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微小RNA-200a&c在改善广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎中的作用
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作者 马芷璇 牛珍 +3 位作者 杨亮 吴小杰 吴忠道 冯英 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2025年第4期619-627,共9页
【目的】探讨过表达miRNA-200a&c后对广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎的保护作用。【方法】选取2~3周SPF级Balb/c小鼠分成4组,即正常组,广州管圆线虫感染7 d、14 d、21 d组。分别记录不同时间分组小鼠的体质量及其生... 【目的】探讨过表达miRNA-200a&c后对广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎的保护作用。【方法】选取2~3周SPF级Balb/c小鼠分成4组,即正常组,广州管圆线虫感染7 d、14 d、21 d组。分别记录不同时间分组小鼠的体质量及其生存情况,并对小鼠进行神经行为学评分及视觉评分。视觉诱发电位(VEP)检测不同时间分组小鼠视觉损伤情况。透射电镜观察不同时间分组小鼠眼球组织结构变化。广州管圆线虫感染第7天时通过立体定位注射向小鼠侧脑室注射miRNA-200a&c外源性类似物,同时将小鼠分为正常组,广州管圆线虫感染21 d组、广州管圆线虫感染+阴性对照(NC)组、广州管圆线虫感染+过表达miRNA-200a&c类似物组。VEP检测以上分组小鼠视觉损伤情况。透射电镜观察以上分组小鼠眼球组织结构变化。免疫荧光检测以上分组小鼠眼部视网膜神经节细胞(RGCs)及视神经少突胶质细胞(OLs)的数量变化。【结果】广州管圆线虫感染第21天,部分Balb/c小鼠眼睑完全闭合(32.52±4.67)%或出现眼球萎缩(15.79±3.23)%等现象,同时出现小鼠体质量下降(21 dpi:P<0.05)和神志不清等表现,感染21 d组小鼠神经行为学评分明显降低,转棒实验时长缩短68%(21 dpi:P<0.01),部分小鼠出现偏瘫而无法正常行走,甚至部分出现行动迟缓、共济失调、定向障碍;另外有部分小鼠出现刺激感觉反应迟钝,单侧视力缺失,视动反应阈值下降83%,视觉功能明显下降(21 dpi:P<0.05)。VEP结果显示广州管圆线虫感染21 d时Balb/c小鼠潜伏期与正常组相比轻度延长(21 dpi:P<0.05),且多为单侧眼部发病。过表达miRNA-200a&c后,与感染21 d组相比,VEP检测结果显示,P1波潜伏期明显缩短(P<0.05);透射电镜结显示视网膜神经节细胞胞质肿胀情况较感染21 d组对比有所减轻,视神经髓鞘结构较感染21 d组对比相对紧密,厚度也较均匀(P<0.05);免疫荧光结果显示RGCs和OLs数量较感染21 d组相比细胞数量明显升高且细胞排列紊乱的现象也有所改善(P<0.05)。【结论】广州管圆线虫感染Balb/c小鼠后引起脱髓鞘性视神经炎,过表达miRNA-200a&c可减轻脱髓鞘性视神经炎造成的损伤,改善小鼠眼部损伤。 展开更多
关键词 miRNA-200a miRNA-200c 脱髓鞘性视神经炎 视网膜神经节细胞 少突胶质细胞
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MicroRNA-200c在结直肠癌中的表达及对侵袭和转移的影响 被引量:3
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作者 叶伟标 徐咏强 +4 位作者 李妤玲 卢碧燕 杨湘玲 刘焕亮 李仲均 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期335-340,共6页
【目的】探讨microRNA-200c(miR-200c)在结直肠癌中的表达及其对SW620肠癌细胞株侵袭和转移能力的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR检测45例结直肠癌组织和配对邻近正常肠粘膜组织中miR-200c的表达水平;利用脂质体将miR-200c模拟物瞬... 【目的】探讨microRNA-200c(miR-200c)在结直肠癌中的表达及其对SW620肠癌细胞株侵袭和转移能力的影响。【方法】采用实时荧光定量PCR检测45例结直肠癌组织和配对邻近正常肠粘膜组织中miR-200c的表达水平;利用脂质体将miR-200c模拟物瞬时转染SW620细胞株,通过Western blot检测上皮间质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达;CCK-8试剂盒和Transwell小室装置检测上调miR-200c的表达对SW620细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。【结果】miR-200c在伴有淋巴结转移的结直肠癌组织中的表达明显下调。体外细胞实验显示,SW620细胞株在转染miR-200c模拟物后,ZEB1蛋白表达受抑制,上皮表型标志物E-cadherin表达升高,而间质表型标志物Vimentin表达下降;上调miR-200c表达可抑制SW620细胞增殖、侵袭和迁移。【结论】miR-200c低表达与结直肠癌侵袭和转移相关,其机制可能是通过调控上皮间质转化过程实现的。 展开更多
