大鼠心肌多胺代谢限速酶ODC、SSAT活性分析 被引量：9

1

作者 赵雅君 王丽娜 +4 位作者 李鸿珠 张力 徐长庆 孙轶华 Wang Rui 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期555-559,共5页

目的建立大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性分析方法。方法以Langendorff离体灌流心肌为实验材料,制备心肌组织匀浆;分别以dl[114C]Ornithine及[114C]acetylCoenzymeA为底物,以液体闪烁计数仪记... 目的建立大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性分析方法。方法以Langendorff离体灌流心肌为实验材料,制备心肌组织匀浆;分别以dl[114C]Ornithine及[114C]acetylCoenzymeA为底物,以液体闪烁计数仪记录生成的14CO2及[14C]acetylspermidine的放射活度,并以其代表ODC,SSAT的活性;计算大鼠心肌ODC、SSAT的酶促反应动力学参数,筛选出适宜的底物浓度;同时观察一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)对酶活性的影响。结果①大鼠心肌ODC、SSAT基础活性分别为:(9.67±3.09)nmol·mg-1Pro·h-1;(3.59±0.91)nmol·mg-1Pro·min-1。②ODC催化LOrnithine的酶促反应动力学参数Km=(54.95±8.14)μmol·L-1;Vmax=(2.364±0.37)nmol·mg-1·h-1;SSAT催化AcetylCoenzymeA的酶促反应动力学参数Km=(12.87±1.88)μmol·L-1;Vmax=(0.50±0.07)nmol·mg-1·min-1。③大鼠心肌ODC、SSAT活性检测的底物浓度分别为:90μmol·L-1(18.5kBq)DL[114C]Ornithine及36μmol·L-1(2.96kBq)[114C]acetylCoA。④SNP呈浓度依赖性地抑制ODC的活性、诱导SSAT的活性。结论建立了大鼠心肌多胺代谢限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰转移酶(SSAT)活性的分析方法,该方法简便易行;根据Km值确定测定大鼠心肌ODC及SSAT? 展开更多

关键词 大鼠 心肌 鸟氨酸脱羧酶 精脒/精胺乙酰转移酶 方法

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建鲤ODC1基因型与增重的相关性分析 被引量：15

2

作者 李红霞 李建林 +1 位作者 唐永凯 俞菊华 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期414-421,共8页

构建了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)jlODC1a基因上6个和jlODC1b基因上4个SNP位点的PCR-RFLP方法,检测了这10个位点在12个家系约900尾建鲤选育群体中的基因型,各位点的基因型频率存在差异,... 构建了建鲤(Cyprinus carpio var.jian)鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)jlODC1a基因上6个和jlODC1b基因上4个SNP位点的PCR-RFLP方法,检测了这10个位点在12个家系约900尾建鲤选育群体中的基因型,各位点的基因型频率存在差异,最小等位基因频率(MAF)为0.14—0.48。各位点不同基因型与增重相关分析结果,其中7个SNPs与建鲤增重显性相关的位点,ODC1s基因上与雌鱼增重相关的SNP位点(7个)较雄鱼(4个)多。标记富集结果表明富集与建鲤增重相关的优势基因型的SNP个数越多的个体增重速度越快SNP个数越多的个体增重速度越快,富集4个的平均增重显著快于富集0—3的个体增重,且比0标记的快约14%,这反映出生长为数量性状。进一步对所检测位点进行双倍型分析,结果显示具有四个优势基因型且全部杂合优势基因型的4567(XXXXXXACCTCTCT)组的增重最快,比0优势基因型的增重快达26.6%,可以考虑用于今后的快增长建鲤的选育计划中。此外,双倍型分析结果还表明,不同位点之间可能存在或颉抗或协同的互作,如1和4之间存在拮抗关系,因此在今后的选育计划中,在考虑标记富集的情况下还应考虑标记之间的关系。宜在选择互为协同作用优势基因型的前提下,富集尽可能多的SNP标记。 展开更多

关键词 建鲤 鸟氨酸脱羧酶 基因型 SNP-增重相关分析

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ODC反义RNA表达质粒的构建及其对人肺鳞癌细胞生长特性的影响 被引量：3

