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Role of Interfacial Viscosity and pH in L-Phenylalanine,L-Tryptophan Molecular Rotors
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作者 N.Meenakshisundaram Kamatchi Sankaranarayanan 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1629-1633,共5页
Protein folding involves the aminoacid sequence to come forth and form an energy minimized structure.Recently molecular crowding leading to increase in viscosity is said to be one of the major concerns affecting prote... Protein folding involves the aminoacid sequence to come forth and form an energy minimized structure.Recently molecular crowding leading to increase in viscosity is said to be one of the major concerns affecting protein folding.Many external fluorescent probes are used to detect such increases in viscosity.Since most of the protein sequences contain L-Phe and L-Trp,in this study we have used these aminoacids as probes to detect changes in viscosity.This study will help to advance the knowledge on molecular crowding effects in protein folding. 展开更多
关键词 Protein folding molecular crowders Interfacial viscosity Fluorescent probes
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新型PET显像探针纳米抗体研究进展
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作者 王猛 陈莉 +1 位作者 孙朋辉 韩彦江 《中国医学影像技术》 北大核心 2025年第5期835-838,共4页
纳米抗体(Nb)因分子质量小、稳定性及渗透性强、可通过血脑屏障、免疫原性低等优势而成为替代传统抗体的PET显像新型探针,应用前景广阔。本文围绕Nb结构特征、正电子同位素标记方法及标记产物在PET显像中的应用进展进行综述。
关键词 纳米粒子 分子探针 正电子发射断层显像
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用于前列腺癌诊疗的PSMA靶向放射性小分子探针研究进展 被引量:1
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作者 谢佺 周雨萱 +3 位作者 蔡舒玥 彭莹 邱玲 林建国 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期105-110,共6页
前列腺癌是全球男性最常见的恶性肿瘤之一,严重危害男性身体健康。自前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)被证实是诊断前列腺癌的首选标志物,PSMA靶向放射性药物在前列腺癌诊治中取得显著进展,有效提高了前列... 前列腺癌是全球男性最常见的恶性肿瘤之一,严重危害男性身体健康。自前列腺特异性膜抗原(prostate specific membrane antigen,PSMA)被证实是诊断前列腺癌的首选标志物,PSMA靶向放射性药物在前列腺癌诊治中取得显著进展,有效提高了前列腺癌的诊断灵敏度与治疗效果。文章就近年来PSMA靶向放射性分子探针的相关研究进展进行综述,分析探针结构设计理念并总结临床经验,以期对前列腺癌放射性诊疗分子探针的开发有所裨益。 展开更多
关键词 前列腺癌 前列腺特异性膜抗原 分子探针 诊断 治疗
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靶向降解组学在天然产物靶标鉴定中的应用
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作者 杨月影 张智琦 +4 位作者 刘洋 梁静 李华 许文 陈丽霞 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第6期1040-1046,共7页
