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oridonin部分通过TNFα信号转导途径诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡 被引量:4
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作者 黄健 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期471-475,共5页
目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24&... 目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24·8±1·2)μmol·L-1和(20·9±1·9)μg·L-1。Oridonin和TNFα均能引起L929细胞凋亡形态学变化,TNFα处理过的细胞在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的凋亡DNA梯状条带,但是oridonin处理的细胞却不能,称之为非典型凋亡;caspase-3,-8抑制剂和caspase家族抑制剂能明显得促进25μmol·L-1oridonin和20μg·L-1TNFα诱导的L929细胞凋亡,caspase-9抑制剂只能促进oridonin诱导的L929细胞凋亡;ERK的抑制剂PD98059能明显的抑制oridonin和TNFα诱导的L929细胞凋亡,但是p38的抑制剂SB203580只能抑制TNFα诱导的L929细胞凋亡;在L929细胞中oridonin能促进内源性pro-TNFα的表达和其上游蛋白IκB的磷酸化。结论Oridonin通过激活转录因子NF-κB而促进内源性pro-TNFα的表达,并且部分通过细胞因子TNFα信号转到途径诱导L929细胞凋亡。 展开更多
关键词 ofidonin TNFΑ L929细胞 凋亡 CASPASE MAPK
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冬凌草甲素对血小板功能的影响及相关作用机制研究
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作者 李玉 闫荣 +2 位作者 杨梦楠 周康熙 戴克胜 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第4期1104-1112,共9页
目的:探究冬凌草甲素对血小板功能的影响及相关机制。方法:分离健康成年志愿者和小鼠洗涤血小板,将血小板与不同浓度的冬凌草甲素(2.5、5和10μmol/L)在体外进行共孵育,流式细胞术检测血小板表面P-选择素表达和整合素αIIbβ3活化情况,... 目的:探究冬凌草甲素对血小板功能的影响及相关机制。方法:分离健康成年志愿者和小鼠洗涤血小板,将血小板与不同浓度的冬凌草甲素(2.5、5和10μmol/L)在体外进行共孵育,流式细胞术检测血小板表面P-选择素表达和整合素αIIbβ3活化情况,通过血小板聚集仪检测血小板在不同刺激剂作用下的聚集功能,通过蛋白免疫印迹检测AKT Ser473的磷酸化水平。三氯化铁损伤小鼠肠系膜建立动脉血栓模型,切断小鼠尾部建立尾出血模型。小鼠腹腔注射冬凌草甲素(10 mg/kg)检测其对血栓与止血的影响。结果:冬凌草甲素抑制了血小板P-选择素表达和整合素αIIbβ3活化。在不同刺激剂的作用下,冬凌草甲素浓度依赖性地抑制血小板聚集。不同浓度冬凌草甲素处理组AKT Ser473的磷酸化水平均降低。冬凌草甲素能够显著延长小鼠肠系膜动脉血栓形成的时间,但不影响尾出血时间。结论:冬凌草甲素通过抑制AKT磷酸化,从而抑制血小板的活化、聚集功能及体内血栓形成,有望作为潜在的抗血小板药物。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 血小板 血栓 活化
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玉米醇溶蛋白与冬凌草甲素的互作机制及其纳米颗粒制备与表征
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作者 王伊 郭睿阳 +4 位作者 沈万鑫 张斐帆 宋香蕾 纠敏 汪伦记 《食品工业科技》 北大核心 2025年第20期154-163,共10页
本研究以玉米醇溶蛋白(Zein)为载体,构建负载冬凌草甲素(Oridonin,ORI)的纳米输送载体以提高其溶解度和生物利用度。首先,利用多光谱法研究了ORI与玉米醇溶蛋白两者的互作机制,然后采用反溶剂法制备了玉米醇溶蛋白和ORI的纳米颗粒(Zein-... 本研究以玉米醇溶蛋白(Zein)为载体,构建负载冬凌草甲素(Oridonin,ORI)的纳米输送载体以提高其溶解度和生物利用度。首先,利用多光谱法研究了ORI与玉米醇溶蛋白两者的互作机制,然后采用反溶剂法制备了玉米醇溶蛋白和ORI的纳米颗粒(Zein-ORI-NPs),并运用激光粒度仪、扫描电镜、差示扫描量热仪、X射线衍射分析和傅里叶红外光谱等对Zein-ORI-NPs进行表征。结果表明,ORI以非辐射能量转移的静态猝灭方式猝灭玉米醇溶蛋白的荧光,结合位点数n接近于1,显示ORI与玉米醇溶蛋白以1:1形式结合,分子间相互作用力为氢键和范德华力,且二者的作用是自发过程。多光谱分析也证实ORI的加入影响了玉米醇溶蛋白中的色氨酸残基周围的微环境导致其构象发生改变。制备的Zein-ORI-NPs的形态呈球形,粒径小,分布均匀,呈现较好的稳定性,对ORI的包封率达到70%以上。氢键等非共价作用是Zein-ORI-NPs形成的主要驱动力,ORI以非晶体状态成功包埋于纳米粒子中,提高了纳米颗粒的热稳定性。本研究结果为设计和开发玉米醇溶蛋白递送系统用于封装和保护ORI提供参考,也为ORI功能性产品开发奠定基础。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 玉米醇溶蛋白 互作机制 纳米颗粒