关键词 microrna-200c 结直肠癌 肿瘤转移 上皮间质转化
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miR-200c在胃癌中的表达水平与患者临床病理特征的关系 被引量:4
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作者 周欣亮 张璁 +4 位作者 袁虎方 王玉栋 赵连梅 桑梅香 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期538-543,共6页
目的:探讨miR-200c在胃癌组织中的表达水平与胃癌患者临床病理特征及无病生存期(diease free survial,DFS)的关系。方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年1月64例胃癌手术切除的标本及相关临床资料,采用实时荧光定量PC... 目的:探讨miR-200c在胃癌组织中的表达水平与胃癌患者临床病理特征及无病生存期(diease free survial,DFS)的关系。方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年1月64例胃癌手术切除的标本及相关临床资料,采用实时荧光定量PCR技术检测miR-200c在胃癌组织和配对癌旁非癌组织中的表达。回顾性分析miR-200c表达水平与胃癌患者的临床病理特征及DFS相关性。结果:胃癌组织中miR-200c的表达水平显著低于癌旁非癌组织(3.29 vs 5.91,P<0.01)。miR-200c的表达水平与肿瘤TNM分期、浸润深度、转移和脉管瘤栓呈显著负相关(均P<0.01)。miR-200c高表达组患者中位DFS明显长于低表达组患者(22.0 vs 13.5个月,P<0.01),其表达水平与患者DFS呈正相关(P<0.01)。结论:miR-200c在胃癌组织中低表达,其表达水平与肿瘤TNM分期、肿瘤浸润深度和脉管瘤栓呈负相关,与DFS呈正相关,在胃癌的发生发展及预后中具有重要作用。 展开更多
关键词 胃癌 mir-200c 病理特征
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miR-200c阻滞转化生长因子-β1在腹膜后成纤维细胞增殖和迁移侵袭中的作用 被引量:4
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作者 施莹 林玲 +3 位作者 阚佳音 刘海燕 马增伟 李双宇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1005-1008,共4页
目的:阐明miR-200c对腹膜后成纤维细胞增殖的影响,并分析其分子机制,为抑制腹膜后纤维化提供理论依据。方法:收集36例人腹膜后组织,原代培养成纤维细胞,以5 ng/ml TGF-β1刺激者为TGF-β1组,pc DNA3.1-miR-200c转染成纤维细胞,再给予5 n... 目的:阐明miR-200c对腹膜后成纤维细胞增殖的影响,并分析其分子机制,为抑制腹膜后纤维化提供理论依据。方法:收集36例人腹膜后组织,原代培养成纤维细胞,以5 ng/ml TGF-β1刺激者为TGF-β1组,pc DNA3.1-miR-200c转染成纤维细胞,再给予5 ng/ml TGF-β1刺激者为miR-200c组,仅以pc DNA3.1质粒转染者为pc DNA3.1质粒组,正常培养的成纤维细胞为对照组。分别以噻唑蓝(MTT)细胞增殖实验、细胞划痕实验、Transwell细胞小室迁移实验检测成纤维细胞增殖和迁移能力,并以ELISA实验检测各组细胞裂解液中Akt蛋白的含量。结果:miR-200c组成纤维细胞的增殖OD值明显比TGF-β1组降低(P<0.01);与TGF-β1组相比,miR-200c组细胞迁移率明显降低(P<0.01);miR-200c组Akt蛋白的含量比TGF-β1组明显降低(P<0.01)。结论:miR-200c下调Akt通路而抑制TGF-β1对成纤维细胞的增殖或迁移效果,对抑制腹膜纤维化具有重要意义。 展开更多
关键词 mir-200c 成纤维细胞 增殖 迁移
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胃癌中DNA甲基化对miR-200c 141表达影响的研究 被引量:3
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作者 周欣亮 张璁 +3 位作者 王玉栋 赵连梅 桑梅香 单保恩 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期73-77,共5页
目的:探讨胃癌组织中miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141表达水平和临床病理特征的相关性。方法:运用实时定量PCR(qRT-PCR)和BS-MSP方法检测胃癌组织和癌旁组织中miR-200c/141CpG岛的表达与其基因甲基化水平。统计学分析miR-2... 目的:探讨胃癌组织中miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141表达水平和临床病理特征的相关性。方法:运用实时定量PCR(qRT-PCR)和BS-MSP方法检测胃癌组织和癌旁组织中miR-200c/141CpG岛的表达与其基因甲基化水平。统计学分析miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c/141水平和临床病理特征的关系。结果:miR-200c/141CpG岛的甲基化水平在胃癌组织中显著升高,miR-200c和miR-141的水平显著降低,miR-200c/141CpG岛的甲基化水平与miR-200c和miR-141的水平呈负相关。结论:胃癌组织中升高的miR-200c/141CpG岛的甲基化水平诱导miR-200c和miR-141表达降低。 展开更多
