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血浆外泌体miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病中的表达及诊断价值 被引量:5
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作者 冯真 张博 +5 位作者 邓思齐 叶国敏 张辉 张万江 吴江东 李卫民 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第12期1979-1984,共6页
目的研究miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病血浆外泌体中的表达差异性及其诊断价值。方法通过生物信息学网站筛选结核病外泌体中具有差异性表达的miRNAs(miR-26a-5p和miR-151a-3p)。再以70例结核病患者(结核病组),58例体检健康者(健康对... 目的研究miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病血浆外泌体中的表达差异性及其诊断价值。方法通过生物信息学网站筛选结核病外泌体中具有差异性表达的miRNAs(miR-26a-5p和miR-151a-3p)。再以70例结核病患者(结核病组),58例体检健康者(健康对照组)样本进行临床验证:采用差速离心法提取血浆外泌体,透射电子显微镜,粒径分析,Western blot对其鉴定,采用RT-qPCR检测血浆外泌体中miR-26a-5p和miR-151a-3p在结核病组和对照组中的表达水平,并通过ROC曲线评价二者在结核病中诊断价值。结果透射电镜、粒径分析、Western blot鉴定到典型的外泌体特性,即成功提取到血浆外泌体。在临床验证中,以内参和外参同时校准,结核组患者血浆外泌体中miR-26a-5p表达水平低于对照组(P<0.0001),结核组患者血浆外泌体中miR-151a-3p表达水平高于对照组(P<0.0001),与生物信息学结果一致。作为诊断标记,以内参为基准,血浆外泌体miR-26a-5p、miR-151a-3p鉴别结核病的曲线下面积(AUC)分别为0.872、0.709,两者联合诊断结核病的AUC为0.915(P<0.0001);以外参为基准,血浆外泌体miR-26a-5p、miR-151a-3p鉴别结核病的AUC分别为0.829、0.854,两者联合诊断结核病的AUC为0.911(P<0.0001)。结论结核患者血浆外泌体来源miR-26a-5p表达水平降低,miR-151a-3p表达水平升高,且两者临床诊断效能较高,可能是诊断结核病潜在的生物标志物。 展开更多
关键词 肺结核 外泌体 mir-26a-5p mir-151a-3p 验证
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过表达miR-151a-3p抑制PC-3前列腺癌细胞增殖和迁移 被引量:6
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作者 张艺 郝彤彤 +2 位作者 张寒 魏澎涛 李小辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期247-252,共6页
目的研究上调微小RNA-151a-3p(miR-151a-3p)对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响和机制。方法采用实时荧光定量PCR检测PC-3M、C4-2B、22RV1、DU-145、PC-3、LNCaP人前列腺癌细胞和RWPE-1人正常前列腺上皮细胞中miR-151a-3p的表达量。以miR-1... 目的研究上调微小RNA-151a-3p(miR-151a-3p)对前列腺癌细胞增殖和迁移的影响和机制。方法采用实时荧光定量PCR检测PC-3M、C4-2B、22RV1、DU-145、PC-3、LNCaP人前列腺癌细胞和RWPE-1人正常前列腺上皮细胞中miR-151a-3p的表达量。以miR-151a-3p表达量最低的PC-3细胞为研究对象,生物信息学预测并采用双荧光素酶报告基因实验检验miR-151a-3p的潜在靶基因。转染miR-151a-3p模拟物或阴性对照微小RNA(miR-NC)至PC-3细胞。实时荧光定量PCR检测miR-151a-3p和潜在靶基因mRNA的表达量,Western blot法检测靶基因及下游信号通路蛋白表达量。采用MTT法检测PC-3细胞的增殖,Transwell^(TM)实验检测PC-3细胞的迁移能力。结果 miR-151a-3p在前列腺癌细胞的表达量明显低于RWPE-1人正常前列腺上皮细胞,其中PC-3细胞中的表达量最低。生物信息学预测及双荧光素酶报告基因实验表明NIMA相关激酶2(NEK2)是miR-151a-3p的潜在靶基因。转染miR-151a-3p模拟物后,PC-3细胞中miR-151a-3p的表达量明显上升,NEK2基因的表达量明显降低,NEK2基因下游磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K-AKT-mTOR)信号通路蛋白水平降低。上调miR-151a-3p明显抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖和迁移。结论miR-151a-3p在前列腺癌细胞中表达降低,上调miR-151a-3p的表达可通过降低NEK2基因及下游PI3K-AKT-mTOR信号通路蛋白的表达抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 微小RNa-151a-3p(mir-151a-3p) NIMA相关激酶2(NEK2) 前列腺癌 细胞增殖 细胞迁移
