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外泌体miRNA在女性生殖领域研究概况及中医药治疗的研究进展 被引量：1
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作者 李晓荣 高婷 +3 位作者 仲佳雯 秦岭 王雪怡 罗玉雪 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第2期194-199,共6页
外泌体作为细胞间通讯的介质,近年来受到广泛的关注。尤其是外泌体携带miRNA能够调控各种疾病的发生发展,包括女性不孕性生殖疾病,有望成为多种疾病早期诊断治疗、预后的新生物标志物。此外,研究发现外泌体及其miRNA广泛参与了药物治疗... 外泌体作为细胞间通讯的介质,近年来受到广泛的关注。尤其是外泌体携带miRNA能够调控各种疾病的发生发展,包括女性不孕性生殖疾病,有望成为多种疾病早期诊断治疗、预后的新生物标志物。此外,研究发现外泌体及其miRNA广泛参与了药物治疗过程。中医药在治疗女性多种生殖疾病中均有较好的疗效,但由于中药治疗作用多靶点、多环节、多通路的特点,直接的信号通路研究已经不能解释药物作用的具体机制,研究发现外泌体及miRNA作为间接桥梁,可能是中药作用机制研究的有效物质。因此,该文旨在通过总结外泌体miRNA对女性生殖疾病的调控作用及外泌体miRNA在中药干预作用机制中的研究,为女性生殖疾病诊疗和中医药作用机制的研究提供新的思路和文献依据。 展开更多
关键词 外泌体 mirna 生殖疾病 中药
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从LncRNA-UCA1探讨针刺调节miRNA-331-3p/BRD4轴改善脾虚大鼠肠道炎症作用机制 被引量：1
2
作者 刘继东 张家豪 +2 位作者 王建波 曲怡 薛亚楠 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第6期183-188,I0027-I0030,共10页
目的从长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(LncRNA-UCA1)探讨针刺调节miRNA-331-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴改善脾虚大鼠肠道炎症作用机制,探讨“健益脾气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机制。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分... 目的从长链非编码RNA尿路上皮癌相关基因1(LncRNA-UCA1)探讨针刺调节miRNA-331-3p/溴结构域蛋白4(BRD4)轴改善脾虚大鼠肠道炎症作用机制,探讨“健益脾气”针刺疗法改善脾虚便溏症状现代作用机制。方法将60只SD雄性大鼠以随机数字表法分为正常组、模型组、非经非穴组、针刺组,每组15只。除正常组外,其余3组采用劳倦过度和不规律饮食复合方法建立脾虚证大鼠模型。造模成功后,针刺组电针“足三里”穴及“脾俞”穴干预治疗,非经非穴组给予电针尾尖作为对照干预,每日1次/20 min,共治疗14 d。治疗结束后,取大鼠血清及结肠组织。qPCR法检测大鼠结肠组织LncRNA-UCA1、miRNA-331-3p/BRD4轴相关基因的表达;ELISA法检测大鼠血清中白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的含量;HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态变化;免疫组化法观察结肠中BRD4、白细胞介素-8(IL-8)的表达情况;免疫荧光法观察IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子-κBp65(NFκBp65)的表达水平;TUNEL染色法观察各组结肠组织凋亡情况。结果与正常组比较,模型组、非经非穴组大鼠结肠组织miRNA-331-3p的表达水平明显下降(P<0.05),LncRNA-UCA1、BRD4、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA表达水平有所升高(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠结肠组织miRNA-331-3p的表达水平明显升高(P<0.05),LncRNA-UCA1、BRD4、NF-κB p65、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的mRNA表达水平有所降低(P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清中促炎因子IL-1β、IL-6表达水平明显升高(P<0.05),与模型组比较,针刺组大鼠结肠组织中促炎因子IL-1β、IL-6的表达水平有所降低(P<0.05)。免疫组化法结果显示与正常组比较,模型组大鼠结肠组织BRD4、IL-8表达有所升高(P<0.05);与模型组比较,针刺组的BRD4表达有所降低(P<0.05)。免疫荧光结果显示与正常组比较,模型组、非经非穴组结肠组织IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值升高(P<0.05);与模型组比较,针刺组大鼠结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α、NF-κB p65免疫荧光平均吸光度值降低(P<0.05)。另外HE染色结果显示,针刺治疗可有效减轻结肠黏膜组织中炎症细胞浸润和杯状细胞的损失;TUNEL染色结果显示,针刺治疗可以改善脾虚大鼠结肠炎症,抑制结肠黏膜细胞凋亡。结论电针“足三里”“脾俞”穴可以干预LncRNA-UCA1调节miRNA-331-3p/BRD4轴,抑制肠道炎症和促炎症介质的表达,进而抑制结肠黏膜细胞凋亡,提高机体免疫力,从而改善脾虚便溏症状。 展开更多
