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生物炭载Bacillus subtilis菌粒对连作芹菜生长的影响 被引量:1
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作者 顾金鑫 孟雪 +3 位作者 傅伟桥 刘晋雅 郭艾英 吉志新 《中国果菜》 2024年第10期52-56,共5页
为解决土壤连作障碍对蔬菜生长发育的不利影响,本研究以连作3年的芹菜土壤为研究对象,采用随机区组试验,设置5种处理:单独施加生物炭(BC)、单独施加Bacillus subtilis菌剂(BS)、生物炭与菌剂混合施加(BB)、施加生物炭载B.subtilis菌粒(... 为解决土壤连作障碍对蔬菜生长发育的不利影响,本研究以连作3年的芹菜土壤为研究对象,采用随机区组试验,设置5种处理:单独施加生物炭(BC)、单独施加Bacillus subtilis菌剂(BS)、生物炭与菌剂混合施加(BB)、施加生物炭载B.subtilis菌粒(BP)、不施加生物炭与菌剂(CK),盆栽种植芹菜,测定其生长与品质指标,探究生物炭和B.subtilis对连作芹菜生长的影响。结果表明,BB、BP处理组芹菜的生长和品质指标都高于其他土壤处理组,BP处理组的芹菜鲜质量、可溶性蛋白含量以及纤维素含量均显著高于BB处理组,分别为60.25 g/棵、27.25 mg/g、2.48%,其他指标两处理间无显著差异。不同土壤处理组芹菜的生长和品质指标都高于CK处理,其中BP处理组各指标值最高,尤其是芹菜鲜质量,增幅高达226.56%。因此,施加生物炭载B.subtilis菌粒提高了连作芹菜生长指标与品质,为农业生产上缓解蔬菜连作障碍奠定了理论基础。 展开更多
关键词 生物炭载Bacillus subtilis菌粒 连作障碍 芹菜 生长指标 品质
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Bacillus subtilis B2产1-脱氧野尻霉素(DNJ)发酵条件优化 被引量:7
2
作者 朱运平 李秀婷 李里特 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第17期290-293,共4页
为探索制备含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ的菌株Bacillus subtilisB2为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ的发酵液。结果表明:接... 为探索制备含有1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojimycin,DNJ)的降血糖功能性食品的新方法,以产DNJ的菌株Bacillus subtilisB2为初始菌株,以价廉的农产品加工副产物豆渣为原料,通过对发酵条件的优化,获得富含功能因子DNJ的发酵液。结果表明:接种量对α-葡萄糖苷酶抑制活性影响不明显,当接种量大于104个/mL时,发酵液的α-葡萄糖苷酶抑制活性均在20以上。而豆渣浓度、发酵温度、培养基初始pH值及发酵时间对发酵液α-葡萄糖苷酶抑制活性影响较大,在豆渣质量浓度30mg/mL,初始pH值6~8,发酵温度40℃的条件下发酵48h,发酵液表现出较高的α-葡萄糖苷酶抑制活性。以Bacillus subtilisB2发酵豆渣的发酵液为原料开发含DNJ的降糖功能食品,可以大大提高豆渣的利用价值,为降糖功能食品的开发利用开辟新途径。 展开更多
关键词 1-脱氧野尻霉素 BACILLUS subtilis B2 豆渣 降血糖 功能性食品
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B.Subtilis Y-6产抗菌肽对桃软腐菌的抑制机理研究 被引量:7
3
作者 袁勇军 汪吴 戚向阳 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1047-1051,共5页
对枯草芽孢杆菌Y-6抗菌肽抑制桃软腐菌的机理进行初步研究。利用PDA平板法研究了该抗菌肽对桃软腐菌的抑制活性,探讨了其对琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性的影响,通过扫描和透射电镜考察了抗菌肽对桃软腐菌孢子萌发的影响,... 对枯草芽孢杆菌Y-6抗菌肽抑制桃软腐菌的机理进行初步研究。利用PDA平板法研究了该抗菌肽对桃软腐菌的抑制活性,探讨了其对琥珀酸脱氢酶(SDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性的影响,通过扫描和透射电镜考察了抗菌肽对桃软腐菌孢子萌发的影响,评价了抗菌肽对桃软腐菌利用糖和蛋白质的影响。结果表明,该抗菌肽能有效抑制桃软腐菌的生长繁殖及孢子萌发,其最低抑菌浓度为175ug·mL-1;该抗菌肽对桃软腐菌孢子壁具有溶解作用,并且可以抑制桃软腐菌SDH和MDH酶活性。此外,当抗菌肽作用于不同生长阶段的桃软腐菌后导致其对营养物质的吸收受阻或停止。B.subtilis Y-6抗菌肽对桃软腐菌孢子壁的破环、抑制桃软腐菌呼吸代谢及利用营养物质的酶的生物合成是其主要的抑制机理。 展开更多
