目的探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)Hep G2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制。方法将Hep G2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组。采用高浓度胰岛素(5×...目的探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)Hep G2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制。方法将Hep G2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组。采用高浓度胰岛素(5×10-6mol/L)持续作用24h诱导IR模型(IR-Hep G2细胞)生成。以人TCF7L2 m RNA编码序列为干扰靶点构建TCF7L2特异性小干扰RNA慢病毒载体(LV-TCF7L2-si RNA)转染空白组及IR组细胞,空载体病毒转染空载体组及IR+空载体组细胞。q RT-PCR法检测各组细胞TCF7L2及IDE m RNA的表达,Western blotting检测各组细胞TCF7L2、IDE、胰岛素刺激后蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的变化,流式细胞术检测各组2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)荧光葡萄糖摄取率。结果与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量及2-NBDG摄取率均明显降低(P<0.01),证明IR细胞模型建立成功。q RT-PCR及Western blotting结果显示,IR组TCF7L2及IDE m RNA种蛋白表达水平均明显低于空白组(P<0.05),TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较空白组、空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较IR组、IR+空载体组均明显下降(P<0.05)。生理剂量胰岛素刺激后,IR组、IR+TCF7L2干扰组p-AKT蛋白水平较空白组明显下降(P<0.01),各组总AKT水平差异无统计学意义。TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较空白组和空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较IR组、IR+空载体组明显下降(P<0.01)。结论 TCF7L2联合IDE致肝细胞IR,其机制可能与减少胰岛素信号通路关键酶p-AKT蛋白的表达有关。展开更多
目的:探讨新疆地区维吾尔族人群转录因子7类似物2(TCF7L2)基因多态性与2型糖尿病的关系。方法:采用病例-对照研究设计,以经确诊的939例2型糖尿病患者作为病例组,选取931例健康个体作为对照组。收集研究对象血液标本5 m L,提取基因组DNA...目的:探讨新疆地区维吾尔族人群转录因子7类似物2(TCF7L2)基因多态性与2型糖尿病的关系。方法:采用病例-对照研究设计,以经确诊的939例2型糖尿病患者作为病例组,选取931例健康个体作为对照组。收集研究对象血液标本5 m L,提取基因组DNA。应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析质谱技术(MALDI-TOF)进行多态性检测。结果:TCF7L2基因rs7901695位点基因型及等位基因频率分布在病例组、对照组中比较差异有统计学意义(P<0.05);rs7094463位点基因型及等位基因频率分布在两组中比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TCF7L2基因rs7901695多态性位点可能与新疆维吾尔族人群2型糖尿病具有相关性,而rs7094463多态性位点可能与新疆维吾尔族人群2型糖尿病无相关性。展开更多
文摘目的探讨沉默转录因子7类似物2(TCF7L2)对胰岛素抵抗(IR)Hep G2细胞胰岛素降解酶(IDE)表达的调控作用及可能机制。方法将Hep G2细胞分为空白组、TCF7L2干扰组、空载体组、IR组、IR+TCF7L2干扰组、IR+空载体组。采用高浓度胰岛素(5×10-6mol/L)持续作用24h诱导IR模型(IR-Hep G2细胞)生成。以人TCF7L2 m RNA编码序列为干扰靶点构建TCF7L2特异性小干扰RNA慢病毒载体(LV-TCF7L2-si RNA)转染空白组及IR组细胞,空载体病毒转染空载体组及IR+空载体组细胞。q RT-PCR法检测各组细胞TCF7L2及IDE m RNA的表达,Western blotting检测各组细胞TCF7L2、IDE、胰岛素刺激后蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达的变化,流式细胞术检测各组2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)荧光葡萄糖摄取率。结果与空白组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量及2-NBDG摄取率均明显降低(P<0.01),证明IR细胞模型建立成功。q RT-PCR及Western blotting结果显示,IR组TCF7L2及IDE m RNA种蛋白表达水平均明显低于空白组(P<0.05),TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较空白组、空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组TCF7L2、IDE m RNA和蛋白表达水平较IR组、IR+空载体组均明显下降(P<0.05)。生理剂量胰岛素刺激后,IR组、IR+TCF7L2干扰组p-AKT蛋白水平较空白组明显下降(P<0.01),各组总AKT水平差异无统计学意义。TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较空白组和空载体组明显下降,IR+TCF7L2干扰组2-NBDG荧光葡萄糖摄取率较IR组、IR+空载体组明显下降(P<0.01)。结论 TCF7L2联合IDE致肝细胞IR,其机制可能与减少胰岛素信号通路关键酶p-AKT蛋白的表达有关。
文摘目的:探讨新疆地区维吾尔族人群转录因子7类似物2(TCF7L2)基因多态性与2型糖尿病的关系。方法:采用病例-对照研究设计,以经确诊的939例2型糖尿病患者作为病例组,选取931例健康个体作为对照组。收集研究对象血液标本5 m L,提取基因组DNA。应用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析质谱技术(MALDI-TOF)进行多态性检测。结果:TCF7L2基因rs7901695位点基因型及等位基因频率分布在病例组、对照组中比较差异有统计学意义(P<0.05);rs7094463位点基因型及等位基因频率分布在两组中比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TCF7L2基因rs7901695多态性位点可能与新疆维吾尔族人群2型糖尿病具有相关性,而rs7094463多态性位点可能与新疆维吾尔族人群2型糖尿病无相关性。
