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猪瘟病毒E^(rns)结构蛋白鼠源单个B细胞抗体的制备和鉴定: 1; 作者黄禹丰吴睿智 +9 位作者徐璐邹兴启车斯琪李芳韬夏应菊赵俊杰赵启祖刘业兵贾伟新朱元源《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期18-27,共10页; 研制猪瘟病毒(CSFV)E^(rns)结构蛋白单克隆抗体(简称“单抗”),对研究E^(rns)抗原结构和建立CSFV诊断方法具有重要意义。本试验利用单个B细胞抗体技术制备系列单抗,用CSFV E^(rns)蛋白免疫BALB/c小鼠,通过流式分选技术分选特异性结合E^(... 展开更多; 关键词猪瘟病毒(CSFV) 单克隆抗体单个b细胞抗体技术 E^(rns)蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

基于单B细胞筛选技术制备PRRSV N蛋白单克隆抗体: 2; 作者李钰婷王衡平 +2 位作者李芳周昕王会岩《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期63-70,共8页; 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体。本试验构建和鉴定重组表达质粒pET28a(+)-sumo-N,以原核表达并纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用单B细胞筛选技术获得分泌针对N蛋白的特异性抗体的单B细胞,再经单细胞测... 展开更多; 关键词猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV) N蛋白单克隆抗体单b细胞筛选技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒VP4兔源单克隆抗体的制备和鉴定: 3; 作者孔维光袁新婕 +2 位作者丁广义张环宇徐镇《渔业研究》 2025年第5期609-619,共11页; 【目的】Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)严重危害中国草鱼(Ctenoparyngodonidel-lus)养殖业的健康发展。本研究基于单个B细胞抗体制备技术平台,结合哺乳动物表达系统,旨在制备靶向GCRV-ⅡVP4蛋白的基因工程抗体。【方法】通过构建GCRV-Ⅱ... 展开更多; 关键词 Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒 VP4蛋白单个b细胞技术单克隆抗体制备; 在线阅读下载PDF 职称材料

用噬菌体呈现技术表达抗人红细胞血型B抗原的单链抗体: 4; 作者王长军唐家琪 +2 位作者潘秀珍李先富操敏《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期277-281,共5页; 本研究的目的是构建表达抗人红细胞血型B抗原5D12杂交瘤细胞的单链抗体(ScFv)。应用重组噬菌体抗体技术，分离与构建5D12McAb单链抗体基因，将其克隆入噬粒pHEN-1中，转化E．coliTGl，M13KO7辅助噬菌体援救构建5D12噬菌体单链抗体库；... 展开更多; 关键词 AbO血型红细胞血型红细胞血型b抗原噬菌体呈现技术单链抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

单克隆抗体制备技术的最新进展被引量：5: 5; 作者林金香王心睿《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期2544-2548,共5页; 随着各类新兴技术和学科的发展,单克隆抗体制备技术也得到不断更新和完善,但如何利用并有效制备抗体,用于检测、预防、治疗等迫在眉睫。本文综述了单克隆抗体制备技术的最新研究进展,包括抗体库技术、转基因和新型动物模型技术、单个B... 展开更多; 关键词单克隆抗体抗体库转基因动物单个b细胞抗体技术; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟病毒E^(rns)结构蛋白鼠源单个B细胞抗体的制备和鉴定: 1; 作者黄禹丰吴睿智徐璐邹兴启车斯琪李芳韬夏应菊赵俊杰赵启祖刘业兵贾伟新朱元源; 机构华南农业大学兽医学院中国兽医药品监察所国家/WOAH猪瘟参考实验室; 出处《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期18-27,共10页; 基金国家重点研发计划项目(2023YFD1800504)。; 文摘研制猪瘟病毒(CSFV)E^(rns)结构蛋白单克隆抗体(简称“单抗”),对研究E^(rns)抗原结构和建立CSFV诊断方法具有重要意义。本试验利用单个B细胞抗体技术制备系列单抗,用CSFV E^(rns)蛋白免疫BALB/c小鼠,通过流式分选技术分选特异性结合E^(rns)蛋白的单个B细胞,利用巢式聚合酶链式反应(PCR)扩增IgG抗体重链和轻链可变区基因,分别构建IgG抗体重链和轻链完整基因重组质粒,然后将重链和轻链重组质粒共转染至人胚胎肾细胞(HEK-293T)中进行单抗表达、纯化,并对单抗进行蛋白免疫印记(WB)、间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光(IFA)鉴定。