青藤碱对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞MyD88、TRAF-6表达的影响 被引量：24

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作者 张洪长 刘明昕 +3 位作者 张莹 王恩鹏 陈港 姜鸿远 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期485-489,共5页

目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类... 目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor88,My D88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes,FLS)增生导致RA软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形的作用机制。方法:体外培养RA-FLS细胞,分为对照组与(0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)SIN组,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测0.5 mmol/L SIN组的细胞增殖率;荧光定量PCR法测定对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6基因表达;Western blot法检测对照组与0.5 mmol/L SIN组My D88和TRAF-6蛋白表达。结果:SIN各组ALP活性均低于对照组,其中以0.5 mmol/L SIN组的ALP活性为最低(P<0.01)。CCK-8法检测,0.5 mmol/L SIN组RA-FLS细胞增殖率明显低于对照组(P<0.01),SIN诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期,之后细胞的增殖率开始下降。荧光定量PCR和Western blot法检测,0.5 mmol/L SIN组的My D88和TRAF-6基因及蛋白表达明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:SIN通过对TLR信号转导通路的影响有效地抑制RA-FLS细胞内My D88和TRAF-6的表达,这可能是其治疗RA防止软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形发生的重要分子机制之一。 展开更多

关键词 青藤碱 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞 髓样分化因子88 肿瘤坏死因子受体相关因子6

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脑络欣通降低局灶性脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质TLR4及TRAF6和TNF-α蛋白的表达 被引量：12

2

作者 王丽娜 曹健 +6 位作者 朱国旗 范婧婧 丁玲 贾学锋 梁梦茹 王键 胡建鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期702-707,共6页

目的观察脑络欣通对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法采用改良线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)大鼠右侧脑缺血模型,SD大鼠随机分... 目的观察脑络欣通对脑缺血再灌注大鼠额顶叶皮质Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达的影响。方法采用改良线栓法建立大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)大鼠右侧脑缺血模型,SD大鼠随机分为假手术组、模型组、通心络组和脑络欣通组,每组30只;再分为3、7、14 d三个亚组,灌胃给药。Western blot法检测缺血侧额顶叶皮质TLR4、TRAF6的蛋白水平,免疫组织化学染色法检测缺血侧额顶叶皮质缺血半暗带TNF-α的表达。结果与假手术组比较,模型组3、7、14 d,TLR4、TRAF6蛋白水平显著升高;与模型组比较,各治疗组3、14 d的TLR4、TRAF6蛋白水平显著降低,脑络欣通组7 d显著降低;与通心络组比较,脑络欣通组3、7 d的TLR4的蛋白水平降低,14 d的TLR4蛋白水平升高。与假手术组比较,模型组3、7 d的TNF-α蛋白表达的阳性面积显著升高;与模型组比较,脑络欣通组和通心络组7、14 d的TNF-α蛋白表达的阳性面积显著降低,脑络欣通组3 d的TNF-α蛋白表达的阳性面积显著降低;与通心络组比较,脑络欣通组各时间点TNF-α蛋白表达的阳性面积均无明显差异。结论脑络欣通通过降低TLR4、TRAF6、TNF-α蛋白表达,减轻炎症反应,减轻脑缺血再灌注损伤。 展开更多

关键词 脑缺血再灌注 脑络欣通 Toll样受体4(TLR4) 肿瘤坏死因子受体相关因子6(traf6) 肿瘤坏死因子α(TNF-α)

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肿瘤坏死因子受体相关因子6对卡波西肉瘤相关疱疹病毒感染后促炎因子的影响

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作者 吴戈 郑嵘炅 +2 位作者 潘珂君 韩丹 鲁晓擘 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1471-1476,共6页

目的通过体外培养观察肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)沉默和过表达后促炎因子白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6、IL-8的表达,探索TRAF6对卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染后促炎因子的影响,为KSHV致病机制的研究提供新思路。方法使... 目的通过体外培养观察肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)沉默和过表达后促炎因子白细胞介素(IL)-1α、IL-1β、IL-6、IL-8的表达,探索TRAF6对卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染后促炎因子的影响,为KSHV致病机制的研究提供新思路。方法使用KSHV(+)iSLK细胞系建立沉默和过表达TRAF6模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测转染水平。细胞培养48、72 h后通过酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测促炎因子的表达,并比较TRAF6沉默及过表达后促炎因子表达水平的变化。结果成功建立TRAF6沉默(siTRAF6)和TRAF6过表达(TRAF6-OE)细胞模型。ELISA结果显示,TRAF6沉默后促炎因子IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8表现出不同程度的升高,TRAF6过表达后IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8有不同程度的降低,且IL-6、IL-8变化幅度较大,说明TRAF6对促炎因子有一定的抑制作用,提示其在KSHV感染后促炎作用的信号通路中发挥重要作用。结论TRAF6对促炎因子有一定抑制作用,有望作为新的潜在靶点抑制卡波西肉瘤病情发展。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子6 卡波西肉瘤 卡波西肉瘤相关疱疹病毒 KSHV 促炎因子

