基因干扰Sirtuin3后对缺氧预处理的影响 被引量：1

1

作者 李超英 胡俊 +3 位作者 赵嘉 王莹 陶玉倩 李玲 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期1-7,共7页

【目的】探讨基因干扰Sirtuin3(SIRT3)后对缺氧预处理的影响。【方法】使用空白载体pGCSIL-GFP进行预实验,筛选适合的感染复数(MOI)。正式实验使用pGCSIL-PUR-SIRT3转染PC12细胞。成功构建空白载体(empty vector)及SIRT3-/-稳定细胞株后... 【目的】探讨基因干扰Sirtuin3(SIRT3)后对缺氧预处理的影响。【方法】使用空白载体pGCSIL-GFP进行预实验,筛选适合的感染复数(MOI)。正式实验使用pGCSIL-PUR-SIRT3转染PC12细胞。成功构建空白载体(empty vector)及SIRT3-/-稳定细胞株后,将两种细胞分别分为对照组(control);缺氧预处理+缺氧组(Hyp+OGD);单纯缺氧组(OGD);MTT测定细胞活性。ATP荧光检测试剂盒测定胞内的ATP水平。Western Blot法测定各组细胞内SIRT3、过氧化物酶体增生激活受体-γ的共刺激因子-1α(PGC-1α),锰超氧化物歧化酶(MnSOD)的蛋白表达水平。【结果】OGD后SIRT3-/-组(0.430±0.009)与Vector组(0.562±0.140)相比,细胞活性下降更明显(P<0.05),经预处理后SIRT3-/-组细胞活性增加,且与Vector组间差异无统计学意义(P=0.311>0.05)。OGD后SIRT3-/-组(0.334±0.006)与Vector组(0.453±0.015)相比,ATP下降更明显(P<0.05)。经预处理后SIRT3-/-组ATP水平增加,且与Vector组间差异无统计学意义(P=0.866>0.05)。SIRT3-/-3组细胞间PGC-1α及MnSOD蛋白的表达与Vector组对应的3组比较明显下降(P<0.05),Hyp+OGD及OGD相对于各自control组均上调(P<0.05),且预处理组的上调更明显(与OGD组比较,P<0.05)【结论】干扰SIRT3基因后PGC-1α及MnSOD的表达下降,SIRT3为预处理或缺氧处理上调PGC-1α及MnSOD的其中一条途径,干扰SIRT3后其他的途径仍然在预处理中发挥重要的细胞保护作用。 展开更多

关键词 缺氧预处理 sirtuin3 过氧化物酶体增生激活受体-γ的共刺激因子-1α 锰超氧化物歧化酶 SIRNA干扰

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Sirtuin3减少心肌细胞钙超载时细胞色素C的释放并抑制细胞凋亡 被引量：5

2

作者 叶璐 杨双强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1031-1035,共5页

目的研究Sirtuin 3在心肌细胞钙超载时对细胞色素C(Cyt C)释放和caspase-3激活的影响。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组,即对照组、Sirtuin 3组、离子霉素组(ionomycin组)和离子霉素联合Sirtuin 3组(ionomycin联合Sirtuin 3组)。采... 目的研究Sirtuin 3在心肌细胞钙超载时对细胞色素C(Cyt C)释放和caspase-3激活的影响。方法将培养的H9c2心肌细胞随机分为4组,即对照组、Sirtuin 3组、离子霉素组(ionomycin组)和离子霉素联合Sirtuin 3组(ionomycin联合Sirtuin 3组)。采用ionomycin诱导法构建心肌细胞钙超载模型,Western blot法检测心肌细胞线粒体及胞质细胞色素C(Cyt C)和caspase-3的水平,分光光度法检测caspase-3的活性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测H9c2心肌细胞的凋亡比率。结果成功构建钙超载模型。Western blot结果显示Cyt C在线粒体中的水平ionomycin组明显低于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组明显高于ionomycin组,Cyt C在胞质中的水平相反;Ionomycin组caspase-3的水平明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组caspase-3的水平明显低于ionomycin组。分光光度法结果显示caspase-3的活性ionomycin组明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组明显低于ionomycin组。双染色结合流式细胞术结果显示ionomycin组的凋亡比率明显高于对照组,ionomycin联合Sirtuin 3组的凋亡比率明显低于ionomycin组。结论心肌细胞钙超载时,Sirtuin 3通过减少Cyt C释放和caspase-3的激活,抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 sirtuin 3 心肌保护 MPTP 钙超载

