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同位素标签技术在人肾小管上皮细胞蛋白质组学研究中的应用被引量：1: 1; 作者陈永熙李娅 +5 位作者张文陈晓农王伟铭张群业黄秋花陈楠《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期513-516,共4页; 目的建立并优化人肾小管上皮细胞蛋白质组学分析所需的相对和绝对定量的同位素标签试剂(iTRAQ)标记技术,为进一步研究奠定基础。方法将人肾小管上皮细胞株HK-2通过细胞裂解、丙酮沉淀、蛋白变性、还原及酶解,最后进行iTRAQ标记和质谱鉴... 展开更多; 关键词相对和绝对定量的同位素标签试剂定量蛋白质组学人肾小管上皮细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

地西他滨抗套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1作用机制的研究被引量：1: 2; 作者耿梅费爱梅 +3 位作者刘静静聂瑞敏王瑾糜坚青《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期161-166,共6页; 背景与目的:套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)是一种难治性的恶性肿瘤,预后差。地西他滨对骨髓异常增生综合征及难治性急性髓性白血病的治疗临床上已达成共识,但是目前鲜有地西他滨对MCL作用的报道。本文探讨地西他滨抗MCL细胞... 展开更多; 关键词套细胞淋巴瘤地西他滨凋亡线粒体途径去甲基化; 在线阅读下载PDF 职称材料

白血病细胞中不同启动子驱动外源基因表达能力差异分析被引量：3: 3; 作者周雁黄秋花《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期879-885,共7页; 为了分析不同启动子在白血病细胞中驱动外源基因表达能力的差异,文章选择了4种含不同启动子EF1α、PGK、Ubiquitin和CMV驱动的GFP报告基因的慢病毒载体,用以感染4种不同的白血病细胞株——NB4、HL60、Kasumi和THP1,利用荧光显微镜、流... 展开更多; 关键词启动子 GFP报告基因慢病毒载体白血病细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

鼠抗人c-Kit单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：1: 4; 作者刘虹辰毛朝明 +5 位作者苏晓瑜阮铮丁秋兰王学锋王鸿利奚晓东《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期619-622,共4页; 目的:鼠抗人c-Kit单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:利用PCR技术获得人c-Kit的胞外免疫球蛋白区编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建出重组表达质粒pQE30-hKitD4-5。测序鉴定正确后转化M15,经IPTG37℃诱导4h... 展开更多; 关键词 C-KIT 原核重组蛋白杂交瘤单克隆抗体白血病; 在线阅读下载PDF 职称材料

Myr-RKEFAK肽选择性调控血小板外向内信号转导相关功能: 5; 作者龙章彪黄建松 +4 位作者施小凤杨纪春阮铮肖兵奚晓东《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期761-767,共7页; 目的:研究踝蛋白杆部整合素结合位点2与整合素β3相互作用对于血小板信号转导的影响。方法:设计合成模拟整合素β3胞浆近膜端α螺旋上6个氨基酸序列(R724KEFAK729)的寡肽,并通过十四烷酰化修饰以使其具有穿细胞膜性(myr-RKEFAK肽)。观察... 展开更多; 关键词整合素Β3 踝蛋白杆部整合素结合位点2 myr-RKEFAK肽血小板信号转导; 在线阅读下载PDF 职称材料