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TRAF6在抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导THP-1细胞表达组织因子时的活化 被引量：3

4

作者 许国莹 周红 +4 位作者 文海平 郭东琳 周芳 陈东东 解鸿翔 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期487-490,共4页

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRN... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)在抗β2GPI/β2GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的作用。方法:采用一定剂量抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,实时定量PCR检测细胞TF mRNA水平,发色底物法检测细胞TF活性;RT-qPCR及Western blot分别检测细胞TRAF6mRNA和蛋白表达情况;进一步采用蛋白酶体抑制剂MG-132,观察是否能够干预抗β2GPI/β2GPI复合物对细胞的刺激效应。结果:抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)能够刺激THP-1细胞表达TF mRNA及活性,与对照相比差异显著(P<0.05);使细胞TRAF6 mRNA和蛋白表达均增加,并显示时间相关性,分别在刺激15 min和30 min时表达至高峰;MG-132(5μmol/L)明显抑制抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg/L)对THP-1细胞TRAF6 mRNA和蛋白的刺激效应及TF的诱导表达。结论:抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,TRAF6被激活并发挥重要作用。 展开更多

关键词 抗磷脂综合征 抗β2GPI/β2GPI tumor necrosis factor receptor-associated factor6 组织因子

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下调TRAF6表达对肺癌细胞株恶性生物学行为的影响 被引量：3

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作者 林根 黄传钟 +3 位作者 苏光建 胡卉华 徐海鹏 黄诚 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期661-667,共7页

背景与目的已有的研究提示肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)在肺癌中常常扩增,可能扮演癌基因角色,但TRAF6的确切作用尚未充分阐明。本研究探索TRAF6表达对肺癌细胞株的增殖、凋... 背景与目的已有的研究提示肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)在肺癌中常常扩增,可能扮演癌基因角色,但TRAF6的确切作用尚未充分阐明。本研究探索TRAF6表达对肺癌细胞株的增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力的影响以及可能作用机制。方法选用A549、H1650、SPC-A-1以及Calu-3等四种肺癌细胞株,应用蛋白印迹、q RT-PCR检测其TRAF6蛋白及m RNA表达。SPC-A-1、Calu-3细胞转染TRAF6 si RNA,以EMSA方法检测不同处理组核因子-κB的DNA结合活性,MTS法检测细胞增殖,流式细胞仪PI染色检测细胞凋亡,流式细胞仪进行细胞周期测定,划痕实验及Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力,并应用蛋白印迹检测泛素化抗体、p65、CD24、CXCR4等蛋白表达。SPC-A-1细胞提取DNA后,应用二代测序法进行全基因组测序。结果在四种细胞株中,SPC-A-1和Calu-3细胞TRAF6相对高表达,TRAF6发生自身K63-泛素化,但仅在SPC-A-1细胞中观察到核因子-κB组成性活化。转染TRAF6 si RNA后,SPC-A-1、Calu-3细胞TRAF6表达明显下调,与空白组及对照组相比,下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞核因子-κB活性、降低迁移及侵袭能力以及促进细胞凋亡,CD24和CXCR4的表达也明显下调,但对细胞增殖及细胞周期无明显影响。下调TRAF6表达对Calu-3细胞株的核因子-κB活性、细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力等均无明显影响。未发现SPC-A-1细胞株TRAF6基因突变或拷贝数改变。结论下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡,并且TRAF6可能是通过调控核因子-κBCD24/CXCR4信号通路参与调控肺癌侵袭、细胞凋亡。 展开更多

关键词 肺肿瘤 肿瘤坏死因子受体相关因子6 核因子-ΚB 凋亡 侵袭

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TRAF6与肿瘤关系的研究进展 被引量：8

6

作者 李妙 周立军 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期24-31,共8页

肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)是肿瘤坏死因子受体相关因子家族的一员,研究发现其在许多恶性肿瘤中高表达,并且在肿瘤细胞的增殖、迁移和凋亡过程中发挥重要作用。随着对TRAF6... 肿瘤坏死因子受体相关因子6(Tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)是肿瘤坏死因子受体相关因子家族的一员,研究发现其在许多恶性肿瘤中高表达,并且在肿瘤细胞的增殖、迁移和凋亡过程中发挥重要作用。随着对TRAF6与不同类型肿瘤关系的深入研究,干扰或者抑制TRAF6在与肿瘤相关信号通路中的作用或许可以为癌症治疗提供新的策略。根据TRAF6的生物学特性及其在肿瘤相关信号通路中的重要作用,综述了TRAF6与肿瘤的关系,探讨了TRAF6在肿瘤治疗中的重要意义,旨在为今后以TRAF6为靶点的癌症治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子6 信号通路 肿瘤

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赤眼鳟TRAF6基因的cDNA克隆及其应对GCRV的免疫表达特性 被引量：2

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作者 陈开健 王静安 +4 位作者 刘巧林 王荣华 徐莹 赵鑫 肖调义 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期641-646,共6页