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去乙酰化酶3在脓毒症相关疾病中的功能和调控作用研究进展

3

作者 李俊杰 梅鸿 +4 位作者 刘鑫鑫 余琨 冯帮海 付豹 覃松 《中国医学科学院学报》 北大核心 2025年第4期601-610,共10页

脓毒症是由宿主对感染的反应失调而引起的危及生命的器官功能障碍,死亡率高。去乙酰化酶3(SIRT3)是线粒体内的一种去乙酰化酶,在细胞代谢、氧化应激和炎症反应中发挥重要调控作用。近年来,SIRT3在脓毒症相关疾病中的功能和调控作用研究... 脓毒症是由宿主对感染的反应失调而引起的危及生命的器官功能障碍,死亡率高。去乙酰化酶3(SIRT3)是线粒体内的一种去乙酰化酶,在细胞代谢、氧化应激和炎症反应中发挥重要调控作用。近年来,SIRT3在脓毒症相关疾病中的功能和调控作用研究取得了显著进展。研究表明SIRT3通过调控线粒体功能、减少氧化应激和抑制炎症反应,能够减轻脓毒症引起的器官损伤。具体机制包括SIRT3对线粒体生物能量学的调节、对抗氧化酶系统的激活以及对炎症介质表达的抑制。此外,SIRT3还通过与多种信号通路的交互作用,在脓毒症的病理过程中发挥重要保护作用。本文主要综述SIRT3在各脓毒症相关疾病中的功能和调控机制,有望为脓毒症的预防和治疗提供新的靶点和策略。 展开更多

关键词 去乙酰化酶3 脓毒症 多器官功能障碍

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非小细胞肺癌组织中MnSOD、SIRT3的表达及意义 被引量：9

4

作者 孙军 王炯 +1 位作者 闫雪波 徐轲 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期860-864,共5页

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn SOD)、去乙酰化酶3(sirtuin 3,SIRT3)的表达,以及两者与NSCLC生物学特征的关系。方法采用免疫组化及Western blot... 目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn SOD)、去乙酰化酶3(sirtuin 3,SIRT3)的表达,以及两者与NSCLC生物学特征的关系。方法采用免疫组化及Western blot法检测89例NSCLC及对应癌旁(直径≥10 cm)肺组织中Mn SOD、SIRT3蛋白的表达,探讨与NSCLC组织类型、TNM分期、分化程度、淋巴结转移的相关性。结果免疫组化及Western blot结果显示:与癌旁肺组织相比,Mn SOD、SIRT3蛋白在NSCLC中的表达明显降低;免疫组化图像分析结果显示癌旁组织中Mn SOD、SIRT3蛋白含量平均光密度值(OD值)为(0.428±0.031)、(0.403±0.035),而NSCLC组织中Mn SOD、SIRT3蛋白OD值显著降低,且两者表达与NSCLC分化程度、肿瘤T分期呈正相关(P<0.05,P<0.01);而与病理类型及有无淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论 NSCLC组织中MnSOD、SIRT3蛋白表达降低,两者联合检查可能对预测肿瘤的恶性程度有一定的意义。 展开更多

关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 锰超氧化物歧化酶 去乙酰化酶3

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运动对骨骼肌线粒体去乙酰化酶3(SIRT3)的影响 被引量：6

5

作者 王海涛 刘玉倩 +1 位作者 赵焕彬 赵斌 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2011年第1期85-88,F0003,共5页

Sirtuins(SIRT)是NAD依赖的组蛋白去乙酰化酶,属于沉默信息调节因子家族,参与物质代谢及应激反应,与细胞寿命密切相关。Sirtuin 3(SIRT3)是哺乳动物线粒体中重要的去乙酰化酶,在骨骼肌中高表达,参与能量代谢并影响机体的衰老、细胞死亡... Sirtuins(SIRT)是NAD依赖的组蛋白去乙酰化酶,属于沉默信息调节因子家族,参与物质代谢及应激反应,与细胞寿命密切相关。Sirtuin 3(SIRT3)是哺乳动物线粒体中重要的去乙酰化酶,在骨骼肌中高表达,参与能量代谢并影响机体的衰老、细胞死亡和肿瘤发生。研究表明,适度运动会增加骨骼肌中的SIRT3含量并进一步影响脂肪代谢。目前,骨骼肌线粒体中SIRT3在运动中的变化引起学者的普遍关注。主要介绍了SIRT3的生理功能及运动对骨骼肌SIRT3的影响,深入研究运动中骨骼肌SIRT3的变化机制对运动抗衰老及运动防肥减肥具有重要的意义。 展开更多

关键词 去乙酰化酶3 运动 线粒体 骨骼肌

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Sirt3抑制血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠血管平滑肌细胞增殖 被引量：5

6

作者 吴新宁 卜培莉 +3 位作者 刘军妮 赵立祥 王希 李娜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期237-241,共5页

目的检测小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中Sirtuin3(Sirt3)的表达,探讨Sirt3在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导小鼠VSMCs增殖中的作用。方法用RT-PCR、Western blot法检测细胞中是否有Sirt3基因和蛋白表达;用不同浓度AngⅡ(10-7mol/L、10-6mol/L、1... 目的检测小鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)中Sirtuin3(Sirt3)的表达,探讨Sirt3在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导小鼠VSMCs增殖中的作用。方法用RT-PCR、Western blot法检测细胞中是否有Sirt3基因和蛋白表达;用不同浓度AngⅡ(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L)分别刺激细胞,用RT-PCR、Western blot法检测AngⅡ对Sirt3表达的影响;用Sirt3 siRNA转染干扰Sirt3mRNA水平后5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(Edu)试剂盒检测细胞增殖水平。结果 Western blot法、RT-PCR结果均显示正常C57小鼠VSMCs中有一定量Sirt3蛋白和mRNA表达;10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L AngⅡ刺激细胞后Sirt3 mR-NA水平及蛋白表达量均明显升高(P<0.01),其中10-6mol/L组比10-7mol/L组和10-5mol/L组升高更明显,差异有统计学意义(P<0.05);Sirt3敲减组细胞增殖较对照组明显增加(P<0.01),Sirt3沉默+AngⅡ(10-6mol/L)组较AngⅡ组细胞增殖明显增加(P<0.01)。结论小鼠VSMCs中有一定量的Sirt3表达,AngⅡ刺激可使Sirt3 mRNA水平和蛋白表达量明显升高;Sirt3可抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖。 展开更多