关键词 足三里 脾俞 脾虚 肠道炎症 LncRNA-UCA1 mirna-331/BRD4
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布鲁氏菌病诊断外泌体microRNA生物标志物的筛选和潜在miRNA-mRNA调控网络的构建
3
作者 赵进 陈志强 +5 位作者 王冰丽 李书灵 朱晓玉 贾金彤 柳叶子 李智伟 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第3期269-277,共9页
目的 探索布鲁氏菌病新型辅助诊断生物标志物及其潜在的miRNA-mRNA调控网络。方法 通过高通量测序比较布鲁氏菌病患者和健康对照组血清外泌体中miRNA的表达差异。利用RT-qPCR验证显著上调的外泌体miRNA的表达。采用ROC曲线评估这些miRN... 目的 探索布鲁氏菌病新型辅助诊断生物标志物及其潜在的miRNA-mRNA调控网络。方法 通过高通量测序比较布鲁氏菌病患者和健康对照组血清外泌体中miRNA的表达差异。利用RT-qPCR验证显著上调的外泌体miRNA的表达。采用ROC曲线评估这些miRNA的诊断价值,并结合生物信息学分析miRNA在布鲁氏菌病感染中的潜在作用。结果 ROC曲线显示外泌体hsa-miR-11400(P<0.05)、hsa-miR-199a-5p(P<0.05)和hsa-miR-148a-5p(P<0.05)的曲线下面积分别为0.79、0.81和0.74。预测了465个差异表达基因,其中包括25个免疫相关靶基因,其中大多数与癌症蛋白多糖、NF-kappa B信号网络和IL-17信号通路密切相关。通过构建差异表达基因网络,PLXNA2、IL17RA、PRKCA、CD22、ACVR1B和CBL免疫基因可能分别受到hsa-miR-199a-5p和hsa-miR-148a-5p的调控。结论 表明外泌体miRNA可作为布鲁氏菌病的辅助诊断指标,且外泌体miRNA-mRNA调控网络为布鲁氏菌病的发病机制及治疗提供了新的见解。 展开更多
关键词 布鲁氏菌病 外泌体微小核糖核酸 生物标志物 mirna-mRNA调控网络
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多酚介导miRNAs防治糖尿病综述
4
作者 段慧明 程永芳 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第28期11867-11876,共10页
糖尿病是一项重大的公共卫生挑战,患病率和死亡率高。多酚作为天然活性成分,在预防2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)中表现出潜力。由于多酚主要通过调节miRNA表达来调控靶基因,因此,对多酚介导miRNAs调控靶标基因的各种功能... 糖尿病是一项重大的公共卫生挑战,患病率和死亡率高。多酚作为天然活性成分,在预防2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)中表现出潜力。由于多酚主要通过调节miRNA表达来调控靶基因,因此,对多酚介导miRNAs调控靶标基因的各种功能进行分类和总结。尽管目前对其调控机制及功能的认识仍需深入,但多酚介导的miRNA靶向调控为防治糖尿病提供了新的理论依据和潜在策略,未来研究应结合多组学技术,进一步阐明其作用机制,并探索个性化应用潜力。 展开更多
关键词 多酚 mirnaS 糖尿病 研究进展
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东安鸡与商品肉鸡胚胎期腿肌差异表达miRNA筛选及分析 被引量：1
5
作者 曾斌 唐敏 +3 位作者 屈宏斌 于桂阳 陈婷 唐伟 《中国家禽》 北大核心 2025年第7期1-11,共11页
研究旨在筛选东安鸡与商品肉鸡胚胎发育关键期腿肌差异表达的miRNA,为深入探究miRNA在东安鸡肌肉发育过程中的调控机制奠定基础。研究选取东安鸡、白羽肉鸡和黄羽肉鸡胚胎期第15天(E15)腿肌组织进行HE染色和小RNA测序。通过生物信息学分... 研究旨在筛选东安鸡与商品肉鸡胚胎发育关键期腿肌差异表达的miRNA,为深入探究miRNA在东安鸡肌肉发育过程中的调控机制奠定基础。研究选取东安鸡、白羽肉鸡和黄羽肉鸡胚胎期第15天(E15)腿肌组织进行HE染色和小RNA测序。通过生物信息学分析,对差异miRNAs的靶基因进行功能富集分析,构建差异miRNA-mRNA调控网络,并随机选取6个差异表达miRNA和8个mRNA进行qRT-PCR验证。结果显示:9个测序文库中共鉴定出824个已知miRNAs和81个新的miRNAs。东安鸡有12个miRNA与两种商品肉鸡都差异表达,其中显著上调3个,显著下调9个。功能富集分析发现东安鸡差异miRNA的靶基因主要富集在大分子代谢和细胞生长周期通路,包括糖酵解/糖异生代谢、花生四烯酸代谢、戊糖磷酸途径、Wnt、P53和MAPK信号通路。miRNA-mRNA联合分析表明,gga-miR-194-TOR1B、gga-miR-122-5p-WNT11B、gga-miR-200b-3p-MYO5A、gga-miR-135a-2-3p-PAX9等互作对可能是调控东安鸡肌肉发育及其相关性状形成的关键调控因子。QRT-PCR的检测结果与测序结果、靶基因预测结果吻合,证实测序数据和分析结果准确可靠。研究表明,东安鸡与两种商品肉鸡在E15腿肌中存在12个差异表达的miRNAs,这些miRNAs的功能聚焦在细胞大分子代谢过程和生长发育信号通路,研究结果为深入探索东安鸡肌肉性状的分子调控机理和遗传改良应用奠定基础。 展开更多
关键词 东安鸡 肉鸡 胚胎期 腿肌 mirna
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肺动脉内皮细胞在肉鸡腹水综合征中的作用及miRNA调控机制的研究进展 被引量：1