3

作者 关钧 范慕贞 曹淑兰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第1期21-24,共4页

鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的限速酶,其活性的异常升高及多胺堆积与恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关.作者构建一个能表达人ODC反义RNA的真核表达质粒pCMV/ODCas,用磷酸钙沉淀法将其导入人肺鳞癌细胞系LTEP-78(L78),经G... 鸟氨酸脱羧酶(ODC)是多胺生物合成途径中的限速酶,其活性的异常升高及多胺堆积与恶性肿瘤的发生、发展及转移密切相关.作者构建一个能表达人ODC反义RNA的真核表达质粒pCMV/ODCas,用磷酸钙沉淀法将其导入人肺鳞癌细胞系LTEP-78(L78),经G418筛选,获两株转染细胞系L78/ODCasl和L78/ODCas4.与亲本细胞相比,其生长速度减慢;软琼脂集落形成能力减弱,DNA、RNA及蛋白质等生物合成受到抑制,ODC酶活性降低.经Southern blot及PCR分析,进一步证明了上述变化与ODC反义序列稳定完整地整合到转染细胞基因组中有关. 展开更多

关键词 odc 肺鳞癌细胞 反义RNA 表达质粒 转染细胞 多胺生物合成 集落形成 基因组 DNA 磷酸钙沉淀法

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大鼠全脑缺血再灌注后皮质和海马中ODC的表达 被引量：1

4

作者 万新 姜冰 +3 位作者 刘运生 刘宏伟 吴光勇 李文泽 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期534-536,共3页

目的 :检测大鼠全脑缺血再灌注不同时相皮质、海马中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)的表达 ,探讨脑缺血再灌注后ODC活性增高的机制。方法 :采用改良的四血管关闭法复制大鼠全脑缺血再灌注 2h ,4h ,6h ,8h动物模型 ;用逆转录PCR(RT PCR)方法检测不... 目的 :检测大鼠全脑缺血再灌注不同时相皮质、海马中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)的表达 ,探讨脑缺血再灌注后ODC活性增高的机制。方法 :采用改良的四血管关闭法复制大鼠全脑缺血再灌注 2h ,4h ,6h ,8h动物模型 ;用逆转录PCR(RT PCR)方法检测不同时相皮质、海马标本中ODCmRNA的表达。结果 :对照组大鼠皮质、海马中未检测出ODCmRNA的表达 ;实验组大鼠皮质、海马中检测出有ODCmRNA的表达 ,且不同时相的表达差异具有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论 :大鼠全脑缺血再灌注后皮质、海马中ODCmRNA表达明显增加 ,脑缺血再灌注后ODC活性明显增加可能是ODCmRNA表达增加。 展开更多

关键词 海马 大鼠 全脑缺血再灌注 odc 皮质 MRNA表达 时相 表达差异 鸟氨酸脱羧酶 标本

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ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体对食管癌细胞凋亡影响的研究(英文) 被引量：1

5

作者 田辉 徐杰 +3 位作者 刘贤锡 张冰 李文军 宋旭 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第2期238-243,共6页

为探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,应用MTT法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响,采用Westernblot和HPLC的方法分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中OD... 为探讨ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,应用MTT法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响,采用Westernblot和HPLC的方法分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,同时应用原位末端标记(TUNEL)法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响,透射电镜进一步观察细胞超微结构的改变.实验结果显示,应用MTT法观察发现Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖有显著抑制作用.以Ad-ODC-AdoMetDCas感染食管癌Eca109细胞,可明显抑制食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC基因表达.HPLC结果显示,食管癌Eca109细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,细胞内3种多胺含量都明显降低.TUNEL标记检测结果显示Ad-ODC-AdoMetDCas可明显引起食管癌Eca109细胞凋亡.透射电镜观察到典型的细胞凋亡特征(表现细胞体积缩小,核皱缩、碎裂,染色质呈块状边集等).实验表明,ODC和AdoMetDC双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)具有显著抑制食管癌细胞生长增殖,降低细胞多胺合成,促进细胞凋亡,为探讨食管癌基因治疗的可行性提供实验依据. 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 多胺 食管癌ECA109细胞 基因治疗

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双反义腺病毒载体Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌细胞凋亡及抑制细胞生长影响的研究 被引量：1

6

作者 徐杰 田辉 +3 位作者 刘贤锡 张冰 李文军 宋旭 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期1359-1363,共5页