关键词 沉默信号调节因子3 血管紧张素Ⅱ 血管平滑肌细胞 增殖

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低氧条件下SIRT3调控ROS介导的氧化应激反应对肺癌细胞凋亡的影响 被引量：3

7

作者 黄波 丁洁 +3 位作者 郭红荣 王红娟 徐建群 郑泉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第12期2045-2050,2057,共7页

目的探讨低氧条件下去乙酰化酶3(SIRT3)通过活性氧(ROS)对肺癌细胞氧化应激反应和低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响及其机制。方法将人非小细胞肺癌A549细胞暴露于低氧条件下培养0、12、24、48 h;RT-PCR和Western blot检测细胞中HIF-... 目的探讨低氧条件下去乙酰化酶3(SIRT3)通过活性氧(ROS)对肺癌细胞氧化应激反应和低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达的影响及其机制。方法将人非小细胞肺癌A549细胞暴露于低氧条件下培养0、12、24、48 h;RT-PCR和Western blot检测细胞中HIF-1α和SIRT3 mRNA和蛋白的表达,确定最佳低氧诱导时间。将A549细胞分成5组:对照组、低氧组、低氧+ROS抑制剂N-乙酰半胱胺酸(NAC)组、低氧+SIRT3过表达(SIRT3-OE)组和低氧+SIRT3-OE+NAC组;MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡情况;RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中HIF-1α和SIRT3 mRNA和蛋白的表达;流式细胞术检测各组细胞中ROS含量;生化试剂盒检测各组细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的含量。结果最佳低氧诱导时间为24 h。与对照组相比,低氧组细胞凋亡率、细胞中SIRT3 mRNA和蛋白水平、SOD和GSH含量均降低(P<0.01),细胞增殖能力、细胞中HIF-1αmRNA和蛋白水平、ROS和MDA含量均升高(P<0.01);与低氧组相比,低氧+NAC组和低氧+SIRT3-OE组细胞凋亡率、细胞中SIRT3 mRNA和蛋白水平、SOD和GSH含量均升高(P<0.05),细胞增殖能力、细胞中HIF-1αmRNA和蛋白水平、ROS和MDA含量均降低(P<0.05);与低氧+NAC组相比,低氧+SIRT3-OE+NAC组细胞凋亡率、细胞中SIRT3 mRNA和蛋白水平、SOD和GSH含量均升高(P<0.01),细胞增殖能力、细胞中HIF-1αmRNA和蛋白水平、ROS和MDA含量均降低(P<0.01)。结论低氧条件下SIRT3能够通过介导ROS抑制肺癌细胞中的氧化应激反应和HIF-1α的表达来促进细胞凋亡,抑制肺癌进展。 展开更多

关键词 去乙酰化酶3 肺癌 氧化应激 活性氧 低氧诱导因子1Α

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8周中等强度低负荷量训练对老龄雌性大鼠骨骼肌Bax和Bcl-2蛋白及SIRT1/SIRT3信号轴基因表达的影响 被引量：1

8

作者 李方晖 肖琳 +1 位作者 覃飞 刘承宜 《体育学刊》 CAS CSSCI 北大核心 2014年第4期140-144,共5页

观察8周中等强度低负荷量训练对老龄雌性大鼠腓肠肌Bax和Bcl-2蛋白水平及去乙酰化酶1（SIRT1）/去乙酰化酶3（SIRT3）轴基因信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。16只18月龄雌性SD大鼠随机分为对照组和运动组（各8只）。运动组在跑台上以15... 观察8周中等强度低负荷量训练对老龄雌性大鼠腓肠肌Bax和Bcl-2蛋白水平及去乙酰化酶1（SIRT1）/去乙酰化酶3（SIRT3）轴基因信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。16只18月龄雌性SD大鼠随机分为对照组和运动组（各8只）。运动组在跑台上以15 km/h（60%~75%VO2max）进行有氧运动，15 min/d，5 d/周，持续运动8周；对照组自由生活。第8周末运动后24 h宰杀并测定腓肠肌指数、蛋白免疫印迹法测定腓肠肌 Bax 和 Bcl-2蛋白水平；逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）测定SIRT3、SIRT1、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）、半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子-1α（PGC-1α）、线粒体转录因子 A（TFAM）和核呼吸因子1（NRF1） mRNA水平。结果显示，运动组腓肠肌质量（P＜0.05）和腓肠肌指数均显著增加（P＜0.01）、Bax蛋白水平显著降低（P＜0.05），Bcl-2蛋白水平和Bcl-2/Bax值显著增加（P＜0.05）；运动组SIRT3、SIRT1、PGC-1α、NRF1、TFAM、MnSOD mRNA水平显著增加（P＜0.05），Caspase-3 mRNA水平显著降低（P＜0.05）。结果表明：中等强度低负荷训练可延缓老龄雌性大鼠肌细胞凋亡信号的改变；SIRT1/SIRT3轴介导的内稳态机制在中等强度低负荷训练提升老龄大鼠骨骼肌线粒体更新速率及抗氧化酶水平起重要作用。 展开更多

