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端粒酶抑制剂BIBR1532联合自噬抑制剂CQ抑制黑色素瘤细胞生存的机制研究
1
作者
龚卫华
陈兰
+3 位作者
赵昆
柯追
许青
郭献灵
《中国癌症杂志》
北大核心
2025年第5期431-439,共9页
背景与目的:黑色素瘤是一种源于黑色素细胞的高度侵袭性恶性肿瘤,严重威胁人类的生命健康,其发病率和死亡率近年来持续升高。而端粒酶和自噬在细胞增殖、生存及应激反应中发挥关键作用。端粒酶通过延长染色体末端的端粒来维持细胞的复...
背景与目的:黑色素瘤是一种源于黑色素细胞的高度侵袭性恶性肿瘤,严重威胁人类的生命健康,其发病率和死亡率近年来持续升高。而端粒酶和自噬在细胞增殖、生存及应激反应中发挥关键作用。端粒酶通过延长染色体末端的端粒来维持细胞的复制能力;自噬作为一种细胞自我降解机制,既能帮助细胞清除受损成分以促进存活,也能在特定条件下诱导细胞死亡。在肿瘤微环境中,端粒酶和自噬常被异常激活或调控失衡,参与包括黑色素瘤在内的多种恶性肿瘤的发生、发展。本研究初步探究端粒酶和自噬在黑色素瘤发展中的作用,并评估端粒酶抑制剂BIBR1532联合自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)在治疗黑色素瘤中的潜在协同作用。方法:通过给予恶性黑色素瘤细胞A375端粒酶抑制剂BIBR1532处理,利用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验来评估细胞活力,并采用AnnexinⅤ/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色来检测细胞凋亡情况。此外,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62的表达,利用自噬双标腺病毒转染技术来观察自噬流的变化。在此基础上,进一步联合应用BIBR1532和自噬抑制剂CQ,分析细胞增殖、凋亡率、线粒体膜电位变化和细胞周期分布,并通过克隆形成实验来验证细胞增殖能力,从而全面地评估这种联合治疗策略的疗效。结果:端粒酶抑制剂BIBR1532在50μmol/L的浓度下能够显著抑制恶性黑色素瘤细胞A375的生长,并诱导细胞发生凋亡。同样在这一浓度下,BIBR1532能够上调A375细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,同时降低p62蛋白的表达。通过自噬双标腺病毒转染A375细胞,观察到经BIBR1532处理后,自噬流显著增强。BIBR1532(50μmol/L)与自噬抑制剂CQ(20μmol/L)的联合应用可显著促进A375细胞的死亡,诱导细胞凋亡和线粒体膜电位的破坏,导致细胞周期在G_(2)/M期停滞,并显著抑制细胞的克隆形成能力。结论:端粒酶抑制剂BIBR1532不仅能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖,还能激活这些细胞的自噬过程,而通过应用自噬抑制剂CQ抑制自噬反应则能增强恶性黑色素瘤细胞对端粒酶抑制剂BIBR1532的敏感性。
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关键词
黑色素瘤
端粒酶
端粒酶抑制剂
BIBR1532
自噬
自噬抑制剂
氯喹
肿瘤治疗
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题名
端粒酶抑制剂BIBR1532联合自噬抑制剂CQ抑制黑色素瘤细胞生存的机制研究
1
作者
龚卫华
陈兰
赵昆
柯追
许青
郭献灵
机构
上海市第十人民医院崇明分院肿瘤科
同济大学附属
第十
人民医院
肿瘤科
安徽理工大学医学院
出处
《中国癌症杂志》
北大核心
2025年第5期431-439,共9页
基金
崇明区科学技术委员会科技项目(CKY2018-34)。
文摘
背景与目的:黑色素瘤是一种源于黑色素细胞的高度侵袭性恶性肿瘤,严重威胁人类的生命健康,其发病率和死亡率近年来持续升高。而端粒酶和自噬在细胞增殖、生存及应激反应中发挥关键作用。端粒酶通过延长染色体末端的端粒来维持细胞的复制能力;自噬作为一种细胞自我降解机制,既能帮助细胞清除受损成分以促进存活,也能在特定条件下诱导细胞死亡。在肿瘤微环境中,端粒酶和自噬常被异常激活或调控失衡,参与包括黑色素瘤在内的多种恶性肿瘤的发生、发展。本研究初步探究端粒酶和自噬在黑色素瘤发展中的作用,并评估端粒酶抑制剂BIBR1532联合自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)在治疗黑色素瘤中的潜在协同作用。方法:通过给予恶性黑色素瘤细胞A375端粒酶抑制剂BIBR1532处理,利用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验来评估细胞活力,并采用AnnexinⅤ/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色来检测细胞凋亡情况。此外,通过蛋白质印迹法(Western blot)检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和p62的表达,利用自噬双标腺病毒转染技术来观察自噬流的变化。在此基础上,进一步联合应用BIBR1532和自噬抑制剂CQ,分析细胞增殖、凋亡率、线粒体膜电位变化和细胞周期分布,并通过克隆形成实验来验证细胞增殖能力,从而全面地评估这种联合治疗策略的疗效。结果:端粒酶抑制剂BIBR1532在50μmol/L的浓度下能够显著抑制恶性黑色素瘤细胞A375的生长,并诱导细胞发生凋亡。同样在这一浓度下,BIBR1532能够上调A375细胞中自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达,同时降低p62蛋白的表达。通过自噬双标腺病毒转染A375细胞,观察到经BIBR1532处理后,自噬流显著增强。BIBR1532(50μmol/L)与自噬抑制剂CQ(20μmol/L)的联合应用可显著促进A375细胞的死亡,诱导细胞凋亡和线粒体膜电位的破坏,导致细胞周期在G_(2)/M期停滞,并显著抑制细胞的克隆形成能力。结论:端粒酶抑制剂BIBR1532不仅能抑制恶性黑色素瘤细胞增殖,还能激活这些细胞的自噬过程,而通过应用自噬抑制剂CQ抑制自噬反应则能增强恶性黑色素瘤细胞对端粒酶抑制剂BIBR1532的敏感性。
关键词
黑色素瘤
端粒酶
端粒酶抑制剂
BIBR1532
自噬
自噬抑制剂
氯喹
肿瘤治疗
Keywords
Melanoma
Telomerase
Telomerase inhibitor
BIBR1532
Autophagy
Autophagy inhibitor
Chloroquine
Tumor therapy
分类号
R739.5 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
端粒酶抑制剂BIBR1532联合自噬抑制剂CQ抑制黑色素瘤细胞生存的机制研究
龚卫华
陈兰
赵昆
柯追
许青
郭献灵
《中国癌症杂志》
北大核心
2025
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