目的:探讨双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用及抑制细胞生长的影响。方法:应用MTT法测定不同MOI的腺病毒对肺癌Eca109细胞的基因转染效率,观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响;采用Wes... 目的:探讨双反义腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞凋亡作用及抑制细胞生长的影响。方法:应用MTT法测定不同MOI的腺病毒对肺癌Eca109细胞的基因转染效率,观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响;采用Western印迹和HPLC的方法分别检测腺病毒载体对食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,采用流式细胞术检测腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA(Ad-ODCas)和Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞周期分布的影响,同时应用原位末端标记(TUNEL)法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞凋亡作用的影响。结果:MTT法实验表明,Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109细胞生长增殖有显著抑制作用(P<0.05)。以Ad-ODC-AdoMetDCas感染食管癌Eca109细胞,可明显抑制食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC基因表达(P<0.05)。流式细胞术结果显示感染了Ad-ODC-AdoMetDCas的食管癌Eca109细胞周期阻滞在G1期。HPLC结果显示,食管癌Eca109细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后,细胞内3种多胺含量均明显降低(P<0.05)。TUNEL标记检测结果显示,Ad-ODC-AdoMet-DCas可明显引起食管癌Eca109细胞凋亡(P<0.05)。结论:Ad-ODC-AdoMetDCas能显著抑制食管癌细胞生长,促进细胞凋亡,为探讨食管癌基因治疗的可行性提供实验依据。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 多胺 食管肿瘤 基因治疗

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芳维A酸乙酯对小鼠皮肤乳头状瘤形成过程中ODC、PCNA的影响 被引量：1

7

作者 王儒鹏 张国威 +1 位作者 何云志 黄海 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期683-685,共3页

目的　通过测定小鼠二阶段皮肤乳头状瘤模型中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)、增殖细胞核抗原 (PCNA)的变化 ,探讨芳维A酸乙酯的癌化学预防作用机制。方法　ODC作用于14 C标记的鸟氨酸底物后释放14 CO2 ,通过测定14 CO2 生成量反映标本中ODC活性 ... 目的　通过测定小鼠二阶段皮肤乳头状瘤模型中鸟氨酸脱羧酶 (ODC)、增殖细胞核抗原 (PCNA)的变化 ,探讨芳维A酸乙酯的癌化学预防作用机制。方法　ODC作用于14 C标记的鸟氨酸底物后释放14 CO2 ,通过测定14 CO2 生成量反映标本中ODC活性 ;用免疫组化方法检测样本中PCNA表达情况。结果　芳维A酸乙酯对肿瘤标志物ODC、PCNA有明显的抑制作用。结论　芳维A酸乙酯对ODC、PCNA的抑制作用是其预防小鼠乳头状瘤发生的重要机制 ,它具有肯定的癌化学预防作用。 展开更多

关键词 芳维A酸乙酯 皮肤乳头状瘤 鸟氨酸脱羧酶 增殖细胞核抗原 odc PCNA 小鼠

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ODC基因反义RNA对肺癌A-549细胞生长抑制作用的体外研究 被引量：1

8

作者 李林 田辉 +2 位作者 刘贤锡 张岩 张冰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第16期905-907,911,共4页

目的:探讨重组腺病毒rAd-ODC/Ex3as对肺癌A-549细胞的体外抑制作用。方法:利用报告基因GFP测定病毒感染效率,采用MTT法实验观察rAd-ODC/Ex3as对肺癌细胞A-549生长增殖的影响,用WesternBlot检测rAd-ODC/Ex3as是否抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)... 目的:探讨重组腺病毒rAd-ODC/Ex3as对肺癌A-549细胞的体外抑制作用。方法:利用报告基因GFP测定病毒感染效率,采用MTT法实验观察rAd-ODC/Ex3as对肺癌细胞A-549生长增殖的影响,用WesternBlot检测rAd-ODC/Ex3as是否抑制鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的表达,并应用TUNEL标记检测法观察rAd-ODC/Ex3as对细胞凋亡的影响。结果:当MOI为50时,腺病毒感染A-549细胞的效率约为75%;WesternBlot证实rAd-ODC/Ex3as可抑制ODC基因的表达;rAd-ODC/Ex3as以20MOI感染肺癌A-549细胞可明显抑制其生长增殖。TUNEL标记检测结果证实rAd-ODC/Ex3as可引起A-549细胞凋亡。结论:rAd-ODC/Ex3as在体外能有效地干扰ODC基因的表达,并可抑制肺癌A-549细胞的生长和增殖,诱导其凋亡,有望成为治疗肺癌的基因药物。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒载体 肺肿瘤 A-549细胞 基因治疗