关键词 运动生物化学 运动训练 骨骼肌 第三类去乙酰化酶 内稳态 老龄大鼠

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和厚朴酚减轻高甘油三酯血症急性胰腺炎大鼠模型的氧化应激:基于激活SIRT3-MnSOD2通路 被引量：8

9

作者 蒙诺 杨慧莹 +4 位作者 陈金凤 覃颖颖 雷宇 黄振宁 唐国都 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期405-411,共7页

目的探讨和厚朴酚调控Sirtuin-3(SIRT3)-MnSOD2通路对高甘油三酯血症急性胰腺炎(HTGP)大鼠氧化应激的作用。方法30只4周龄SD雄性大鼠随机分成普通饲养组和高脂饲养组,4周后普通饲养组随机设置为:对照(C)组和急性胰腺炎(AP)组;高脂饲养... 目的探讨和厚朴酚调控Sirtuin-3(SIRT3)-MnSOD2通路对高甘油三酯血症急性胰腺炎(HTGP)大鼠氧化应激的作用。方法30只4周龄SD雄性大鼠随机分成普通饲养组和高脂饲养组,4周后普通饲养组随机设置为:对照(C)组和急性胰腺炎(AP)组;高脂饲养组随机设置为:高甘油三酯血症(HTG)对照组、HTGP组、和厚朴酚(HKL)治疗组,6只/组。AP组、HTGP组和HKL组经腹腔注射雨蛙肽建立AP模型,HKL组于造模后15 min腹腔注射HKL5 mg/kg。建立模型24 h后处置大鼠,检测大鼠血清甘油三酯(TG)、IL-6、TNF-α水平,HE染色观察胰腺组织病理学,试剂盒检测胰腺组织活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平,Western blot测定SIRT3、锰超氧化物歧化酶(MnSOD2)蛋白的表达水平,免疫组化法检测MnSOD2蛋白表达,透射电镜观察胰腺腺泡细胞及线粒体超微结构。结果与普通组比较,高脂组TG水平显著增高(P<0.05)。与各对照组比较,模型组IL-6、TNF-α、MDA水平均显著增高(P<0.05),GSH水平、SIRT3和MnSOD2蛋白表达均显著降低(P<0.05),HE染色显示有不同程度的水肿及炎细胞浸润,ROS荧光强度增强,电镜下腺泡细胞及线粒体超微结构损伤明显。与HTGP组比较,HKL组IL-6、TNF-α、MDA水平均显著降低(P<0.05),GSH水平、SIRT3和MnSOD2蛋白表达均显著增高(P<0.05),HE染色水肿及炎细胞浸润程度减轻,ROS荧光强度降低,电镜下腺泡细胞及线粒体超微结构损伤改善。结论HKL可能通过SIRT3-MnSOD2途径改善HTGP大鼠氧化应激水平并减轻胰腺病理损伤。 展开更多

关键词 急性胰腺炎 高甘油三酯血症 sirtuin-3 氧化应激

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MnSOD-SIRT3在佐剂性关节炎大鼠肝组织中的表达和意义 被引量：8

10

作者 苏会萍 张俊强 +6 位作者 曹威 储海峰 俞晨 李简 杨睿 宋先兵 陈晓宇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第9期1268-1272,共5页

目的探讨肝脏锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、去乙酰化酶3(SIRT3)的改变与佐剂性关节炎(AA)大鼠的关系。方法弗氏完全佐剂(FCA)足趾皮下注射诱导SD大鼠AA,造模后12、19、26 d,分批处死大鼠,计算肝脏指数,检测血清谷草转氨酶(AST);谷丙转氨酶(... 目的探讨肝脏锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、去乙酰化酶3(SIRT3)的改变与佐剂性关节炎(AA)大鼠的关系。方法弗氏完全佐剂(FCA)足趾皮下注射诱导SD大鼠AA,造模后12、19、26 d,分批处死大鼠,计算肝脏指数,检测血清谷草转氨酶(AST);谷丙转氨酶(ALT);肝匀浆检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化;肝组织免疫组化和Western blot法检测MnSOD、SIRT3蛋白表达变化。结果与正常组大鼠比较,AA大鼠造模12 d后,肝脏指数升高,血清转氨酶升高,肝匀浆中MDA升高,GSH-Px、SOD活性下降(P<0.05,P<0.01),肝组织中MnSOD、SIRT3蛋白表达下降。结论 AA模型组大鼠存在肝损伤,肝匀浆中氧化应激指标升高,其机制与肝脏中MnSOD和SIRT3表达有一定的关联。 展开更多

关键词 佐剂性关节炎 锰超氧化物歧化酶 去乙酰化酶3 大鼠

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银杏叶提取物通过UCP2/SIRT3通路改善大鼠脑缺血-再灌注损伤 被引量：6