关键词 胃癌 甲基化 mir-200c mir-141 临床病理特征
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MiR-200c与脏器纤维化的研究进展 被引量:4
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作者 陈珺 蔡晋宇 +3 位作者 杜翠 曹琼 李敏 刘斌杰 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期226-232,共7页
MiR-200c在肺、肝、肾、腹膜、皮肤纤维化及翼状胬肉中异常表达。多项研究表明miR-200c与脏器纤维化密切相关,miR-200c主要通过调控TGF-β介导的上皮间质转化参与调控纤维化的发生发展;血清中miR-200c的表达异常可能为肺纤维化的早期诊... MiR-200c在肺、肝、肾、腹膜、皮肤纤维化及翼状胬肉中异常表达。多项研究表明miR-200c与脏器纤维化密切相关,miR-200c主要通过调控TGF-β介导的上皮间质转化参与调控纤维化的发生发展;血清中miR-200c的表达异常可能为肺纤维化的早期诊断提供依据,实验表明miRNA mimics,miRNA agomir,miRNA抑制剂是纤维化潜在的靶标治疗工具。作者对miR-200c的表达、调控及其在脏器纤维化的诊断、治疗和预后判断中的作用进行了综述。 展开更多
关键词 mir-200c 纤维化 靶基因
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miR-200c与肿瘤进展关系的研究进展 被引量:3
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作者 谭国斌 邱明宁 +1 位作者 陈合格 柳建军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期120-124,共5页
microRNA(miRNA)是内源性非编码单链小RNA,参与细胞增殖、凋亡与分化等多种重要生命活动的调控。近年来研究发现,miRNAs参与多种恶性肿瘤的演进,起抑癌基因或原癌基因的作用。miR-200c是上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal,EMT)过程... microRNA(miRNA)是内源性非编码单链小RNA,参与细胞增殖、凋亡与分化等多种重要生命活动的调控。近年来研究发现,miRNAs参与多种恶性肿瘤的演进,起抑癌基因或原癌基因的作用。miR-200c是上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal,EMT)过程中的重要调节基因,除了在正常细胞的表型转换中起作用,还在多种类型癌细胞的表型转换中起调节作用,能促进或者抑制肿瘤的侵袭转移能力。此外,关于miR-200c的研究还涉及肿瘤的耐药性和凋亡抗性。研究证实,miR-200c能够促进或抑制肿瘤的侵袭转移,逆转肿瘤细胞的耐药性和凋亡抗性。本文主要对不同肿瘤中miR-200c对肿瘤进展的影响进行综述。 展开更多
关键词 mir-200c EMT 抗凋亡 耐药 肿瘤
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miR-200c对乳腺癌BT549细胞迁移及Slug表达的作用 被引量:3
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作者 贾莉婷 田远 +5 位作者 石瑛 张琳琳 杨小倩 荣守华 张玉超 李静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期304-307,共4页
目的:结合对乳腺癌细胞系BT549迁移能力的研究,探讨转染miR-200c对Slug表达的作用。方法:设计miR-200c模拟物,转染具有高转移性的乳腺癌细胞系BT549,通过Transwell迁移试验、划痕实验,观察转染miR-200c后对乳腺癌细胞系BT549迁移能力的... 目的:结合对乳腺癌细胞系BT549迁移能力的研究,探讨转染miR-200c对Slug表达的作用。方法:设计miR-200c模拟物,转染具有高转移性的乳腺癌细胞系BT549,通过Transwell迁移试验、划痕实验,观察转染miR-200c后对乳腺癌细胞系BT549迁移能力的影响;利用Real-time PCR检测Slug和E-钙黏连蛋白mRNA的表达水平;利用Western blot检测Slug蛋白的表达水平。结果:Real-time PCR和Western blot结果显示,miR-200c转染组Slug表达水平被有效抑制(P<0.05)。与对照组相比,miR-200c转染组的BT549细胞迁移能力明显下降(P<0.05)。结论:在乳腺癌细胞系BT549中,miR-200c可以通过抑制Slug的表达进而抑制上皮间质转化,最终导致细胞迁移能力下降。 展开更多