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低强度脉冲超声协同冬凌草甲素通过激活PIEZO1诱导胰腺癌细胞铁死亡的机制
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作者 孙陛航 郭煜君 +3 位作者 祁玉麟 姚丹 陈文直 陈念芝 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2160-2170,共11页
目的基于铁死亡探讨冬凌草甲素(Ori)对胰腺癌的影响,以及低强度脉冲超声(LIPUS)在协同增效中的作用机制。方法体外实验首先分为对照组、不同浓度的Ori组,通过CCK-8法检测不同浓度Ori对PANC-1增殖活力的影响。其次实验分为对照组、Ori组... 目的基于铁死亡探讨冬凌草甲素(Ori)对胰腺癌的影响,以及低强度脉冲超声(LIPUS)在协同增效中的作用机制。方法体外实验首先分为对照组、不同浓度的Ori组,通过CCK-8法检测不同浓度Ori对PANC-1增殖活力的影响。其次实验分为对照组、Ori组,通过流式细胞术检测细胞内Fe^(2+)、ROS含量,试剂盒检测细胞内二醛(MDA)、而谷胱甘肽(GSH)和三磷酸腺苷(ATP)浓度,Western blotting检测细胞内GPX4、Nrf2、HO-1蛋白表达。随后分为对照组、铁死亡抑制剂组(Fer-1)、Ori组以及Ori联合Fer-1组,通过CCK-8法检测各组对PANC-1增殖活力的影响。最后分为对照组、Ori组、LIPUS组及联合组,通过Western blotting检测细胞内PIEZO1蛋白表达。体内实验构建C57BL/6J小鼠胰腺癌模型,实验分组分为对照组、Ori组、LIPUS组及联合组,通过检测皮下移植瘤小鼠肿瘤的苏木精-伊红染色(HE)、免疫组织化学Ki67染色评估肿瘤组织病理变化及细胞增殖活性,Western blotting及免疫荧光染色(IF)检测小鼠肿瘤内GPX4表达。结果与对照组相比,Ori可以抑制PANC-1细胞增殖(P<0.001),细胞内Fe^(2+)、ROS、MDA升高(P<0.05),GSH和ATP下降(P<0.001)。与对照组相比,Ori组GPX4蛋白表达下降(P<0.01),HO-1、Nrf2蛋白表达升高(P<0.05)。与Ori组相比,Ori联合LIPUS组细胞活力下降(P<0.01)。比较各组皮下移植瘤小鼠肿瘤发现,与Ori组相比,Ori联合LIPUS组进一步抑制肿瘤的生长(P<0.01)。Ki67染色表明联合组相较于Ori组细胞增殖活性更弱。与Ori组相比,联合组GPX4蛋白表达及荧光强度均更低(P<0.05)。与对照组相比,LIPUS组和Ori组PIEZO1蛋白表达均升高(P<0.005),与Ori组相比,联合组PIEZO1蛋白表达升高更为显著(P<0.01)。结论LIPUS协同Ori通过激活PIEZO1,通过Nrf2/HO-1/GPX4通路促进胰腺癌细胞铁死亡。 展开更多
关键词 低强度脉冲超声 冬凌草甲素 铁死亡 PIEZO1 胰腺癌
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冬凌草甲素通过PPARα/CPT-1通路改善非酒精性脂肪肝的作用研究
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作者 任茹梦 余丽瑞 +2 位作者 胡俊杰 方颖 李嫚 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第5期828-836,共9页
本研究旨在探究冬凌草甲素(oridonin,ORI)改善非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。采用油酸(oleic acid,OA)诱导HepG2、Huh-7细胞构建NAFLD模型,运用CCK-8细胞活力检测法、油红O染色法、总胆固醇(tota... 本研究旨在探究冬凌草甲素(oridonin,ORI)改善非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制。采用油酸(oleic acid,OA)诱导HepG2、Huh-7细胞构建NAFLD模型,运用CCK-8细胞活力检测法、油红O染色法、总胆固醇(total cholesterol,TC)和甘油三酯(triglyceride,TG)含量测定法,评价ORI对OA诱导的细胞脂肪变性的作用。通过网络药理学方法挖掘ORI治疗NAFLD的潜在靶点和作用通路。用HepG2、Huh-7细胞脂肪变性模型验证ORI改善NAFLD的机制。实验结果表明ORI在5、10μmol/L能改善HepG2、Huh-7细胞脂肪变性模型中的脂肪累积,显著降低脂肪变性模型中脂质含量和TC、TG含量。筛选出ORI与NAFLD共同作用靶点95个,GO功能富集分析显示这些基因主要参与脂多糖反应、脂肪酸结合和胆固醇稳态,KEGG通路富集分析结果显示PPAR信号通路可能是ORI改善NAFLD的关键通路。机制验证结果表明,ORI干预后,PPARα、CPT-1的蛋白和mRNA表达升高(P<0.05、P<0.01),在PPARα抑制剂MK886处理后,ORI对PPARα、CPT-1蛋白表达的影响消失。综上,ORI对OA诱导的HepG2、Huh-7细胞NAFLD模型有改善作用,其作用机制与PPARα/CPT-1信号通路有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 非酒精性脂肪肝 PPARα/CPT-1信号通路 网络药理学
