＋ＣＤ４５ＲＡ￣＋及ＣＤ８￣＋ＣＤ４５ＲＯ￣＋细胞均在活动期增高，又均在稳定期降至正常水平。提示ＣＤ４５ＲＡ￣＋和ＣＤ４５ＲＯ￣＋Ｔ细胞在ＳＬＥ发病机理中可能占有重要意义。 展开更多

关键词 SLE CD45 流式细胞术 红斑狼疮 T淋巴细胞亚群

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三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用 被引量：22

3

作者 谭立军 史桂英 +1 位作者 石学耕 汤雪明 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1999年第2期85-87,共3页

目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株Ｅ８７１２和ＥＣ１７１贴壁生长，在电镜观察的基础上，用碘化丙啶（ＰＩ）染色和ＴＵＮＥＬ将凋亡细胞反映在流式细胞仪（ＦＣＭ）上。结果经三氧化二砷２μｍｏｌ... 目的研究三氧化二砷对人食管癌细胞株凋亡的诱导作用。方法癌细胞株Ｅ８７１２和ＥＣ１７１贴壁生长，在电镜观察的基础上，用碘化丙啶（ＰＩ）染色和ＴＵＮＥＬ将凋亡细胞反映在流式细胞仪（ＦＣＭ）上。结果经三氧化二砷２μｍｏｌ／Ｌ作用后，电镜下见部分细胞核染色质凝聚，呈半月形；ＦＣＭ细胞ＤＮＡ检得亚Ｇ１细胞峰；部分Ｇ１期细胞ＴＵＮＥＬ标记呈阳性。结论结果表明，三氧化二砷能诱人食管癌细胞株的凋亡，此药对食管癌等实体瘤的治疗有诱入的应用前景。同时表明，ＦＣＭ具有敏感。 展开更多

关键词 三氧化二砷 食管癌 细胞凋亡 流式细胞术

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AS_2O_3对消化道肿瘤细胞凋亡作用的研究 被引量：15

4

作者 石熠慧 谭立军 +3 位作者 李慧 史桂英 石学耕 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期242-245,共4页

目的研究AS3O3对10种消化道肿瘤细胞株的致凋亡作用。方法采用形态学观察、流式细胞仪检测及DNA电泳分析。结果发现两株细胞经AS2O3作用后有明显凋亡，三株细胞无凋亡，其余有少量凋亡。结论AS2O3对不同的消化道肿瘤细胞有不同的作用，... 目的研究AS3O3对10种消化道肿瘤细胞株的致凋亡作用。方法采用形态学观察、流式细胞仪检测及DNA电泳分析。结果发现两株细胞经AS2O3作用后有明显凋亡，三株细胞无凋亡，其余有少量凋亡。结论AS2O3对不同的消化道肿瘤细胞有不同的作用，提示AS2O3对不同细胞的致凋亡作用可能存在不同的机理。 展开更多

关键词 AS2O3 细胞凋亡 消化道肿瘤 细胞株 治疗 研究

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三氧化二砷启动人食管癌细胞凋亡机制研究 被引量：19

5

作者 谭立军 石熠慧 +3 位作者 史桂英 李慧 石学耕 湯雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第1期12-17,共6页

目的探讨三氧化二砷诱导白血病及实体瘤细胞凋亡的机制。方法以三氧化二砷敏感和不敏感人食管癌细胞株为模型，运用ＲＴ－ＰＣＲ和流式细胞术检测三氧化二砷处理的这两类细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达的改变；同时利用荧光探针检测线粒体功... 目的探讨三氧化二砷诱导白血病及实体瘤细胞凋亡的机制。方法以三氧化二砷敏感和不敏感人食管癌细胞株为模型，运用ＲＴ－ＰＣＲ和流式细胞术检测三氧化二砷处理的这两类细胞Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达的改变；同时利用荧光探针检测线粒体功能变化。结果两类细胞有同等水平Ｆａｓ表达，但均未检测出ＦａｓＬ；三氧化二砷既不能上调Ｆａｓ也不能诱导ＦａｓＬ表达，但破环线粒体跨膜电势和氧化－还原系统。结论三氧化二砷诱导人食管癌细胞凋亡不依赖Ｆａｓ／ＦａｓＬ的启动，而直接作用于线粒体，活化Ｃａｓｐａｓｅ－３导致凋亡。 展开更多