11

作者 杨雨鸣 赵勇 +3 位作者 王景霞 张辉 李尧 王淑英 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第2期187-193,共7页

目的:研究银杏叶提取物(EGb761)能否通过线粒体解偶联蛋白2(UCP2)/去乙酰化酶3(SIRT3)通路改善大鼠脑缺血再灌注(CIRI)损伤。方法:雄性SD大鼠分成以下四组:假手术组(sham)、脑缺血再灌注(CIRI)损伤组(CIRI)、银杏叶提取物组(EGb761)和U... 目的:研究银杏叶提取物(EGb761)能否通过线粒体解偶联蛋白2(UCP2)/去乙酰化酶3(SIRT3)通路改善大鼠脑缺血再灌注(CIRI)损伤。方法:雄性SD大鼠分成以下四组:假手术组(sham)、脑缺血再灌注(CIRI)损伤组(CIRI)、银杏叶提取物组(EGb761)和UCP2抑制剂组(EGb761+Genipin)。对EGb761组和EGb761+Genipin组每天尾静脉注射10 mg/kg EGb761注射液,sham组和CIRI组给予尾静脉注射等剂量生理盐水,连续7 d;在第5~7 d,同时对EGb761+Genipin组每天灌胃50 mg/kg Genipin生理盐水溶液。末次给药次日,通过大脑左侧中动脉闭塞法(MCAO)构建大鼠脑CIRI模型。记录各组大鼠Longa神经功能评分和体重变化,取鼠脑制成石蜡切片,通过HE和尼氏染色并观察脑皮质损伤区病理变化;通过免疫组织化学技术检测脑皮质损伤区UCP2、SIRT3及天冬氨酸蛋白半胱氨酸酶3(caspase-3)的表达;收集动脉血,测定血清中总超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)浓度。结果:与sham组比较,CIRI组大鼠神经功能评分上升(P<0.01),再灌注后体重减轻(P<0.01),脑组织病理损伤加重,UCP2、SIRT3表达减少,caspase-3表达增加(P<0.01),血清SOD活力下降,MDA浓度上升(P<0.01);与CIRI组比较,EGb761组大鼠神经功能评分下降(P<0.01),再灌注后体重增加(P<0.01),脑组织病理损伤减轻,UCP2、SIRT3表达增加,caspase-3表达减少(P<0.01),血清SOD活力增高,MDA浓度下降(P<0.01);与EGb761组比较,EGb761+Genipin组大鼠神经功能评分增加(P<0.05),再灌注后体重减轻(P<0.05),脑组织病理损伤较严重,UCP2、SIRT3表达减少,caspase-3表达增加(P<0.05),血清SOD活力下降,MDA浓度上升(P<0.01)。结论:EGb761可通过调控UCP2/SIRT3通路改善大鼠脑CIRI损伤。 展开更多

关键词 银杏叶提取物 脑缺血再灌注损伤 解偶联蛋白2(UCP2) 去乙酰化酶3(SIRT3) 大鼠

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胰腺癌细胞PANC-1中LSD1负向调控抑癌基因SIRT3的实验研究 被引量：5

12

作者 徐近 秦毅 +5 位作者 张波 吉顺荣 许文彦 施思 刘江 虞先濬 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期87-92,共6页

背景与目的:组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是重要的染色质修饰蛋白之一,可以通过调节染色质的结构调节基因的转录调控,进而影响肿瘤的发生、发展、侵袭、转移以及代谢异常等恶性潜能,是判断肿瘤预后的... 背景与目的:组蛋白赖氨酸去甲基化酶1(lysine specific demethylase 1,LSD1)是重要的染色质修饰蛋白之一,可以通过调节染色质的结构调节基因的转录调控,进而影响肿瘤的发生、发展、侵袭、转移以及代谢异常等恶性潜能,是判断肿瘤预后的生物标志物。Sirtuins家族去乙酰化酶3(sirtuin3,SIRT3)基因是位于线粒体内的抑癌基因,通过调控肿瘤代谢异常以及氧化损伤行使抑癌基因的功能。本研究通过基因转录调控的手段,研究胰腺癌细胞PANC-1中LSD1与SIRT3的关系。方法:通过RNA干扰(RAN interference,RNAi)、免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,CoIP)、染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation assay,ChIP)及启动子活性分析等分子生物学实验手段,探讨LSD1与SIRT3在PANC-1细胞中的关系。结果:通过RNAi的手段干扰LSD1的表达,发现SIRT3基因转录水平和蛋白水平明显上升;通过蛋白相互作用的手段,发现LSD1可以与SIRT3转录调控的重要转录因子过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma,coactivator 1 alpha,PGC-1α)相互作用;通过ChIP方法,发现LSD1与PGC-1α共同募集到SIRT3基因的启动子区域染色质上;通过启动子活性分析,发现LSD1基因可以显著抑制PGC-1α对SIRT3基因的转录调控。结论:LSD1可以表观遗传调控抑癌基因SIRT3的转录,为深入研究LSD1与肿瘤代谢异常以及氧化应激提供了理论依据。 展开更多