天然产物是创新药物的重要来源,但分子靶标和作用机制不明确限制了其进一步的开发和应用。作者基于蛋白降解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera,PROTAC)技术和差异定量蛋白组学创立了天然产物靶标鉴定新方法,提出并建立了靶向降... 天然产物是创新药物的重要来源,但分子靶标和作用机制不明确限制了其进一步的开发和应用。作者基于蛋白降解靶向嵌合体(proteolysis-targeting chimera,PROTAC)技术和差异定量蛋白组学创立了天然产物靶标鉴定新方法,提出并建立了靶向降解组学(targeted degradomics,TGDO)新概念和技术体系,可用于弱亲和力靶标的鉴定。该文综述了TGDO技术用于天然产物靶标鉴定的标准化工作流程和应用进展。 展开更多
关键词 靶向降解组学 天然产物 PROTAC 差异定量蛋白组学 分子探针 靶标验证
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基于铜纳米酶和分子印迹技术的替来他明快速检测荧光探针开发 被引量:1
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作者 李嘉豪 凌江 +2 位作者 蔡子豪 郑梓源 丁艳君 《法医学杂志》 北大核心 2025年第4期355-363,共9页
目的开发一种针对替来他明的快速检测方法,在保证灵敏度和准确性的前提下做到操作简便、成本低廉,帮助现场快速筛查和禁毒工作的开展。方法本研究结合双配体铜纳米酶与分子印迹技术,先以易获取的原材料在120℃条件下合成铜纳米酶,再在... 目的开发一种针对替来他明的快速检测方法,在保证灵敏度和准确性的前提下做到操作简便、成本低廉,帮助现场快速筛查和禁毒工作的开展。方法本研究结合双配体铜纳米酶与分子印迹技术,先以易获取的原材料在120℃条件下合成铜纳米酶,再在常温条件下通过溶胶-凝胶法在表面刻印特异性空腔,构建一种新型荧光传感探针。对该探针进行表征和方法学验证,并将其应用于实际样本的检测。结果所构建探针荧光性质稳定,抗干扰能力强,具有良好的选择性和灵敏度,检出限为5 ng/mL,定量浓度范围为15~500 ng/mL,可实现血液、电子烟油等实际样本中替来他明的快速检测。结论该荧光探针可用于多种检材中替来他明的快速检测与现场初筛,极大提高了检测效率且显著降低了分析成本,具有较高的研究价值和广阔的应用前景。 展开更多
关键词 法医学 毒物分析 替来他明 铜纳米酶 分子印迹聚合物 荧光探针 快速检测
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靶向hiPSCs-CMs的miRNA-452/Let7i超声分子探针构建
6
作者 买尔哈巴·依布拉音 王子航 +3 位作者 王伟 杨灵洁 关丽娜 穆玉明 《中国医学影像学杂志》 北大核心 2025年第6期611-617,共7页
目的构建载miRNA-452/Let-7i的超声分子探针,体外分析其对人诱导多能干细胞来源心肌细胞(hiPSCs-CMs)的靶向效果。材料与方法合成生物素化核心脂质微泡(NBs)、携带过表达miRNA-452/Let-7i的腺病毒的脂质微泡(Ad-miR-452/Let-7i)和携带... 目的构建载miRNA-452/Let-7i的超声分子探针,体外分析其对人诱导多能干细胞来源心肌细胞(hiPSCs-CMs)的靶向效果。材料与方法合成生物素化核心脂质微泡(NBs)、携带过表达miRNA-452/Let-7i的腺病毒的脂质微泡(Ad-miR-452/Let-7i)和携带过表达miRNA-452/Let-7i的腺病毒及靶向蛋白MYH6的超声分子探针(Ad-miR-452/Let7i-MYH6),比较荧光蛋白表达率验证其结合情况。测量其理化性质、稳定性及体外造影成像能力,评估生物安全性等。将hiPSCs-CMs分为Ad-miR-452/Let-7i组和Ad-miR-452/Let7i-MYH6组,比较细胞结合情况。结果构建的NBs、Ad-miR-452/Let-7i以及Ad-miR-452/Let7i-MYH6形态规则,稳定性好;其浓度分别为(1.62±0.40)×10^(8)个/ml、(1.83±0.20)×10^(8)个/ml、(1.35±0.33)×10^(8)个/ml,平均粒径分别为(605.94±17.46)nm、(726.53±14.95)nm、(729.31±16.62)nm,电位分别为(2.61±0.30)mV、(-11.21±0.71)mV、(-12.28±0.52)mV,分散度分别为0.24±0.07、0.26±0.14、0.25±0.13。在浓度为107个/ml时,3种样品的造影强度分别为99.24±5.04、102.18±3.61、99.07±3.87。载miRNAs超声分子探针对细胞无明显毒性,体外显影持续超过15 min,可与hiPSC-CMs特异性结合。结论本研究构建的超声分子探针具有稳定性及体外靶向性,能有效提高病毒转染效率。 展开更多
关键词 腺病毒科 转染 超声学 分子探针 人诱导多能干细胞来源心肌细胞 实验研究
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NRP-1靶向分子探针助力乳腺癌诊断的最新进展及展望
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作者 蔡舒玥 谢佺 +3 位作者 周雨萱 刘清竹 邱玲 林建国 《中国癌症杂志》 北大核心 2025年第2期249-254,共6页
乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤,其中三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)具有高度侵袭性与转移性,近年其发病率逐步上升并呈年轻化趋势。随着对乳腺癌分子机制的深入研究,神经毡蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)作为一种... 乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤,其中三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)具有高度侵袭性与转移性,近年其发病率逐步上升并呈年轻化趋势。随着对乳腺癌分子机制的深入研究,神经毡蛋白-1(neuropilin-1,NRP-1)作为一种跨膜蛋白,被证实与乳腺癌特别是TNBC的转移及患者预后密切相关,已经成为乳腺癌诊断和治疗的潜在靶点。利用核医学、光学及多模态等成像技术可以无创、实时、精准地检测NRP-1的表达和分布,对于乳腺癌的早期诊断、分期以及治疗和疗效监测具有重要的指导意义。核医学探针将放射性核素(如^(68)Ga、^(99m)Tc等)与特定的靶向配体结合,从而特异性靶向肿瘤细胞或组织,并通过正电子发射体层成像(positron emission tomography,PET)或单光子发射计算机体层成像(single photon emission computed tomography,SPECT)实现对乳腺癌的灵敏特异性诊断。随着医学影像及各交叉学科的发展,靶向NRP-1的多模态分子探针[^(68)Ga]Ga-NODAGA-K(Cy5)DKPPR将PET的高灵敏度和近红外荧光(near-infrared fluorescence,NIRF)的高分辨率优势相结合,实现乳腺癌术前精确诊断并在术中提供实时荧光导航,有助于更准确地识别和切除肿瘤。本文对NRP-1靶向分子探针在乳腺癌诊断中的优缺点进行系统比较,并阐述各类探针在乳腺癌诊疗领域的适用范围及最新研究进展,以期为乳腺癌靶向分子探针的研发及临床应用提供参考。 展开更多
关键词 乳腺癌 神经毡蛋白-1 肿瘤诊断 分子成像 分子探针
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监测免疫治疗反应的颗粒酶B靶向分子影像探针研究进展
8
作者 杨继辰 邱玲 林建国 《南京医科大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第9期1267-1275,共9页
近年来,癌症免疫治疗尤其是免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI),在临床实践中取得了显著进展。然而,由于个体间免疫反应的异质性,患者对治疗的应答具有差异,因此对治疗效果的监测显得尤为重要。在肿瘤微环境中,细胞毒性... 近年来,癌症免疫治疗尤其是免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI),在临床实践中取得了显著进展。然而,由于个体间免疫反应的异质性,患者对治疗的应答具有差异,因此对治疗效果的监测显得尤为重要。在肿瘤微环境中,细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)的活性是评估免疫治疗效果的关键指标。颗粒酶B(granzyme B,GzmB)作为一种主要存在于CTL中的丝氨酸蛋白酶,是早期预测免疫治疗反应的重要生物标志物。靶向GzmB的分子影像探针可以监测免疫治疗过程中肿瘤部位GzmB表达的变化,进而为评估治疗效果提供依据。文章总结了各类GzmB靶向分子探针的研究进展,并分析了探针的结构设计、成像原理及其在早期监测肿瘤免疫治疗反应中的应用潜力,旨在为GzmB靶向分子探针的进一步开发和临床应用提供参考。 展开更多
关键词 癌症 免疫治疗 疗效监测 颗粒酶B 分子影像探针
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荧光PCR探针熔解曲线技术和DNA微阵列芯片技术鉴定分枝杆菌菌种的研究
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作者 樊瑞芳 代小伟 +6 位作者 杨新宇 陈双双 陈昊 于兰 赵琰枫 李传友 王嫩寒 《中国防痨杂志》 北大核心 2025年第8期1031-1037,共7页
目的:研究荧光PCR探针熔解曲线技术(简称“熔解曲线法”)和DNA微阵列芯片技术(简称“基因芯片法”)在分枝杆菌菌种鉴定方面的临床应用价值。方法:选取熔解曲线法和基因芯片法检测范围内的分枝杆菌标准菌株,以及2016年1月至2023年8月北... 目的:研究荧光PCR探针熔解曲线技术(简称“熔解曲线法”)和DNA微阵列芯片技术(简称“基因芯片法”)在分枝杆菌菌种鉴定方面的临床应用价值。方法:选取熔解曲线法和基因芯片法检测范围内的分枝杆菌标准菌株,以及2016年1月至2023年8月北京市疾病预防控制中心结核病实验室保存的疑似非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacterium,NTM)的临床分离菌株,采用2种方法进行检测分析,对检测异常的菌株进行全基因组测序分析。