关键词 乳腺癌 上皮间质转化 SLUG BT549 E-钙黏连蛋白 mir-200c
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miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2蛋白的相关性 被引量:11
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作者 苏纯 李巧云 张薇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第18期3057-3059,共3页
目的:探讨miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2的相关性。方法:选取113例子宫内膜癌组织和癌旁组织标本,40例正常子宫内膜癌组织作为对照组,检测组织中miR-200c表达量,以及ZEB2基因和蛋白表达量,利用反义寡核苷酸技术抑制子宫内膜... 目的:探讨miR-200c在子宫内膜癌组织中的表达及与ZEB2的相关性。方法:选取113例子宫内膜癌组织和癌旁组织标本,40例正常子宫内膜癌组织作为对照组,检测组织中miR-200c表达量,以及ZEB2基因和蛋白表达量,利用反义寡核苷酸技术抑制子宫内膜癌RL95-2细胞株中miR-200c表达,检测其对细胞侵袭力的影响,以及细胞中ZEB2基因和蛋白表达。结果:子宫内膜癌组织中miR-200c表达量、ZEB2基因和蛋白表达量均高于癌旁组织和对照组(P<0.05);反义miR-200c转染组穿膜细胞数少于阴性对照组和脂质体组(P<0.05);反义miR-200c转染组细胞中ZEB2基因和蛋白表达量均低于阴性对照组和脂质体组(P<0.05)。结论 :miR-200c在子宫内膜癌组织中呈高表达,可能是通过调控ZEB2而促进肿瘤细胞的浸润和转移。 展开更多
关键词 子宫内膜肿瘤 MI R-200c ZEB2 相关性
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miR-200c调控RhoA基因表达介导RMP7增加血肿瘤屏障通透性机制的研究 被引量:2
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作者 马腾 刘丽波 +2 位作者 蔺扬 马珺 薛一雪 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1057-1062,共6页
目的研究miR-200c调控Ras基因家族成员A(RhoA)表达介导RMP7增加血肿瘤屏障(BTB)通透性的机制。方法应用real-time PCR检测RMP7作用BTB后人脑微血管内皮细(ECs)miR-200c的表达;应用miR-200c模拟物和miR-200c抑制物分别转染GECs(ECs和U87... 目的研究miR-200c调控Ras基因家族成员A(RhoA)表达介导RMP7增加血肿瘤屏障(BTB)通透性的机制。方法应用real-time PCR检测RMP7作用BTB后人脑微血管内皮细(ECs)miR-200c的表达;应用miR-200c模拟物和miR-200c抑制物分别转染GECs(ECs和U87脑胶质瘤细胞共培养的细胞),测量跨内皮阻抗值(TEER)、辣根过氧化物酶(HRP)渗漏量,分析BTB通透性;应用Western blotting检测RhoA的表达;应用免疫荧光方法观察GECs中RhoA表达和分布;应用双荧光素酶报告基因检测miR-200c转录后水平调控RhoA机制。结果 RMP7作用GECs后,使GECs内源性miR-200c表达显著降低;miR-200c模拟物和miR-200c抑制物成功转染到GECs中;miR-200c模拟物显著抑制RMP7诱导TEER值的降低、HRP的升高;miR-200c模拟物显著减少RhoA的表达,促使RhoA在GECs细胞质和细胞核分布减少;miR-200c模拟物转录后水平负性调控RhoA基因表达。miR-200c抑制物与miR-200c模拟物实验结果相反。结论 miR-200c转录后水平负性调控RhoA表达,介导RMP7增加血肿瘤屏障通透性机制。 展开更多
关键词 mir-200c Ras基因家族成员A RMP7 血肿瘤屏障 基因表达调控
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miR-200c对三阴性乳腺癌细胞系上皮间质转化的影响 被引量:2
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作者 贾莉婷 张玉超 +7 位作者 李静 张琳琳 田远 于海洋 荣守华 邢金芳 李君芳 马啸天 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第3期325-329,共5页