6
作者 蒋晨晰 程素芳 +4 位作者 吴国灶 陈娟 高晓娜 郭小权 刘平 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第4期1522-1532,共11页
肉鸡腹水综合征是一种由多病因引发的营养代谢性疾病,与遗传、饲养管理、营养失衡及环境等因素均有关。自该病首次出现以来,已给全球家禽养殖业带来了严重经济损失。研究表明,系统性缺氧是肉鸡发生腹水的重要原因,长时间缺氧会导致肺动... 肉鸡腹水综合征是一种由多病因引发的营养代谢性疾病,与遗传、饲养管理、营养失衡及环境等因素均有关。自该病首次出现以来,已给全球家禽养殖业带来了严重经济损失。研究表明,系统性缺氧是肉鸡发生腹水的重要原因,长时间缺氧会导致肺动脉内皮细胞(PAECs)受到损伤,引发其功能紊乱,产生大量血管活性因子刺激血管平滑肌异常收缩,进而加剧血管内皮的异常增殖、炎症反应和表型转化的发生。随着时间的推移,这些变化将导致血管膜增厚、管腔逐渐变窄等复杂病理过程,进而促进了肺动脉重构,最终成为腹水形成的直接诱因。miRNA作为表观遗传调控因子,在调节多种信号传导通路进而影响细胞生理功能方面发挥着不可忽视的作用。在肺动脉高压的形成中,miRNA的作用尤为显著,参与调控肺动脉内皮细胞的生理过程。鉴于此,笔者探讨了肉鸡腹水综合征的病因及其发病机制,阐明了肺动脉内皮细胞的功能变化以及miRNA在这一复杂疾病过程中的关键作用,以期为肉鸡腹水综合征的预防和控制提供参考。 展开更多
关键词 肉鸡腹水综合征 肺动脉内皮细胞(PAECs) 肺动脉高压 mirna
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植物miRNA稳定性与降解的分子基础 被引量：2
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作者 郭梦玮 樊友宏 任国栋 《遗传》 北大核心 2025年第8期944-957,共14页
miRNA(microRNA)是一类由内源基因编码的、长度在20~24个核苷酸的小分子非编码RNA。miRNA主要在转录后水平调控基因表达,进而影响动植物生殖、发育和环境应答等各种生物学过程。miRNA在不同组织和细胞内的分布、稳态维持和动态调节受到... miRNA(microRNA)是一类由内源基因编码的、长度在20~24个核苷酸的小分子非编码RNA。miRNA主要在转录后水平调控基因表达,进而影响动植物生殖、发育和环境应答等各种生物学过程。miRNA在不同组织和细胞内的分布、稳态维持和动态调节受到多个层次调控,包括转录、加工生成、稳定性调节以及靶向降解等。关于miRNA生物合成(包括转录和加工)的生化途径已经建立,对其调控的分子机制也有了较为深入的认识。本文系统综述了植物miRNA生成后稳定性调节、周转和靶向降解的相关研究进展,并结合动物中的机制进行比较和讨论,旨在为深入阐明控制细胞内miRNA丰度的分子机制提供理论框架。 展开更多
关键词 mirna 稳定性 降解 ARGONAUTE 甲基化 尿苷化 靶标RNA 核酸酶
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大黄灵仙胶囊对大鼠炎性胆管组织miRNA-152-3p、miRNA-221-3p及miRNA-30b表达水平的实验研究 被引量：1
8
作者 林龙 居燕飞 +4 位作者 陈雅璐 黄丽华 王明刚 蒙健林 王清坚 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第3期190-193,共4页
目的探讨大黄灵仙胶囊对大鼠炎性胆管组织中miRNA-152-3p、miRNA-221-3p及miRNA-30b的表达水平及临床意义。方法运用随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组、模型组及治疗组,每组10只。假手术组采用麻醉后开腹再予缝合进行造模,模型组... 目的探讨大黄灵仙胶囊对大鼠炎性胆管组织中miRNA-152-3p、miRNA-221-3p及miRNA-30b的表达水平及临床意义。方法运用随机数字表法将30只SD大鼠分为假手术组、模型组及治疗组,每组10只。假手术组采用麻醉后开腹再予缝合进行造模,模型组、治疗组使用3 mg/kg的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)进行胆总管注射构建胆管炎性大鼠模型。造模后假手术组、模型组予2 mL/100 g体质量蒸馏水灌胃,每日2次,每次间隔12 h;治疗组予320 mg/(kg·d)的大黄仙灵胶囊颗粒溶液在造模前2 d开始灌胃给药至造模后3 d,每日2次,每次间隔12 h。采用实时定量PCR法检测大鼠胆管组织中miRNA-152-3p、miRNA-221-3p及miRNA-30b的表达水平。结果与假手术组比较,模型组miRNA-152-3p表达水平较低(P<0.001)、miRNA-221-3p表达水平较低(P<0.001)及miRNA-30b表达水平较低(P<0.01),差异具有统计学意义。与模型组比较,治疗组miRNA-152-3p表达水平较高(P<0.001)、miRNA-221-3p表达水平较高(P<0.05)、miRNA-30b表达水平较高(P<0.01),差异具有统计学意义。结论大黄灵仙胶囊具有保护胆管组织的作用,作用机制可能与调控miRNA-152-3p、miRNA-221-3p及miRNA-30b表达,从抗炎、抗氧化应激角度发挥保护胆管的作用。 展开更多
关键词 胆石症 大黄灵仙胶囊 mirna-152-3p mirna-221-3p mirna-30b
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基于miRNA测序技术探讨艾灸治疗骨质疏松模型大鼠的分子机制 被引量：1