流式分选结果显示,本试验分选得到48个特异性结合E^(rns)蛋白的单个B细胞。PCR扩增结果显示,从48个B细胞中扩增得到16对配对的IgG抗体重链和轻链可变区基因。WB、间接ELISA和IFA结果显示,本试验成功制备得到13株能与CSFV发生反应的E^(rns)单抗,其中1株(E0M11)仅与CSFV疫苗毒株(HCLV株、Thiverval株)反应,不与CSFV流行毒株(IVDC-HeB-01、IVDC-HuB-06)和牛流行性腹泻病毒(BVDV)反应。结果表明,本试验建立了快速筛选CSFV单抗的技术平台,制备的单抗有望用于CSFV鉴别诊断方法的建立,具有一定的临床应用价值。; 关键词猪瘟病毒(CSFV) 单克隆抗体单个b细胞抗体技术 E^(rns)蛋白; Keywords classical swine fever virus(CSFV) monoclonal antibody single b cell antibody technology E^(rns)protein; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于单B细胞筛选技术制备PRRSV N蛋白单克隆抗体: 2; 作者李钰婷王衡平李芳周昕王会岩; 机构扬州大学兽医学院吉林医药学院吉林省抗体工程科技协同创新中心; 出处《中国兽医杂志》北大核心 2025年第9期63-70,共8页; 基金吉林省科技发展计划项目(20240404022ZP)。; 文摘为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体。本试验构建和鉴定重组表达质粒pET28a(+)-sumo-N,以原核表达并纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用单B细胞筛选技术获得分泌针对N蛋白的特异性抗体的单B细胞,再经单细胞测序获得抗体基因序列并构建真核表达质粒,利用中华仓鼠卵巢(CHO)细胞瞬时转染表达并筛选和纯化单克隆抗体,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定其效价,蛋白质免疫印迹(WB)鉴定其特异性,生物膜干涉(BLI)技术测定其亲和力和表位分组。结果显示,N蛋白呈可溶性表达,分子量约34 kDa。基于单B细胞筛选技术筛选出5株单克隆抗体。5株单克隆抗体效价均大于10~5,均可与PRRSV N蛋白产生特异性反应,亲和力解离常数(Kd)分别为8.72×10^(-9)、1.41×10^(-8)、1.14×10^(-10)、1.00×10^(-12)和1.54×10^(-11)mol/L,且表位均不相同。本试验应用单B细胞筛选技术成功制备出抗PRRSV N蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究PRRSV N蛋白的结构特性、功能作用以及建立高效且快速的PRRSV抗体检测方法提供参考。; 关键词猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV) N蛋白单克隆抗体单b细胞筛选技术; Keywords porcine reproductive and respiratory syndrome(PRRSV) N protein monoclonal antibody single b cell screen⁃ing technology; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒VP4兔源单克隆抗体的制备和鉴定: 3; 作者孔维光袁新婕丁广义张环宇徐镇; 机构中国科学院水生生物研究所; 出处《渔业研究》 2025年第5期609-619,共11页; 基金国家自然科学基金(32225050、U24A20461、32303053)。; 文摘【目的】Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒(GCRV-Ⅱ)严重危害中国草鱼(Ctenoparyngodonidel-lus)养殖业的健康发展。本研究基于单个B细胞抗体制备技术平台,结合哺乳动物表达系统,旨在制备靶向GCRV-ⅡVP4蛋白的基因工程抗体。【方法】通过构建GCRV-ⅡVP4基因表达载体,在真核表达系统中制备重组VP4蛋白;将纯化后的重组蛋白作为免疫原多次免疫新西兰白兔,分离出脾脏单个抗原特异性记忆B细胞;随后通过聚合酶链式反应(PCR)扩增抗体可变区、恒定区基因片段,构建重组表达载体并转染HEK293F细胞进行单克隆抗体表达。最终通过酶联免疫吸附试验(ELISA)、蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫荧光分析(IF)评估抗体的抗原结合特性。【结果】通过对分离培养的单个B细胞上清液进行筛选,利用ELISA筛选出对VP4蛋白具有较好结合能力的三种B细胞克隆(1D5、1F9、1H1),并结合IF实验验证了其能结合病毒感染组织中的VP4抗原。进一步通过抗体重组表达获得了三株抗VP4重组单克隆抗体(1D5、1F9、1H1),其ELISA效价均达1∶128000。