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冬凌草甲素对绝经后骨质疏松小鼠肠道菌群的影响
6
作者 郑修竹 朱春雨 +3 位作者 梁彦博 车明昊 陈玥 秦健 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第6期799-805,共7页
目的探索冬凌草甲素(oridonin,ORI)通过调节肠道菌群缓解小鼠绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的价值。方法将小鼠随机分为Normal组、Model组、Positive组(雌二醇)及ORI低、中、高剂量组,每组8只。用去卵巢法对除Norma... 目的探索冬凌草甲素(oridonin,ORI)通过调节肠道菌群缓解小鼠绝经后骨质疏松(postmenopausal osteoporosis,PMOP)的价值。方法将小鼠随机分为Normal组、Model组、Positive组(雌二醇)及ORI低、中、高剂量组,每组8只。用去卵巢法对除Normal组外的各组构建PMOP小鼠模型。8周干预后,用HE染色对胫骨近端骨组织行病理学观察;Micro CT评估小鼠骨密度(bone mineral density,BMD)及骨小梁微观结构特征;通过ELISA法检测小鼠血液中的抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b)与碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)水平。用16S核糖体脱氧核糖核酸(16S rDNA)测序技术探究各组肠道微生物种类的丰度及其目别、属别的相对丰度。结果与Normal组比较,Model组小鼠骨组织结构破坏明显,BMD水平显著降低(P<0.05),ALP、TRACP-5b显著增加(P<0.05)。与Model组比较,ORI组骨组织结构损伤明显改善,BMD水平显著升高(P<0.05),ALP、TRACP-5b明显降低(P<0.05)。此外,ORI通过促进益生菌繁殖和抑制条件致病菌生长,对肠道菌群构造产生积极调节作用,有助于恢复并保持肠道微生态的平衡。结论ORI可能通过调节肠道菌群缓解PMOP。 展开更多
关键词 骨质疏松症 冬凌草甲素 去卵巢小鼠 肠道菌群
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冬凌草甲素诱导HL-60细胞凋亡 被引量:27
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作者 王筠 刘清芸 +3 位作者 华海婴 叶启霞 张予 张覃沐 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期402-404,共3页
目的 研究冬凌草甲素诱导人白血病HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 形态学观察 ,DNA凝胶电泳及流式细胞术。结果 冬凌草甲素能显著地诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的浓度效应关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,... 目的 研究冬凌草甲素诱导人白血病HL 6 0细胞凋亡的作用。方法 形态学观察 ,DNA凝胶电泳及流式细胞术。结果 冬凌草甲素能显著地诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的浓度效应关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见明显的DNA梯带 ;流式细胞仪检测到G1亚峰。结论 冬凌草甲素能诱导HL 6 0细胞凋亡 ,并与其细胞杀伤活性相互平行 。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 细胞凋亡 HL-60细胞 白血病
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冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞系生长抑制作用 被引量:22
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作者 宋芳 冯一中 +2 位作者 蒋小岗 顾振纶 郭次仪 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期240-243,共4页
目的研究冬凌草甲素(oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞生长抑制作用并探究其可能机制。方法采用MTT法检测冬凌草甲素对SW1990细胞增殖抑制作用、Hoechst 33258染色法及透射电镜观察细胞的形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、RT-... 目的研究冬凌草甲素(oridonin)对人胰腺癌SW1990细胞生长抑制作用并探究其可能机制。方法采用MTT法检测冬凌草甲素对SW1990细胞增殖抑制作用、Hoechst 33258染色法及透射电镜观察细胞的形态学变化、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率、RT-PCR法检测survivin、p21mR-NA表达。结果冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的生长抑制作用,荧光显微镜和透射电镜下均见到典型的凋亡形态学改变,流式分析出现亚G1峰并显示G2/M期周期阻滞。RT-PCR分析结果显示p21mRNA表达增加而survivin mRNA表达减少。结论冬凌草甲素通过诱导凋亡和G2/M期周期阻滞来抑制人胰腺癌SW1990细胞生长,其分子机制可能与survivin和p21调节的信号途径有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 SW1990细胞 凋亡 周期阻滞 SURVIVIN P21