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lncRNA FGD5-AS1调节miR-133a-3p/SPAG5轴对胃癌细胞迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 陈远航 何朗 +2 位作者 谭卯 徐毅 李霞 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第5期401-406,共6页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1调节miR-133a-3p/SPAG5轴对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。方法用实时定量PCR检测胃癌组织和邻近非肿瘤组织、正常人胃上皮细胞系GES-1及胃癌细胞系(MKN-28和NCI-N87、HGC-27、AGS)中FGD5-AS1、miR-1... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FGD5-AS1调节miR-133a-3p/SPAG5轴对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。方法用实时定量PCR检测胃癌组织和邻近非肿瘤组织、正常人胃上皮细胞系GES-1及胃癌细胞系(MKN-28和NCI-N87、HGC-27、AGS)中FGD5-AS1、miR-133a-3p、SPAG5 mRNA表达水平;用CCK-8法、EdU染色检测细胞增殖;用Transwell实验检测细胞侵袭;用划痕实验检测细胞迁移能力;用Western blotting检测增殖蛋白Ki-67、SPAG5、迁移侵袭增强子因子1(MIEN1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达水平;用双萤光素酶实验验证miR-133a-3p与FGD5-AS1、SPAG5的关系。结果在胃癌组织及胃癌细胞系中,FGD5-AS1、SPAG5 mRNA表达水平明显升高,miR-133a-3p则明显降低(P<0.05)。干扰FGD5-AS1可上调miR-133a-3p表达,下调SPAG5表达,抑制MKN-28细胞恶性行为;抑制miR-133a-3p表达逆转了干扰FGD5-AS1对MKN-28细胞恶性行为的作用。结论干扰lnc-RNA FGD5-AS1通过上调miR-133a-3p/SPAG5轴抑制胃癌细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 长链非编码RNA FGD5-AS1 mir-133a-3p/SpAG5轴 胃癌 迁移 侵袭
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野黄芩苷调控miR-26a-3p/Survivin分子轴对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响
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作者 黄建成 刘佳 +3 位作者 刘璞娟 董彦博 王军 李红英 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第5期1360-1367,共8页
目的探讨野黄芩苷(Scutellarin,Scu)调控miR-26a-3p/Survivin分子轴对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(Myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI)的影响及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、野黄芩苷组(Scu... 目的探讨野黄芩苷(Scutellarin,Scu)调控miR-26a-3p/Survivin分子轴对大鼠心肌缺血/再灌注损伤(Myocardial ischemia/reperfusion injury,MIRI)的影响及其机制。方法将50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、野黄芩苷组(Scu)、miR-26a-3p激动剂组(agomir)和野黄芩苷+miR-26a-3p agomir组(Scu+agomir),每组10只。结扎大鼠冠状动脉前降支建立MIRI动物模型,各组大鼠于术前及术中分别给予20 mg/kg Scu或10 nmol agomir干预,Sham组和Model组大鼠给予等量溶剂。术后48 h,采用超声心动图检查大鼠心功能;苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠心肌组织病理学改变;生化试剂盒检测大鼠血清中心肌损伤标志物肌酸激酶同工酶(CreatinekinaseisoenzymeMB,CK-MB)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、心肌肌钙蛋白I(Cardiac troponin I,cTnI)水平以及心肌组织中氧化水平标志物丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)含量;TUNEL染色检测大鼠心肌细胞凋亡水平;qRT-PCR检测大鼠心肌组织中miR-26a-3p及生存素(Survivin)mRNA表达水平;Western blot检测大鼠心肌组织中Survivin、细胞周期蛋白依赖激酶抑制因子(p21)及cleaved-caspase 3蛋白表达水平。