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siRNA-757干扰旋毛虫Ts-ODC基因对其抗酸能力的影响

9

作者 薄禄琪 王雪莹 +7 位作者 侯嘉茗 张力 张鉴慧 阮入琳 张博涵 王爽 宋铭忻 张子群 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期2114-2125,共12页

旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最... 旨在探究旋毛虫肌幼虫体内是否存在鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究根据GenBank中Ts-ODC全序列基因组设计三条特异性siRNA分子,采用脂质体浸染转染的方法将其分别转染至旋毛虫肌幼虫体内,使用qPCR、Western blot和间接免疫荧光试验,筛选最佳干扰siRNA分子及最佳干扰条件;并在pH 1.5、2.5、4.5和6.6的条件下将肌幼虫分别培养0.5、1和2 h,从肌幼虫Ts-ODC基因转录水平、酶活性及存活率等方面分析Ts-ODC基因干扰对旋毛虫肌幼虫抗酸能力的影响;将Ts-ODC基因被干扰的旋毛虫肌幼虫感染小鼠,在7和42 d时分别收集成虫和肌幼虫,分别计算其减虫率;将子一代肌幼虫在pH 2.5的酸性条件下培养2 h,计算其存活率,对Ts-ODC基因干扰的遗传性进行分析。结果显示,Ts-ODC siRNA-757为最佳干扰分子,转染12 h、浓度为2μmol·L^(-1)培养3 d时为最佳干扰条件;各组pH 2.5培养2 h时Ts-ODC基因转录水平最高,pH 1.5培养2 h时虫体的存活率明显低于其他培养条件(P<0.01),pH 4.5培养0.5 h时虫体体内酶活性最高;转染Ts-ODC siRNA-757的肌幼虫接种小鼠后,7 d时成虫和42 d时肌幼虫的减虫率分别为58.95%和65.91%;其子一代肌幼虫在pH 2.5的培养液内培养2 h时其存活率为49%。综上表明,旋毛虫肌幼虫体内具有鸟氨酸依赖型抗酸系统,本研究首次通过siRNA技术干扰旋毛虫肌幼虫Ts-ODC基因,且证实干扰Ts-ODC基因可降低肌幼虫抗酸能力,为后期旋毛虫病的防治提供新思路。 展开更多

关键词 旋毛虫 鸟氨酸脱羧酶 RNA干扰 抗酸系统

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鸟氨酸脱羧酶及多胺对细胞增殖影响 被引量：5

10

作者 李恩中 宁黔冀 +1 位作者 李超堃 张红绪 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2004年第1期113-114,118,共3页

鸟氨酸脱羧酶(Ornithinedecarboxylase,ODC)是多胺生物合成中的限速酶,ODC活性和多胺水平对细胞增殖起关键作用.本文就近年来的有关报道,对它们的结构、对细胞增殖的影响及其作用机理加以综述.

关键词 鸟氨酸脱羧酶 多胺 细胞增殖 腐胺 限速酶

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甘草次酸对早期断奶仔猪内脏器官发育的影响 被引量：8

11

作者 何子双 胡元亮 +3 位作者 印遇龙 黄瑞林 李飞务 王贵平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期989-993,共5页

7日龄断奶长×大仔公猪,以代乳粉配制代乳液饲养。12头仔猪9日龄按体重随机均分为对照组(基础日粮)和甘草次酸(GA)组(代乳粉添加200 mg/kg的GA),每组6头。连续饲喂12 d。仔猪21日龄称重后处死,测定内脏指数、小肠黏膜上皮细胞蛋白... 7日龄断奶长×大仔公猪,以代乳粉配制代乳液饲养。12头仔猪9日龄按体重随机均分为对照组(基础日粮)和甘草次酸(GA)组(代乳粉添加200 mg/kg的GA),每组6头。连续饲喂12 d。仔猪21日龄称重后处死,测定内脏指数、小肠黏膜上皮细胞蛋白质含量、空肠和回肠黏膜绒毛高度、隐窝深度和固有层厚度以及空肠上皮细胞鸟氨酸脱羧酶活性。结果表明,与对照组相比,GA组肝脏指数、小肠质量/长度比、空肠和回肠绒毛高度及回肠隐窝深度显著增加(P<0.05),空肠上皮细胞鸟氨酸脱羧酶活性显著增强(P<0.01)。提示GA促进了仔猪小肠和肝脏的发育,改善黏膜结构;提高上皮细胞鸟氨酸脱羧酶活性可能是GA影响小肠发育的分子机制之一。 展开更多