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冬凌草甲素通过改变Bax/Bcl-xL表达激活caspase-3诱导A375-S2细胞凋亡 被引量:24
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作者 张春玲 吴立军 +3 位作者 左海军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期669-672,共4页
目的 研究冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的作用原理。方法 形态学观察 ,DNA凝胶电泳法及WesternBlot法。结果 冬凌草甲素能明显诱导A375 S2细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体... 目的 研究冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的作用原理。方法 形态学观察 ,DNA凝胶电泳法及WesternBlot法。结果 冬凌草甲素能明显诱导A375 S2细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase 3的抑制剂能阻止caspase 3的活力升高 ;免疫印迹结果显示冬凌草甲素作用A375 S2细胞 12h改变Bax与Bcl xL蛋白的表达 ;且发现caspase 3的底物PARP蛋白在 12h时被降解。结论 冬凌草甲素 (34 3μmol·L-1)诱导A375 S2细胞凋亡 ,这种作用是通过改变了Bax/Bcl xL的表达比率 ,激活caspase 3而实现的。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 A375-S2细胞 凋亡 Bax/Bcl—xL CASPASE-3
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冬凌草甲素通过激活caspase诱导HeLa细胞凋亡 被引量:37
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作者 张春玲 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期521-525,共5页
目的 研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法 采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果 冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖... 目的 研究冬凌草甲素诱导人子宫颈癌HeLa细胞凋亡的作用机制。方法 采用形态学观察、DNA凝胶电泳及LDH法。结果 冬凌草甲素能显著诱导HeLa细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase家族抑制剂 ,caspase 1和 3抑制剂能抑制冬凌草甲素诱导HeLa细胞的凋亡 ,6 8 7μmol·L-1冬凌草甲素作用HeLa细胞 12h使caspase 3的活力提高 2倍。 结论 适宜浓度以下 ,冬凌草甲素 (6 8 7μmol·L-1)诱导HeLa细胞凋亡具有浓度与时间依赖性 ,大剂量 (137 4 μmol·L-1)时 ,冬凌草甲素诱导HeLa细胞坏死的程度强于凋亡 ,且通过激活caspase途径诱导HeLa细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 HELA细胞 凋亡 CASPASE
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冬凌草甲素诱导人多发性骨髓瘤ARH-77细胞凋亡及其可能机制 被引量:12
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作者 曲佳 郭坤元 +3 位作者 吴秉毅 宋朝阳 佘妙容 贺艳杰 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期134-138,共5页
目的:探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对人多发性骨髓瘤ARH-77细胞的致凋亡作用及其可能的机制。方法:不同浓度Ori(2.5、5、10μmol/L)作用于ARH-77细胞,MTT法检测ARH-77细胞的增殖,相差显微镜和Hoechst33258染色观察细胞凋亡的形态学改变... 目的:探讨冬凌草甲素(oridonin,Ori)对人多发性骨髓瘤ARH-77细胞的致凋亡作用及其可能的机制。方法:不同浓度Ori(2.5、5、10μmol/L)作用于ARH-77细胞,MTT法检测ARH-77细胞的增殖,相差显微镜和Hoechst33258染色观察细胞凋亡的形态学改变,流式细胞术检测ARH-77细胞的早期凋亡及线粒体膜电位(Δψm)的变化,caspase8凋亡试剂盒检测ARH-77细胞caspase8的活化。