结果:共选取19种分枝杆菌标准菌株,每种各1株;采用熔解曲线法和基因芯片法对标准菌株进行检测,符合率均为100.00%;收集到临床分离菌株180株,经熔解曲线法和基因芯片法鉴定为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTB)的菌株8株,1株MTB合并偶发分枝杆菌,NTM菌株171株。2种方法检测临床分离菌株的一致率为87.78%(158/180);检测一致的149株NTM菌株中,占比前4位的依次为鸟分枝杆菌复合群(MAC)[38.26%(57/149)]、龟分枝杆菌或脓肿分枝杆菌[24.83%(37/149)]、堪萨斯分枝杆菌[17.45%(26/149)]、偶发分枝杆菌[12.75%(19/149)]。2种方法鉴定结果不同的菌株22株,9株为MAC;1株基因芯片法鉴定为胞内分枝杆菌,熔解曲线法鉴定为慢生黄分枝杆菌;1株基因芯片法鉴定为土分枝杆菌,熔解曲线法鉴定为不产色分枝杆菌。10株基因芯片法有菌种鉴定结果,熔解曲线法无法判读;1株基因芯片法无法判读,熔解曲线法判读为慢生黄分枝杆菌。采用全基因组测序计算平均核苷酸一致性(average nucleotide identity,ANI),检测出爱知戈登氏菌(ANI=99.102)、沃林斯基分枝杆菌(ANI=97.822)、慕里黑分枝杆菌(ANI=97.365)、外来分枝杆菌(ANI=97.730/97.981/96.930)、大口非鲫分枝杆菌(ANI=96.277)。结论:熔解曲线法和基因芯片法在分枝杆菌菌种鉴定方面均具有较好的临床应用价值,且熔解曲线法鉴定结果准确度更高。 展开更多
关键词 分枝杆菌感染 分枝杆菌 结核 分子探针技术 诊断 鉴别
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光声成像探针:应用现状与挑战
10
作者 张瑞平 《中国医学影像技术》 北大核心 2025年第8期1294-1298,共5页
光声成像是融合高对比度光学成像与具有深层穿透特性超声成像的新兴无创成像技术。内源性探针凭借其天然生物相容性及可规避外源物质监管审批的优势,能为揭示组织结构和生理功能提供基础对比;经过精准设计的外源性探针则在提升成像灵敏... 光声成像是融合高对比度光学成像与具有深层穿透特性超声成像的新兴无创成像技术。内源性探针凭借其天然生物相容性及可规避外源物质监管审批的优势,能为揭示组织结构和生理功能提供基础对比;经过精准设计的外源性探针则在提升成像灵敏度、对比度与靶向特异性方面展现出巨大潜力,可持续推动光声成像向分子与功能成像向深化发展并不断拓展其应用范围。本文就光声成像探针应用现状与挑战进行述评。 展开更多
关键词 分子探针 光声成像
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萘酰亚胺-菲并咪唑荧光探针用于Cu^(2+)的比色比率检测
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作者 董智云 石瑞丹 +2 位作者 周佳丽 雷心星 席福贵 《化工进展》 北大核心 2025年第7期4078-4088,共11页
开发高选择性、高灵敏度的Cu^(2+)传感器在化学、生物和环境等领域具有重要意义。本研究利用ICT机制设计并合成了一种基于萘酰亚胺-菲并咪唑的新型Cu^(2+)比色和荧光比率探针NP,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR和HR-MS进行了表征。在Cu^(2+... 开发高选择性、高灵敏度的Cu^(2+)传感器在化学、生物和环境等领域具有重要意义。本研究利用ICT机制设计并合成了一种基于萘酰亚胺-菲并咪唑的新型Cu^(2+)比色和荧光比率探针NP,并通过^(1)H NMR、^(13)C NMR和HR-MS进行了表征。在Cu^(2+)加入后,探针NP由“亮黄色”荧光变为“蓝色”荧光,肉眼可观察到颜色由“亮黄色”变为“无色”。UV-vis和荧光光谱研究表明,探针NP对Cu^(2+)具有较高的选择性和灵敏度,并且响应时间短。根据荧光滴定实验,计算得到探针NP与Cu^(2+)的结合常数为3.04×10^(4)L/mol,NP对Cu^(2+)的检出限为5.35×10^(-8)mol/L(53.5nmol/L)。Job曲线、^(1)H NMR和质谱数据分析显示,探针NP是通过菲并咪唑N原子、亚胺上的N原子与Cu^(2+)结合的,二者结合的化学计量比为1∶1,DFT计算显示NP-Cu^(2+)的HOMO-LUMO能带能隙差低于NP的能隙差,表明NP与Cu^(2+)的配位是有利的。NP已成功应用于实际水样中Cu^(2+)的定量识别;此外,制备了基于NP的试纸条,与智能手机结合,可实现Cu^(2+)的快速视觉半定量检测。 展开更多
关键词 铜离子 萘酰亚胺-菲并咪唑 荧光比率探针 分子内电荷转移 比色识别
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发光金属有机框架和碳点嵌入分子印迹比率荧光探针对恩诺沙星检测
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作者 柴迎鑫 齐庆迎 +1 位作者 李晓飞 徐龙华 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第4期566-572,共7页