关键词 BACILLUS subtilis 抗菌肽 桃软腐菌 抑制机理
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偏高温大曲发酵过程中B.licheniformis和B.subtilis动态变化和生产特性 被引量:2
4
作者 周瑞平 王涛 +5 位作者 陈云宗 江东材 唐代云 刘超 朱和琴 周荣清 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第19期237-240,共4页
对偏高温大曲发酵过程中Bacillus licheniformis和Bacillus subtilis主要酶活及对部分理化因子耐受性进行分析。31株供试菌中,能够在65℃、体积分数7%乙醇和3.8mmol/mL酸度条件下生长的菌株分别为77.4%、83.9%、71.0%;能够产淀粉酶、脂... 对偏高温大曲发酵过程中Bacillus licheniformis和Bacillus subtilis主要酶活及对部分理化因子耐受性进行分析。31株供试菌中,能够在65℃、体积分数7%乙醇和3.8mmol/mL酸度条件下生长的菌株分别为77.4%、83.9%、71.0%;能够产淀粉酶、脂肪酶、蛋白质酶的菌株分别占87.1%、96.8%、90.3%,其中高产菌株分别占48.4%、35.5%、38.7%;所有菌株在生理生化特征、耐受性和产酶能力上均不完全相同,表明该2个种的菌株在偏高大曲发酵过程中呈现种间多态性和生长代谢的复杂性。 展开更多
关键词 偏高温大曲 BACILLUS LICHENIFORMIS BACILLUS subtilis 生产特性
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Bacillus subtilis UN_(13)产α-淀粉酶酶学性质研究 被引量:3
5
作者 温拥军 游玟娟 +1 位作者 冯刚利 李拥军 《中国调味品》 CAS 北大核心 2009年第12期64-66,69,共4页
对Bacillus subtilis UN13所产生的α-淀粉酶酶学性质进行初步研究。结果表明:该酶是一种中温酸性α-淀粉酶;其最适温度为50℃,在40-60℃范围内稳定性较好;最适pH为5.5,在pH值为5.0~7.5范围内较稳定;Ca^2+和Mn^2+对该酶有... 对Bacillus subtilis UN13所产生的α-淀粉酶酶学性质进行初步研究。结果表明:该酶是一种中温酸性α-淀粉酶;其最适温度为50℃,在40-60℃范围内稳定性较好;最适pH为5.5,在pH值为5.0~7.5范围内较稳定;Ca^2+和Mn^2+对该酶有激活作用,Cu^2+,Zn^2+,K^+和EDTA则抑制该酶的活性;动力学研究表明该酶的Km值为1.7039mg/mL,Vmax值为3.1615mg/min·mL。 展开更多
关键词 BACILLUS subtilis UN13 Α-淀粉酶 酶学性质
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白酒细菌酒曲固态培养条件下B.subtilis S12产四甲基吡嗪的合成机制 被引量:21
6
作者 吴建峰 徐岩 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期8-15,共8页
四甲基吡嗪又名川芎嗪,是白酒中重要的风味成分,但其在白酒酿造过程的形成机制尚不明晰。为了探索白酒固态酿造体系中四甲基吡嗪的合成机制,作者从白酒细菌曲中分离得到一株产四甲基吡嗪菌株B.subtilis S12,并对细菌曲固态培养条件下四... 四甲基吡嗪又名川芎嗪,是白酒中重要的风味成分,但其在白酒酿造过程的形成机制尚不明晰。为了探索白酒固态酿造体系中四甲基吡嗪的合成机制,作者从白酒细菌曲中分离得到一株产四甲基吡嗪菌株B.subtilis S12,并对细菌曲固态培养条件下四甲基吡嗪的合成机制进行了探究。结果表明:固态条件下B.subtilis S12合成四甲基吡嗪分两步来进行:第一步,在全细胞催化下细菌利用底物合成四甲基吡嗪的前提物质3-羟基丁酮,同时氨基酸残基在氨基酸脱氢酶作用下生成氨;第二步,3-羟基丁酮和氨在热动力作用下生成四甲基吡嗪。 展开更多
关键词 B subtilis S12 固态发酵 四甲基吡嗪 合成机制