结果:Ori对ARH-77细胞的生长有明显的抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。10μmol/LOri作用于ARH-77细胞24h后可见细胞变小、胞质中出现空泡,并可见凋亡小体。流式细胞术结果显示,经不同浓度Ori(2.5、5、10μmol/L)处理后,细胞早期凋亡率分别为(15.07±0.78)%、(21.00±1.49)%和(27.45±2.47)%,均高于对照组的(5.27±1.46)%(P<0.01)。不同浓度Ori(2.5、5、10μmol/L)处理后,反映Δψm的绿色荧光细胞百分率分别为(26.80±0.75)%、(36.81±2.27)%和(49.48±1.10)%,均高于对照组的(16.96±0.50)%(P<0.01),提示ARH-77细胞凋亡有显著增加。同时,Ori处理可上调ARH-77细胞caspase8的活性(P<0.01)。结论:冬凌草甲素能明显诱导多发性骨髓瘤ARH-77细胞的凋亡,其机制可能与激活内、外源凋亡通路有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 多发性骨髓瘤 凋亡 CASPASE 8 线粒体膜电位
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冬凌草甲素对SW1990细胞的增殖抑制作用 被引量:11
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作者 刘军楼 汪悦 +4 位作者 徐力 杨继兵 于希忠 刘佳 唐宇宏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期915-920,共6页
背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应较小且疗效尚佳,在胰腺癌防治方面有较大的潜力与优势,正日益受到国内外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制作用,并探讨其可能机制。方法:以不同浓度(12.5、25... 背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应较小且疗效尚佳,在胰腺癌防治方面有较大的潜力与优势,正日益受到国内外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞的增殖抑制作用,并探讨其可能机制。方法:以不同浓度(12.5、25和50μmol/L)的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,光学显微镜下观察药物对细胞形态的影响。DAPI法染色后,用荧光显微镜观察细胞核凋亡,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测细胞凋亡前后端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化。结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的细胞凋亡形态学改变。冬凌草甲素12.5、25和50μmol/L给药组早期细胞凋亡的百分率显著高于未给药组[(2.17±0.57)%、(5.83±0.57)%、(4.43±0.78)%vs(0.30±0.17)%,P<0.05],晚期细胞凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组[(5.10±0.98)%、(7.03±1.52)%、(10.13±0.70)%vs(2.63±0.06)%,P<0.05]。冬凌草甲素12.5、25和50μmol/L给药组端粒酶hTERT mRNA的表达水平显著高于未给药组(7.72±0.33、8.17±0.67、10.36±1.65 vs 5.94±0.17,P<0.05)。结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能与药物引起端粒酶hTERT mRNA的表达水平均降低有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 胰腺癌 增殖抑制 凋亡 端粒酶
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冬凌草甲素对多发性骨髓瘤抗肿瘤的机制研究 被引量:10
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作者 段浩清 李绵洋 +5 位作者 高丽 张俊峰 王蔚 李燕 马一盖 王成彬 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期364-369,共6页
本研究探讨冬凌草甲素(Oridonin)对人多发性骨髓瘤(MM)细胞株U266抗肿瘤作用及其分子机制。CCK-8法检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;瑞氏染色法观察细胞的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR方法检测U266细胞FGFR3、BCL... 本研究探讨冬凌草甲素(Oridonin)对人多发性骨髓瘤(MM)细胞株U266抗肿瘤作用及其分子机制。CCK-8法检测冬凌草甲素对细胞增殖的影响;瑞氏染色法观察细胞的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR方法检测U266细胞FGFR3、BCL2、CCND1、MYC基因表达水平的变化;Western blot方法分析BCL2、MYC、CCND1、FGFR3和P53蛋白表达水平的变化。