长期摄入恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)残留超标食品会对人体健康构成威胁,建立快速、高灵敏检测技术加强对其残留水平监测具有重要意义。本文合成了铕基发光金属有机框架(europium-based luminescent metal-organic frameworks,Eu-MOF)... 长期摄入恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)残留超标食品会对人体健康构成威胁,建立快速、高灵敏检测技术加强对其残留水平监测具有重要意义。本文合成了铕基发光金属有机框架(europium-based luminescent metal-organic frameworks,Eu-MOF)和碳点(carbon dots,CDs),结合分子印迹溶胶-凝胶技术,制备了Eu-MOF和CDs嵌入的分子印迹聚合物(europium-based luminescent metal-organic frameworks and carbon dots-embedded molecular imprinted polymer,Eu-MOF/CDs@MIP)比率型荧光探针。运用扫描电子显微镜、透射电子显微镜、傅里叶变换红外光谱对材料进行表征,考察了孵育时间、目标物浓度及结构类似物对探针荧光响应行为的影响,并将Eu-MOF/CDs@MIP探针应用于实际样品检测。结果表明:Eu-MOF/CDs@MIP为均匀球形结构,具有稳定的荧光发射、较快的传质速率和较高的饱和容量。恩诺沙星可使Eu-MOF 615 nm处的荧光发射显著增强,而430 nm处碳点荧光基本保持不变。基于两者荧光强度的比值与恩诺沙星浓度之间的线性关系,建立了恩诺沙星高选择性、高灵敏检测新方法。该方法的线性范围为0.03~20.00 mg·L^(-1),最低检出限为0.01 mg·L^(-1),在实际样品中的回收率为85.0%~108.8%。 展开更多
关键词 比率荧光探针 发光金属有机框架 碳点 分子印迹 恩诺沙星
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GeneXpert MTB/RIF联合线性探针检测技术在耐药结核病诊断中的应用研究 被引量:18
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作者 李静 郁晨蕾 +4 位作者 张阳奕 王莉莉 沈旭辉 陈炜 江渊 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2021年第10期1102-1106,共5页
选择上海市19家结核病定点医院作为研究现场,对2017年12月至2018年12月初诊为可疑肺结核患者的痰样本(3903份)同时进行痰涂片、BACTEC MGIT 960液体培养(简称"液体培养")和GeneXpert MTB/RIF(简称GeneXpert)检测,研究GeneXper... 选择上海市19家结核病定点医院作为研究现场,对2017年12月至2018年12月初诊为可疑肺结核患者的痰样本(3903份)同时进行痰涂片、BACTEC MGIT 960液体培养(简称"液体培养")和GeneXpert MTB/RIF(简称GeneXpert)检测,研究GeneXpert检测结核分枝杆菌的效能;对同期收集到的707例临床诊断肺结核患者的分离菌株采用线性探针检测技术(line probe assay,LPA)进行利福平耐药性检测,将检测结果与GeneXpert检测结果不一致的痰样本,用培养阳性菌株采用最低抑菌浓度(minimun inhibitory concentration,MIC)法和GeneXpert方法复测,比较同一例患者从痰样本中采用GeneXpert检测利福平耐药情况与其培养阳性菌株采用LPA检测利福平耐药情况的一致性。结果显示,3903例痰标本同时进行痰涂片、液体培养和GeneXpert检测,阳性检出率分别为19.63%(766/3903)、25.93%(1012/3903)、25.16%(982/3903)。GeneXpert阳性检出率高于痰涂片,差异有统计学意义(χ^(2)=34.390,P<0.001);略低于液体培养,但差异无统计学意义(χ^(2)=0.610,P=0.436)。以液体培养(培养阳性鉴定为结核分枝杆菌)为标准,GeneXpert检测的敏感度和特异度分别为81.23%(822/1012)和94.47%(2731/2891),痰涂片检测的敏感度和特异度分别为64.92%(657/1012)和96.23%(2782/2891)。对同一例患者的痰样本采用GeneXpert检测利福平耐药性,与对其培养阳性菌株采用LPA检测利福平耐药性进行比较,两种分子检测技术符合率达98.30%(695/707)。GeneXpert和LPA两种方法检测利福平耐药性符合率很高,但也可能存在漏检或过诊情况。对于检测结果不一致的情况,还需要引入其他检测方法,为精准诊断提供实验室依据。 展开更多
关键词 结核 抗药性 分子诊断技术 分子探针技术 利福平
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单核苷酸多态性检测方法的新进展 被引量:19
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作者 赵广荣 扬帆 +2 位作者 元英进 髙秀梅 张军平 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期123-129,共7页