Westernblot分析结果显示,1D5、1F9和1H1单克隆抗体能特异性识别GCRV-YX246感染的脑细胞中65.4kDa的蛋白质条带,该分子量大小与病毒VP4蛋白理论分子量一致。IF实验结果也进一步证实1D5、1F9和1H1可特异性识别GCRV-YX246毒株感染的草鱼头肾组织切片中的病毒抗原。【结论】本研究成功制备并筛选出抗GCRV-ⅡVP4重组单克隆抗体,为GCRV-Ⅱ病毒快速诊断试剂盒的研发和VP4蛋白功能研究奠定基础。; 关键词 Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒 VP4蛋白单个b细胞技术单克隆抗体制备; Keywords grass carp reovirus genotypeⅡ(GCRV-Ⅱ) VP4 protein single b cell technology monoclonal antibodies preparation; 分类号 S941 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用噬菌体呈现技术表达抗人红细胞血型B抗原的单链抗体: 4; 作者王长军唐家琪潘秀珍李先富操敏; 机构南京华东生物技术研究所; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期277-281,共5页; 基金 "九五"全军招标课题编号96M025; 文摘本研究的目的是构建表达抗人红细胞血型B抗原5D12杂交瘤细胞的单链抗体(ScFv)。应用重组噬菌体抗体技术，分离与构建5D12McAb单链抗体基因，将其克隆入噬粒pHEN-1中，转化E．coliTGl，M13KO7辅助噬菌体援救构建5D12噬菌体单链抗体库；用完整虹细胞亲和富集法淘选阳性重组噬菌体，重组噬菌体鉴定及序列测定分析；免疫杂交试验检测重组噬菌体单链抗体的特异性抗原活性。经M13K07援救E．coli TG1转化菌中的pHEN-1重组噬菌体，得到滴度为3×10^9pfu／m1噬菌体单链抗体库；免疫杂交试验证实表达产物保留了亲本单抗对人红细胞血型B抗原的特异性亲和力。本研究成功地构建5D12McAb单链噬菌体抗体库，为进一步研制；与特异性和高亲和力的基因工程原核血型检定抗体试剂奠定了基础。; 关键词 AbO血型红细胞血型红细胞血型b抗原噬菌体呈现技术单链抗体; Keywords AbO blood group red blood cell blood group RbC blood grup b substance phage display technology single chain antibody; 分类号 Q439.48 [生物学—生理学] R457.11 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名单克隆抗体制备技术的最新进展被引量：5: 5; 作者林金香王心睿; 机构福建省儿童医院福建医科大学附属福建省妇幼保健院医学研究中心国家卫健委非人灵长类生育调节技术评价重点实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期2544-2548,共5页; 基金福建省妇幼保健院科研基金项目(YCXB18-05,YCXM19-03)。; 文摘随着各类新兴技术和学科的发展,单克隆抗体制备技术也得到不断更新和完善,但如何利用并有效制备抗体,用于检测、预防、治疗等迫在眉睫。本文综述了单克隆抗体制备技术的最新研究进展,包括抗体库技术、转基因和新型动物模型技术、单个B细胞抗体技术、多学科和计算机辅助抗体制备技术,并简要讨论其应用前景和存在的问题。; 关键词单克隆抗体抗体库转基因动物单个b细胞抗体技术; Keywords Monoclonal antibody Antibody library Transgenic animal single b cell antibody technology; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪瘟病毒E^(rns)结构蛋白鼠源单个B细胞抗体的制备和鉴定	黄禹丰吴睿智徐璐邹兴启车斯琪李芳韬夏应菊赵俊杰赵启祖刘业兵贾伟新朱元源	《中国兽医杂志》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	基于单B细胞筛选技术制备PRRSV N蛋白单克隆抗体	李钰婷王衡平李芳周昕王会岩	《中国兽医杂志》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒VP4兔源单克隆抗体的制备和鉴定	孔维光袁新婕丁广义张环宇徐镇	《渔业研究》	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	用噬菌体呈现技术表达抗人红细胞血型B抗原的单链抗体	王长军唐家琪潘秀珍李先富操敏	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	1999	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	单克隆抗体制备技术的最新进展	林金香王心睿	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2021	5	在线阅读下载PDF 职称材料