目的:提取牙本质细胞外基质蛋白(Dentin extracellular matrix proteins,DEMPs)研究其对人脱落的乳牙牙髓干细胞(Stem cell from human exfoliated deciduous teeth,SHED)体外增殖分化能力的影响。方法:采用组织块联合酶消化法获得SHED...目的:提取牙本质细胞外基质蛋白(Dentin extracellular matrix proteins,DEMPs)研究其对人脱落的乳牙牙髓干细胞(Stem cell from human exfoliated deciduous teeth,SHED)体外增殖分化能力的影响。方法:采用组织块联合酶消化法获得SHED并进行体外培养。成骨诱导液诱导细胞,鉴定其多向分化能力;拔取健康牛牙,用4mol/L盐酸胍和0.5mol/L EDTA提取DEMPs,四唑盐比色法(MTT)检测不同浓度DEMPs对SHED增殖能力的影响,同时测定DEMPs对SHED碱性磷酸酶(ALP)活性的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测牙本质磷蛋白与牙本质基质蛋白1的mRNA表达情况。结果:DEMPs诱导细胞培养3d、5d可促进细胞增殖。细胞培养5、7d上调ALP活性,RT-PCR结果显示,DEMPs诱导后可促进DSPP与DMP-1基因的表达。结论:牙本质细胞外基质蛋白可以促进SHED的增殖与牙向分化能力。展开更多
目的:研究釉质基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对人脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated dediduous teeth,SHED)体外增殖分化能力的影响。方法:利用酶消化法联合组织块法获得脱落乳牙牙髓干细胞,并进行形态学...目的:研究釉质基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对人脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated dediduous teeth,SHED)体外增殖分化能力的影响。方法:利用酶消化法联合组织块法获得脱落乳牙牙髓干细胞,并进行形态学观察。三氯乙酸法制备EMPs,用不同浓度的EMPs对SHED进行诱导,利用四唑盐比色法(MTT)检测并分析诱导后的SHED增殖活性的变化,检测经诱导后的培养液中碱性磷酸酶(ALP)。RTPCR检测牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)及牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP-1)的mRNA表达。结果:人脱落乳牙牙髓干细胞呈集落生长,并且在体外具有一定的自我增殖能力。EMPs对乳牙牙髓干细胞的增殖无明显影响,而能够显著提高ALP的活性,并呈现一定的剂量依赖性。经EMPs诱导后,细胞相对高表达DSPP、DMP-1mRNA。结论:EMPs对于SHED向成牙本质样分化具有积极作用。展开更多
目的:观察乳牙牙髓干细胞(SHEDs)在3种羟基磷灰石(HA)复合支架材料上黏附、增殖、分化情况。方法:利用正常替换的乳牙分离培养SHEDs,免疫组织化学法鉴定细胞来源,体外诱导实验观察细胞分化能力。将SHEDs分别接种在羟基磷灰石/β-磷酸三...目的:观察乳牙牙髓干细胞(SHEDs)在3种羟基磷灰石(HA)复合支架材料上黏附、增殖、分化情况。方法:利用正常替换的乳牙分离培养SHEDs,免疫组织化学法鉴定细胞来源,体外诱导实验观察细胞分化能力。将SHEDs分别接种在羟基磷灰石/β-磷酸三钙(HA/TCP),羟基磷灰石/胶原(HA/COL)和羟基磷灰石/聚乙丙交酯(HA/PLGA)支架材料上复合培养,于4、6、8、10 h 4个时间点检测各细胞黏附率,MTT比色法检测SHEDs增殖情况;碱性磷酸酶(ALP)活性检测、能谱分析钙含量;Von Kossa染色和灰度扫描细胞矿化能力。结果:SHEDs在HA/COL上的黏附少于HA/PLGA和HA/TCP(P<0.05);HA/PLGA对SHEDs矿化诱导能力最强,其次是HA/TCP,HA/COL最弱。结论:SHEDs在HA/PLGA上的黏附率、增殖率及矿化能力优于HA/TCP和HA/COL。展开更多
文摘目的:研究釉质基质蛋白(enamel matrix proteins,EMPs)对人脱落乳牙牙髓干细胞(stem cells from human exfoliated dediduous teeth,SHED)体外增殖分化能力的影响。方法:利用酶消化法联合组织块法获得脱落乳牙牙髓干细胞,并进行形态学观察。三氯乙酸法制备EMPs,用不同浓度的EMPs对SHED进行诱导,利用四唑盐比色法(MTT)检测并分析诱导后的SHED增殖活性的变化,检测经诱导后的培养液中碱性磷酸酶(ALP)。RTPCR检测牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)及牙本质基质蛋白1(dentin matrix protein 1,DMP-1)的mRNA表达。结果:人脱落乳牙牙髓干细胞呈集落生长,并且在体外具有一定的自我增殖能力。EMPs对乳牙牙髓干细胞的增殖无明显影响,而能够显著提高ALP的活性,并呈现一定的剂量依赖性。经EMPs诱导后,细胞相对高表达DSPP、DMP-1mRNA。结论:EMPs对于SHED向成牙本质样分化具有积极作用。
文摘目的:观察乳牙牙髓干细胞(SHEDs)在3种羟基磷灰石(HA)复合支架材料上黏附、增殖、分化情况。方法:利用正常替换的乳牙分离培养SHEDs,免疫组织化学法鉴定细胞来源,体外诱导实验观察细胞分化能力。将SHEDs分别接种在羟基磷灰石/β-磷酸三钙(HA/TCP),羟基磷灰石/胶原(HA/COL)和羟基磷灰石/聚乙丙交酯(HA/PLGA)支架材料上复合培养,于4、6、8、10 h 4个时间点检测各细胞黏附率,MTT比色法检测SHEDs增殖情况;碱性磷酸酶(ALP)活性检测、能谱分析钙含量;Von Kossa染色和灰度扫描细胞矿化能力。结果:SHEDs在HA/COL上的黏附少于HA/PLGA和HA/TCP(P<0.05);HA/PLGA对SHEDs矿化诱导能力最强,其次是HA/TCP,HA/COL最弱。结论:SHEDs在HA/PLGA上的黏附率、增殖率及矿化能力优于HA/TCP和HA/COL。