CHO细胞模型中整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响被引量：1: 6; 作者杨纪春施小凤 +4 位作者黄建松龙章彪肖兵阮铮奚晓东《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期768-773,共6页; 目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤... 展开更多; 关键词整合素Β3 CHO细胞模型 β3胞浆NITY基序 αⅡbβ3介导的细胞功能; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名同位素标签技术在人肾小管上皮细胞蛋白质组学研究中的应用被引量：1: 1; 作者陈永熙李娅张文陈晓农王伟铭张群业黄秋花陈楠; 机构上海交通大学医学院瑞金医院肾脏科上海交通大学医学院瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室; 出处《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期513-516,共4页; 基金国家自然科学基金(30600291) 上海市重点学科(T0201) +1 种基金上海市卫生局重点学科基金(05Ⅲ001)~~; 文摘目的建立并优化人肾小管上皮细胞蛋白质组学分析所需的相对和绝对定量的同位素标签试剂(iTRAQ)标记技术,为进一步研究奠定基础。方法将人肾小管上皮细胞株HK-2通过细胞裂解、丙酮沉淀、蛋白变性、还原及酶解,最后进行iTRAQ标记和质谱鉴定,研究iTRAQ在HK-2细胞的标记情况和蛋白质组学。结果通过质谱检测,检测到带有iTRAQ标记肽段。随机选取20个前体离子,通过3次重复试验,鉴定出iTRAQ标记多肽肽段分别为17、15和18个,标记效率在75.5%～90.0%,且组间标记效率差异无统计学意义(P>0.05)。结论iTRAQ可以在HK-2细胞中标记效果满意,且重复性较好,为进一步研究肾脏疾病的蛋白质组学奠定了基础。; 关键词相对和绝对定量的同位素标签试剂定量蛋白质组学人肾小管上皮细胞; Keywords isobaric tags for relative and absolute quantitation quantitative proteomics human renal proximal tubular epithelial cell; 分类号 Q51-33 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名地西他滨抗套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1作用机制的研究被引量：1: 2; 作者耿梅费爱梅刘静静聂瑞敏王瑾糜坚青; 机构上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室肿瘤放化疗科中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物研究所上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室血液科; 出处《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期161-166,共6页; 基金国家自然科学基金面上资助项目(No:30871106) 国家重点基础研究发展计划(No:2010CB529203); 文摘背景与目的:套细胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)是一种难治性的恶性肿瘤,预后差。地西他滨对骨髓异常增生综合征及难治性急性髓性白血病的治疗临床上已达成共识,但是目前鲜有地西他滨对MCL作用的报道。本文探讨地西他滨抗MCL细胞的作用机制。方法:以MCL细胞株Jeko-1作为研究对象,采用MTT法检测地西他滨对细胞增殖的影响,Annexin V/PI双重染色法检测其对细胞凋亡的影响,采用DiOC6(3)染色/流式细胞术检测Jeko-1细胞线粒体跨膜电位的丢失,Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及凋亡途径相关蛋白的表达,用亚硫酸氢盐测序(bisulfate sequencing PCR,BSP)技术检测地西他滨作用Jeko-1细胞前后PCDH8基因启动子CpG岛的甲基化水平变化。结果:地西他滨能有效抑制Jeko-1细胞的增殖并诱导其凋亡,凋亡率呈时间和剂量依赖性增加,并引起MCL细胞线粒体跨膜电位丢失,Cyclin D1蛋白表达水平降低,caspase 3、caspase 9表达水平增加。本研究另发现Jeko-1细胞中PCDH8基因启动子CpG岛的甲基化率为76.67%,经过0.5μmol/L低浓度的地西他滨处理72 h后,其甲基化率下降至48.33%。结论:地西他滨在对MCL细胞的作用中,高浓度时起到细胞毒作用,低浓度时则具有去甲基化作用,为今后的临床治疗提供了新的理论依据。; 关键词套细胞淋巴瘤地西他滨凋亡线粒体途径去甲基化; Keywords Mantle cell lymphoma Decitabine Apoptosis Mitochondrial pathway Demethylation; 分类号 R73 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名白血病细胞中不同启动子驱动外源基因表达能力差异分析被引量：3: 3; 作者周雁黄秋花; 机构上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期879-885,共7页; 基金国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(编号:2009CB825604)资助; 文摘为了分析不同启动子在白血病细胞中驱动外源基因表达能力的差异,文章选择了4种含不同启动子EF1α、PGK、Ubiquitin和CMV驱动的GFP报告基因的慢病毒载体,用以感染4种不同的白血病细胞株——NB4、HL60、Kasumi和THP1,利用荧光显微镜、流式细胞仪和荧光定量PCR的方法检测其GFP表达效率,发现EF1α启动子驱动GFP表达的能力最强,CMV最弱,PGK和Ubiquitin则介于两者之间。该结果提示在白血病细胞中研究基因功能时,应根据不同的研究需求选择最为合适的启动子。; 关键词启动子 GFP报告基因慢病毒载体白血病细胞; Keywords promoters GFP reporter gene lentivirus vectors leukemia cells; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鼠抗人c-Kit单克隆抗体的制备及其特性鉴定被引量：1: 4; 作者刘虹辰毛朝明苏晓瑜阮铮丁秋兰王学锋王鸿利奚晓东; 机构上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期619-622,共4页; 基金国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02A245); 文摘目的:鼠抗人c-Kit单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:利用PCR技术获得人c-Kit的胞外免疫球蛋白区编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建出重组表达质粒pQE30-hKitD4-5。