关键词 胰腺癌 PANC-1 组蛋白赖氨酸去甲基化酶1 过氧化物酶增殖体激活受体辅激动子-1α sirtuins家族去乙酰化酶3 表观遗传调控

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沉默信息调节因子3对白藜芦醇诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 李松岩 林冬静 +4 位作者 于洋 刘师兵 徐路 孙奇 徐冶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期45-49,I0003,共6页

目的:检测沉默信息调节因子3 (Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0mg·L-1)Res培养24h,MTT法检测细胞存活... 目的:检测沉默信息调节因子3 (Sirt3)对白藜芦醇(Res)诱导的人卵巢癌SKOV3细胞凋亡的影响,探讨其促进凋亡的机制。方法:人卵巢癌SKOV3细胞加入不同浓度(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0和80.0mg·L-1)Res培养24h,MTT法检测细胞存活率。将细胞随机分为对照组、Sirt3抑制剂3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)吡啶(3-TYP)组、Res组和3-TYP+Res组,培养24h后,MTT法检各组细胞增殖抑制率;采用Hoechst 33342进行细胞核染色,激光共聚焦显微镜观察细胞核形态;采用活性氧(ROS)探针检测细胞中ROS水平;Western blotting法检测各组细胞中Sirt3、B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (cleaved caspase-3)蛋白表达水平。结果:MTT实验,随着Res浓度的增加,细胞存活率明显降低,Res的半数抑制浓度(IC50)为42.73mg·L^-1。与对照组比较,Res组和3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,3-TYP+Res组细胞核出现固缩、染色增强、核碎裂增多。与对照组比较,3-TYP组细胞红色荧光无明显变化,Res组和3-TYP+Res组细胞红色荧光明显减少。Western blotting法检测,与对照组比较,3-TYP组细胞中Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),Res组细胞中Sirt3和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与Res组比较,3-TYP+Res组细胞中Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Bcl-2和Sirt3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:Res可以诱导SKOV3细胞的凋亡,3-TYP通过抑制Sirt3表达可增强Res的作用。 展开更多

关键词 3-(1H-1 2 3-三唑-4-基)吡啶 沉默信息调节因子3 白藜芦醇 人卵巢癌SKOV3细胞 细胞凋亡

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SIRT3去SUMO化修饰调节乳腺癌细胞MCF7增殖及化疗药物敏感性的研究 被引量：3

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作者 郝艳云 俞思慧 +4 位作者 陆静 顾湘 张帆 程金科 王田实 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1557-1563,共7页

目的·研究沉默调节蛋白3(sirtuin 3,SIRT3)去SUMO化修饰对乳腺癌细胞的增殖和耐药性的影响。方法·用CRISPR-Cas9质粒pX330-sgRNA敲除MCF7乳腺癌细胞系SIRT3基因,构建SIRT3KO的MCF7细胞系;在此细胞系基础上,利用表达SIRT3 K288... 目的·研究沉默调节蛋白3(sirtuin 3,SIRT3)去SUMO化修饰对乳腺癌细胞的增殖和耐药性的影响。方法·用CRISPR-Cas9质粒pX330-sgRNA敲除MCF7乳腺癌细胞系SIRT3基因,构建SIRT3KO的MCF7细胞系;在此细胞系基础上,利用表达SIRT3 K288R(SUMO化修饰位点突变型)和SIRT3 WT(野生型)的反转录病毒,以及空载对照(Vector)病毒进行感染,以构建SIRT3 SUMO化修饰位点突变的细胞系及其对照细胞系。3种细胞株在相同条件下培养后进行细胞计数并在显微镜下进行观察,确定细胞数量和形态的变化;用不同浓度的阿霉素分别处理细胞24、48、72 h,检测3种细胞株的耐药程度。结果·成功构建了敲除SIRT3的MCF7细胞系,并利用反转录病毒感染构建了表达SIRT3 K288R和SIRT3 WT以及空载对照的细胞系;通过细胞计数发现,在相同培养时间下,SIRT3 K288R细胞系的增殖速率显著低于SIRT3 WT和Vector细胞系(P=0.000);在显微镜下测量非黏附性乳腺球群细胞的大小,发现SIRT3 K288R细胞系的直径较SIRT3 WT和Vector细胞系小,增殖缓慢。阿霉素耐药实验结果显示,在细胞培养24、48和72 h时,不同阿霉素浓度(1.25、2.5、5和10μg/mL)处理下的SIRT3 K288R细胞系的活性均显著高于SIRT3 WT和Vector细胞系(均P<0.05);并且相比另外2个细胞系,阿霉素在SIRT3 K288R细胞系中的半数抑制浓度(IC_(50))也较高。结论·去SUMO化修饰的SIRT3能抑制乳腺癌细胞MCF7的增殖,但增加其对阿霉素的耐药性。 展开更多

关键词 沉默调节蛋白3 SUMO化修饰 乳腺癌 阿霉素 耐药性

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下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老 被引量：4

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作者 彭宣 倪海强 +1 位作者 顾世琦 宫念樵 《器官移植》 CSCD 北大核心 2024年第1期46-54,共9页

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)... 目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。 展开更多