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作者 崔露 李萧 +4 位作者 李杏 陈小丽 胡笑燊 周海燕 李享 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第6期22-34,共13页
目的基于微小RNA(micro-RNA,miRNA)高通量测序技术,探究艾灸改善骨质疏松模型大鼠的分子机制。方法18只雌性SD大鼠随机分为假手术(SO)组(6只)和手术组(12只)。手术组以去卵巢手术法制备骨质疏松症(osteoporosis,OP)模型,将造模成功的12... 目的基于微小RNA(micro-RNA,miRNA)高通量测序技术,探究艾灸改善骨质疏松模型大鼠的分子机制。方法18只雌性SD大鼠随机分为假手术(SO)组(6只)和手术组(12只)。手术组以去卵巢手术法制备骨质疏松症(osteoporosis,OP)模型,将造模成功的12只大鼠随机分为模型(OVX)组和艾灸(MOX)组,每组6只。艾灸组大鼠艾灸双侧“肾俞”“关元”穴,每天1次,每天20 min,持续12周。Micro-CT扫描大鼠股骨并成像,分析骨小梁厚度(trabecular thickness,Tb.Th)、骨小梁分离度(trabecular separation,Tb.Sp)、骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV);HE染色观察大鼠胫骨组织形态;ELISA法检测血清碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)含量;随机挑选3只大鼠的右胫骨进行miRNA高通量测序,筛选差异表达的miRNA,并对差异表达miRNA进行功能富集分析与靶基因预测。结果Micro-CT图像显示艾灸组骨密度优于模型组,与模型组比较,艾灸组骨小梁厚度显著增加,骨体积分数显著上升,骨小梁分离度显著下降(P<0.05);ELISA结果表明,与模型组比较,艾灸组血清ALP活性显著降低,血清OCN含量显著上升(P<0.05);miRNA测序结果显示模型组上调基因与干预后下调基因共同表达34个,模型组下调与干预后上调基因共同表达15个。KEGG通路富集分析结果显示,差异基因的表达主要富集于MAPK、Ras、FoxO、TNF、癌症中的miRNA等信号通路途径。对显著性最高的前5个差异miRNA(miR-153-5p、miR-201-5p、miR-449c-5p、miR-451-3p、miR-153-3p)的靶基因预测得到10个主要靶点(Ebf2、Rtn4、Fbxl3、Naa15、Vamp2、Daam1、Akap6、Camta1、Ptprz1、Lamp1)。结论艾灸能够延缓OP病程、改善骨微结构、平衡骨代谢,这种治疗作用可能通过调控miRNA及其靶基因表达来实现,更详细的机制有待进一步探索。 展开更多
关键词 骨质疏松症 艾灸 mirna测序 生物信息学分析
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具胁迫“记忆”特征的白木香离体根的miRNA分析 被引量：1
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作者 庄婷婷 李佳欣 +1 位作者 詹若挺 马新业 《热带作物学报》 北大核心 2025年第4期820-830,共11页
本研究以白木香离体根为材料,在经过连续三代盐胁迫处理后,使用EASYspin Plus植物快速提取试剂盒提取样品的总RNA,利用HiSeq 2500高通量测序平台进行测序,旨在探讨miRNA在白木香三代离体根盐胁迫中发挥的作用及可能参与调控的代谢途径,... 本研究以白木香离体根为材料,在经过连续三代盐胁迫处理后,使用EASYspin Plus植物快速提取试剂盒提取样品的总RNA,利用HiSeq 2500高通量测序平台进行测序,旨在探讨miRNA在白木香三代离体根盐胁迫中发挥的作用及可能参与调控的代谢途径,为揭示白木香抵御盐胁迫机制的研究提供参考。取白木香三代盐胁迫的离体根为材料,通过使用高通量测序平台及生物信息学技术,获得第一代、第二代、第三代的miRNA表达谱,筛选三代离体根中的差异miRNA,对差异miRNA进行靶基因预测,之后进行靶基因分析,从而获得可能参与白木香次生代谢产物及响应盐胁迫相关的miRNA。结果显示:第一代样品中共检测出508个已知miRNA和764个新预测miRNA,第二代样品中共检测出444个已知miRNA和673个新预测miRNA,第三代样品中共检测出904个已知miRNA和1100个新预测miRNA。三代样品中共获得59个差异表达miRNA及275个靶基因,上调的miRNA靶基因主要参与类黄酮生物合成、谷胱甘肽代谢等信号通路,下调的miRNA靶基因则主要涉及苯丙烷类生物合成、植物激素信号传导、植物病原相互作用等信号通路。选取关键miRNA进行NR注释,结果发现,miR8020-x和novel-m0628-5p可能参与白木香离体根次生代谢产物合成;miR7494-y、miR477-y、miR5185-y、miR7757-y、miR408-z和novel-m0628-5p可能响应白木香离体根盐胁迫。本研究利用高通量测序得到白木香离体根盐胁迫的miRNA表达谱,并利用生物信息学分析得到可能参与白木香次生代谢产物及响应盐胁迫相关的miRNA,研究结果将有助于增强对白木香在盐胁迫条件下miRNA调控机制的认识,并为白木香次生代谢产物合成提供新的途径。 展开更多
关键词 白木香 胁迫记忆 mirna HiSeq 2500高通量测序
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miRNAs靶向调控Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎发病机制中的作用研究进展 被引量：2
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作者 杨浣艺 邾雨芹 +1 位作者 杨芸畅 赵燕 《中国运动医学杂志》 北大核心 2025年第4期304-310,共7页
骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种累及整个关节的慢性退行性病变,目前对OA的潜在分子机制尚不完全清楚。近年研究表明,微小RNA(microRNAs,miRNAs)和Wnt/β-catenin信号通路都参与了OA的病理生理过程,miRNAs可结合Wnt/β-catenin通路... 骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是一种累及整个关节的慢性退行性病变,目前对OA的潜在分子机制尚不完全清楚。近年研究表明,微小RNA(microRNAs,miRNAs)和Wnt/β-catenin信号通路都参与了OA的病理生理过程,miRNAs可结合Wnt/β-catenin通路中相关靶基因的3’非翻译区(3’untranslated area,3’UTR),通过抑制靶基因表达实现对OA的调控。本文就miRNAs靶向调控Wnt/β-catenin通路参与骨和软骨细胞的代谢过程以及在OA发生发展中的作用机制作一综述,为基于miRNAs的OA疗法提供一些新的思路与途径。 展开更多
关键词 骨关节炎 mirnaS WNT/Β-CATENIN信号通路 靶向调控
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miRNA在肠黏膜屏障功能中的作用研究进展 被引量：1
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作者 许帮荣 蒋正华 +3 位作者 陈鑫 陈军 雒海波 梁道明 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第7期1079-1083,共5页
肠黏膜屏障是天然和获得性免疫调节的关键部位,基本功能是在肠内容物与免疫系统之间起到屏障作用,其完整性对于维持机体健康至关重要。微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一种非编码小RNA分子,作为非常强大的遗传调节因子,miRNA可以通过与... 肠黏膜屏障是天然和获得性免疫调节的关键部位,基本功能是在肠内容物与免疫系统之间起到屏障作用,其完整性对于维持机体健康至关重要。微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一种非编码小RNA分子,作为非常强大的遗传调节因子,miRNA可以通过与广泛的靶基因相互作用来指导整个细胞通路。近年来,相关研究表明,miRNA参与了肠黏膜屏障功能的调节,该文就miRNA在肠黏膜屏障中的作用进行综述,包括其作用机制、相关的临床研究成果及未来研究方向。以期探索miRNA在相关疾病机制研究以及诊断与治疗中的潜在价值。 展开更多
关键词 微小核糖核酸 肠黏膜屏障 肠上皮细胞
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夏南牛子宫外泌体miRNA在牛胚胎发育和着床中的作用研究
13
作者 张志浩 鲁立刚 +8 位作者 张子敬 王香南 闵佳 韩艺伟 彭晟坤 栾曼茹 刘奥兵 施巧婷 王二耀 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第6期2691-2704,共14页
【目的】探索超数排卵后获取不同胚胎数量的牛子宫冲胚液外泌体miRNA的表达差异,以明确子宫冲胚液外泌体miRNA在牛胚胎发育和着床中的调控机制。【方法】选取15头3~6岁、480~600 kg夏南牛进行超数排卵、同期发情和人工授精。在人工授精... 【目的】探索超数排卵后获取不同胚胎数量的牛子宫冲胚液外泌体miRNA的表达差异,以明确子宫冲胚液外泌体miRNA在牛胚胎发育和着床中的调控机制。【方法】选取15头3~6岁、480~600 kg夏南牛进行超数排卵、同期发情和人工授精。在人工授精后第7天,冲洗牛子宫以获取囊胚,根据国际胚胎生产的平均水平5.5枚作为标准,选取获取的囊胚数量多的3头夏南牛(试验组)和获取的囊胚数量少的2头夏南牛(对照组),收集子宫冲胚液进行外泌体分离与鉴定,并提取外泌体miRNA进行测序分析;对差异表达miRNA进行靶基因预测,并对靶基因进行GO功能和KEGG通路富集分析。随机选取4个miRNAs(bta-miR-2888、bta-miR-11987、bta-miR-2484、bta-miR-27a-3p)进行实时荧光定量PCR验证。【结果】5个样本的囊泡粒径为30~150 nm,符合外泌体的特征。共筛选到14个差异表达miRNAs,其中9个miRNAs表达上调,5个miRNAs表达下调。差异表达miRNAs共预测到8 703个靶基因。GO功能富集分析表明,靶基因主要富集在与发育过程调节、多细胞生物发育调控、调节运输、发育过程的正向调节、细胞连接等功能有关的条目。KEGG通路富集分析表明,显著富集的MAPK和Hedgehog信号通路等与胚胎发育和着床相关,提示子宫冲胚液外泌体可能参与调控胚胎发育和着床。4个miRNAs的实时荧光定量PCR结果与转录组测序结果相一致。【结论】本研究从夏南牛子宫冲胚液中分离得到了外泌体,丰富了外泌体研究的物种,为夏南牛后续外泌体研究提供了材料。共筛选出14个差异表达miRNAs,有8个miRNAs与胚胎发育和着床相关。子宫内外泌体中miRNA的变化可能影响牛胚胎发育和着床。 展开更多
关键词 夏南牛 外泌体 mirna 胚胎发育 胚胎着床
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海南本地抗病小米辣响应象耳豆根结线虫侵染的miRNA鉴定及其靶基因预测
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作者 高畅 张志远 +3 位作者 刘子记 陈梅红 朱婕 曹振木 《热带作物学报》 北大核心 2025年第7期1571-1583,共13页