关键词 甘草次酸 仔猪 内脏指数 形态学 鸟氨酸脱羧酶

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多胺在癌症治疗中的作用及机制 被引量：8

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作者 马容 陈咨余 +1 位作者 姜冬梅 康波 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期46-50,共5页

多胺是真核细胞生长及发育的必需物质,多胺代谢功能的紊乱与癌症发生密切相关。研究表明,抑制多胺生物合成途径的限速酶鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶能有效缓解癌症的发展。此外,利用多胺跨膜转运系统的特异性,可将多胺类似物和... 多胺是真核细胞生长及发育的必需物质,多胺代谢功能的紊乱与癌症发生密切相关。研究表明,抑制多胺生物合成途径的限速酶鸟氨酸脱羧酶和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶能有效缓解癌症的发展。此外,利用多胺跨膜转运系统的特异性,可将多胺类似物和缀合物转运至细胞内,通过降低细胞内多胺水平,调节组蛋白乙酰化和甲基化水平,促进肿瘤细胞凋亡等途径发挥其抗癌治疗的作用。综述了通过抑制多胺合成酶以及利用多胺类似物和缀合物治疗癌症的研究进展,以期为今后利用多胺代谢途径靶向治疗癌症的研究提供参考。 展开更多

关键词 多胺 鸟氨酸脱羧酶 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶 多胺类似物 癌症

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鸟氨酸脱羧酶结构、功能及表达调控研究进展 被引量：7

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作者 陈咨余 马容 +3 位作者 康波 姜冬梅 何珲 范樱川 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第8期40-44,共5页

多胺对细胞生长、存活以及增殖具有重要的调控作用,体内多胺水平变化与疾病和衰老的关系密切。鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)是多胺生物合成途径中的第一个限速酶,能催化细胞内鸟氨酸脱羧转化成腐胺。因此,ODC可通过对细... 多胺对细胞生长、存活以及增殖具有重要的调控作用,体内多胺水平变化与疾病和衰老的关系密切。鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase,ODC)是多胺生物合成途径中的第一个限速酶,能催化细胞内鸟氨酸脱羧转化成腐胺。因此,ODC可通过对细胞内多胺水平的调节来参与调控细胞增殖过程。近年来,对ODC功能的研究取得了一定的进展,特别是在ODC调控多胺水平、细胞增殖、癌症以及ODC表达调控等方面研究较多。文章对ODC结构、功能及其表达调控的研究进行了评述,并对今后ODC的深入研究进行了展望。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 多胺 细胞增殖 肿瘤 表达调控

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多胺在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及意义 被引量：10

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作者 林岩 徐长庆 +4 位作者 赵雅君 王丽娜 席玉慧 李鸿珠 李光伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期417-421,共5页

目的:研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶(SSAT)在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱(RP-HPLC)、RT-PCR和Western blotting结... 目的:研究多胺、鸟氨酸脱羧酶(ODC)及精脒/精胺乙酰基转移酶(SSAT)在异丙肾上腺素所致大鼠心肌肥厚中的作用及机制。方法:异丙肾上腺素(ISO)皮下注射复制大鼠心肌肥厚模型,应用反向高效液相色谱(RP-HPLC)、RT-PCR和Western blotting结合图像分析系统,分别检测ISO作用不同时点大鼠心肌组织多胺含量、ODC和SSAT mRNA和蛋白的表达。结果:与对照组比较,心脏重量参数在ISO注射后7d时显著增加,ISO注射后1d时腐胺含量增加(P<0.05),5d、7d时显著增加(P<0.01);精脒含量在ISO注射后3d时开始增加,ISO注射后7d时增加显著(P<0.01),精胺含量略有增多(P<0.05),总多胺池显著增加。心肌组织ODC和SSAT的mRNA表达在ISO注射后1d时升高(P<0.05或P<0.01),并持续在较高水平。心肌组织ODC和SSAT的蛋白表达分别在ISO注射后1d和ISO注射后5d时升高,ISO注射后7d时显著升高(P<0.01)。结论:大鼠心肌组织多胺含量增加和ODC、SSAT的表达增强可能参与ISO所致心肌肥厚的病理过程。 展开更多