为研究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)肿瘤坏死因子受体相关因子6基因的结构特性及其应对GCRV的免疫表达特性,采用RACE技术获得了赤眼鳟TRAF6基因的cDNA全长(共2 621 bp),其中包含5′端非编码区50 bp,开放阅读框1 629 bp,3′端非编码... 为研究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)肿瘤坏死因子受体相关因子6基因的结构特性及其应对GCRV的免疫表达特性,采用RACE技术获得了赤眼鳟TRAF6基因的cDNA全长(共2 621 bp),其中包含5′端非编码区50 bp,开放阅读框1 629 bp,3′端非编码区942 bp;该基因编码542个氨基酸,推导的蛋白质相对分子质量为61670,理论等电点为6.01。SMART结构分析结果显示,TRAF6基因编码的蛋白包含1个RING结构域、2个锌指结构域、1个螺旋卷曲结构域和1个MATH结构域。系统进化树分析结果表明,赤眼鳟TRAF6与团头鲂TRAF6的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,TRAF6在赤眼鳟的12种组织中均有表达,其中在肝脏中的表达量最高,在中肠中的表达量最低;经GCRV感染后,赤眼鳟脾脏和头肾中TRAF6均呈波动上调趋势,在24 h达到峰值,表明TRAF6参与了赤眼鳟抗GCRV的免疫应答反应。 展开更多

关键词 赤眼鳟 肿瘤坏死因子受体相关因子6基因 草鱼呼肠孤病毒(GCRV)

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大鼠野生型TRAF6基因和TRAF6 shRNA表达质粒的构建及鉴定 被引量：1

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作者 邱文 单锴 +2 位作者 庞蓉蓉 季明德 王迎伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1407-1411,1435,共6页

目的:构建大鼠野生型肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因及其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达和沉默TRAF6基因的情况... 目的:构建大鼠野生型肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因及其特异性短发卡状小干涉RNA(shRNA)真核表达质粒,并观察其在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中过表达和沉默TRAF6基因的情况。方法:用DNA重组技术将针对大鼠TRAF6基因的CDS区序列(加HA标签)和针对其不同位点所设计的3种shRNA序列分别克隆到pcDNA3.1及pGenesil-1/GFP真核表达质粒中。在酶切鉴定及序列测定正确后,用NeonTM电转仪,将上述质粒分别转染入培养的大鼠GMC中,然后用Western blot检查HA-TRAF6融合蛋白的表达情况,同时筛选最有效的TRAF6shRNA。结果:限制性酶切及核酸序列分析确证,上述TRAF6基因过表达和shRNA表达质粒均构建成功。Western blot显示,构建的pcDNA3.1-HA-TRAF6质粒能在大鼠GMC中表达,且TRAF6 shRNA-1具有最佳的沉默效率。结论:本实验成功构建了大鼠野生型TRAF6真核表达质粒及其特异性的shRNA表达载体,这为今后进一步研究TRAF6基因的生物学功能提供了实验基础。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子6 小发夹RNA 肾小球系膜细胞

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单宁酸通过抑制TRAF6向细胞质膜的招募抑制Akt信号通路 被引量：1

9

作者 阮海华 胡双艳 +2 位作者 张春晨 曹婳 张真 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第7期188-194,共7页

目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,也称Akt)信号通路在大多数人类实体肿瘤中过度激活、表达失调,促进肿瘤细胞增殖。植物单宁属于植物多酚类物质,能够抑制肿瘤细胞的增殖... 目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,也称Akt)信号通路在大多数人类实体肿瘤中过度激活、表达失调,促进肿瘤细胞增殖。植物单宁属于植物多酚类物质,能够抑制肿瘤细胞的增殖。然而,单宁酸通过何种机制调控肿瘤细胞中过度激活的Akt信号通路仍不清楚。方法:本实验选用人胶质瘤U87细胞作为模型,研究单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞EGFR/Akt信号通路的分子机制。结果:单宁酸抑制人胶质瘤U87细胞Akt的磷酸化以及受Akt信号通路调控的相关蛋白4EBP-1和核糖体S6蛋白的磷酸化。进一步研究发现,单宁酸抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis receptor-associated factor6,TRAF6)向细胞质膜的招募,导致与TRAF6相互作用的Akt蛋白减少,进而抑制人胶质瘤细胞中Akt的磷酸化激活。利用EGFR组成型激活突变体EGFR v III研究单宁酸对TRAF6向细胞质膜招募的影响发现:一方面单宁酸对EGFR的抑制作用需要EGFR胞外区第2~7外显子区域的存在;另一方面单宁酸对EGFR磷酸化的抑制是导致TRAF6向细胞质膜招募减少的原因。结论:EGFR是单宁酸发挥其抗肿瘤作用的受体蛋白,单宁酸通过抑制EGFR的磷酸化改变TRAF6向细胞质膜的招募进而介导了单宁酸对肿瘤细胞中Akt磷酸化的抑制,从而控制蛋白质的翻译,为食品来源单宁酸的抗肿瘤研究提供理论依据。 展开更多