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高产淀粉酶菌株Bacillus subtilis XC2的产酶条件及酶学性质 被引量:3
7
作者 曹慧 张腾月 +5 位作者 杨佳萌 张会会 苏奎源 刘真 刘紫祎 张镯 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第17期60-64,共5页
试验研究从高产淀粉酶菌株Bacillus subtilis XC2的产酶条件及酶学性质。通过单因素试验和正交试验,初步探究淀粉酶酶学性质并优化菌株发酵产酶条件。结果表明,菌株XC2产淀粉酶的反应最适温度为50℃,最适反应pH值为6.0,在30~50℃和pH值4... 试验研究从高产淀粉酶菌株Bacillus subtilis XC2的产酶条件及酶学性质。通过单因素试验和正交试验,初步探究淀粉酶酶学性质并优化菌株发酵产酶条件。结果表明,菌株XC2产淀粉酶的反应最适温度为50℃,最适反应pH值为6.0,在30~50℃和pH值4.0~7.0时酶活稳定性较好,Fe^(2+)、Cu^(2+)和Zn^(2+)对酶活有促进作用,Na^(+)对酶活有抑制作用。菌株XC2产淀粉酶最佳条件为蔗糖添加量1.5%、牛肉膏添加量2.0%、K^(+)添加量0.6%、培养温度37℃、转速200 r/min、初始pH值7.0、发酵时间21 h。研究表明,对产酶条件优化后,Bacillus subtilis XC2产淀粉酶活力达984.5 U/mL。 展开更多
关键词 淀粉酶 Bacillus subtilis 酶学性质 产酶条件优化
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Bacillus subtilis AS35发酵麦糟产β-葡聚糖酶粗酶性质的研究
8
作者 李宝坤 韩晶 +4 位作者 李开雄 郑晓吉 张建 毛晓英 姬华 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第6期72-74,共3页
研究了Bacillus subtilis AS35发酵麦糟制备的β-葡聚糖酶的性质,研究表明,该酶在55℃-65℃时酶活力较高,最适反应温度为60℃;最适反应pH值为5.5,在pH值为4.0N7.0时有较高的稳定性,在4~C保存24h后,残余酶活超过85%;在1mmol/... 研究了Bacillus subtilis AS35发酵麦糟制备的β-葡聚糖酶的性质,研究表明,该酶在55℃-65℃时酶活力较高,最适反应温度为60℃;最适反应pH值为5.5,在pH值为4.0N7.0时有较高的稳定性,在4~C保存24h后,残余酶活超过85%;在1mmol/L的浓度条件下,Fe^2+、Co^2+.Ca^2+,尤其是Co^2+对酶活性有明显的激活作用;Pb^2+、Fe^3+、Al^3+对酶活性有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 BACILLUS subtilis AS35麦糟 Β-葡聚糖酶
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正交旋转组合设计优化豆豉纤溶酶Subtilisin FS33的培养条件
9
作者 王成涛 籍保平 +2 位作者 孙宝国 曹雁平 李涛 《中国调味品》 CAS 北大核心 2009年第6期50-53,共4页
从中国传统豆豉中分离筛选出一株高产纤溶酶菌株Bacillus subtilis DC33,并研究营养和环境因素条件对DC33产酶的影响。在单因素水平试验基础上,选择对DC33产纤溶酶影响较大的聚蛋白胨、半乳糖、硫酸镁、硫酸锂和吐温80五因素,通过正交... 从中国传统豆豉中分离筛选出一株高产纤溶酶菌株Bacillus subtilis DC33,并研究营养和环境因素条件对DC33产酶的影响。在单因素水平试验基础上,选择对DC33产纤溶酶影响较大的聚蛋白胨、半乳糖、硫酸镁、硫酸锂和吐温80五因素,通过正交旋转组合设计得到DC33产酶活力与营养因素水平的回归方程,极值分析得DC33优化发酵培养基(g/L):聚蛋白胨22,半乳糖1.56,硫酸镁0.5,硫酸锂0.01,K2HPO42.0,NaH2PO41.0,CaCO32.0,吐温80 0.33 mL。在此条件下,DC33产纤溶酶达到780 U/mL,较优化前提高86.7%。 展开更多
关键词 豆豉纤溶酶 BACILLUS subtilis DC33 正交旋转组合设计 发酵培养基优化
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搅拌转速对Bacillus subtilis分批发酵碱性果胶裂解酶的影响
10