关键词 多胺 鸟氨酸脱羧酶 精脒/精胺乙酰基转移酶 心肌肥厚 异丙肾上腺素

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鸟氨酸脱羧酶/多胺系统在大鼠缺血预适应心肌保护中的作用 被引量：5

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作者 赵雅君 张伟华 +9 位作者 王艳丽 李红珠 王丽娜 李弘 韩丽平 林岩 吴博 李宏霞 徐曼 徐长庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2295-2301,共7页

目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ODC)/多胺系统在缺血预适应(IPC)心肌保护中的作用。方法:应用离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注模型。心脏随机分为6组:对照组(control)、缺血/再灌注组(IR)、弱缺血预适应组(IPCw)、强缺血预适应组(IPCs... 目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ODC)/多胺系统在缺血预适应(IPC)心肌保护中的作用。方法:应用离体灌流大鼠心脏复制模拟心肌缺血/再灌注模型。心脏随机分为6组:对照组(control)、缺血/再灌注组(IR)、弱缺血预适应组(IPCw)、强缺血预适应组(IPCs)、IPCw+多胺抑制剂组(DF-EG-IPCw)和IPCs+多胺抑制剂组(DF-EG-IPCs)。免疫印迹法定量分析多胺合成限速酶鸟氨酸脱羧酶(ODC)的表达;高效液相色谱测定心肌组织中的多胺(腐胺、精脒、精胺)含量;Powerlab多导生理记录系统记录心脏功能;氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测心肌梗死面积;TUNEL方法检测细胞凋亡率,比较其中的差异性。结果:(1)与对照组比,IR组ODC表达下调,腐胺含量增加,精胺含量减少,总多胺池减少(P<0.05),此时心功能下降(LVDP、HR、CF均低于对照组,P<0.05),心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率增加(P<0.05);(2)与IR组比,弱及强缺血预处理组(IPCw、IPCs)心肌ODC表达上调,腐胺含量减少,精胺含量增加,总多胺池增加(P<0.05或P<0.01),此时大鼠心功能有明显改善(LVDP、HR、CF与IR组比,P<0.05),心肌梗死面积及心肌细胞凋亡率均明显降低(P<0.01);(3)给予多胺抑制剂后,心肌ODC表达,腐胺、精脒、精胺及总多胺池含量均明显降低(DF-EG-IPCw组vsIPCw组;DF-EG-IPCs组vsIPCs组,P<0.05或P<0.01),心功能明显下降(P<0.05),心肌梗死面积及细胞凋亡率均明显增加(P<0.05)。结论:缺血预适应能明显上调大鼠心肌ODC/多胺系统,减轻缺血/再灌注心肌损伤;多胺合成代谢抑制剂取消了预适应介导的心功能改善、缩小心肌梗死面积及减少心肌细胞凋亡的作用,提示ODC/多胺系统可能参与了缺血预适应介导的心肌保护作用。 展开更多

关键词 心脏 缺血预处理 鸟氨酸脱羧酶 多胺 大鼠

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鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对前列腺癌细胞生长的抑制作用 被引量：5

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作者 张岩 刘贤锡 +2 位作者 张冰 胡海燕 龚磊 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期128-133,共6页

为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染... 为研究鸟氨酸脱羧酶 (ODC)基因反义RNA对前列腺癌细胞的生长抑制作用 ,将表达ODC第 3外显子反义RNA的重组腺病毒rAd ODC Ex3as分别感染前列腺癌细胞株PC 3和LNCap .通过MTT法观察其对前列腺癌细胞增殖的影响 ,并确定不同细胞合适的感染滴度 ,再采用Western印迹和流式细胞术检测rAd ODC Ex3as对细胞中ODC表达的抑制作用、对细胞周期和凋亡的影响以及与CDK抑制物p2 1的关系 .实验显示 ,rAd ODC Ex3as分别以 5 0MOI、2 5MOI感染PC 3和LNCap细胞可明显抑制其生长增殖 ,而不引起细胞毒性作用 ;其对两种细胞中ODC表达的抑制作用分别为4 5 %和 5 9% .流式细胞DNA含量分析证实 ,rAd ODC Ex3as可引起PC 3和LNCap细胞周期G1期阻滞 ,但并未引起凋亡 .通过Western印迹发现 ,细胞中ODC表达的降低可诱导p2 1蛋白的过表达 .结果表明 ,rAd ODC Ex3as在体外能有效地干扰ODC基因的表达 ,并通过诱导p2 1的过表达使其细胞周期停于G1期 ,从而抑制前列腺癌细胞PC 3和LNCap的增殖 ,为其进一步基因治疗的研究打下基础 . 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 腺病毒 基因治疗 反义RNA 前列腺癌细胞