关键词 单宁酸 肿瘤坏死因子受体相关因子6(traf6) 蛋白激酶B(Akt) 招募 表皮生长因子受体(EGFR)

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TRAF6沉默对LPS刺激牙周膜成纤维细胞成骨分化的影响

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作者 陈庆勇 李霞 +1 位作者 张芳 王锦华 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2017年第11期1181-1184,共4页

目的:使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,TRAF6)的基因,观察沉默TRAF6基因对... 目的:使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,TRAF6)的基因,观察沉默TRAF6基因对LPS刺激的hPDLC成骨分化的影响。方法:实验分为空白对照组、转染试剂组、TRAF6siRNA组、control siRNA组,采用脂质体法将TRAF6siRNA、control siRNA分别瞬时转染入对应组中,设转染试剂组加入等量的转染试剂,空白对照组不做处理,再使用10 mg/L LPS刺激细胞,RT-PCR、Western blot检测转染后TRAF6的基因及蛋白表达水平,使用LPS+成骨诱导液培养细胞,碱性磷酸酶检测试剂盒检测碱性磷酸酶的活性,RT-PCR检测Runx-2和I型胶原蛋白(Col-I)基因表达情况。结果:TRAF6siRNA组的TRAF6mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.001);成骨诱导3d后,LPS刺激下各组ALP的表达量要显著低于对照组(P<0.05),TRAF6siRNA组的ALP表达量要高于空白对照、转染试剂组和control siRNA组(P<0.05),TRAF6siRNA的Runx-2和Col-I的mRNA表达均明显高于其余3组(P<0.05)。结论:沉默TRAF6基因能减轻LPS对hPDLC成骨分化的抑制作用,即沉默TRAF6基因能促进LPS刺激下的hPDLC成骨分化,推测TRAF6可能影响牙周炎的发生发展进程,是牙周炎潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子6 RNA干扰 成骨分化 脂多糖

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构建高效载体OPEI沉默TRAF6促进骨关节炎软骨再生的研究

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作者 刘宏强 陆艳青 +3 位作者 高宇轩 王一云 王传东 张晓玲 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期846-857,共12页

目的·构建低毒性的关节滑膜高效率siRNA转染载体OPEI,抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6 (tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6),观察其对骨关节炎(osteoarthritis,OA)模型骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenc... 目的·构建低毒性的关节滑膜高效率siRNA转染载体OPEI,抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6 (tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6),观察其对骨关节炎(osteoarthritis,OA)模型骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成软骨能力的影响。方法·通过内侧半月板切除术建立SD大鼠OA模型(OA组,n=20);另设假手术组(n=10),半月板保持完好。造模后3个月后采集手术部位软骨和滑膜,免疫组织化学法检测TRAF6的表达,Western blotting方法检测白介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)诱导的大鼠原代滑膜细胞中MMP13、TRAF6、p-p65的表达。在无水厌氧环境中合成小分子聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)衍生物OPEI,琼脂糖凝胶电泳检测OPEI包裹siRNA的能力,动态光散射测量形成的OPEI/siRNA复合物的粒径和Zeta电位,MTT法检测形成的复合物对大鼠原代滑膜细胞的细胞毒性,流式细胞术分析复合物对滑膜细胞凋亡的影响,并利用激光共聚焦技术及荧光显微镜观测体内外OPEI在滑膜细胞中转染siRNA的效率,阿尔新蓝染色检测软骨细胞基质蛋白聚糖含量。结果·与假手术组相比,TRAF6在大鼠OA模型的滑膜及软骨中的表达显著升高;抑制TRAF6表达可显著降低IL-1β刺激的原代滑膜细胞中MMP13和p-p65的表达。构建的OPEI载体在大鼠原代滑膜细胞中的siRNA转染效率高达99.33%,在大鼠膝关节腔内注射OPEI/Cy3-siRNA后第3日、第7日均显示大量滑膜细胞摄取siRNA。OPEI/siTRAF6复合物转染大鼠原代滑膜细胞2 d,Western blotting结果显示OPEI/siTRAF6组在质量比值为3∶1、4∶1和5∶1时,TRAF6基因敲除效率分别为49.05%、74.61%和83.18%。OPEI/siTRAF6沉默TRAF6基因后,与对照组(OPEI/siNC)相比,IL-1β刺激条件下软骨细胞阿尔新蓝染色显著增强。结论·OPEI是低毒性高效率siRNA转染载体,在滑膜细胞中沉默TRAF6可促进骨关节炎软骨再生。 展开更多

关键词 OPEI SIRNA 滑膜细胞 肿瘤坏死因子受体相关因子6 骨髓间充质干细胞 软骨再生 骨关节炎

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MT01对实验性牙移动大鼠牙周组织中TLR9、TRAF6和IL-6表达水平的影响 被引量：3

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作者 杨竹君 侯旭 +3 位作者 于文雯 闫阔 申玉芹 孙新华 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期752-756,F0003,共6页