关键词 肾移植 缺血-再灌注损伤 剪接型X盒结合蛋白1 细胞衰老 氧化应激 沉默信息调节因子3 线粒体活性氧簇 超氧化物歧化酶

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烟酰胺单核苷酸通过Sirt3减轻心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤 被引量：2

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作者 贾志兴 程颖 +1 位作者 李慧源 贾德功 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期618-625,共8页

目的 探讨烟酰胺单核苷酸(NMN)对大鼠心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤(IRI)的作用及机制。方法 通过“磁环+双袖套”法建立大鼠原位肝移植模型。将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、原位肝移植组(OLT组)、NMN处理+原位肝移植组(NMN组... 目的 探讨烟酰胺单核苷酸(NMN)对大鼠心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤(IRI)的作用及机制。方法 通过“磁环+双袖套”法建立大鼠原位肝移植模型。将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、原位肝移植组(OLT组)、NMN处理+原位肝移植组(NMN组)、NMN+去乙酰化酶-3(Sirt3)抑制剂(3-TYP)+原位肝移植组(NMN+3-TYP组)。观察各组大鼠肝组织病理学改变及肝细胞凋亡情况,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,检测肝组织Sirt3、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、Parkin、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)表达水平。分析各组大鼠术后生存情况。结果 与Sham组比较,OLT组ALT、AST水平升高;与OLT组比较,NMN组ALT、AST水平均下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组ALT、AST水平升高(均为P<0.05)。Sham组大鼠肝组织结构基本正常;OLT组大鼠肝组织可见明显的淤血、空泡变性和肝细胞坏死等病理改变。OLT组Suzuki评分、细胞凋亡率较Sham组升高;NMN组Suzuki评分、细胞凋亡率较OLT组降低;NMN+3-TYP组Suzuki评分、细胞凋亡率较NMN组升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,OLT组SOD含量下降,MDA含量升高;与OLT组比较,NMN组SOD含量升高,MDA含量下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组SOD含量下降,MDA含量升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,OLT组Sirt3、TOMM20蛋白相对表达量下降,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量升高;与OLT组比较,NMN组Sirt3、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量升高,TOMM20蛋白相对表达量下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量下降,TOMM20蛋白相对表达量升高(均为P<0.05)。Sham组、OLT组、NMN组、NMN+3-TYP组大鼠术后7 d生存率分别为100%、50%、75%、58%。结论 NMN可通过上调Sirt3,增强肝脏抗氧化能力及诱导PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,减轻肝IRI,从而对心脏死亡供肝发挥保护作用。 展开更多

关键词 烟酰胺单核苷酸(NMN) 肝移植 心脏死亡器官捐献(DCD) 缺血-再灌注损伤(IRI) 线粒体自噬 超氧化物歧化酶(SOD) 去乙酰化酶-3(Sirt3) PTEN诱导假定激酶1(PINK1)

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沉默信息调节因子3调控小胶质细胞对早产儿脑损伤的神经保护作用研究进展 被引量：1

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作者 魏佳(综述) 毛姗姗(审校) 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期152-156,共5页

随着围生医学发展,早产儿存活率已逐年上升,但脑损伤发生率依旧不低。尽管神经康复使脑损伤得到一定改善,但不可避免地遗留不同程度神经功能障碍。最近研究表明,沉默信息调节因子3可调控脑内小胶质细胞而减轻神经元受损,在早产儿脑损伤... 随着围生医学发展,早产儿存活率已逐年上升,但脑损伤发生率依旧不低。尽管神经康复使脑损伤得到一定改善,但不可避免地遗留不同程度神经功能障碍。最近研究表明,沉默信息调节因子3可调控脑内小胶质细胞而减轻神经元受损,在早产儿脑损伤保护中具有极大潜力。文章综述了沉默信息调节因子3通过小胶质细胞对早产儿脑损伤的神经保护作用机制,以期为治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 沉默信息调节因子3 小胶质细胞 脑损伤 神经保护 早产儿

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SIRT3介导褪黑激素保护帕金森病多巴胺能神经元的作用机制 被引量：8

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作者 蒋德旗 徐兰程 +1 位作者 毛书慧 赵仕花 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期121-126,共6页

目的研究SIRT3在褪黑激素保护帕金森病(Parkinson’s disease,PD)多巴胺能神经元中的作用。方法48只小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,治疗组小鼠给予褪黑激素(10 mg·kg-1)和MPTP(30 mg·kg-1)腹腔注射,模型组小鼠给予MPTP... 目的研究SIRT3在褪黑激素保护帕金森病(Parkinson’s disease,PD)多巴胺能神经元中的作用。方法48只小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,治疗组小鼠给予褪黑激素(10 mg·kg-1)和MPTP(30 mg·kg-1)腹腔注射,模型组小鼠给予MPTP腹腔注射,对照组小鼠同时给予等量生理盐水,褪黑激素连续给药14 d。采用免疫组化分析黑质TH、Iba-1表达情况,ELISA法检测中脑组织氧化应激指标(ROS、MDA、SOD)及炎症因子(TNF-α、IL-1β)水平,实时定量PCR分析SIRT3 mRNA水平,免疫荧光和Western blot检测蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠黑质TH表达减少、Iba-1表达增多,中脑组织氧化应激与炎症损伤明显增强,黑质SIRT3 mRNA和蛋白表达水平明显降低,SOD2蛋白表达减少,iNOS蛋白表达增多,组间比较差异均具有统计学意义( P <0.05)。治疗组小鼠经褪黑激素干预后,TH表达增多、Iba-1表达减少,氧化应激与炎症损伤明显减弱,SIRT3 mRNA和蛋白表达水平升高,SOD2蛋白表达上调,iNOS蛋白表达下调,与模型组比较,差异均具有统计学意义( P <0.05)。 结论 褪黑激素通过上调SIRT3表达抵抗PD多巴胺能神经元损伤,作用机制与其抑制小胶质细胞激活减轻氧化应激和炎症损伤有关。 展开更多