作者 赵政 董云舟 +2 位作者 堵国成 陈坚 高卫东 《东华大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期124-127,共4页
在5L小型发酵罐上,考察了不同搅拌转速对细胞生长和碱性果胶裂解酶生产的影响。根据细胞生物量、酶活水平、比细胞生长速率和比产物合成速率的变化情况,提出了两阶段搅拌转速控制策略:0~5h搅拌转速500 r/min;5h后搅拌转速600r/min。PGL... 在5L小型发酵罐上,考察了不同搅拌转速对细胞生长和碱性果胶裂解酶生产的影响。根据细胞生物量、酶活水平、比细胞生长速率和比产物合成速率的变化情况,提出了两阶段搅拌转速控制策略:0~5h搅拌转速500 r/min;5h后搅拌转速600r/min。PGL和PMGL酶活分别提高5.3%和15.1%;PGL和PMGL最大平均比生成速率分别提高15.9%和23.1%。 展开更多
关键词 碱性果胶裂解酶 搅拌转速 Bacillus subtilis 聚半乳糖醛酸裂解酶 聚甲基半乳糖醛酸裂解酶
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Bacillus subtilis 168菌株产surfactin改造 被引量:8
11
作者 刘丽霞 高玲 +3 位作者 别小妹 陆兆新 张充 吕凤霞 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期97-102,共6页
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168菌株基因组中含有编码surfactin合成酶系的srfA操纵子,却不产抗菌肽surfactin。运用同源重组的方法将外源的有活性的sfp基因(编码4'-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶)整合入B.subtilis 168中,将其改造... 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168菌株基因组中含有编码surfactin合成酶系的srfA操纵子,却不产抗菌肽surfactin。运用同源重组的方法将外源的有活性的sfp基因(编码4'-磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶)整合入B.subtilis 168中,将其改造为产surfactin的菌株。通过分析多株枯草芽孢杆菌和解淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的sfp基因,从基因的上、下游找出较为保守的区域,设计引物,从枯草芽孢杆菌Nja-9中扩增sfp基因,将获得的sfp基因与P43启动子和终止子相连,构建了sfp基因表达框,并连接于枯草整合质粒pDG1730上,最终构建了枯草芽孢杆菌整合质粒pST-1730,利用pST-1730本身的淀粉酶E基因与B.subtilis 168菌株的基因组DNA进行同源重组整合,获得了产surfactin的重组菌株B.subtilis121。本研究为surfactin合成酶基因的改造和分析奠定了基础。 展开更多
关键词 同源重组 BACILLUS subtilis 168 SURFACTIN sfp基因 改造
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枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)降解萘的动力学研究 被引量:3
12
作者 方世纯 郝瑞霞 鲁志强 《高校地质学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期682-687,共6页
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HBS-4是从油田中分离出来的一株能高效降解有机物萘的菌株。当萘的初始浓度为100mg时,该菌株在pH为8.0,温度为40℃下具有较好的降解效果,作用69h能降解50%以上的萘。通过HBS-4菌株降解萘的动力学研究,在... 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HBS-4是从油田中分离出来的一株能高效降解有机物萘的菌株。当萘的初始浓度为100mg时,该菌株在pH为8.0,温度为40℃下具有较好的降解效果,作用69h能降解50%以上的萘。通过HBS-4菌株降解萘的动力学研究,在Williams结构模型的基础上建立了HBS-4作用萘的四组分动力学模型,并用此模型解释菌株HBS-4在降解萘的过程中,葡萄糖含量、菌液浓度、pH、Eh随时间的变化特征。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 降解 动力学 结构模型