目的:探讨Toll样受体9(TLR9)及其下游炎症因子白细胞介素6(IL-6)在实验性大鼠牙移动过程中牙周组织中表达水平的变化,以及MT01对牙周组织TLR9、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和IL-6表达水平的影响,阐明其相关机制。方法:30只雄性Wis... 目的:探讨Toll样受体9(TLR9)及其下游炎症因子白细胞介素6(IL-6)在实验性大鼠牙移动过程中牙周组织中表达水平的变化,以及MT01对牙周组织TLR9、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和IL-6表达水平的影响,阐明其相关机制。方法:30只雄性Wistar大鼠分为无MT01干预组(n=24)和MT01干预组(n=6)。其中,无MT01干预大鼠右侧加力为实验组,左侧不加力为对照组;MT01干预大鼠左侧上颌第一磨牙颊侧黏膜注射MT01+加力为实验组,右侧上颌第一磨牙颊侧黏膜注射PBS+加力作为对照组。0.49N力近中移动大鼠上颌第一磨牙,无MT01干预大鼠于加力后第3、7、14和21天处死,MT01干预组于加力后第7天处死。分别获取各组大鼠上颌第一磨牙近远中侧牙槽骨,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测张力侧和压力侧牙周组织中TLR9、TRAF6和IL-6mRNA的表达水平。结果:无MT01干预大鼠中,实验组张力侧和压力侧牙周组织中IL-6和TLR9表达水平均明显高于对照组(P<0.05),且加力7d后两者表达水平达高峰;MT01干预大鼠中,加力7d后实验组张力侧及压力侧牙周组织中TLR9表达水平较对照组降低(P<0.01),实验组压力侧牙周组织中TRAF6表达水平较对照组降低(P<0.01)。结论:MT01能够抑制实验性牙移动大鼠牙周组织中TLR9及下游相关因子TRAF6的表达,进而产生抑制牙移动过程中牙周组织炎症反应的作用。 展开更多

关键词 特定序列寡核苷酸MT01 牙移动 TOLL样受体9 肿瘤坏死因子受体相关因子6 白细胞介素6 聚 合酶链式反应

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IL-17A中和抗体通过IL-17RA/Traf6/NF-κB信号通路缓解鼻窦炎伴鼻息肉组织重塑 被引量：5

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作者 王重阳 于洋 +5 位作者 金海南 宋艺兰 刘思奇 张雅琳 延光海 金永德 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1416-1421,共6页

目的通过探究IL^(-1)7A中和抗体缓解慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)组织重塑的作用机制,为临床治疗CRSwNP组织重塑寻找新靶点。方法BALB/c小鼠32只,随机分为Control组,C+IL^(-1)7A中和抗体组,HDM模型组,HDM+IL^(-1)7A中和抗体组。ELISA和... 目的通过探究IL^(-1)7A中和抗体缓解慢性鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)组织重塑的作用机制,为临床治疗CRSwNP组织重塑寻找新靶点。方法BALB/c小鼠32只,随机分为Control组,C+IL^(-1)7A中和抗体组,HDM模型组,HDM+IL^(-1)7A中和抗体组。ELISA和免疫组化检测小鼠炎症因子的表达。HE着色法察看小鼠鼻息肉及下鼻甲粘膜的病变,Western blot检测小鼠和HNEpCs中MMP-9、VEGF、Act1、Traf6、NF-κB信号通路蛋白。结果CRSwNP小鼠中IL-4、IL^(-1)7A表达水平增加,MMP-9、VEGF、Act1、Traf6、NF-κB信号通路蛋白表达上调,其鼻组织炎症浸润明显,而予以IL^(-1)7A中和抗体后以上蛋白表达水平下降,炎症浸润缓解。IL^(-1)7A刺激HNEpCs后Act1、Traf6、NF-κB信号蛋白表达增加,而予以anti-IL^(-1)7RA和Traf6 inhibitor预处理可降低以上蛋白的表达水平。结论IL^(-1)7A可能在CRSwNP的组织重塑中发挥至关重要的作用。阻滞IL^(-1)7RA/Traf6/NF-κB信号通路可以缓解鼻窦炎伴鼻息肉组织重塑。 展开更多

关键词 慢性鼻窦炎 鼻息肉 白介素-17A 肿瘤坏死因子受体相关因子6 核因子ΚB 组织重塑

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三氧化二砷、VEGF对人骨肉瘤Saos-2细胞TRAF-2和STAT-6表达的影响 被引量：2

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作者 钟永翔 林晓 +1 位作者 王恩智 王鑫华 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第9期993-997,共5页