目的:探讨miR-200c对三阴性乳腺癌细胞系上皮间质转化的影响。方法:选取三阴性人乳腺癌细胞系BT549、MDA-MB-231和非三阴性人乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3为研究对象,各细胞系按转染情况分为A组(miR-200c模拟物/Lipo2000组)、B组(miR-200... 目的:探讨miR-200c对三阴性乳腺癌细胞系上皮间质转化的影响。方法:选取三阴性人乳腺癌细胞系BT549、MDA-MB-231和非三阴性人乳腺癌细胞系MCF-7、SK-BR-3为研究对象,各细胞系按转染情况分为A组(miR-200c模拟物/Lipo2000组)、B组(miR-200c阴性对照物/Lipo2000组)、C组(miR阴性对照物/Lipo2000组)、D组(Lipo2000组)、E组(空白对照组)。分别提取各组细胞的总RNA和蛋白,通过RT-PCR检测Slug和E-cadherin mRNA表达水平,通过Western blot检测Slug和E-cadherin蛋白表达水平。采用划痕实验检测BT549和MDA-MB-231的迁移能力。结果:三阴性细胞系与非三阴性细胞系相比,E组Slug、E-cadherin在mRNA与蛋白水平的表达量,差异有统计学意义(P<0.05)。转染miR-200c后,三阴性细胞系BT549、MDA-MB-231 Slug在mRNA和蛋白水平表达量均降低(P<0.05),E-cadherin在mRNA和蛋白水平表达量均增高(P<0.05),细胞迁移能力下降(P<0.05)。结论:miR-200c可通过下调三阴性乳腺癌细胞系Slug的表达,进而抑制上皮间质转化,降低细胞迁移能力。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 mir-200c SLUG E-cADHERIN 上皮间质转化
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miR-200c下调KRAS基因表达抑制膀胱癌细胞体外增殖能力 被引量:1
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作者 李建昌 苏泽轩 +3 位作者 石利平 陈合格 柳建军 刘磊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第21期2142-2146,共5页
目的探讨miR-200c对膀胱癌细胞体外增殖能力的作用及机制。方法慢病毒感染法建立稳定过表达和稳定低表达miR-200c膀胱癌细胞,分为对照组、稳定过表达miR-200c组(miR-200c组)、稳定低表达miR-200c组(miR-200c-inhibit组),实时定量qRT-PCR... 目的探讨miR-200c对膀胱癌细胞体外增殖能力的作用及机制。方法慢病毒感染法建立稳定过表达和稳定低表达miR-200c膀胱癌细胞,分为对照组、稳定过表达miR-200c组(miR-200c组)、稳定低表达miR-200c组(miR-200c-inhibit组),实时定量qRT-PCR和Western blot检测不同实验组膀胱癌细胞中miR-200c、KRAS的表达量,克隆试验检测不同组膀胱癌细胞系的增殖能力。结果CCK-8试验显示对照组T24和UM-UC-3与miR-200c组分别为0.833 3±0.062 1、0.650 3±0.088 7和0.939 0±0.018 1、0.806 0±0.021 6,2组间差异有统计学意义(T24,P<0.05;UM-UC-3,P<0.01)。稳定过表达miR-200c后,膀胱癌细胞系内KRAS蛋白的表达降低(P<0.05)。结论 miR-200c在体外通过下调KRAS基因降低膀胱癌细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 膀胱癌 mir-200c KRAS 增殖
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长链非编码ATB通过抑制miR-200c的表达促进乳腺癌细胞的侵袭转移 被引量:2
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作者 李娟 何力 高青山 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2163-2168,共6页
目的探讨长链非编码ATB通过抑制miR-200c的表达促进乳腺癌细胞侵袭转移的作用及其机制。方法 q PCR检测不同乳腺癌细胞株中ATB和miR-200c的表达情况;双荧光素酶报告基因检测ATB与miR-200c的相互作用;MTT细胞增殖实验和Transwell侵袭实... 目的探讨长链非编码ATB通过抑制miR-200c的表达促进乳腺癌细胞侵袭转移的作用及其机制。方法 q PCR检测不同乳腺癌细胞株中ATB和miR-200c的表达情况;双荧光素酶报告基因检测ATB与miR-200c的相互作用;MTT细胞增殖实验和Transwell侵袭实验检测沉抑制ATB后乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的变化;MTT细胞增殖实验和Transwell侵袭实验检测抑制ATB后沉默miR-200c对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的逆转作用;Western blot检测抑制ATB后ZEB1和ZNF217蛋白的表达。结果与其他乳腺癌细胞相比,SKBr-3细胞株ATB表达水平最低,miR-200c的表达水平最高;ATB能与miR-200c的位点特异性结合,调控其表达活性;抑制ATB后可以增强乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力,而沉默miR-200c后可以在一定程度上逆转ATB对乳腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响;抑制ATB后ZEB1和ZNF217蛋白表达水平得到一定的恢复。结论 ATB在乳腺癌发生、发展过程中起重要作用,ATB可以靶向调节miR-200c调控乳腺癌细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 ATB mir-200c 乳腺癌 增殖 侵袭