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棉花黄萎病拮抗细菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的理化性质和抑菌机理 被引量:5
13
作者 王奕丁 姜婷婷 王全 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期560-569,共10页
【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机... 【目的】旨在研究棉花黄萎病拮抗细菌枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis ZL2-70抗菌蛋白的抑菌谱、理化性质以及抑菌机理,为棉花黄萎病生物农药的研制与开发奠定理论基础。【方法】采用抑菌圈法测定该抗菌蛋白的抑菌谱,以及温度、pH、无机离子、有机溶剂、蛋白酶对其稳定性的影响,并通过无菌小瓶等方法研究抗菌蛋白对大丽轮枝菌菌丝和孢子的抑制作用,测定了抗菌蛋白的纤维素酶和几丁质酶活力。【结果】棉花黄萎病拮抗细菌B.subtilis ZL2-70抗菌蛋白抑菌谱广,对19种植物病原菌表现出抑菌活性;该蛋白理化性质相对稳定,耐高温,在pH 5.0~10.0范围内抑菌活性较稳定,经EDTA处理后活性变化不大,对Fe3+敏感,对蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶不敏感;该抗菌蛋白对大丽轮枝菌的菌丝生长和孢子萌发有双重抑制作用,能使病原菌菌丝胞壁消融、原生质凝集渗漏、菌丝细胞泡囊化,并可抑制病菌孢子的萌发;抗菌蛋白具有纤维素酶和几丁质酶活性,且酶活力与抑菌活性有关。【结论】初步推断该抗菌蛋白通过多糖酶活力破坏大丽轮枝菌的细胞壁和抑制病原菌的孢子萌发而起到抑菌作用。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝菌 拮抗细菌 B.subtilis ZL2-70 抗菌蛋白 理化性质 抑菌机理
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一种碱性γ-谷氨酰转肽酶在Bacillus subtilis 168中的分泌表达与酶学性质分析 被引量:1
14
作者 Bernard Gitura Kimani 杨套伟 +3 位作者 饶志明 张显 徐美娟 和斐 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期149-155,共7页
将γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在Bacillus subtilis 168同源过量表达,发现该酶能够自动分泌到细胞外,且重组菌酶活比原始菌提高了3 568倍。通过SDS-PAGE分析发酵液上清液发现,该γ-谷氨酰转肽酶是由一个相对分子质量为42 000的大亚基和一个22 ... 将γ-谷氨酰转肽酶(GGT)在Bacillus subtilis 168同源过量表达,发现该酶能够自动分泌到细胞外,且重组菌酶活比原始菌提高了3 568倍。通过SDS-PAGE分析发酵液上清液发现,该γ-谷氨酰转肽酶是由一个相对分子质量为42 000的大亚基和一个22 000的小亚基组成。通过酶学性质分析发现,该γ-谷氨酰转肽酶是一个耐碱性的酶,最适反应pH为10;同时该酶具有良好的耐热性,最适反应温度达到50℃;另外,加入5.0 mmol/L的Mg^(2+)、Ca^(2+)、K^+、La^(3+)、Li^+和NH_4^+对GGT转肽活力具有明显的促进作用,其中添加的NH_4^+对GGT活力促进作用最为显著,GGT活力提高45%以上,而Cu^(2+)和Zn^(2+)则对其具有抑制作用。 展开更多
关键词 Γ-谷氨酰转肽酶 分泌表达 酶学特征 Bacillus subtilis 168
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Bacillus subtilis Z-27制剂饲喂断奶仔猪应用研究 被引量:3
15
作者 孔少元 姜军坡 +2 位作者 周曙光 朱宝成 王世英 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第11期2598-2602,共5页