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鸟氨酸脱羧酶和S-甲硫氨酸脱羧酶双反义RNA腺病毒抑制食管癌细胞的增殖和侵袭 被引量：2

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作者 宋旭 田辉 +3 位作者 刘贤锡 张冰 李文军 徐杰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第4期316-320,共5页

目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)和S-甲硫氨酸脱羧酶(s-adenosylmethionine decarboxylase,AdoMetDC)的双反义RNA腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞增殖和侵袭的抑制作用。方法:重组腺病毒载体Ad-OD... 目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)和S-甲硫氨酸脱羧酶(s-adenosylmethionine decarboxylase,AdoMetDC)的双反义RNA腺病毒载体(Ad-ODC-AdoMetDCas)对食管癌Eca109细胞增殖和侵袭的抑制作用。方法:重组腺病毒载体Ad-ODC-AdoMetDCas感染食管癌Eca109细胞,应用Western blotting和HPLC分别检测双反义RNA腺病毒对食管癌细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺合成的抑制作用。采用活细胞计数法观察其对食管癌Eca109细胞生长增殖的影响,采用Matrigel侵袭实验检测重组腺病毒载体感染对食管癌Eca109细胞侵袭活性的影响。同时应用裸鼠皮下移植瘤模型观察Ad-ODC-AdoMetDCas对移植食管癌生长增殖的抑制作用。结果:Western bloting证实Ad-ODC-AdoMetDCas可明显抑制食管癌Eca109细胞中ODC和AdoMetDC蛋白的表达,HPLC结果显示食管癌Eca109细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas 后细胞内腐胺、精胺、精脒等3种多胺含量都明显降低(P<0.01)。活细胞计数法表明Ad-ODC-AdoMetDCas对食管癌Eca109 细胞生长增殖有明显抑制作用(P<0.01),Matrigel侵袭实验结果显示Ad-ODC-AdoMetDCas可显著降低食管癌Eca109细胞的体外侵袭能力(P<0.01)。体内实验显示,双反义RNA腺病毒载体对已形成的裸鼠皮下移植瘤具有明显的抑制作用(P< 0.05或P<0.01)。结论:ODC和AdoMetDC双反义RNA重组腺病毒能显著抑制食管癌细胞的增殖和侵袭,具有食管癌基因治疗临床应用的潜在价值。 展开更多

关键词 鸟氨酸脱羧酶 S-甲硫氨酸脱羧酶 反义RNA 重组腺病毒 食管癌 基因治疗

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产蛋前期和产蛋期鹅HPG轴OAZ1和OAZ2基因表达的研究 被引量：4

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作者 马容 康波 +1 位作者 姜冬梅 何珲 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2015年第2期44-48,共5页

【目的】探讨产蛋前期和产蛋期鹅HPG轴中OAZ1和OAZ2基因表达的差异。【方法】选取健康的产蛋前期和产蛋期四川白鹅母鹅各3只,采集下丘脑、垂体和卵巢组织样品,提取总RNA并反转录合成cDNA,应用实时荧光定量PCR检测产蛋前期和产蛋期四川... 【目的】探讨产蛋前期和产蛋期鹅HPG轴中OAZ1和OAZ2基因表达的差异。【方法】选取健康的产蛋前期和产蛋期四川白鹅母鹅各3只,采集下丘脑、垂体和卵巢组织样品,提取总RNA并反转录合成cDNA,应用实时荧光定量PCR检测产蛋前期和产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体、卵巢组织中OAZ1和OAZ2基因的相对表达量。【结果】在产蛋前期和产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体和卵巢组织中,OAZ1和OAZ2基因均有表达,并且产蛋期OAZ1和OAZ2表达量均极显著高于产蛋前期(P<0.01),产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体和卵巢中OAZ1的表达量分别是产蛋前期的1.79倍(P<0.01)、2.96倍(P<0.01)和3.48倍(P<0.01);产蛋期四川白鹅下丘脑、垂体和卵巢中OAZ2的表达量分别是产蛋前期的2.66倍(P<0.01)、1.38倍(P<0.01)和2.03倍(P<0.01)。【结论】OAZ1和OAZ2可在HPG轴的各级水平发挥其调控鹅繁殖过程的功能,OAZ1主要参与卵巢功能的调控,而OAZ2主要参与下丘脑功能的调控。 展开更多

