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BPOZ基因剔除小鼠模型的建立
被引量：
1
1
作者
项佑贵
孙霞
+9 位作者
王龙
严兰珍
杨桦
刘伟
许勇
徐国江
王一
费俭
傅继梁
王铸钢
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第7期616-621,共6页
BPOZ是在卵巢癌等肿瘤组织中表达下调的细胞生长抑制基因 ,建立BPOZ基因剔除小鼠模型 ,可以为在体研究BPOZ基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件 .运用生物信息学手段确定小鼠BPOZ基因组序列 ,设计基因剔除策略 ,构建完成了基...
BPOZ是在卵巢癌等肿瘤组织中表达下调的细胞生长抑制基因 ,建立BPOZ基因剔除小鼠模型 ,可以为在体研究BPOZ基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件 .运用生物信息学手段确定小鼠BPOZ基因组序列 ,设计基因剔除策略 ,构建完成了基因剔除载体XpPNT BPOZ .以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES细胞 ,用G4 18和Ganciclovoir进行正负筛选 ,获得抵抗克隆 ,PCR和DNA印迹鉴定出正确同源重组的ES细胞克隆 .将同源重组的ES细胞注入小鼠囊胚 ,获得嵌合体小鼠 .嵌合体小鼠与C5 7BL/ 6J小鼠交配后获得Aguoti毛色的小鼠30只 ,其中 15只为BPOZ基因剔除杂合子小鼠 ,阳性率为 5 0 % .在雌雄杂合子交配的后代中获得纯合子小鼠 .初步的表型观察发现BPOZ基因剔除小鼠发育正常 ,有繁殖能力 ,进一步的表型分析工作正在进行之中 .
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关键词
BPOZ基因
细胞生长抑制基因
基因剔除
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职称材料
GLUT4-Cre转基因模型建立与Cre酶特异性表达
2
作者
孔辉
骆惠均
+4 位作者
陈玉英
王龙
陆振虞
费俭
王铸钢
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004年第10期789-792,832,共5页
目的 建立骨骼肌和脂肪组织特异性表达Cre重组酶基因的转基因小鼠,以期在上述组织细胞中实现相关基因的条件性剔除。方法 选择人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因的启动子驱动Cre重组酶的特异性表达,利用基因重组技术,构建GLUT4-Cre转基因表...
目的 建立骨骼肌和脂肪组织特异性表达Cre重组酶基因的转基因小鼠,以期在上述组织细胞中实现相关基因的条件性剔除。方法 选择人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因的启动子驱动Cre重组酶的特异性表达,利用基因重组技术,构建GLUT4-Cre转基因表达质粒。通过显微注射法将该质粒导入小鼠受精卵细胞核,获得的新生鼠经PCR和Southern杂交方法进行基因型的分析鉴定,常规方法培育、传代转基因鼠。用RT-PCR和免疫组化法对Cre酶在阳性转基因鼠体内mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果 获得5只阳性转基因首建鼠,其中3只已建系并稳定传代。在脑、脂肪组织中检测到Cre基因表达,而心肌、骨骼肌及肝脏组织中未检出转基因表达。结论 成功构建了在脑、脂肪组织中特异性表达Cre的转基因鼠,为研究与2型糖尿病、胰岛素抵抗等相关的条件性基因剔除小鼠模型的建立奠定了基础。
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关键词
特异性表达
GLUT4
脂肪组织
阳性
转基因鼠
骨骼肌
质粒
CRE重组酶
CRE基因
建系
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职称材料
RNA干扰-转录后水平的基因沉默
3
作者
谭轶
费照亮
+1 位作者
费俭
王铸钢
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004年第7期583-586,593,共5页
随着人类基因组计划的初步完成,生命科学也随之进入后基因组计划的时代。在各种研究基因功能的方法中,RNA水平使目的基因沉默无疑是目前研究的新点和热点,特别是双链RNA(dsRNA)介导的转录后水平的基因沉默(PTGS),更是快速关闭基因的途径...