测序鉴定正确后转化M15,经IPTG37℃诱导4h后,SDS-PAGE显示融合蛋白(表达产物)以包涵体形式存在。用镍柱对融合蛋白进行纯化,将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,经流式细胞术(FCM)分析和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人c-Kit分子mAb的杂交瘤细胞株。采用Western blot、Ig亚型快速定性试纸法、FCM等对mAb的生物学特性进行鉴定。结果:成功表达及纯化了人c-Kit重组蛋白,并获得1株持续、稳定分泌鼠抗人c-KitmAb的杂交瘤细胞株,命名为SRJ1。ELISA和Western blot、FCM结果显示了该株mAb能够识别Kasumi白血病细胞株表面表达的天然的c-Kit分子,并与人正常外周血细胞无交叉反应。值得注意的是,Kasumi细胞含有一个不被SRJ1识别的亚群,虽然其表达c-Kit(Ab81mAb的结合正常)。结论:成功构建了原核表达载体pQE30-Kit4-5,并获得高纯度的人pQE30-Kit4-5重组蛋白;成功制备了1株特异性的鼠抗人c-KitmAb杂交瘤。其所分泌的抗体能特异地识别人c-Kit分子,并且可能成为区分细胞表面表达不同c-Kit分子的潜在检测工具。; 关键词 C-KIT 原核重组蛋白杂交瘤单克隆抗体白血病; Keywords c-Kit procaryotic fusion proteins hybridoma monoclonal antibody leukemia; 分类号 Q8 [生物学] R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Myr-RKEFAK肽选择性调控血小板外向内信号转导相关功能: 5; 作者龙章彪黄建松施小凤杨纪春阮铮肖兵奚晓东; 机构上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期761-767,共7页; 基金国家重点基础研究发展计划(973)项目(2013CB966800) 国家自然科学基金(81270594); 文摘目的:研究踝蛋白杆部整合素结合位点2与整合素β3相互作用对于血小板信号转导的影响。方法:设计合成模拟整合素β3胞浆近膜端α螺旋上6个氨基酸序列(R724KEFAK729)的寡肽,并通过十四烷酰化修饰以使其具有穿细胞膜性(myr-RKEFAK肽)。观察myr-RKEFAK肽对经典血小板外向内信号转导事件(固相纤维蛋白原上的稳定黏附和伸展、二相聚集、纤维蛋白凝块回缩),以及内向外信号转导事件(一相聚集、游离纤维蛋白原的结合)的影响。结果:myr-RKEFAK肽可以浓度依赖性地抑制血小板固相化纤维蛋白原上稳定黏附和伸展、二相聚集以及纤维蛋白凝块回缩等外向内信号转导功能;但不影响游离纤维蛋白原结合和一相聚集等内向外信号转导功能。结论:穿膜肽myr-RKEFAK对血小板的外向内信号转导相应功能产生抑制,但不影响血小板内向外信号转导相关功能。; 关键词整合素Β3 踝蛋白杆部整合素结合位点2 myr-RKEFAK肽血小板信号转导; Keywords integrin β3 talin rod integrin binding site 2 myr-RKEFAK peptide Platelet signal transduction; 分类号 R331.143 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名CHO细胞模型中整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响被引量：1: 6; 作者杨纪春施小凤黄建松龙章彪肖兵阮铮奚晓东; 机构上海交通大学医学院附属瑞金医院上海血液学研究所医学基因组学国家重点实验室; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期768-773,共6页; 基金国家自然科学基金项目(81270594) 中国博士后科学基金项(2013M541528); 文摘目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能,通过免疫共沉淀方法检测蛋白相互作用。结果:成功建立了CHO-αⅡbβ3和CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株,稳定表达野生型整合素αⅡbβ3的CHO细胞具有在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,与CHO-αⅡbβ3细胞株相比,CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株的黏附能力减弱,但是黏附后的伸展能力无明显改变。免疫共沉淀结果显示,kindlin-2能够结合野生型整合素β3,但与突变型整合素β3结合的量显著减少。结论:整合素β3胞浆段缺失NITY基序引起细胞黏附功能受损,这种缺失突变导致整合素β3与kindlin-2蛋白的结合受到抑制,从而部分抑制了整合素β3的信号转导。; 关键词整合素Β3 CHO细胞模型 β3胞浆NITY基序 αⅡbβ3介导的细胞功能; Keywords integrin β3 CHO cell model β3 cytoplasmic NITY motif α Ⅱ bβ3 mediated cell function; 分类号 R331.143 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	同位素标签技术在人肾小管上皮细胞蛋白质组学研究中的应用	陈永熙李娅张文陈晓农王伟铭张群业黄秋花陈楠	《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	地西他滨抗套细胞淋巴瘤细胞株Jeko-1作用机制的研究	耿梅费爱梅刘静静聂瑞敏王瑾糜坚青	《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	白血病细胞中不同启动子驱动外源基因表达能力差异分析	周雁黄秋花	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	鼠抗人c-Kit单克隆抗体的制备及其特性鉴定	刘虹辰毛朝明苏晓瑜阮铮丁秋兰王学锋王鸿利奚晓东	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	Myr-RKEFAK肽选择性调控血小板外向内信号转导相关功能	龙章彪黄建松施小凤杨纪春阮铮肖兵奚晓东	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	CHO细胞模型中整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响	杨纪春施小凤黄建松龙章彪肖兵阮铮奚晓东	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	1	在线阅读下载PDF 职称材料