单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)是第三代遗传标记,在基因定位、遗传疾病和人类起源等理论研究中具有重大意义,在抗药性或药物过敏反应中扮演着极其重要的角色,正逐步成为分子诊断、临床检验、新药研发的重要手段。... 单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)是第三代遗传标记,在基因定位、遗传疾病和人类起源等理论研究中具有重大意义,在抗药性或药物过敏反应中扮演着极其重要的角色,正逐步成为分子诊断、临床检验、新药研发的重要手段。文章综述和分析了几种新建立的SNP检测方法,包括基因芯片、分子探针、荧光偏振、荧光共振、质谱和磁性颗粒分析。在生物化学、工程学和分析软件等方面取得突破的基础上,有望建立灵敏准确、简便易行、高通量、低费用的SNP技术。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性 基因芯片 分子探针 荧光偏振 荧光共振 质谱 磁性颗粒
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阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)分子检测方法研究进展 被引量:17
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作者 王翔 祝长青 +1 位作者 徐幸莲 周光宏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第13期350-354,共5页
阪崎肠杆菌(现克罗诺杆菌属)是一种重要的食源性条件致病菌,因其能通过污染婴幼儿配方食品导致严重的新生儿脑膜炎、菌血症和小肠结肠炎等疾病,而受到广泛的关注。其分子生物学检测方法克服了传统检测方法实验操作繁琐、耗时长等问题。... 阪崎肠杆菌(现克罗诺杆菌属)是一种重要的食源性条件致病菌,因其能通过污染婴幼儿配方食品导致严重的新生儿脑膜炎、菌血症和小肠结肠炎等疾病,而受到广泛的关注。其分子生物学检测方法克服了传统检测方法实验操作繁琐、耗时长等问题。目前常用的分子生物学方法主要有普通PCR、实时荧光定量PCR、环介导恒温扩增、探针方法等。 展开更多
关键词 阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属) 分子检测方法 环介导恒温扩增 分子探针
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人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质 被引量:5
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作者 王荣福 刘萌 +2 位作者 张春丽 闫平 于明明 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期437-441,共5页
目的:研究人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针(99mTc-hTERT ASON)在体外靶细胞摄取动力学情况,以及特异识别靶基因的生物学性质。方法:以双功能螯合剂法,制备放射性核素99mTc标记的针对hTERT mRNA的反义分子探针(99mTc-hTERTASON)... 目的:研究人端粒酶催化亚单位(hTERT)反义分子探针(99mTc-hTERT ASON)在体外靶细胞摄取动力学情况,以及特异识别靶基因的生物学性质。方法:以双功能螯合剂法,制备放射性核素99mTc标记的针对hTERT mRNA的反义分子探针(99mTc-hTERTASON)。培养hTERT表达阳性的人肝细胞癌细胞株(HepG2细胞)。观察在有/无脂质体介导下,细胞对99mTc-hTERT ASON的摄取动力学情况。阳离子脂质体介导99mTc-hTERTASON转染细胞,逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,RT-PCR)分析其特异识别靶基因的生物学活性。结果:99mTc-hTERT ASON的标记率达到(76±5)%(n=5),放射性化学纯度达到96%,比活度为1.850×106Bq/μg。不论脂质体介导与否,99mTc-hTERT ASON在不同时相的细胞摄取率均高于对照组(P<0.05);脂质体明显提高细胞对99mTc-hTERT ASON的摄取(P<0.05);通过脂质体介导,细胞对99mTc-hTERT ASON的摄取高峰值提前至2h,并保持稳定水平至3h。RT-PCR结果显示99mTc-hTERT ASON转染细胞后,hTERT mRNA表达量明显降低。结论:脂质体在体外能有效提高99mTc-hTERT ASON的细胞摄取率。分子探针99mTc-hTERT ASON能特异识别靶基因。为进一步开展99mTc-hTERT ASON体内研究奠定了基础。 展开更多
关键词 分子探针 端粒 末端转移酶 脂质体 细胞 培养的
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同步荧光法测定生物样品中蛋白含量的研究 被引量:5