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF-2)和信号转导子与转录激活子6(STAT-6)在骨肉瘤发病机制中的作用,及三氧化二砷(As2O3)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对其表达的影响。方法:人骨肉瘤Saos-2细胞经分别加入As2O3和VEGF培养48 h后... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF-2)和信号转导子与转录激活子6(STAT-6)在骨肉瘤发病机制中的作用,及三氧化二砷(As2O3)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)对其表达的影响。方法:人骨肉瘤Saos-2细胞经分别加入As2O3和VEGF培养48 h后,采用实时荧光定量PCR法和流式细胞术测定TRAF2和STAT-6的表达。结果:100 ng/m L浓度的VEGF能显著上调TRAF-2及STAT-6的表达(P<0.05,P<0.01);2μmol/L以上的As2O3能显著下调TRAF-2及STAT-6的表达(P<0.05,P<0.01),它还能显著降低VEGF诱导作用(P<0.05,P<0.01)。结论:TRAF-2和STAT-6在骨肉瘤的发病机制中可能起了重要作用,VEGF具有促进疾病的进展作用,而As2O3则反之,两者具有一定的量-效关系。 展开更多

关键词 骨肉瘤 三氧化二砷 肿瘤坏死因子受体相关因子2 信号转导子与转录激活子6 血管内皮细胞生长因子

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IRAK1、TRAF6表达量与口腔扁平苔藓病灶内炎症反应、免疫应答的相关性研究 被引量：5

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作者 徐建英 《海南医学院学报》 CAS 2017年第15期2165-2168,共4页

目的:研究IRAK1、TRAF6表达量与口腔扁平苔藓病灶内炎症反应、免疫应答的相关性。方法:选择在本院诊断为口腔扁平苔藓的患者作为研究的OLP组,收集口腔扁平苔藓病灶组织;另取同期因口腔外伤或颌面部整形接受手术的42例患者作为研究的对照... 目的:研究IRAK1、TRAF6表达量与口腔扁平苔藓病灶内炎症反应、免疫应答的相关性。方法:选择在本院诊断为口腔扁平苔藓的患者作为研究的OLP组,收集口腔扁平苔藓病灶组织;另取同期因口腔外伤或颌面部整形接受手术的42例患者作为研究的对照组,收集正常口腔黏膜组织。检测组织样本中IRAK1、TRAF6、TLR4信号通路分子、Th1/Th2/Treg/Th17转录因子及细胞因子的表达量。结果:OLP组患者口腔扁平苔藓病灶组织中IRAK1、TRAF6、TLR4、MyD88、NF-kB的mRNA表达量和蛋白表达量均显著低于对照组,T-bet、IFN-γ的含量均显著低于对照组,GATA3、FOXP3、RORγt、IL-4、IL-10、IL-17的含量均显著高于对照组;口腔黏膜组织中IRAK1、TRAF6的表达量与TLR4、MyD88、NF-kB的表达量以及T-bet、IFN-γ的含量呈正相关,与GATA3、FOXP3、RORγt、IL-4、IL-10、IL-17的含量呈负相关。结论:口腔扁平苔藓病灶内IRAK1、TRAF6的表达量能够抑制TLR4炎症反应通路并造成Th1/Th2/Treg/Th17免疫应答紊乱。 展开更多

关键词 口腔扁平苔藓 IL-1受体相关激酶1 肿瘤坏死因子受体相关因子6 炎症反应 免疫应答

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山楂原花青素下调Traf6/NF-κB信号通路诱导肝癌细胞凋亡 被引量：3

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作者 宓伟 尹淑英 +2 位作者 高丽霞 李宁 石塔拉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第5期96-102,共7页

目的:探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)诱导肝癌细胞Huh-7增殖和促进其凋亡的机制。方法:体外常规培养Huh-7细胞株和过表达Traf6基因Huh-7细胞株,配制0、5、10、20、40、80μg/mL不同质量浓度的HPC,采用细胞计数8(cell coun... 目的:探讨山楂原花青素(hawthorn procyanidins,HPC)诱导肝癌细胞Huh-7增殖和促进其凋亡的机制。方法:体外常规培养Huh-7细胞株和过表达Traf6基因Huh-7细胞株,配制0、5、10、20、40、80μg/mL不同质量浓度的HPC,采用细胞计数8(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒检测HPC对Huh-7细胞和过表达Traf6基因Huh-7细胞增殖的抑制作用,并选40μg/mL作为HPC实验质量浓度;利用实时定量聚合酶链反应检测Huh-7细胞中Traf6、NF-κB?p65、Bax和Caspase-3的mRNA表达水平;利用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Huh-7细胞中Traf6、NF-κB p65、Bax和Caspase-3蛋白表达水平;利用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测HPC对Huh-7细胞凋亡的影响。结果:HPC质量浓度大于20μg/mL时可以明显抑制Huh-7细胞增殖,并随HPC质量浓度升高Huh-7细胞的相对存活率显著降低(P<0.05);Traf6蛋白过表达可以促进Huh-7细胞的增殖。与空白对照组比较,40μg/mL的HPC可以显著抑制肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor associated factor 6,Traf 6)和核转录因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB) p65 mRNA和蛋白表达(P<0.05),显著增强Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达(P<0.05),显著促进Huh-7细胞的凋亡(P<0.05)。结论:HPC可以通过下调Traf6/NF-κB信号通路诱导肝癌细胞凋亡。 展开更多