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原发性先天性青光眼(PCG)患儿与正常婴幼儿血浆中微小核糖核酸(miRNA或miR)-29b、miR-24、miR-200c的表达差异及临床意义 被引量:4
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作者 郑玲 冯光强 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第8期755-758,共4页
目的探讨原发性先天性青光眼(primary congenital glaucoma,PCG)患儿与正常婴幼儿血浆中微小核糖核酸(miRNA或miR)-29b、miR-24、miR-200c的表达差异及临床意义。方法收集2015年至2017年散发的PCG患儿16例血浆标本作为PCG组,另选年龄相... 目的探讨原发性先天性青光眼(primary congenital glaucoma,PCG)患儿与正常婴幼儿血浆中微小核糖核酸(miRNA或miR)-29b、miR-24、miR-200c的表达差异及临床意义。方法收集2015年至2017年散发的PCG患儿16例血浆标本作为PCG组,另选年龄相近的正常婴幼儿共49例血浆标本作为正常人组。应用实时荧光定量PCR检测两组受试者血浆中miR-29b、miR-24、miR-200c的表达量,分析各自表达差异与病变严重程度的关系,并运用ROC曲线评价其诊断价值。结果PCG组受试者血浆中miR-29b、miR-24、miR-200c相对表达量(0.31±0.19、0.17±0.16、0.55±0.18)明显低于正常人组(1.18±0.52、2.86±2.65、1.62±0.76),差异均有统计学意义(均为P<0.05);血浆中miR-24、miR-29b的表达与PCG病变严重程度有关,病变越严重,其表达量越低;ROC曲线表明miR-24和miR-29b对PCG疾病的诊断价值高于miR-200c。结论血浆中游离的miRNA可作为辅助诊断PCG一种新的血浆标志物。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-29 b 微小核糖核酸-24 微小核糖核酸-200c 血浆 原发性先天性青光眼
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miR-200c增加H2228细胞对克唑替尼和紫杉醇及顺铂敏感性的研究 被引量:1
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作者 高海祥 曹磊 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第36期4478-4483,共6页
背景miR-200c可以增加肿瘤细胞对紫杉醇、顺铂的敏感性及表皮生长因子受体(EGFR)阳性肺癌细胞对分子靶向药物厄洛替尼、吉非替尼及阿法替尼的敏感性,但其是否可以增加棘皮动物微管相关样蛋白4(EML4)-间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合基因阳性... 背景miR-200c可以增加肿瘤细胞对紫杉醇、顺铂的敏感性及表皮生长因子受体(EGFR)阳性肺癌细胞对分子靶向药物厄洛替尼、吉非替尼及阿法替尼的敏感性,但其是否可以增加棘皮动物微管相关样蛋白4(EML4)-间变性淋巴瘤激酶(ALK)融合基因阳性肺腺癌细胞(ALK阳性肺癌细胞)对克唑替尼、紫杉醇和顺铂的敏感性尚无相关研究。目的观察miR-200c是否可以增加H2228细胞对克唑替尼、紫杉醇及顺铂的敏感性,并探讨其机制。方法 2014年2月—2015年5月,培养H2228细胞并进行转染,根据转染物的不同,将细胞分为增强转染组(转染miR-200c mimics)、增强对照组(转染miR-200c mimics阴性对照)、抑制转染组(转染miR-200c inhibitor)、抑制对照组(转染miR-200c inhibitor阴性对照)。采用实时荧光定量PCR法(Real-time PCR法)检测H2228细胞中miR-200c基因表达水平,MTT法检测不同浓度抗肿瘤药物〔克唑替尼(50、100、200 nmol/L)、紫杉醇(6.25、12.50、25.00 nmol/L)、顺铂(25、50、100 nmol/L)〕作用下H2228细胞增殖水平,Transwell法检测H2228细胞迁移率,Real-time PCR法检测增强转染组、增强对照组H2228细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波状蛋白、CD24mRNA表达水平,Western blotting法检测增强转染组、增强对照组H2228细胞中E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波状蛋白、CD24表达水平。结果增强转染组H2228细胞中miR-200c基因表达水平高于增强对照组(P<0.05)。抑制转染组H2228细胞中miR-200c基因表达水平低于抑制对照组(P<0.05)。增强转染组各浓度抗肿瘤药物作用下H2228细胞增殖水平均低于增强对照组(P<0.05)。抑制转染组各浓度抗肿瘤药物作用下H2228细胞增殖水平均高于抑制对照组(P<0.05)。增强转染组H2228细胞迁移率小于增强对照组(P<0.05)。抑制转染组H2228细胞迁移率大于抑制对照组(P<0.05)。增强转染组H2228细胞中E-钙黏蛋白及其mRNA表达水平高于增强对照组,N-钙黏蛋白、波状蛋白、CD24及其mRNA表达水平低于增强对照组(P<0.05)。结论 miR-200c可以通过使肺癌细胞发生间质-上皮转变(MET)而增加H2228细胞对克唑替尼、紫杉醇及顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 抗药性 肿瘤 H2228 mir-200c 克唑替尼 紫杉醇 顺铂