象耳豆根结线虫(Meloidogyneenterolobii)是一种对辣椒生产危害较大的病原物,使用抗病品种是防治该病害最为经济、环保的手段。深入理解根结线虫抗性调控机理将有利于加速抗病育种进程。本课题组前期研究中对海南本地抗病小米辣种质CF2... 象耳豆根结线虫(Meloidogyneenterolobii)是一种对辣椒生产危害较大的病原物,使用抗病品种是防治该病害最为经济、环保的手段。深入理解根结线虫抗性调控机理将有利于加速抗病育种进程。本课题组前期研究中对海南本地抗病小米辣种质CF25进行了接种前后的转录组数据分析,挖掘了与根结线虫抗性相关的代谢通路。为进一步探索抗性表达调控机理,本研究对CF25接种前后sRNA文库进行了高通量测序,共检测到133个差异表达miRNAs。以P≤0.05和|log2(FC)|≥3为筛选标准,鉴定出33个显著差异表达的miRNAs,其中包括19个已知miRNAs和14个新发现miRNAs。对33个显著差异表达的miRNAs进行靶基因预测,共得到373个靶基因,其中miR5658-z预测靶基因数量最多。GO功能和KEGG代谢通路富集分析显示靶基因主要富集于植物-病原菌互作、信号转导等通路,推测miRNA介导的信号转导及植物防御反应可能是CF25抗象耳豆根结线虫的重要原因。为初步验证差异表达miRNA和靶基因间的调控关系,选取6个差异表达miRNAs及其靶基因进行qRT-PCR表达验证,得出miRNA与靶基因的表达差异趋势与高通量测序结果一致,基本符合miRNA负向调控靶基因表达的规律。以上研究结果表明miRNA可能在辣椒对根结线虫的防御反应中起到了重要作用,为后续深入解析miRNA介导的根结线虫抗性机理奠定基础。 展开更多
关键词 灌木辣椒 抗象耳豆根结线虫 sRNA测序 mirna 靶基因
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唐氏综合征胎儿羊水外泌体与胎盘差异miRNA的联合分析
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作者 张亚勤 马忠蕊 +2 位作者 钱源 李俊君 邓兴力 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1140-1148,共9页
目的分析唐氏综合征(DS)胎儿羊水外泌体miRNA差异表达谱,为寻找新的DS产前诊断标志物提供依据。方法收集DS胎儿和染色体正常胎儿羊水,分别提取羊水外泌体进行高通量测序。筛选出差异表达miRNA,使用Targetscan、miRanda进行靶基因预测,... 目的分析唐氏综合征(DS)胎儿羊水外泌体miRNA差异表达谱,为寻找新的DS产前诊断标志物提供依据。方法收集DS胎儿和染色体正常胎儿羊水,分别提取羊水外泌体进行高通量测序。筛选出差异表达miRNA,使用Targetscan、miRanda进行靶基因预测,筛选出定位在21号染色体上的靶基因,用GeneCards、HGNC、NCBI Gene、UniProtKB/Swiss-Prot、Ensembl、OMIM等数据库查询靶基因相关的生物学功能及相关疾病等。对富集基因的生物学功能进行GO、KEGG分析。结果共检出59个差异表达的miRNA,其中31个上调,28个下调。以P<0.05为条件对测序结果进行筛选,在变化倍数大于2的差异miRNA中,根据表达丰度从高到低分别筛选出10个上调miRNA,9个下调miRNA。hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7b-3p_1ss22CT和hsa-miR-199b-5p是其中的焦点miRNA,BACH1和IFNAR1是它们的交集靶基因。GO分析发现,富集的靶基因主要功能与蛋白质结合、金属离子结合、转移酶活性、DNA结合、RNA聚合酶Ⅱ对转录调控、核苷酸结合等相关。KEGG富集分析结果表明,靶基因主要参与的信号通路包括代谢通路、肿瘤相关通路、PI3K-Akt信号通路、Rap1信号通路等。结论DS胎儿羊水外泌体miRNA表达与正常核型胎儿存在差异。联合DS胎盘miRNA分析,发现hsa-miR-199b-5p是DS羊水与胎盘共同存在的差异miRNA。推测hsa-miR-199b-5p与hsa-let-7b-5p、hsa-let-7c-5p、hsa-let-7b-3p_1ss22CT共同的靶基因BACH1和IFNAR1可能参与了DS的病理过程。 展开更多
关键词 唐氏综合征 mirna 测序 羊水 胎盘
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丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响
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作者 徐广立 田超 +4 位作者 郭晶晶 郭婧 景竹青 李思梦 陈萍 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期33-37,共5页
目的:探讨丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响。方法:将12只CBA/J雌鼠随机分为2组,每组6只,丹寿汤组灌胃丹寿汤1 mL/次,2次/d,模型组则灌胃等体积蒸馏水,连续7 d。停药3 d后,将雌鼠与DBA/2雄鼠合笼交配,诱导复... 目的:探讨丹寿汤对复发性流产小鼠蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA表达谱的影响。方法:将12只CBA/J雌鼠随机分为2组,每组6只,丹寿汤组灌胃丹寿汤1 mL/次,2次/d,模型组则灌胃等体积蒸馏水,连续7 d。停药3 d后,将雌鼠与DBA/2雄鼠合笼交配,诱导复发性流产,雌鼠继续灌胃蒸馏水或丹寿汤。于受孕第15天安乐处死孕鼠,称重胚胎并计算胚胎吸收率。收集蜕膜组织,免疫磁珠法分选蜕膜巨噬细胞,超速离心法提取外泌体,透射电镜下观察外泌体形态,Western blot法检测CD63表达。采用高通量测序技术检测外泌体miRNA表达情况,筛选差异miRNA,并与miRanda、miRWalk和miRDB数据库进行比对,筛选差异miRNA靶基因,对靶基因进行GO和KEGG富集分析。