结果与Sham组比较,Model组大鼠心肌组织病理损伤严重,心功能LVEDP水平及血清中CK-MB、LDH、cTnI水平显著升高(P<0.01),LVESP、LVEF、LVFS水平显著降低(P<0.01);心肌组织细胞凋亡水平及MDA水平显著升高(P<0.01),SOD、GSH-Px水平显著降低(P<0.01);同时,心肌组织中miR-26a-3p及cleaved-caspase 3蛋白表达水平显著升高(P<0.01),而p21蛋白及Survivin mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与Model组比较,Scu组大鼠心肌组织病理损伤明显改善,心功能LVEDP水平及血清中CK-MB、LDH、cTnI水平显著升高(P<0.01),LVESP、LVEF、LVFS水平显著升高(P<0.01);心肌组织细胞凋亡水平及MDA水平显著降低(P<0.01),SOD、GSH-Px水平显著升高(P<0.01);同时,心肌组织中miR-26a-3p及cleaved-caspase 3蛋白表达水平显著降低(P<0.01),p21蛋白及Survivin mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。然而,使用miR-26a-3p激动剂干预可明显逆转Scu对大鼠MIRI的改善作用。结论Scu可改善MIRI大鼠心功能及心肌损伤,抑制心肌细胞凋亡,其作用机制可能与调控miR-26a-3p/Survivin分子轴有关。 展开更多
关键词 野黄芩苷 心肌 缺血/再灌注损伤 mir-26a-3p 生存素
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LINC00261通过靶向miR-23a-3p/ZNF292轴抑制食管鳞状细胞癌的增殖、侵袭与转移
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作者 米源 李旭哲 +4 位作者 王占鹏 刘延杰 宋春涛 王澜涛 王雷 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2118-2125,共8页
目的探讨长链非编码RNA LINC00261对食管鳞状细胞的增殖、侵袭及转移等生物学行为的影响。方法通过GEO数据库中GSE149612数据集分析食管鳞状细胞癌中的差异分子。收集临床食管鳞状细胞癌及正常食管组织样本及多种食管鳞状细胞癌细胞系... 目的探讨长链非编码RNA LINC00261对食管鳞状细胞的增殖、侵袭及转移等生物学行为的影响。方法通过GEO数据库中GSE149612数据集分析食管鳞状细胞癌中的差异分子。收集临床食管鳞状细胞癌及正常食管组织样本及多种食管鳞状细胞癌细胞系细胞和正常食管上皮细胞HEEC细胞,通过PCR技术检测LINC00261的表达变化。过表达LINC00261再分为pcDNA组和pcDNA-LINC00261组,CCK-8、克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell和流式细胞术分析其对细胞侵袭转移和凋亡的影响。ENCORI等相关生物信息学网站对LINC00261的靶点进行预测,双荧光素酶实验及Western blotting实验进行验证,裸鼠皮下移植瘤实验验证了LINC00261对食管鳞状细胞癌的影响。结果LINC00261在食管鳞状细胞癌中显著低表达,并且在临床食管鳞状细胞癌样本及细胞系中同样表达量明显降低(P<0.05);通过过表达LINC00261,发现其明显抑制了食管鳞状细胞癌的增殖、侵袭和转移并促进了肿瘤细胞的凋亡(P<0.05)。通过生物信息学网站的预测和双荧光素酶报告基因测定,验证了LINC00261靶向miR-23a-3p/ZNF292的关系。裸鼠皮下移植瘤实验发现通过过表达LINC00261可以明显抑制食管鳞状细胞癌的增殖和转移(P<0.0001)。结论LINC00261可以通过靶向miR-23a-3p/ZNF292抑制人食管鳞状细胞癌的增殖、侵袭和转移,为食管鳞状细胞癌的治疗提供新的依据。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞癌 LINC00261 mir-23a-3p ZNF292
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lncRNA ABHD11-AS1通过调控miR-133a-3p/SLC6A1轴影响肾癌细胞增殖与侵袭
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 黄遂斌 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第8期754-761,共8页