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作者 崔凤灵 闫迎华 +2 位作者 张强斋 渠桂荣 卢雁 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期2531-2534,共4页
基于5一甲基尿苷(5一Methyluridine)与血清白蛋白(HSA)相互作用,导致血清白蛋白的同步荧光发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中HSA的浓度呈良好的线性关系,建立了以5-甲基尿苷为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱法... 基于5一甲基尿苷(5一Methyluridine)与血清白蛋白(HSA)相互作用,导致血清白蛋白的同步荧光发生特异性变化,且体系的同步荧光强度和溶液中HSA的浓度呈良好的线性关系,建立了以5-甲基尿苷为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱法测定生物样品中蛋白质总含量的新方法。文章考察了猷值、反应介质、试剂用量、离子浓度、试剂加入顺序、反应时间、反应温度等因素对体系同步荧光的影响。在选定的最佳实验条件下,体系的同步荧光强度与血清白蛋白在1.38~575.2μg·mL^-1范围内的线性相关系数为0.9981,方法的检测限可达0.12μg·mL^-1。运用本方法对人血清、唾液和尿液等生物样品进行测定并进行加标回收实验,回收率在98.7%~103.8%之间。对11份5一甲基尿苷空白溶液进行平行测定,其相对标准差为1.56%。还考察了一些常见离子和有机物存在时对蛋白质测定的影响。结果显示,本方法具有简单、快速、灵敏度较高、线性范围宽、体系稳定、精密度高、重现性好等优点。该法可直接用于血清、唾液和尿样等生物样品中蛋白质总量的快速测定,结果令人满意。 展开更多
关键词 5-甲基尿苷(5-Methyluridine) 人血清白蛋白(HSA) 同步荧光光谱 分子探针
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荧光及磁示踪法观测脑组织液的引流分区特征 被引量:6
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作者 赵越 李昀倩 +5 位作者 李怀业 李玉亮 刘兰祥 袁兰 张殊佳 韩鸿宾 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期303-309,共7页
目的:对比光、磁两种探针示踪显示脑组织间隙(interstitial space,ISS)内分子扩散与团流运动的结果,研究脑组织液(interstitial fluid,ISF)在ISS内的分区引流特征。方法:36只SD大鼠随机分为荧光检查组(18只)和磁示踪组(18只),每组再随... 目的:对比光、磁两种探针示踪显示脑组织间隙(interstitial space,ISS)内分子扩散与团流运动的结果,研究脑组织液(interstitial fluid,ISF)在ISS内的分区引流特征。方法:36只SD大鼠随机分为荧光检查组(18只)和磁示踪组(18只),每组再随机分为尾状核(caudate nucleus,Cn)、丘脑(thalamus,T)和黑质(substantia nigra,Sn)3个亚组,每亚组6只。荧光检查组:参考脑立体定位图谱,选取冠状位苍白球为中心层面,以Cn、T和Sn为靶点进行穿刺定位,分别导入2μL 10 mmol/L荧光黄(lucifer yellow,LY)于相应脑区的中心位置,于Cn 3 h、T 2 h和Sn 1 h对大鼠用4%(体积分数)多聚甲醛进行心脏灌注固定后,将取出的鼠脑置于脑切片模具中,沿视交叉向后切片,以进针位点所在的冠状切片为中心层面,计为1片,前取3片,后取2片,每片厚约1 mm,共6片待检测,应用激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope,LSCM)对离体切片进行采集,测量离体切片LY扩散的面积;磁示踪组大鼠也以Cn、T和Sn为靶点进行穿刺定位导入2μL 10 mmol/L钆喷酸葡胺(gadolinium-diethylene triamine pentaacetic acidm,Gd-DTPA),应用磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)动态监测示踪剂在大鼠脑内的扩散,并利用Radiant软件测量Gd-DTPA的扩散面积。结果:LY与Gd-DTPA在Cn、T和Sn的ISS内扩散区域各不相同,Cn亚组LY与Gd-DTPA导入3 h后,比较1~6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(10.95±4.27)mm^2vs.(8.33±2.25)mm^2、(18.16±4.74)mm^2vs.(16.42±2.88)mm^2、(24.57±3.65)mm^2vs.(20.75±2.29)mm^2、(34.81±3.32)mm^2vs.(28.88±1.51)mm^2、(30.53±3.12)mm^2vs.(20.92±2.75)mm^2、(12.15±4.92)mm^2vs.