关键词 三氧化二砷 细胞凋亡 FAS/FASL 线粒体 食管肿瘤

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流式细胞术检测细胞内活性氧的方法 被引量：22

6

作者 史桂英 高飞 +1 位作者 石学耕 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第2期122-124,共3页

目的流式细胞术检测NB4和U93 7细胞内活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的水平。　方法双氢罗丹明 12 3 (DHR)以不同的时间孵育细胞 ( 1、6、2 4h) ,DHR可被细胞内ROS氧化为罗丹明 12 3 ,通过流式细胞仪来检测细胞内罗丹明 12 3的荧... 目的流式细胞术检测NB4和U93 7细胞内活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)的水平。　方法双氢罗丹明 12 3 (DHR)以不同的时间孵育细胞 ( 1、6、2 4h) ,DHR可被细胞内ROS氧化为罗丹明 12 3 ,通过流式细胞仪来检测细胞内罗丹明 12 3的荧光 ,同时设立阴性及阳性对照。　结果 1μmol/LDHR孵育细胞 ,1～ 2 4hNB4和U93 7细胞内的平均荧光强度分别从 19.2 0增加到 3 84 .3 8和 12 .3 1增加到 97.15。　结论适当延长DHR孵育时间可检测不同细胞系ROS基准水平的差异。 展开更多

关键词 流式细胞术 活性氧 双氢罗丹明1233

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As_2O_3诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与活性氧水平相关 被引量：7

7

作者 高飞 易静 +3 位作者 史桂英 金慧芳 石学耕 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第4期296-299,共4页

目的研究三氧化二砷 (As2 O3)诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)水平的关系。　 方法以碘化丙啶 (PI)标记DNA ,流式细胞仪检测As2 O3 单独或联用二甲萘醌 (DMNQ)作用后细胞周期的变化 ,以 7-氨基放... 目的研究三氧化二砷 (As2 O3)诱导NB4细胞凋亡的周期选择性与细胞活性氧 (reactiveoxygenspecies,ROS)水平的关系。　 方法以碘化丙啶 (PI)标记DNA ,流式细胞仪检测As2 O3 单独或联用二甲萘醌 (DMNQ)作用后细胞周期的变化 ,以 7-氨基放线菌素D(7AAD)标记DNA ,双氢罗丹明 12 3(DHR)或双氢 -乙酰乙酸二氯荧光黄 (DCFH -DA)捕获ROS ,流式细胞仪双参数法检测细胞周期不同阶段ROS水平。　结果 2 μmol/LAs2 O3 可选择性诱导NB4G2 /M期细胞凋亡 ,DMNQ可增强这一效应 ;G2 /M期细胞ROS水平明显高于G1、S期。　结论As2 O3 诱导NB4G2 /M期细胞凋亡与G2 /M期ROS水平较高相关。As2 O3 展开更多

关键词 三氧化二砷 细胞凋亡 细胞周期 活性氧 急性早幼粒细胞白血病

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正常人成纤维细胞老化过程中活性氧水平的变化 被引量：4

8

作者 李慧 易静 +3 位作者 高飞 史桂英 陈玉英 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第5期393-396,共4页

目的研究正常人成纤维细胞在老化过程中细胞活性氧水平的变化。　方法取常规体外培养的原代人成纤维细胞 ,按不同传代数 (PD2 2 - 2 4和PD5 0 - 5 2 )分为两组 ,代表老化过程中两个阶段 (早期和中—晚期 ) ,用流式细胞仪检测罗丹明 12 ... 目的研究正常人成纤维细胞在老化过程中细胞活性氧水平的变化。　方法取常规体外培养的原代人成纤维细胞 ,按不同传代数 (PD2 2 - 2 4和PD5 0 - 5 2 )分为两组 ,代表老化过程中两个阶段 (早期和中—晚期 ) ,用流式细胞仪检测罗丹明 12 3显示细胞活性氧水平 ,同时用β -半乳糖苷酶组化染色 ,形态观察衰老细胞 ,用群体倍增时间和流式细胞周期分析显示细胞增殖情况。　结果中—晚期细胞中衰老细胞增多 ,活性氧水平增高 ,未出现增殖阻滞。　结论正常人成纤维细胞在老化过程中细胞活性氧水平呈升高趋势。 展开更多