关键词 褪黑激素 SIRT3 帕金森病 多巴胺能神经元 氧化应激 小胶质细胞

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异槲皮苷对Aβ25-35导致的PC12细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量：1

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作者 郑传痴 周旭美 高健美 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第1期73-78,136,共7页

探讨异槲皮苷对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)导致的PC12细胞氧化损伤的保护作用。首先通过分子对接技术分析异槲皮苷与AMPK的结合情况。采用Aβ25-35(20μmol/L)损伤PC12细胞建立细胞氧化损伤模型,采用甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,通过... 探讨异槲皮苷对β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)导致的PC12细胞氧化损伤的保护作用。首先通过分子对接技术分析异槲皮苷与AMPK的结合情况。采用Aβ25-35(20μmol/L)损伤PC12细胞建立细胞氧化损伤模型,采用甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,通过试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、活性氧(ROS)含量、丙二醛(MDA)含量以及抗氧化物酶超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,采用Western blot法检测磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)、过氧化物增殖体受体辅激活子-1α(PGC-1α)、沉默信息调节因子3(Sirt3)和异柠檬酸脱氢酶(IDH2)的蛋白表达。结果显示异槲皮苷与AMPK的结合力为-9.48 kJ/mol,提示AMPK可能为异槲皮苷的潜在作用靶点。异槲皮苷(1、10和100μmol/L)能够浓度依赖性的显著抑制Aβ25-35导致的PC12细胞死亡,减少ROS和MDA含量,升高SOD和GSH-Px活力。异槲皮苷抑制Aβ25-35导致的细胞氧化损伤并上调p-AMPK、PGC-1α、Sirt3和IDH2的蛋白表达。以上结果表明异槲皮苷可能通过调控AMPK/Sirt3信号通路发挥抗Aβ25-35导致的PC12细胞氧化损伤作用。 展开更多

关键词 异槲皮苷 Β-淀粉样蛋白25-35 PC12细胞 氧化应激 沉默信息调节因子3

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急性髓系白血病SIRT3的表达

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作者 张妍 杨明珍 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1826-1830,共5页

目的观察急性髓系白血病(AML)患者化学治疗前后活性氧(ROS)、异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)、去乙酰化酶3(SIRT3)动态变化情况,探讨不同AML患者ROS、IDH2、SIRT3水平的差异及其在临床诊断和疗效评价中的应用价值。方法取20例新诊断的且尚未行... 目的观察急性髓系白血病(AML)患者化学治疗前后活性氧(ROS)、异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)、去乙酰化酶3(SIRT3)动态变化情况,探讨不同AML患者ROS、IDH2、SIRT3水平的差异及其在临床诊断和疗效评价中的应用价值。方法取20例新诊断的且尚未行化学治疗的AML(非APL)患者骨髓及外周血标本(新诊断组);取40例已行化学治疗的AML(非APL)患者骨髓及外周血标本(经治组);取20例正常人骨髓及外周血标本作为对照(对照组)。荧光显微镜下观察各组骨髓单个核细胞及骨髓单个核细胞线粒体中ROS的表达,ELISA测定各组外周血中IDH2、SIRT3的表达。对患者AML1-ETO融合基因表达与否进行归纳总结,比较不同组中SIRT3的表达。比较经治患者中不同治疗疗效、治疗疗程中SIRT3的表达。结果三组中骨髓单个核细胞内及细胞中线粒体ROS的表达,新诊断组高于对照组(P<0.05),经治组低于新诊断组(P<0.05)。三组的外周血IDH2的表达,新诊断组高于对照组(P<0.0001);经治组低于新诊断组(P<0.05)。外周血标本稀释5倍后,SIRT3的表达新诊断组低于对照组(P<0.0001);经治组高于新诊断组(P<0.01)。经治患者中融合基因阳性者SIRT3表达高于融合基因阴性者;部分缓解者SIRT3表达高于完全缓解者;经治患者中完全缓解亚组,治疗疗程长者SIRT3表达高于治疗疗程短者。结论SIRT3是作为重要蛋白质在细胞线粒体中调节代谢功能,其在急性髓系白血病患者中表达下调,IDH2及ROS表达随之升高。在AML中,SIRT3的异常表达会加速肿瘤的发生发展及降低治疗疗效。 展开更多

关键词 去乙酰化酶3 急性髓系白血病 活性氧 异柠檬酸脱氢酶2 线粒体

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