结果表明,①冬凌草甲素能够抑制U266细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性;②10μmol/L冬凌草甲素处理U266细胞24 h后,光学显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态学改变;③U266细胞凋亡比例随冬凌草甲素药物浓度及作用时间的延长而增加;④经冬凌草甲素处理后的U266细胞中,FGFR3、BCL2、CCND1、MYC基因表达下调,同时其相应的蛋白质表达下调,P53蛋白表达上调,上述变化均呈浓度和时间依赖性。结论:冬凌草甲素可以抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖并诱导其凋亡,发挥其抗肿瘤作用。本研究为MM新的靶向治疗方案选择提供理论依据。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 多发性骨髓瘤 U266细胞 细胞凋亡 细胞增殖
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冬凌草甲素对HL-60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制(英) 被引量:10
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作者 刘加军 黄仁魏 +1 位作者 潘祥林 彭军 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1027-1031,共5页
目的探讨冬凌草甲素对白血病HL60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL60细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAPPCRELIS... 目的探讨冬凌草甲素对白血病HL60细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL60细胞,应用MTT法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡,TRAPPCRELISA及FCM法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及P53蛋白表达水平的变化。结果8umol/L以上的冬凌草甲素对HL60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,并呈现出明显的量效与时效关系。药物作用48小时后细胞的凋亡率达高峰,在Hoechst染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的凋亡改变。在细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降,同时P53蛋白的表达水平显著升高。结论冬凌草甲素对HL60细胞具有显著的诱导凋亡及增殖抑制作用,升高P53蛋白的表达水平及降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一;这为冬凌草甲素进一步应用于临床治疗急性白血病提供了有力的试验依据。 展开更多
关键词 细胞凋亡 白血病 冬凌草甲素 P53蛋白 端粒酶
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稀土元素镧和铈对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物的影响 被引量:8
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作者 董诚明 曹利华 +3 位作者 苏秀红 张艳贞 乔毅琳 姚锋 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期437-441,共5页
以冬凌草无菌苗为材料,在冬凌草再生植株时期,添加不同浓度的稀土元素镧和铈,用重量法测定其单株平均鲜重及干重,用高效液相法测定冬凌草甲素、乙素、迷迭香酸的含量,参考农作物、园艺作物种质评比的方法,根据冬凌草生产中各项指标的重... 以冬凌草无菌苗为材料,在冬凌草再生植株时期,添加不同浓度的稀土元素镧和铈,用重量法测定其单株平均鲜重及干重,用高效液相法测定冬凌草甲素、乙素、迷迭香酸的含量,参考农作物、园艺作物种质评比的方法,根据冬凌草生产中各项指标的重要性,设置权重,计算加权后得到综合评分对其进行综合评价,探讨稀土元素镧、铈对冬凌草再生植株产量及次生代谢产物冬凌草甲素、乙素、迷迭香酸含量的影响。结果表明:空白对照组综合评分为62.99分,添加稀土元素铈的条件下,1μmol·L-1Ce Cl3·7H2O评分最高为87.96分,添加稀土元素镧的条件下,5μmol·L-1La Cl3·6H2O评分最高为74.44分,这表明Ce Cl3·7H2O对冬凌草再生植株生长及次生代谢产物积累的促进作用优于La Cl3·6H2O;适宜浓度的镧、铈能促进冬凌草再生植株的生长及次生代谢产物冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸的合成,而高浓度10μmol·L-1La Cl3·6H2O具有抑制的情况。该研究结果将对进一步研究稀土元素对冬凌草再生植株生长的促进作用机制奠定基础,为植物组织培养中如何科学合理地使用稀土元素提供理论依据。 展开更多
关键词 冬凌草 稀土元素 甲素 乙素 迷迭香酸
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冬凌草甲素对EC9706细胞增殖、凋亡的影响 被引量:21