关键词 成纤维细胞 老化 活性氧 流式细胞液 β-半乳糖苷酶组化染色

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淋巴细胞凋亡与慢性肾衰免疫功能低下的关系 被引量：5

9

作者 张薇 沈波 +1 位作者 李艳 史桂英 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第6期541-544,共4页

目的探讨淋巴细胞凋亡与慢性肾功能衰竭(CRF)患者免疫功能低下之间的关系。 方法28例CRF患者分为透析组和非透析组,应用Annexin—V及PI双标记结合流式细胞技术及电镜观察,检测两组患者淋巴细胞的凋亡率及。肾功能指标,并与27例肾功能正... 目的探讨淋巴细胞凋亡与慢性肾功能衰竭(CRF)患者免疫功能低下之间的关系。 方法28例CRF患者分为透析组和非透析组,应用Annexin—V及PI双标记结合流式细胞技术及电镜观察,检测两组患者淋巴细胞的凋亡率及。肾功能指标,并与27例肾功能正常者的检测值进行对比分析。 结果淋巴细胞的减少与细胞凋亡过度相一致。两组CRF患者淋巴细胞的凋亡率均显著高于肾功能正常组(P<0.01),且透析组高于非透析组(P<0.05);肾功能指标与淋巴细胞凋亡率呈正相关(P<0.01)。 结论CRF患者免疫功能低下与淋巴细胞过度凋亡有关;肾功能指标与淋巴细胞凋亡率呈正相关。 展开更多

关键词 淋巴细胞凋亡 慢性肾衰 免疫功能低下 流式细胞术

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大鼠Leydig细胞中细胞内吞和自体吞噬两条途径的交汇点

10

作者 易静 汤雪明 《电子显微学报》 CAS CSCD 2000年第3期273-274,共2页

关键词 大鼠 自体吞噬 交汇点 细胞内吞 LEYDIG细胞

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氯喹对大鼠睾丸支持细胞溶酶体的影响 被引量：1

11

作者 盛毅 王一飞 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1997年第1期16-18,共3页

用氯喹灌胃大鼠可致生精障碍，电镜下发现服氯喹组最早有Sertoli细胞溶酶体变化。形态计量发现细胞溶酶体数目略减少（P＞0．05），体积增大（P＜0．01）。作者还讨论了Sertoli细胞溶酶体的变化对精子发生的意义。

关键词 睾丸支持细胞 SERTOLI细胞 溶酶体 氯喹

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抗BrdUrd/DNA双参数流式细胞仪技术检测细胞周期动力学的方法

12

作者 邵莉 石学耕 +1 位作者 方智雯 欧阳仁荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第1期108-112,共5页

肿瘤细胞周期动力学的研究有助于了解细胞群体的生长、消亡规律,也有助于分析各种物理和化学因素对细胞的影响以及抗肿瘤药物的作用机理,指导临床合理用药。本文应用连续标记FCM—BrdUrd/DNA双参数方法测定了HL—60细胞的细胞周期动力... 肿瘤细胞周期动力学的研究有助于了解细胞群体的生长、消亡规律,也有助于分析各种物理和化学因素对细胞的影响以及抗肿瘤药物的作用机理,指导临床合理用药。本文应用连续标记FCM—BrdUrd/DNA双参数方法测定了HL—60细胞的细胞周期动力学各参数,为动力学研究提供一种快速的研究方法,同时应用该法检测了13例急性非淋巴细胞白血病的骨髓细胞的细胞周期动力学特征,并初步探讨其临床意义。 展开更多

关键词 细胞周期动力学 BrdUrd 双参数 细胞动力学 流式细胞仪技术 连续标记 白血病患者 急性非淋巴细胞白血病 技术检测 DNA合成

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大肠癌p16抑癌基因甲基化及与Dukes分期的关系 被引量：4

13

作者 王志伟 易静 +5 位作者 仓辉 赵任 邹鸿志 王灏 郁宝铭 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第4期307-309,共3页