为了研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Z-27制剂(以下简称Z-27菌剂)对断奶仔猪肠道中微生物菌群及消化酶活力、生长性能和腹泻率的影响,将供试仔猪分为试验组和对照组,试验组饲喂添加0.1%Z-27菌剂的T2饲料,对照组饲喂T2饲料;采集粪... 为了研究枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Z-27制剂(以下简称Z-27菌剂)对断奶仔猪肠道中微生物菌群及消化酶活力、生长性能和腹泻率的影响,将供试仔猪分为试验组和对照组,试验组饲喂添加0.1%Z-27菌剂的T2饲料,对照组饲喂T2饲料;采集粪便并使用鉴别培养基进行培养和菌落计数;测定仔猪粪便中蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶等消化酶活力;记录并计算各组仔猪的平均日增重、料重比及腹泻率。结果表明,与对照组相比,试验组仔猪粪便中大肠杆菌(E.coli)数量降低了37.6%,乳酸菌(Lactobacillus)、双歧杆菌(Bifidobacterium)、芽孢杆菌数量分别增加了45.7%、47.4%、40.1%;试验组粪便中蛋白酶、α-淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的平均酶活力分别增加了62.99%、34.56%、66.57%和133.10%;平均日增重增加了9.37%,料重比降低了4.94%,腹泻率下降83.22%。表明枯草芽孢杆菌Z-27制剂能够抑制大肠杆菌等肠道病原菌,促进乳酸菌等有益菌的生长,维护仔猪肠道微生态平衡,有效预防仔猪腹泻,同时产生多种外源消化酶,有利于提高饲料转化率,提高仔猪生长性能。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)Z-27制剂 断奶仔猪 肠道菌群 消化酶 腹泻
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耐盐性谷氨酰胺酶在Bacillus subtilis 168中的整合表达 被引量:1
16
作者 徐朝阳 张显 +2 位作者 徐美娟 杨套伟 饶志明 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期22-29,共8页
微生物质粒过表达外源基因,会由于质粒分离稳定性低、种子培养基中需添加抗生素等原因,限制其在工业生产中的应用。为了得到一株可用于工业生产谷氨酰胺酶的菌株,选择食品安全级Bacillus subtilis 168作为宿主,将来源于Micrococcus lute... 微生物质粒过表达外源基因,会由于质粒分离稳定性低、种子培养基中需添加抗生素等原因,限制其在工业生产中的应用。为了得到一株可用于工业生产谷氨酰胺酶的菌株,选择食品安全级Bacillus subtilis 168作为宿主,将来源于Micrococcus luteus K-3的编码耐高浓度盐的谷氨酰胺酶基因(Mglu)插入到其染色体上进行整合表达。选择了2个内源性蛋白酶基因作为整合表达位点,通过lox序列的重组消除抗性基因,得到无抗性基因的重组谷氨酰胺酶表达菌株。遗传稳定性研究表明,在不添加抗生素的条件下,通过连续传代重组菌株并测定发酵酶活,发现重组菌株连续传42代时,酶活基本不变。随后,采用5 L发酵罐对重组菌株进行分批补料发酵,最高酶活达到了41.5 U/mL。本研究对提高谷氨酰胺酶重组菌株遗传稳定性提供了借鉴。 展开更多
关键词 谷氨酰胺酶 Bacillus subtilis 168 整合表达 蛋白酶 遗传稳定性
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Bacillus subtilis LC-9产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质与催化特性研究 被引量:2
17
作者 刘娟娟 吴斌 何冰芳 《安徽农业科学》 CAS 2012年第27期13243-13246,共4页
[目的]系统研究Bacillus subtilis LC-9所产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质,探讨其在催化应用上的可行性。[方法]采用两步阴离子交换层析法对B.subtilis LC-9发酵液中的β-1,3-1,4-葡聚糖酶进行纯化,用SDS-PAGE检测其纯度,研究纯酶的酶... [目的]系统研究Bacillus subtilis LC-9所产β-1,3-1,4-葡聚糖酶的酶学性质,探讨其在催化应用上的可行性。[方法]采用两步阴离子交换层析法对B.subtilis LC-9发酵液中的β-1,3-1,4-葡聚糖酶进行纯化,用SDS-PAGE检测其纯度,研究纯酶的酶学性质及该酶对β-葡聚糖和地衣多糖的降解特性,并采用TLC法检测其水解液中糖的成分。