关键词 山楂原花青素 肝细胞肝癌 肿瘤坏死因子受体相关因子6 核转录因子-κB 细胞凋亡

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TRAF-6、IRAK-1和NALP3炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用研究 被引量：12

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作者 谢敏 范晓利 +1 位作者 赵一璟 王昆 《海南医学院学报》 CAS 2020年第12期925-931,937,共8页

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、白介素1受体关联激酶-1(IRAK-1)、嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3(NALP3)等3种炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用。方法:选取本院收治的105例痛风性关节炎患者(急性发作期患者47例,缓... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、白介素1受体关联激酶-1(IRAK-1)、嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3(NALP3)等3种炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用。方法:选取本院收治的105例痛风性关节炎患者(急性发作期患者47例,缓解期患者58例,即A、B组)进行回顾性实验,同时选健康志愿者61例进行对照,即C组,3组纳入时间均为2017年5月~2018年5月,所有受试者TRAF-6、IRAK-1和NALP3检测均采用实时荧光定量发法(RT-PCR)完成,并比较这3种炎性因子与痛风性关节炎的相关性。结果:(1)A、B组治疗后的ESR、BUA及总补体均高于C组,其中A组上述3项指标均高于B组(P<0.05),而CRP均低于C组,且A组上述两项指标均低于B组(P<0.05)。(2)A、B组治疗前TRAF-6 mRNA相对表达量比较无明显差异(P<0.05),且低于C组(P<0.05);A、B组治疗后的上述指标均有所提升,但A组依旧低于B组(P<0.05),且A组提升幅度同样低于C组(P<0.05),而B组提升幅度较C组无明显差异(P<0.05)。(3)A、B组治疗前的IRAK-1mRNA相对表达量相比无显著差异(P>0.05),但均低于C组(P<0.05),A、B组治疗后的IRAK-1mRNA相对表达量均有所提升,A组明显低于C组(P<0.05),B组较C组则无明显差异(P>0.05)。(4)A、B组治疗前的NALP-3 mRNA相对表达量相比无明显差异(P>0.05),且高于C组(P<0.05);A组治疗后的NALP-3 mRNA相对表达量下降均不明显(P<0.05),而B组治疗后则明显下降,与A、C组相比均有显著差异(P<0.05)。(5)TRAF-6与ESR、CRP及总补体均无相关性(P>0.05);IRAK-1与CRP、BUA及总补体呈负相关(P<0.05);NALP-3与ESR、CRP呈正相关(P<0.05)。结论:在痛风性关节炎患者的患病过程中,TRAF-6、IRAK-1及NALP-3均呈异常表达状态,是促进患者病情发生、发展和转归的重要参与者,应采取措施进行干预。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子-6 炎症因子失调 泛素连接酶 白介素1受体关联激酶-1 嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3 痛风性关节炎

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小檗碱对神经病理性疼痛大鼠疼痛行为及IRAK1/TRAF6信号通路介导的神经炎症的影响 被引量：8

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作者 王士珍 张晓蕾 +4 位作者 丁苏彭 顾玲玲 陈培 李广智 张萌 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1561-1568,共8页

目的:探讨小檗碱对神经病理性疼痛大鼠是否具有疼痛缓解作用,并分析白细胞介素1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)通路在其中的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、脊神经结扎组(模型组)、小檗碱(低、高剂... 目的:探讨小檗碱对神经病理性疼痛大鼠是否具有疼痛缓解作用,并分析白细胞介素1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)通路在其中的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、脊神经结扎组(模型组)、小檗碱(低、高剂量)组及阳性药物(阿魏酸钠)组,每组12只。对各组大鼠进行动物行为学评估,测定大鼠后足热缩足反射潜伏期(TWL)、机械缩足反射阈值(MWT);六胺银染色观察患侧脊髓背角病理变化;ELISA法检测各组大鼠背根神经节中炎症相关因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6的表达水平;RT-qPCR法和Western blot法分别检测脊髓IRAK1和TRAF6的mRNA及蛋白表达水平。结果:脊髓背角病理切片显示,模型组出现明显的神经元纤维增粗并缠绕成结,且有大量空泡变性,并且神经细胞的胞质出现含有嗜银颗粒的空泡;小檗碱和阳性药物治疗后脊髓背角损伤明显减少。与假手术组相比,模型组MWT和TWL显著降低,大鼠背根神经节中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均显著升高,脊髓中IRAK1和TRAF6 mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.05);与模型组相比,小檗碱(低、高剂量)组及阳性药物组MWT和TWL显著升高,大鼠背根神经节中TNF-α、IL-1β和IL-6含量均显著降低,脊髓中IRAK1和TRAF6 mRNA和蛋白表达量显著降低(P<0.05);与小檗碱高剂量组相比,小檗碱低剂量组MWT和TWL显著降低,大鼠背根神经节TNF-α、IL-1β和IL-6含量均显著升高,脊髓中IRAK1和TRAF6 mRNA和蛋白表达量显著升高(P<0.05)。阳性药物组各项指标与小檗碱高剂量组相比均无显著性差异(P>0.05)。结论:小檗碱可以抑制IRAK1/TRAF6通路介导的神经炎症反应,减轻神经病理性疼痛大鼠的疼痛反应。 展开更多