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miR-200c促进肝星状细胞活化诱导肝纤维化的机制 被引量:6
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作者 马腾飞 华赟鹏 +2 位作者 李巧 蔡秀琴 马超峰 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期497-501,共5页
【目的】探讨mi R-200c在肝星状细胞(HSC)活化、增殖、迁移及促肝纤维化中的作用。【方法】慢病毒转染的方法构建过表达mi R-200c的稳定细胞株(LX2-200c)和空质粒对照组(LX2-nc),RT-PCR检测LX2-200c和LX2-nc细胞上mi R-200c和Ⅰ型胶原... 【目的】探讨mi R-200c在肝星状细胞(HSC)活化、增殖、迁移及促肝纤维化中的作用。【方法】慢病毒转染的方法构建过表达mi R-200c的稳定细胞株(LX2-200c)和空质粒对照组(LX2-nc),RT-PCR检测LX2-200c和LX2-nc细胞上mi R-200c和Ⅰ型胶原蛋白的表达,Western Blot检测LX2-200c和LX2-nc细胞的活化标志分子α-SMA和Vimentin的变化,CCK-8实验检测增殖情况,划痕实验检测迁移情况。【结果】野生型LX2细胞中mi R-200c呈低表达,mi R-200c的过表达促进了HSC上α-SMA和Vimentin表达的增加,并使HSC的增殖和迁移能力增强,另外,ECM重要组成成分Ⅰ型胶原蛋白的表达也显著增加(P=0.0031)。【结论】mi R-200c可以促进HSC的活化、增殖、迁移以及ECM的分泌,进而参与了肝纤维化的过程。 展开更多
关键词 肝星状细胞 mir-200c 肝纤维化
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miR-200c和miR-429靶向调节绵羊皮下脂肪细胞中SCD1表达的研究 被引量:4
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作者 王书芳 潘洋洋 +4 位作者 任端阳 赵艳艳 李宝钧 乔利英 刘文忠 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1347-1357,共11页
旨在预测并验证调节绵羊皮下脂肪细胞中SCD1基因表达的关键miRNAs。本研究利用4个生物信息学软件TargetScan、mirDB、StarBase和miRanda预测与该基因具有靶标关系的关键miRNAs;利用双荧光素酶报告系统验证SCD1基因与miRNAs的靶标关系;... 旨在预测并验证调节绵羊皮下脂肪细胞中SCD1基因表达的关键miRNAs。本研究利用4个生物信息学软件TargetScan、mirDB、StarBase和miRanda预测与该基因具有靶标关系的关键miRNAs;利用双荧光素酶报告系统验证SCD1基因与miRNAs的靶标关系;利用荧光定量PCR和Western-blotting技术,分别在mRNA和蛋白水平上检测miRNAs对SCD1 mRNA和蛋白质表达的影响。预测结果表明,miR-200c和miR-429是调控SCD1基因表达的关键miRNAs;双荧光素酶报告系统检测证明,2个miRNAs与SCD1基因都具有靶标关系;荧光定量PCR显示,miR-200c和miR-429显著抑制SCD1 mRNA的表达(P<0.05),且miR-200c作用更大;Western-blotting显示,miR-200c和miR-429极显著抑制SCD1蛋白质的表达(P<0.01);显微镜观察发现,miR-200c和miR-429抑制绵羊皮下脂肪细胞脂滴生成。由此证明,miR-200c和miR-429均靶向抑制SCD1基因的表达,进而抑制绵羊脂肪生成。 展开更多
关键词 mir-200c mir-429 ScD1 miRNA预测 脂肪代谢
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miR-200c启动子区甲基化与肺癌细胞对EGFR-TKI耐药相关 被引量:2
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作者 徐姝 吴建中 +3 位作者 曹海霞 张琰 刘宇飞 冯继锋 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-5,共5页