[结果]从自行筛选的糖苷酶产生菌B.subtilis LC-9的发酵液中经两步纯化,得到电泳纯的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,其比活力达3 502 U/mg,表观分子量为28 kDa;酶的最适反应pH和温度分别为6.5和45℃,且在45℃下稳定;该酶催化地衣多糖的Km值和Vmax分别为4.13 mg/ml和1 238μmol/min/mg,催化大麦β-葡聚糖的Km值和Vmax分别为3.84 mg/ml和1 427μmol/min/mg;该酶降解大麦β-葡聚糖产生寡聚糖,最终产物主要为三糖和四糖,而降解地衣多糖终产物主要为三糖。[结论]从Bacillus subtilis LC-9发酵液中纯化获得了电泳纯的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,性质研究表明该酶是专一性的β-1,3-1,4-葡聚糖酶,有望用于啤酒、饲料等领域。 展开更多
关键词 B.subtilis LC-9 Β-1 3-1 4-葡聚糖酶 纯化 酶学性质
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重组大肠杆菌产Bacillus subtilis 168来源γ-谷氨酰转肽酶的摇瓶发酵优化 被引量:1
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作者 陈星奕 宿玲恰 吴敬 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期799-805,共7页
为实现来源于Bacillus subtilis的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)高效胞外分泌表达,以基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-20b(+)/ggt为出发菌株,对其发酵产酶的诱导条件和培养基进行优化。最终确定其最优发酵培养基为:10 g/L甘油,21 g/L... 为实现来源于Bacillus subtilis的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)高效胞外分泌表达,以基因工程菌E.coli BL21(DE3)/p ET-20b(+)/ggt为出发菌株,对其发酵产酶的诱导条件和培养基进行优化。最终确定其最优发酵培养基为:10 g/L甘油,21 g/L酵母粉,7 g/L蛋白胨,130 mmol/L磷酸盐;发酵条件为:37℃、200 r/min培养4 h,加入0.2 mmol/L IPTG后转入25℃,诱导40~48 h,优化后酶活达到81.2 U/m L,是未优化前的1.9倍。本研究结果为目前国内报道大肠杆菌摇瓶发酵产γ-谷氨酰转肽酶的最高酶活,为该酶的工业化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) Γ-谷氨酰转肽酶 重组大肠杆菌 发酵优化
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Bacillus subtilis Z-5产果胶酶发酵条件的优化及其应用 被引量:2
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作者 张小丹 高梦迪 +2 位作者 赵赛赛 刘可玉 宁喜斌 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第19期117-127,共11页
为进一步提高果胶酶的产量,采用响应面法优化了Bacillus subtilis Z-5产果胶酶的发酵培养基和发酵条件,并将优化后得到的果胶酶应用于梨汁澄清实验。通过单因素实验探究9个因子对B.subtilis Z-5产果胶酶活力的影响,然后采用Plackett-Bur... 为进一步提高果胶酶的产量,采用响应面法优化了Bacillus subtilis Z-5产果胶酶的发酵培养基和发酵条件,并将优化后得到的果胶酶应用于梨汁澄清实验。通过单因素实验探究9个因子对B.subtilis Z-5产果胶酶活力的影响,然后采用Plackett-Burman试验设计筛选出3个显著影响产酶的因素:酵母粉含量、pH、培养时间;再结合响应面设计法确定了最佳的发酵条件。结果表明最佳的发酵培养基成分是果胶10 g/L,酵母粉7.99 g/L,MgSO_(4)·7H2O 0.5 g/L;最佳的发酵条件为初始pH5.66,发酵温度37℃,培养时间72 h,接种量为6%(v/v),装液量50/250 mL,底物浓度为10 g/L;在此基础上,B.subtilis Z-5产果胶酶酶活力由879.00 U/mL提高到1549.62 U/mL,是优化前的1.76倍。在梨汁澄清实验中表明果胶酶的最适添加量为4 mL,最适酶解时间为2.5 h,最适酶解温度为65℃,最适酶解pH为6.0,此时透光率最大为79.77%,与商品酶相比,自制果胶酶是一种具有多种酶系复合酶,可作用于梨汁中含有的蛋白、淀粉等其他成分,使得梨汁更加澄清。本研究结果为果胶酶的工业化生产和应用提供了理论支撑。 展开更多