随着人类基因组计划的初步完成,生命科学也随之进入后基因组计划的时代。在各种研究基因功能的方法中,RNA水平使目的基因沉默无疑是目前研究的新点和热点,特别是双链RNA(dsRNA)介导的转录后水平的基因沉默(PTGS),更是快速关闭基因的途径,目前在植物、线虫、果蝇和小鼠早期胚胎中均有发现和证实。这一现象的发现和应用将有助于基因功能及其在信号传导、病毒抵御机制等方面的研究,并有可能开创基因治疗的新模式。
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关键词
RNA干扰
基因转录
基因沉默
PTGS
基因治疗
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职称材料
题名
BPOZ基因剔除小鼠模型的建立
被引量：
1
1
作者
项佑贵
孙霞
王龙
严兰珍
杨桦
刘伟
许勇
徐国江
王一
费俭
傅继梁
王铸钢
机构
上海第二医科大学基础医学院医学遗传学教研室
上海
南方模式生物研究中心
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004年第7期616-621,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(30370793)
国家杰出青年科学基金(39925023)
+3 种基金
教育部"长江学者奖励计划"(OOTPJS111)
国家高技术"863"计划(2001AA216081)
上海市科学技术发展基金(99JC14029
99XD14005)资助项目~~
文摘
BPOZ是在卵巢癌等肿瘤组织中表达下调的细胞生长抑制基因 ,建立BPOZ基因剔除小鼠模型 ,可以为在体研究BPOZ基因的生物学功能及其与肿瘤发生的关系创造条件 .运用生物信息学手段确定小鼠BPOZ基因组序列 ,设计基因剔除策略 ,构建完成了基因剔除载体XpPNT BPOZ .以电穿孔方法将基因剔除载体导入ES细胞 ,用G4 18和Ganciclovoir进行正负筛选 ,获得抵抗克隆 ,PCR和DNA印迹鉴定出正确同源重组的ES细胞克隆 .将同源重组的ES细胞注入小鼠囊胚 ,获得嵌合体小鼠 .嵌合体小鼠与C5 7BL/ 6J小鼠交配后获得Aguoti毛色的小鼠30只 ,其中 15只为BPOZ基因剔除杂合子小鼠 ,阳性率为 5 0 % .在雌雄杂合子交配的后代中获得纯合子小鼠 .初步的表型观察发现BPOZ基因剔除小鼠发育正常 ,有繁殖能力 ,进一步的表型分析工作正在进行之中 .
关键词
BPOZ基因
细胞生长抑制基因
基因剔除
Keywords
BPOZ gene
cell growth suppressor gene
gene knockout
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
GLUT4-Cre转基因模型建立与Cre酶特异性表达
2
作者
孔辉
骆惠均
陈玉英
王龙
陆振虞
费俭
王铸钢
机构
上海第二医科大学基础医学院医学遗传学教研室
上海
南方模式生物研究中心细胞生物学
教研室
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004年第10期789-792,832,共5页
基金
国家杰出青年科学基金(39925023)
教育部"长江学者奖励计划"(OOTPJS111)
+2 种基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(2001AA216081)
上海市科学技术发展基金(99JC14029
99XD14005)资助项目
文摘
目的 建立骨骼肌和脂肪组织特异性表达Cre重组酶基因的转基因小鼠,以期在上述组织细胞中实现相关基因的条件性剔除。方法 选择人葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)基因的启动子驱动Cre重组酶的特异性表达,利用基因重组技术,构建GLUT4-Cre转基因表达质粒。通过显微注射法将该质粒导入小鼠受精卵细胞核,获得的新生鼠经PCR和Southern杂交方法进行基因型的分析鉴定,常规方法培育、传代转基因鼠。用RT-PCR和免疫组化法对Cre酶在阳性转基因鼠体内mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果 获得5只阳性转基因首建鼠,其中3只已建系并稳定传代。在脑、脂肪组织中检测到Cre基因表达,而心肌、骨骼肌及肝脏组织中未检出转基因表达。结论 成功构建了在脑、脂肪组织中特异性表达Cre的转基因鼠,为研究与2型糖尿病、胰岛素抵抗等相关的条件性基因剔除小鼠模型的建立奠定了基础。
关键词
特异性表达
GLUT4
脂肪组织
阳性
转基因鼠
骨骼肌
质粒
CRE重组酶
CRE基因
建系
Keywords
glucose transporter type 4
Cre-Loxp recombination system
transgenic mice model
specific tissue expression
分类号
R-332 [医药卫生]
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职称材料
题名
RNA干扰-转录后水平的基因沉默
3
作者
谭轶
费照亮
费俭
王铸钢
机构
上海第二医科大学基础医学院医学遗传学教研室
上海
南方模式生物研究中心
出处
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004年第7期583-586,593,共5页
基金
国家杰出青年科学基金(39925023)
教育部"长江学者奖励计划"(OOTPJS111)资助项目
文摘
随着人类基因组计划的初步完成,生命科学也随之进入后基因组计划的时代。在各种研究基因功能的方法中,RNA水平使目的基因沉默无疑是目前研究的新点和热点,特别是双链RNA(dsRNA)介导的转录后水平的基因沉默(PTGS),更是快速关闭基因的途径,目前在植物、线虫、果蝇和小鼠早期胚胎中均有发现和证实。这一现象的发现和应用将有助于基因功能及其在信号传导、病毒抵御机制等方面的研究,并有可能开创基因治疗的新模式。
关键词
RNA干扰
基因转录
基因沉默
PTGS
基因治疗
Keywords
post-transcriptional gene silencing
RNA interference
dsRNA
small interference RNA
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
BPOZ基因剔除小鼠模型的建立
项佑贵
孙霞
王龙
严兰珍
杨桦
刘伟
许勇
徐国江
王一
费俭
傅继梁
王铸钢
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2004
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
GLUT4-Cre转基因模型建立与Cre酶特异性表达
孔辉
骆惠均
陈玉英
王龙
陆振虞
费俭
王铸钢
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004
0
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下载PDF
职称材料
3
RNA干扰-转录后水平的基因沉默
谭轶
费照亮
费俭
王铸钢
《上海第二医科大学学报》
CSCD
2004
0
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职称材料
已选择
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