目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ABHD11-AS1在肾透明细胞癌(ccRCC)及肾癌细胞系中的表达情况,并探索其潜在功能和作用机制。方法应用GEPIA2软件分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库,比较ABHD11-AS1在ccRCC与正常肾脏组织中的表达差异;实时定... 目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ABHD11-AS1在肾透明细胞癌(ccRCC)及肾癌细胞系中的表达情况,并探索其潜在功能和作用机制。方法应用GEPIA2软件分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库,比较ABHD11-AS1在ccRCC与正常肾脏组织中的表达差异;实时定量PCR检测ABHD11-AS1在ccRCC、正常肾脏组织及肾癌细胞系(ACHN、786-O、A498、SN12-PM6细胞)中的表达;并对ABHD11-AS1在肾癌细胞中的亚细胞定位进行分析。用MTT实验、Transwell实验、实时定量PCR、Western blotting检测ABHD11-AS1、miR-133a-3p对肾癌细胞增殖、侵袭及SLC6A1表达的影响。用双萤光素酶报告基因实验分析ABHD11-AS1与miR-133a-3p,miR-133a-3p与SLC6A1的靶向关系。结果GEPIA2软件分析与实时定量PCR检测结果显示,与正常肾脏组织比较,ABHD11-AS1在ccRCC中高表达(P<0.05);与永生化肾小管上皮细胞系HK-2细胞相比,ABHD11-AS1在肾癌细胞系ACHN、786-O及SN12-PM6细胞中均高表达,且在786-O细胞中表达最为显著。亚细胞定位实验显示,ABHD11-AS1主要分布于786-O细胞的细胞质中。敲减ABHD11-AS1后,786-O细胞增殖与侵袭能力明显下降,SLC6A1 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05)。双萤光素酶报告基因实验显示,ABHD11-AS1与miR-133a-3p,miR-133a-3p与SLC6A1存在靶向关系。过表达miR-133a-3p可降低786-O细胞中SLC6A1 mRNA和蛋白表达,而下调miR-133a-3p则产生相反的效果。miR-133a-3p下调可增强786-O细胞增殖和侵袭活力,而敲减SLC6A1可部分逆转miR-133a-3p下调对786-O细胞增殖和侵袭的促进作用(P<0.05)。同时,miR-133a-3p下调也可部分逆转ABHD11-AS1敲减对786-O细胞增殖、侵袭及SLC6A1表达的抑制效应(P<0.05)。结论ABHD11-AS1通过调控miR-133a-3p/SLC6A1轴在ccRCC中发挥促癌作用,影响肾癌细胞的增殖与侵袭。 展开更多
关键词 肾透明细胞癌 ABHD11-AS1 mir-133a-3p/SLC6A1轴
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抑制miR-203a-3p基因表达对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响
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作者 陈礼荣 范秋玉 +1 位作者 刘亚 杨惠琴 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期600-604,共5页
目的:探究抑制miR-203a-3p基因表达对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响。方法:将成纤维样滑膜细胞MH7A分为Control组(未转染细胞)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-203a-3p组(转染anti-miR-203a-3p)、anti-mi... 目的:探究抑制miR-203a-3p基因表达对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖与凋亡的影响。方法:将成纤维样滑膜细胞MH7A分为Control组(未转染细胞)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-203a-3p组(转染anti-miR-203a-3p)、anti-miR-203a-3p+LiCl组(转染anti-miR-203a-3p+信号通路激活剂LiCl)。qRT-PCR检测miR-203a-3p表达水平;克隆形成实验、MTT实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测PCNA、Bcl-2、Bax、Wnt1、β-catenin蛋白表达。结果:转染miR-203a-3p可降低MH7A细胞克隆形成数、存活率,增加细胞凋亡率,降低PCNA、Bcl-2、Wnt1、β-catenin蛋白表达水平,增加Bax蛋白表达水平。信号通路激活剂LiCl增加转染miR-203a-3p对MH7A细胞克隆形成数、存活率,降低细胞凋亡率,增加Wnt1、β-catenin、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,降低Bax蛋白表达水平。结论:miR-203a-3p可能通过激活Wnt/β-catenin促进RA滑膜成纤维细胞增殖和抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 mir-203a-3p 类风湿关节炎 增殖 凋亡
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血清miR-196b-5p和miR-199a-3p水平对非小细胞肺癌的诊断价值