目的:初步探讨miR-200c启动子区甲基化与非小细胞肺癌细胞株对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)敏感性变化的关系。方法:选用表皮生长因子受体(epidermal growt... 目的:初步探讨miR-200c启动子区甲基化与非小细胞肺癌细胞株对表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)敏感性变化的关系。方法:选用表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)19外显子区缺失突变(E746-A750)的细胞株(H1650、HCC827)及EGFR野生型细胞株(H358、H1299),应用MSP法检测各细胞株miR-200c启动子区的甲基化状态,CCK-8法检测各细胞株对EGFR-TKI吉非替尼的药物敏感性,荧光定量PCR法检测各细胞株miR-200c的相对表达量;去甲基化药物5-aza-CdR处理各细胞株后,观察其对吉非替尼敏感性及miR-200c表达量的变化。结果:吉非替尼敏感细胞株HCC827及H358高表达miR-200c,其启动子区为非甲基化状态;吉非替尼耐药细胞株H1650及H1299的miR-200c表达较低,其启动子区为甲基化状态;经5-aza-CdR处理后,吉非替尼耐药细胞株H1650及H1299的miR-200c及对吉非替尼的敏感性较前显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);而吉非替尼敏感株HCC827及H358的miR-200c及对吉非替尼的敏感性未见有明显改变(P>0.05)。结论:miR-200c启动子区的甲基化抑制了miR-200c的表达,从而使H1650及H1299细胞对吉非替尼耐药。 展开更多
关键词 mir-200c 吉非替尼 甲基化 5-AZA-cDR
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miR-200c通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路诱导膀胱癌细胞阿霉素耐药 被引量:4
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作者 刘雷 李轶枭 +1 位作者 万波 曾青 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第5期510-516,共7页
目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/... 目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/β-连环蛋白信号激活剂Wnt3a干预对miR-200c诱导膀胱癌DOX耐药作用的影响。结果:抗miR-200c转染后,T24和RT4细胞DOX的耐药性显著下降。DOX干预后,与对照组细胞相比,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞凋亡和S期积累明显增加。此外,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞中Dkk1,Kremen2和s FRP2等Wnt/β-连环蛋白信号的负调控蛋白表达明显升高,Wnt/β-连环蛋白信号通路活性明显下降。Wnt3a干预能够拮抗抗miR-200c转染的膀胱癌细胞生长抑制作用。结论:miR-200c表达与膀胱癌细胞DOX耐药密切相关,且Wnt/β-连环蛋白信号通路激活介导了miR-200c诱导的膀胱癌细胞DOX耐药性。 展开更多
关键词 膀胱癌 阿霉素 微小核糖核酸 mir-200c Wnt/β-连环蛋白信号通路
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乙型肝炎病毒x蛋白通过靶向miR-200c诱导DNA异常甲基化 被引量:1
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作者 张媛悦 王淑青 +3 位作者 刘岩 刘艳坤 李玉辉 李玉凤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1080-1089,共10页
乙型肝炎病毒x(hepatitis B virus x,HBx)蛋白是导致肝癌(hepatocellular Carcinoma,HCC)的重要因素.但HBX在HCC形成过程中表观遗传机制尚有待阐明.本研究发现microRNA-200c(miR-200c)在过表达乙型肝炎病毒的HCC中下调,并且其直接靶向DN... 乙型肝炎病毒x(hepatitis B virus x,HBx)蛋白是导致肝癌(hepatocellular Carcinoma,HCC)的重要因素.但HBX在HCC形成过程中表观遗传机制尚有待阐明.本研究发现microRNA-200c(miR-200c)在过表达乙型肝炎病毒的HCC中下调,并且其直接靶向DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferase 3A,DNMT3A).此外,miR-200c和DNMT3A在HB诱发的肝癌组织中呈现负相关.乙型肝炎病毒诱导miR-200c下调,进而引起DNMT3A表达上调,导致细胞中肿瘤相关基因的启动子超甲基化.我们对乙型肝炎病毒诱导的肝癌表观遗传学改变进行了进一步研究,并提出一种基于miRNA的靶向治疗乙型肝炎病毒相关肝癌的潜在方法. 展开更多
关键词 mir-200c 肝癌 DNMT3A 乙肝病毒
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