关键词 四川白鹅 鸟氨酸脱羧酶抗酶1(OAZ1) 鸟氨酸脱羧酶抗酶2(OAZ2) 多胺 下丘脑-垂体-性腺轴 实时荧光定量PCR

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卵巢癌组织中鸟氨酸脱羧酶基因过度扩增及其临床意义 被引量：3

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作者 丁翔 李红霞 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第3期289-292,共4页

目的检测鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因在卵巢癌组织、癌旁组织及卵巢良性肿瘤中的表达,探讨ODC过度扩增在卵巢肿瘤发生、发展中的作用。方法应用RT-PCR方法检测40例卵巢癌组织、15例癌旁正常卵巢组织、15例卵巢良性... 目的检测鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因在卵巢癌组织、癌旁组织及卵巢良性肿瘤中的表达,探讨ODC过度扩增在卵巢肿瘤发生、发展中的作用。方法应用RT-PCR方法检测40例卵巢癌组织、15例癌旁正常卵巢组织、15例卵巢良性肿瘤中ODC基因的表达,比较ODC在不同卵巢组织中的阳性表达率。结果ODC在癌旁正常卵巢组织中表达率为26.67%,在15例卵巢良性肿瘤组织中均无表达,在卵巢癌组织中表达率为65%。统计学分析结果显示ODC在卵巢癌组织的表达明显高于癌旁正常卵巢组织和卵巢良性肿瘤,差异均有统计学意义(P<0.05);ODC在浆液性癌表达阳性率为83.33%,较其他类型卵巢恶性肿瘤的50.00%明显增加,差异有统计学意义(P=0.028)。在Ⅰ,Ⅱ期患者ODC阳性率为54.55%,其中强阳性2例;Ⅲ,Ⅳ期患者ODC阳性率68.97%,其中强阳性17例,两者相比差异无统计学意义(P=0.469),而强阳性率Ⅲ,Ⅳ期为58.62%明显高于Ⅰ,Ⅱ期的18.18%,差异有统计学意义(P=0.034)。在中、高分化癌组织中ODC强阳性表达率为20%,低分化癌组织中强阳性表达率为64%,差异有统计学意义(P=0.018)。在癌旁正常卵巢组织中ODC表达较卵巢良性肿瘤有增高趋势,但差异无统计学意义(P=0.10)。结论ODC过度扩增可能在卵巢癌的发生、发展中起重要作用。 展开更多

关键词 卵巢癌 鸟氨酸脱羧酶 基因

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地塞米松对大鼠再生肝鸟氨酸脱羧酶活性及其基因表达的影响 被引量：1

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作者 张群芝 陈献春 宁黔冀 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期132-134,139,共4页

采用高效液相色谱和原位杂交技术研究了地塞米松对大鼠再生肝鸟氨酸脱羧酶(ODC)及ODCmRNA表达的影响.结果显示,大鼠完整肝脏中ODC水平较低,部分肝切除(PH)后2 h,不同处理组ODC活性开始升高,5 h达到最高值,其中:去肾上腺+NaCl组的酶活性... 采用高效液相色谱和原位杂交技术研究了地塞米松对大鼠再生肝鸟氨酸脱羧酶(ODC)及ODCmRNA表达的影响.结果显示,大鼠完整肝脏中ODC水平较低,部分肝切除(PH)后2 h,不同处理组ODC活性开始升高,5 h达到最高值,其中:去肾上腺+NaCl组的酶活性高于对照组(去肾上腺假手术组),而去肾上腺+地塞米松处理组的酶活性低于对照组;24 h恢复到肝切除前水平.完整肝脏的ODC mRNA水平极低,PH后表达量迅速增加,5 h达到最大值,不同处理组mRNA水平的高低顺序与酶活性一致,12 h降至肝切除前水平.以上结果表明,在PH诱导的再生肝中,ODC mRNA表达量的增加或减少是造成ODC活性改变的原因之一,地塞米松对ODC活性及其mRNA的表达具有抑制作用,且主要表现在肝再生的早期. 展开更多

关键词 地塞米松 大鼠 再生肝 鸟氨酸脱羧酶

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