关键词 小檗碱 神经病理性疼痛 白细胞介素1受体相关激酶 肿瘤坏死因子受体相关因子6

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TGF-β1通过TRAF6活化Notch3信号通路促进卵巢癌细胞迁移和侵袭的研究 被引量：7

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作者 周韵娇 王婧姝 +2 位作者 梁凡 杨丽娜 杨恭 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期98-104,共7页

背景与目的:转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)与Notch3在卵巢肿瘤组织中的异常表达与扩增分别与肿瘤转移和患者的低生存率有关。尽管TGF-β1与Notch3信号通路的交互作用促进多种肿瘤细胞的侵袭和转移,但其具体... 背景与目的:转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)与Notch3在卵巢肿瘤组织中的异常表达与扩增分别与肿瘤转移和患者的低生存率有关。尽管TGF-β1与Notch3信号通路的交互作用促进多种肿瘤细胞的侵袭和转移,但其具体机制尚存在争议。该研究通过体外细胞学实验,探究TGF-β1与Notch3信号通路对卵巢癌细胞生物学行为的影响及其可能的相互作用机制。方法:以上皮性卵巢癌细胞Hey A8和Hey为细胞模型,用ELISA检测培养上清液中TGF-β1的表达;分别用500 ng/mL TGF-β1中和抗体(对照组)、10 ng/mL TGF-β1、50μmol/L DAPT、10 ng/mL TGF-β1和50μmol/L DAPT、50μmol/L TRAF6多肽抑制剂、10 ng/mL TGF-β1和50μmol/L TRAF6多肽抑制剂处理细胞,采用蛋白[质]印迹法(Western blot)检测各处理组TGF-β1和Notch3信号通路分子以及TRAF6蛋白表达水平的变化;采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)、划痕实验和Transwell小室测定各处理组细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果:Hey A8和Hey细胞培养上清液中TGF-β1浓度随时间延长而明显增加;与对照组相比,TGF-β1处理组Notch3-ICD、Hes1表达增加,Notch3抑制剂DAPT与TGF-β1共同处理组Notch3-ICD、Hes1表达水平无明显变化,TGF-β1明显促进细胞增殖、迁移和侵袭,Notch3抑制剂DAPT削弱了TGF-β1对卵巢癌细胞的促增殖、迁移和侵袭能力,说明TGF-β1通过激活Notch3信号通路促进卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭;进一步研究发现,TGF-β1激活Notch3信号通路的同时上调TRAF6表达,特异性抑制TRAF6能够抑制TGF-β1对Notch3信号通路的激活作用。结论:TGF-β1可能通过TRAF6活化Notch3信号通路,从而促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多

关键词 Notch3受体 转化生长因子Β1 肿瘤坏死因子受体相关因子6 卵巢癌 迁移和侵袭

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TRAF6基因沉默对肝癌细胞SMCC7721的影响及可能作用机制 被引量：4

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作者 葛创 钱益 +1 位作者 朱冬梅 朱斌 《海南医学院学报》 CAS 2022年第2期105-110,共6页

目的:探索肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因沉默对肝癌SMCC7721的影响及可能作用机制。方法:运用细胞转染技术构建细胞系,并经定量实时PCR验证。运用CCK8法、Transwell实验和... 目的:探索肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)基因沉默对肝癌SMCC7721的影响及可能作用机制。方法:运用细胞转染技术构建细胞系,并经定量实时PCR验证。运用CCK8法、Transwell实验和EdU实验观察细胞变化,使用Western blotting技术检测,探索其可能作用机制。结果:TRAF6 RNA在肝癌细胞中异常上调。选取SMCC7721作为TRAF6高表达细胞,CCK8实验和EdU实验结果表明,TRAF6表达降低显著抑制了SMCC7721细胞的增殖,而TRAF6基因敲除细胞中过表达TRAF6可使细胞增殖恢复和增强。Transwell实验检测证实siRNA处理的SMCC7721细胞侵袭性显著降低;经Lv-Rescue质粒处理后,细胞侵袭恢复并增强。Western blotting检测提示siRNA组细胞YB-1、Wnt、β-catenin、c-myc、cyclin D1蛋白水平明显下调;与此相反CYLD蛋白表达水平上升。结论:TRAF6作为肿瘤细胞的重要连接蛋白,可能通过修饰(泛素化)YB-1进而提高促癌因子c-myc、cyclin D1表达,提高细胞的增殖及侵袭能力,而该过程可能与Wnt/β-catenin通路密切正相关,与CYLD蛋白表达负相关。 展开更多

关键词 肝细胞癌 肿瘤坏死因子受体相关因子6 DNA结合蛋白B 去泛素化酶 CYLD

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