结果:丹寿汤组小鼠胚胎质量大于模型组,胚胎吸收率小于模型组(P<0.05)。共筛选出14个蜕膜巨噬细胞外泌体差异miRNA,其中5个(miR-466m-3p、miR-497a-3p、miR-7015-3p、miR-744-3p和miR-7679-5p)在丹寿汤组表达上调,9个(miR-222-5p、miR-541-5p、miR-3963、miR-669o-5p、miR-3062-5p、miR-34c-3p、miR-6976-5p、miR-3473g和miR-434-5p)表达下调。预测的靶基因有1 490个,GO和KEGG富集分析结果显示,靶基因功能主要为参与蜕膜巨噬细胞的细胞过程及组成等,主要涉及PI3K-Akt和MAPK等信号通路。结论:丹寿汤可能通过调控蜕膜巨噬细胞外泌体miRNA的表达,发挥治疗复发性流产的作用。 展开更多
关键词 复发性流产 丹寿汤 蜕膜巨噬细胞 外泌体 mirna 小鼠
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重度阻塞性睡眠呼吸暂停人群中循环miRNA-205与全身炎症状态的相关性分析
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作者 苏比江·吐尔逊 姚晓光 +2 位作者 吴婷 木拉力别克·黑扎提 布阿依仙木·艾麦提 《中国医学科学院学报》 北大核心 2025年第4期567-574,共8页
目的探讨重度阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)人群中血循环miRNA-205表达和全身免疫炎症指数(SII)及全身炎症反应指数(SIRI)的相关性。方法连续纳入2023年1至6月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院高血压中心、完善整夜多导睡眠监测的重度OSA患者3... 目的探讨重度阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)人群中血循环miRNA-205表达和全身免疫炎症指数(SII)及全身炎症反应指数(SIRI)的相关性。方法连续纳入2023年1至6月就诊于新疆维吾尔自治区人民医院高血压中心、完善整夜多导睡眠监测的重度OSA患者30例,无OSA患者32例;采用统一方法和标准检测血常规(包括白细胞、中性粒细胞、单核细胞、血小板等),采用逆转录实时荧光定量PCR检测循环miRNA-205的表达;采用简单回归分析循环miRNA-205和SII、SIRI与OSA的相关性;进一步分析循环miRNA-205对OSA与炎症指数之间可能的调节作用。结果在总体人群中,重度OSA患者循环miRNA-205表达显著低于非OSA患者[1.910(1.240,2.403)比3.650(2.148,5.109),z=-3.874,P<0.001],而SIRI、SII显著高于非OSA患者[SII:555.200(451.780,936.350)比448.685(380.823,646.073),z=-2.029,P=0.042;SIRI:1.090(0.775,1.573)比0.870(0.650,1.240),z=-2.031,P=0.041]。在总体人群中,呼吸暂停低通气指数与循环miRNA-205呈显著负相关(r=-0.391,P=0.002);在重度OSA人群中,呼吸暂停低通气指数每增加1个单位,循环miRNA-205降低0.030,而SII和SIRI分别增加10.046和0.037,回归系数均具有统计学意义(SII:P=0.003;SIRI:P=0.037);循环miRNA-205每升高1个单位,SII下降121.093(β=-0.40,P=0.046)。调节效应分析显示,低表达miRNA-205可能对SII升高具有显著的负调节效应(β=-0.40,P=0.004)。结论重度OSA人群中SII、SIRI升高,循环miRNA-205表达水平降低;低表达miRNA-205在重度OSA相关的全身炎症状态中可能存在负调节作用。 展开更多
关键词 阻塞性睡眠呼吸暂停 mirna 炎症指数
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后备母猪发情期和乏情期下丘脑-垂体-卵巢性腺轴miRNA-mRNA表达谱比较分析
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作者 吕玲燕 孙如玉 +9 位作者 林昌华 张胜斌 覃秀珍 柏秀芳 吴永绍 陈钊 刘磊 张冰 蒋家霞 张家庆 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第7期2965-2980,共16页
【目的】探讨miRNA-mRNA互作网络在后备母猪发情调控中的关键作用,以期解释其在后备母猪发情活动中的遗传机制。【方法】以发情期和乏情期后备母猪的下丘脑、垂体、卵巢组织为研究对象,测定血清中促卵泡激素(FSH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2... 【目的】探讨miRNA-mRNA互作网络在后备母猪发情调控中的关键作用,以期解释其在后备母猪发情活动中的遗传机制。【方法】以发情期和乏情期后备母猪的下丘脑、垂体、卵巢组织为研究对象,测定血清中促卵泡激素(FSH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)等生殖激素浓度,通过小RNA测序(sRNA-Seq)并利用生物信息学软件筛选出不同情期差异表达miRNA,通过R语言对差异表达miRNA靶基因进行GO功能及KEGG通路富集分析,并随机选取4个差异表达miRNAs进行实时荧光定量PCR验证。【结果】后备母猪血清中生殖激素浓度与母猪所处的生理周期相吻合;在发情期和乏情期母猪中共检测到742个已知的miRNAs和229个新的miRNAs。