目的检测大肠癌患者 p16基因启动子CpG区甲基化的改变 ,探讨其与大肠癌发生、发展和临床资料的关系。　方法采用甲基化特异PCR技术 (MSP法 )研究 5 8例大肠癌标本 p16基因甲基化改变 ,分析临床病理资料。　结果 2 5例标本 (4 3 .1% )呈 ... 目的检测大肠癌患者 p16基因启动子CpG区甲基化的改变 ,探讨其与大肠癌发生、发展和临床资料的关系。　方法采用甲基化特异PCR技术 (MSP法 )研究 5 8例大肠癌标本 p16基因甲基化改变 ,分析临床病理资料。　结果 2 5例标本 (4 3 .1% )呈 p16CpG区甲基化阳性 ;DukesC、D期病人p16CpG区甲基化发生率 (75 % )明显高于DukesA、B期病人 (13.3% )。　结论 p16启动子区甲基化导致p16抑癌基因失活参与了大肠癌的发生和发展 ; 展开更多

关键词 大肠癌 P16 CpG区 甲基化 MSP DUKES分期 甲基化特异PCR技术

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LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP的变化研究 被引量：3

14

作者 高飞 易静 +1 位作者 张岚 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期204-207,共4页

目的研究鼠Leydig细胞膜LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP水平的变化及二者之间的关系。方法应用RT－PCR法，以β-actin为内参照，测定激素刺激后鼠Leydig细胞膜LH受体（LHR）减量调节中LHRmRNA水平的变化，同时应用放射免疫法，分析同... 目的研究鼠Leydig细胞膜LH受体减量调节中受体mRNA及cAMP水平的变化及二者之间的关系。方法应用RT－PCR法，以β-actin为内参照，测定激素刺激后鼠Leydig细胞膜LH受体（LHR）减量调节中LHRmRNA水平的变化，同时应用放射免疫法，分析同一时间细胞内cAMP水平的变化。结果LHRmRNA水平早期有20％的升高，然后逐渐下降50％，与此趋势相同，cAMP水平亦呈现出升高-降低的动态过程，二者在变化上呈“正相关”，并且前者总是“滞后”于后者一段时间。结论LHR减量调节过程中，细胞内cAMP水平可能以“正相关”的方式影响着LHR基因的转录速率。 展开更多

关键词 LH受体 减量调节 CAMP MRNA 黄体化激素

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PCNA和P53蛋白在食管癌变过程中表达的意义 被引量：3

15

作者 谭立军 汤雪明 沈忠英 《上海第二医科大学学报》 CAS CSCD 1997年第3期178-181,共4页

通过对食管上皮癌变进程：正常上皮、单纯增生、非典型增生、原位癌和癌组织进行P53和PCNA蛋白表达的免疫组织化学研究，并结合图像定量分析表达的强度。结果提示：P53和PCNA在评价癌变演化中细胞增殖活性上各具特点，而且P53与PCNA可... 通过对食管上皮癌变进程：正常上皮、单纯增生、非典型增生、原位癌和癌组织进行P53和PCNA蛋白表达的免疫组织化学研究，并结合图像定量分析表达的强度。结果提示：P53和PCNA在评价癌变演化中细胞增殖活性上各具特点，而且P53与PCNA可能存在协同作用，将两者结合起来可以更为客观地反映食管上皮癌变过程。 展开更多

关键词 食管肿瘤 P53蛋白 增殖细胞核抗原 癌变

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自体吞噬与类固醇激素分泌调节的关系 被引量：1

16

作者 易静 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1994年第4期313-318,共6页

本实验用腹腔内给予下丘脑激素或类固醇激素的方法，造成大鼠睾丸间质细胞和肾上腺皮质束状带细胞处于分泌兴奋或抑制状态，对这两种分泌类固醇激素细胞中的溶酶体和自噬小体进行了超微结构、细胞化学和形态计量研究。结果表明，在类固... 本实验用腹腔内给予下丘脑激素或类固醇激素的方法，造成大鼠睾丸间质细胞和肾上腺皮质束状带细胞处于分泌兴奋或抑制状态，对这两种分泌类固醇激素细胞中的溶酶体和自噬小体进行了超微结构、细胞化学和形态计量研究。结果表明，在类固醇激素分泌增多时，细胞中自体吞噬活动减弱；激素分泌减少时，自体吞噬活动加强。这一结果证明了细胞内的自体吞噬活动与类固醇激素的分泌调节有密切关系，自体吞噬是溶酶体参与激素分泌调节过程的一种重要方式。 展开更多