(10.00±1.89)mm^2,对其在每层两组间扩散面积进行t检验,扩散面积差异均无统计学意义(t=0.940,P=0.400;t=0.546,P=0.614;t=1.534,P=0.200;t=2.809,P=0.480;t=2.693,P=0.055;t=0.707,P=0.518);T亚组中LY与Gd-DTPA导入2 h后,比较1~6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(5.56±4.61)mm^2vs.(3.33±2.25)mm^2、(16.21±3.36)mm^2vs.(11.42±2.88)mm^2、(19.00±5.21)mm^2vs.(15.75±2.29)mm^2、(25.32±5.49)mm^2vs.(22.33±3.25)mm^2、(17.34±5.31)mm^2vs.(15.92±2.75)mm^2、(7.67±6.19)mm^2vs.(5.00±1.89)mm^2,对其在每层两组间扩散面积进行t检验,差异均无统计学意义(t=0.753,P=0.493;t=1.875,P=0.134;t=0.990,P=0.378;t=0.810,P=0.464;t=0.413,P=0.701;t=0.716,P=0.514);Sn亚组LY与Gd-DTPA导入1 h后,比较1~6层LY与Gd-DTPA扩散面积为:(6.78±4.56)mm^2vs.(4.75±2.00)mm^2、(12.65±5.04)mm^2vs.(10.44±1.13)mm^2、(19.51±6.54)mm^2vs.(17.55±0.30)mm^2、(28.72±5.45)mm^2vs.(24.48±1.32)mm^2、(21.34±4.42)mm^2vs.(17.72±0.25)mm^2、(13.00±5.46)mm^2vs.(12.00±2.88)mm^2,对其在每层间扩散面积进行t检验,扩散面面积的差异均无统计学意义(t=0.705,P=0.519;t=0.743,P=0.499;t=0.517,P=0.656;t=1.310,P=0.260;t=1.416,P=0.292;t=0.281,P=0.793),但LY扩散面积略大于Gd-DTPA。结论:荧光法证实了磁示踪法发现的ISF在ISS内的分区引流特征,并且可为磁示踪法提供离体验证的技术与方法。荧光ISS成像法具有更高的对比度和分辨率,得到了更加精细的ISF引流分区区域。 展开更多
关键词 分子探针技术 显微镜检查 共焦 磁共振成像
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二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测志贺菌方法的建立及初步应用 被引量:5
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作者 陈峰 吴尔翔 +3 位作者 丁锁顺 邵亚平 章杰 唐晓宇 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期886-890,共5页
目的利用二聚体蝎型荧光探针法,建立一种可广泛应用且敏感、特异的检测志贺菌的荧光定量PCR技术。方法根据编码志贺菌ipaH基因的核苷酸序列设计引物和荧光探针,采用基因重组技术构建用于志贺菌检测的定量标准品,通过对荧光定量PCR反应... 目的利用二聚体蝎型荧光探针法,建立一种可广泛应用且敏感、特异的检测志贺菌的荧光定量PCR技术。方法根据编码志贺菌ipaH基因的核苷酸序列设计引物和荧光探针,采用基因重组技术构建用于志贺菌检测的定量标准品,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测志贺菌的二聚体蝎型探针定量PCR方法。结果成功构建了志贺菌重组质粒标准品和志贺菌实时荧光定量PCR方法;通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性、敏感性、稳定性和重复性;对比分离培养标本,二者符合率为100%;对比TaqMan方法,本方法具有更敏感、省时、成本低的特点。结论建立了一种以二聚体蝎型荧光探针技术为基础的志贺菌荧光定量PCR检测法,为研制新型的检测试剂盒奠定了基础,可应用于食品卫生监管以及传染病诊断等。 展开更多
关键词 二聚体蝎型探针 荧光定量PCR 志贺菌 分子探针
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MRI荧光双模态分子影像探针研究进展 被引量:8
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作者 周明 刘治国 +1 位作者 叶秋稷 曾文彬 《磁共振成像》 CAS CSCD 2013年第1期71-75,共5页
非入侵性显像技术对于研究生物体真实生理状态和机制具有十分重要的意义。由于每种显像技术都有其自身的局限性,难以同时满足定量、实时以及分辨率和灵敏度等的要求,因而多模态显像技术成为当前非入侵分子影像领域发展的主流。MRI-荧光... 非入侵性显像技术对于研究生物体真实生理状态和机制具有十分重要的意义。由于每种显像技术都有其自身的局限性,难以同时满足定量、实时以及分辨率和灵敏度等的要求,因而多模态显像技术成为当前非入侵分子影像领域发展的主流。MRI-荧光显像技术的融合由于综合了结构分辨率和检测灵敏度的优点引起了人们极大关注。作者主要对当前MRI-荧光双模态分子探针的发展现状进行综述。 展开更多
关键词 磁共振成像 荧光 分子探针 诊断显像
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