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作者 刘俊保 岳静宇 唐引引 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第1期8-11,共4页
目的:观察冬凌草甲素对食管鳞状细胞癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响。方法:用MTT法检测冬凌草甲素对EC9706细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪技术检测冬凌草甲素对EC9706细胞周期和细胞凋亡的影响,并计算凋亡率;激光共聚焦显微镜观察不... 目的:观察冬凌草甲素对食管鳞状细胞癌EC9706细胞增殖、凋亡的影响。方法:用MTT法检测冬凌草甲素对EC9706细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪技术检测冬凌草甲素对EC9706细胞周期和细胞凋亡的影响,并计算凋亡率;激光共聚焦显微镜观察不同浓度冬凌草甲素作用后EC9706细胞中游离Ca2+荧光强度的变化。结果:MTT法显示冬凌草甲素作用EC9706细胞株后,抑制率随浓度增高而增高(F=370.600,P<0.001);流式细胞仪检测结果显示,冬凌草甲素作用EC9706细胞48 h后,G1/G0期细胞均显著增多(F=24.200,P<0.001);细胞凋亡结果显示,冬凌草甲素均能明显诱导EC9706细胞凋亡(P<0.05),冬凌草甲素40μmol/L组的作用效果最佳(F=10.214、37.820,P<0.001)。不同浓度冬凌草甲素均升高了EC9706细胞内游离Ca2+荧光强度(F=24.400,P<0.001)。结论:冬凌草甲素可抑制EC9706细胞增殖、促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 食管鳞状细胞癌 EC9706 增殖 凋亡 EC9706
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冬凌草甲素对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用及其作用机制 被引量:10
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作者 张俊峰 陈规划 +1 位作者 陆敏强 刘加军 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1325-1329,共5页
目的:探讨冬凌草甲素对肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的BEL-7402细胞,MTY法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的... 目的:探讨冬凌草甲素对肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的BEL-7402细胞,MTY法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡,Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。应用PCR-ELISA及RT-PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERT mRNA表达水平的变化。结果:冬凌草甲素可显著的抑制BEL-7402细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。冬凌草甲素作用48~60h后在Hoechst 33258荧光染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,同时端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低。结论:冬凌草甲素能抑制BEL-7402细胞的生长及诱导细胞发生凋亡;降低端粒酶hTERT mRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 肝癌 端粒酶 细胞凋亡
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冬凌草甲素诱导小鼠肝癌细胞醌还原酶活性及其机理研究 被引量:12
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作者 王佐 王璐 +7 位作者 陈忠正 劳扬 刘杏宜 高雄 燕妮 林晓蓉 张媛媛 李斌 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第7期193-200,共8页
为筛选鉴定出溪黄草中抗癌活性组分,本研究以溪黄草为材料得到乙酸乙酯提取物,通过硅胶柱层析、半制备色谱分离纯化,利用小鼠肝癌细胞Hepa1c1c7体外模型测定分离产物对细胞存活率和醌还原酶(quinone reductase,QR/NAD(P)H:reductase 1,N... 为筛选鉴定出溪黄草中抗癌活性组分,本研究以溪黄草为材料得到乙酸乙酯提取物,通过硅胶柱层析、半制备色谱分离纯化,利用小鼠肝癌细胞Hepa1c1c7体外模型测定分离产物对细胞存活率和醌还原酶(quinone reductase,QR/NAD(P)H:reductase 1,NQO1)诱导活性。