关键词 果胶酶 Bacillus subtilis Z-5 发酵条件优化 果汁澄清
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Fermentation optimization to improve production of antagonistic metabolites by Bacillus subtilis strain BS501a 被引量:10
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作者 李瑞芳 徐怡 《Journal of Central South University》 SCIE EI CAS 2011年第4期1047-1053,共7页
To improve antagonistic metabolites production of Bacillus subtilis strain BS501a, physical parameters of fermentation and metal inorganic salts in medium, namely initial pH value, culture temperature, fermentation ti... To improve antagonistic metabolites production of Bacillus subtilis strain BS501a, physical parameters of fermentation and metal inorganic salts in medium, namely initial pH value, culture temperature, fermentation time, concentrations of CaC12, FeSO4, ZnSO4, MnSO4 and MgSO4, were optimized using one-factor-at-a-time and orthogonal tests. The results show that the optimal physical parameters of fermentation are an initial pH of 7.0, a culture temperature of 30 ~C, and a fermentation time of 48 h. The optimal concentrations of metal inorganic salts in basal medium are 10.2 mmol/L CaCl2, 0.4 mmol/L FeSO4, 3.5 mmol/L ZnSO4, 0.6 mmol/L MnSO4 and 2.0 mmol/L MgSO4. Among the metal inorganic salts, MgSO4 and MnSO4 play important roles in the improvement of the antagonistic metabolites production of B. subtilis strain BS501a; especially, MgSO4 contributes a highly significant effect. The average diameter of inhibition zone of the BS501a filtered fermentation supernatant (FFS) cultured in the optimal fermentation conditions against Magnaporthe grisea DWBJ329 reaches 71.4 mm, and there is 2.4-fold increase in antifungal activity as compared with 21.2 mm under the pre-optimized conditions. 展开更多
关键词 Bacillus subtilis antagonistic metabolites PRODUCTION optimization orthogonal array
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