关键词 细胞 内分泌 溶酶体 自体吞噬 类固醇激素

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原位PCR和免疫组化检测垂体腺癌P16基因

17

作者 易静 陈玉英 +3 位作者 于德蓉 李骁雄 熊文浩 沈建康 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第3期223-226,共4页

目的研究人垂体腺瘤P16基因的改变，同时探索原位PCR技术的适宜条件和结果确认，以及用于基因缺失检测的可行性。方法原位PCR和免疫组化技术。结界绝大部分间质细胞为P16蛋白免疫组化阴性，而一部分垂体肿瘤细胞呈P16阳性；针对P16基因... 目的研究人垂体腺瘤P16基因的改变，同时探索原位PCR技术的适宜条件和结果确认，以及用于基因缺失检测的可行性。方法原位PCR和免疫组化技术。结界绝大部分间质细胞为P16蛋白免疫组化阴性，而一部分垂体肿瘤细胞呈P16阳性；针对P16基因的原位PCR信号则可见于垂体肿瘤细胞和间质细胞等各种细胞，即P16组化阴性的细胞同样表明有P16基因存在。结论原位PCR可以是P16基因研究的一种有效手段，提示垂体腺癌的P16基因改变形式可能主要是表达过度而不是基因缺失。 展开更多

关键词 原位PCR 免疫组化 P16基因 垂体腺瘤

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口腔鳞癌p16/MTS1免疫组化和原位杂交检测

18

作者 汪铮 陈玉英 +1 位作者 李慧 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1998年第2期106-109,共4页

运用免疫组化和原位杂交法对43例口腔鳞癌的 MTS1基因,即 p16的表达进行研究,并分析了口腔鳞癌细胞株 p16的表达。结果43例口腔癌中28例为 p16阳性,15例为 p16阴性,p16基因的改变是口腔鳞癌发展中的频发事件。组化和原位杂交结合能较好... 运用免疫组化和原位杂交法对43例口腔鳞癌的 MTS1基因,即 p16的表达进行研究,并分析了口腔鳞癌细胞株 p16的表达。结果43例口腔癌中28例为 p16阳性,15例为 p16阴性,p16基因的改变是口腔鳞癌发展中的频发事件。组化和原位杂交结合能较好地反映肿瘤组织中 p16基因和蛋白的改变。研究表明 p16的改变可能是肿瘤发生的晚发事件,但和肿瘤的发生部位、浸润、转移、分级无关。TCA 细胞株是研究 P16表达的良好模型。 展开更多

关键词 口腔肿瘤 鳞癌 P16/MTS1 免疫组织化学 原位杂交

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口腔癌前病变和原位癌及鳞癌P53抑癌基因的表达

19

作者 汪铮 陈玉英 汤雪明 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1997年第5期329-331,共3页

P53抑癌基因和多种肿瘤的形成有关。作者应用免疫组化方法对口腔鳞癌发生、发展中P53的改变进行研究。结果发现，P53在上皮异常增生特别是中度、重度上皮增生及原位癌有着较高的表达；P53阳性与肿瘤的深度浸润有关（P＜0．05）；P53阳... P53抑癌基因和多种肿瘤的形成有关。作者应用免疫组化方法对口腔鳞癌发生、发展中P53的改变进行研究。结果发现，P53在上皮异常增生特别是中度、重度上皮增生及原位癌有着较高的表达；P53阳性与肿瘤的深度浸润有关（P＜0．05）；P53阳性中淋巴转移率为54％，P53阴性中淋巴转移率为28％，具有显著差异（P＜0．05）。提示在肿瘤形成的早期P53的不稳定表达起着极其重要的作用，在分化差的肿瘤，P53有着较强的阳性表达且淋巴转移率较高。作者认为P53阳性可作为临床肿瘤行为恶性、预后较差的十分重要的指标。 展开更多

关键词 口腔肿瘤 癌前病变 鳞癌 原位癌 免疫组织化学

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