发情期和乏情期母猪下丘脑中有57个差异表达miRNAs,其中24个上调,33个下调;垂体中有71个差异表达miRNAs,其中44个上调,27个下调;卵巢中有140个差异表达miRNAs,其中63个上调,77个下调。KEGG通路富集分析发现,后备母猪下丘脑中差异表达miRNA靶基因主要参与癌症中的蛋白聚糖、NOD样受体信号通路、Toll样受体信号通路、细胞因子受体相互作用等;垂体中差异表达miRNA靶基因主要参与甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸代谢过程,促性腺激素释放激素分泌,细胞黏附分子,新陈代谢信号通路等;卵巢中差异表达miRNA靶基因主要参与趋化因子信号通路、溶酶体、卵巢类固醇生成、胆固醇代谢、PPAR信号通路、ECM受体交互作用等。在与生殖相关的靶基因调控网络中筛选出可能由下丘脑-垂体-卵巢性腺轴介导调控后备母猪情期活动的关键miRNAs:miR-6240Z、ssc-miR-34a、ssc-miR-143-3P、ssc-miR-127、ssc-miR-21-5P、ssc-miR-381-3p。对后备母猪卵巢组织中4个差异表达miRNAs进行实时荧光定量PCR验证,其表达趋势与测序结果一致。【结论】本研究成功构建了发情期和乏情期后备母猪下丘脑-垂体-卵巢性腺轴miRNA表达谱,并对差异表达miRNA进行验证,筛选到与后备母猪情期活动显著相关的miRNA,为解析后备母猪发情机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 mirna-mRNA 后备母猪 发情期 乏情期 下丘脑-垂体-卵巢性腺轴
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基于识别竞争策略的SERS传感器用于快速和同时检测结直肠癌相关miRNA 被引量：3
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作者 陈峰松 蔡瑞 +3 位作者 曹小卫 张烁丰 盛金鑫 王小永 《分析测试学报》 北大核心 2025年第2期265-274,共10页
基于识别竞争策略和金十二面体(AuNDs)阵列,构建了表面增强拉曼光谱(SERS)传感器,并实现了健康人和结直肠癌(CRC)患者血清中两种miRNA的高效检测。通过将拉曼信号分子和适配体互补链修饰到金纳米双锥(AuNBP)表面,制备了两种标记探针,并... 基于识别竞争策略和金十二面体(AuNDs)阵列,构建了表面增强拉曼光谱(SERS)传感器,并实现了健康人和结直肠癌(CRC)患者血清中两种miRNA的高效检测。通过将拉曼信号分子和适配体互补链修饰到金纳米双锥(AuNBP)表面,制备了两种标记探针,并将其结合在适配体功能化AuNDs阵列上构建SERS传感器。目标miRNAs能够特异性结合适配体,使标记探针从AuNDs阵列表面竞争性脱落,进而使得SERS信号降低。该方法对血清中miR-21和miR-92a的检出限分别低至5.7 pmol/L和8.4 pmol/L,反应时间仅需6 min。临床检测结果显示,相对于健康人,CRC患者血清中miR-21和miR-92a的表达水平显著升高。SERS结果与实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)一致,证实了其准确性。该方法为miRNA的快速、高灵敏、同时检测提供了新的策略,在CRC的早期诊断中具有巨大的临床潜在价值。 展开更多
关键词 表面增强拉曼散射 金十二面体 mirna 核酸适配体 结直肠癌 识别竞争策略
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丹皮酚对癫痫大鼠的治疗作用及miRNA-34a/Bcl-2通路的影响
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作者 顿圆圆 扈清云 +1 位作者 冯燕 朱金玲 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期569-572,共4页
目的:观察丹皮酚对癫痫大鼠的治疗作用及可能机制。方法:30只雄性Wistar大鼠通过简单随机抽样法分成3组,每组10只。正常对照组、癫痫组分别腹腔注射生理盐水、戊四氮(35 mg/kg),丹皮酚组在腹腔注射丹皮酚(40 mg/kg)20 min后注射戊四氮,1... 目的:观察丹皮酚对癫痫大鼠的治疗作用及可能机制。方法:30只雄性Wistar大鼠通过简单随机抽样法分成3组,每组10只。正常对照组、癫痫组分别腹腔注射生理盐水、戊四氮(35 mg/kg),丹皮酚组在腹腔注射丹皮酚(40 mg/kg)20 min后注射戊四氮,1次/d,持续4周。采用TUNEL法观察大鼠海马组织中细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和细胞色素C的表达,测定超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,丙二醛(MDA)含量及总抗氧化能力(T-AOC),采用实时荧光定量PCR法检测miRNA-34a的表达。结果:与正常对照组相比,癫痫组神经元凋亡率升高,海马组织Bax、细胞色素C蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低,MDA含量升高,SOD、CAT活力和T-AOC降低,miRNA-34a表达水平升高[(5.74±0.18)vs(1.01±0.31)](P<0.05);与癫痫组相比,丹皮酚组上述指标均有改善(miRNA-34a:2.85±0.25)(P<0.05)。结论:丹皮酚对癫痫大鼠有一定的治疗作用,其机制可能与激活miRNA-34a/Bcl-2介导的线粒体氧化应激信号通路,抑制神经元凋亡有关。 展开更多
关键词 丹皮酚 微核糖核酸-34a 癫痫 氧化应激 细胞凋亡 大鼠
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