通过核磁共振、质谱分析鉴定组分结构;采用细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)p38、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)和c-Jun N-末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)5种蛋白激酶的特异性抑制剂,确定冬凌草甲素诱导QR活性的信号转导通路,采用实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)和Western blot法分别检测NQO1的m RNA和蛋白表达情况。结果:1)从溪黄草中筛选鉴定出一较强诱导QR活性组分为冬凌草甲素;2)冬凌草甲素质量浓度为0.94μg/m L时,即可诱导QR活性倍增;3)PI3K抑制剂处理显著抑制冬凌草甲素诱导的QR活性,而ERK抑制剂处理显著促进冬凌草甲素诱导的QR活性,但PKC、p38和JNK抑制剂处理对冬凌草甲素诱导的QR活性无明显影响;4)冬凌草甲素显著提高细胞内NQO1的m RNA和蛋白表达水平。结论:溪黄草中的冬凌草甲素具有抗癌活性,其抗癌活性通过提高Hepa1c1c7细胞中NQO1基因的转录及翻译水平以增加QR活性实现,并且其抗癌功能主要通过激活PI3K通路、抑制ERK通路进行信号传导。研究结果为深入开展溪黄草和冬凌草甲素的癌症化学预防研究奠定前期理论基础。 展开更多
关键词 溪黄草 冬凌草甲素 醌还原酶 Hepa1c1c7细胞株 信号通路
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冬凌草甲素磷脂复合物的制备及其性质研究 被引量:7
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作者 陆国庆 郑江 +2 位作者 郑新川 鲁永玲 何凤慈 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第20期2220-2223,共4页
目的制备冬凌草甲素磷脂复合物,并研究其理化性质。方法溶剂挥发法制备冬凌草甲素磷脂复合物,差示扫描量热法研究复合物的热力学性质变化,X射线衍射分析研究冬凌草甲素在复合物中的存在状态,紫外-可见分光光度法验证是否有新化学键生成... 目的制备冬凌草甲素磷脂复合物,并研究其理化性质。方法溶剂挥发法制备冬凌草甲素磷脂复合物,差示扫描量热法研究复合物的热力学性质变化,X射线衍射分析研究冬凌草甲素在复合物中的存在状态,紫外-可见分光光度法验证是否有新化学键生成,显微镜检复合物在水中分散情况。结果磷脂复合物中冬凌草甲素熔点峰发生改变;冬凌草甲素在磷脂复合物中以无定型存在,晶体衍射峰消失;紫外-可见分光光度法分析显示无新化合物生成;显微镜镜检证实冬凌草甲素磷脂复合物在水中不稳定、易析出晶体。结论成功制备冬凌草甲素磷脂复合物,但是该系统在水中不稳定,不能单独作为冬凌草甲素的药物传递系统。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 磷脂复合物 理化性质
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冬凌草甲素对胰腺癌细胞骨架蛋白F-actin的影响 被引量:6
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作者 刘军楼 沈洪 +3 位作者 徐力 杨继兵 于希忠 孙志岭 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期31-37,共7页
背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应低且疗效显著,在防治胰腺癌方面有较大的潜力与优势,日益受到国内、外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草的有效成分冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响。方法:以不同浓... 背景与目的:中医药治疗肿瘤不良反应低且疗效显著,在防治胰腺癌方面有较大的潜力与优势,日益受到国内、外医学界的关注。本研究观察中草药冬凌草的有效成分冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990凋亡及细胞骨架蛋白F-actin的影响。方法:以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的SW1990细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,DAPI染色法染色后荧光显微镜观察细胞核凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜观察F-actin形态学变化。结果:冬凌草甲素对人胰腺癌SW1990细胞具有明显的增殖抑制作用,荧光显微镜见到典型的凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,25、50μmol/L冬凌草甲素给药组早期凋亡的百分率显著高于对照组(3.78±0.46,9.51±0.63 vs 0.73±0.06,P<0.05),晚期凋亡和坏死细胞的百分率也显著高于未给药组(14.40±1.78,20.53±2.54 vs 4.16±0.31,P<0.05)。细胞骨架蛋白F-actin呈现解聚状态。结论:冬凌草甲素可抑制胰腺癌SW1990细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能是药物引起了细胞骨架蛋白F-actin解聚。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 胰腺癌 增殖抑制 凋亡 细胞骨架蛋白
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