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作者 张福全 曹津铭 吴雪杰 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期702-709,725,共9页
目的探究血清miR-196b-5p和miR-199a-3p水平对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的诊断价值。方法回顾性选取2022年1月至2024年3月于南通市第一人民医院就诊的202例NSCLC患者作为研究对象,另选取同期健康体检者195例作为... 目的探究血清miR-196b-5p和miR-199a-3p水平对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的诊断价值。方法回顾性选取2022年1月至2024年3月于南通市第一人民医院就诊的202例NSCLC患者作为研究对象,另选取同期健康体检者195例作为对照。收集所有受试者一般基线资料及NSCLC患者临床病理资料。采用qRT-PCR定量分析血清miR-196b-5p和miR-199a-3p表达水平。采用Pearson检验分析miR-196b-5p、miR-199a-3p表达水平与细胞角蛋白19片段抗原21-1(cytokeratin 19 fragment antigen 21-1,Cyfra21-1)浓度的相关性。根据miR-196b-5p和miR-199a-3p表达水平的均值将NSCLC患者分为高、低表达组,分析不同组别患者的临床基线资料与病理特征的差异。绘制ROC曲线分析血清Cyfra21-1、miR-196b-5p、miR-199a-3p以及后两者联合对NSCLC患者的诊断效能。结果与对照组相比,NSCLC患者血清miR-196b-5p表达水平升高,miR-199a-3p表达水平降低;与Ⅰ/Ⅱ期患者相比,Ⅲ/Ⅳ期患者血清中miR-196b-5p相对表达水平明显升高,miR-199a-3p相对表达水平明显降低(均P<0.01)。NSCLC患者血清中miR-196b-5p水平与Cyfra21-1水平显著正相关,miR-199a-3p水平与Cyfra21-1水平显著负相关(均P<0.01)。miR-196b-5p、miR-199a-3p表达差异与NSCLC患者病理分期、肿瘤大小、Cyfra21-1水平及淋巴结转移等相关(均P<0.05)。血清miR-196b-5p水平诊断NSCLC的AUC为0.882(灵敏度为75.25%,特异度为95.38%),血清miR-199a-3p水平诊断NSCLC的AUC为0.857(灵敏度为68.32%,特异度为88.21%);传统生物标志物Cyfra21-1诊断NSCLC的AUC为0.818(灵敏度为63.86%,特异度为87.18%);血清miR-196b-5p和miR-199a-3p联合检测对早期(Ⅰ/Ⅱ期)NSCLC患者的诊断效能显著高于血清Cyfra21-1(P<0.01)、miR-196b-5p(P<0.01)、miR-199a-3p(P<0.01)单独检测。结论NSCLC患者血清miR-196b-5p表达水平显著升高,miR-199a-3p表达水平降低,二者联合检测对NSCLC具有较高的诊断效能。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 mir-196b-5p mir-199a-3p 诊断
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LINC01224、miR-193a-5p、ELMOD3 c.512A>G在感音神经性耳聋患者中的筛查分析
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作者 王喜悦 温馨 +2 位作者 周逸云 张彩虹 孙捷 《中华耳科学杂志》 北大核心 2025年第8期928-934,共7页
目的通过对感音神经性耳聋(sensorineural hearing loss,SNHL)患者外周血中LINC01224、miR-193a-5p的表达检测及ELMOD3 c.512A>G突变位点的筛查,分析LINC01224、miR-193a-5p、ELMOD3 c.512A>G与感音神经性耳聋疾病的相关性及其在... 目的通过对感音神经性耳聋(sensorineural hearing loss,SNHL)患者外周血中LINC01224、miR-193a-5p的表达检测及ELMOD3 c.512A>G突变位点的筛查,分析LINC01224、miR-193a-5p、ELMOD3 c.512A>G与感音神经性耳聋疾病的相关性及其在临床中的筛查意义.方法利用TargetScan、RNAInter和miRDB数据库预测可能调控ELMOD3的miRNA,运用韦恩图进行交集分析;结合starBase网站预测潜在的lncRNA、miRNA/ELMOD3通路;通过双荧光素酶报告实验验证预测的lncRNA、miRNA与ELMOD3的靶向结合关系;选取2023年1月至2024年1月中山大学附属第八医院耳鼻咽喉头颈外科收治的SNHL患者24例为感音神经性耳聋组(SNHL组),另选取听力正常志愿者12名为对照组(CON组).采用SYBR Green法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SNHL组及CON组外周血中预测的lncRNA、miRNA的表达水平,通过Sanger测序筛查ELMOD3 c.512A>G突变位点,以2-ΔΔCt法计算相对表达量并统计学分析其差异性.结果综合3个数据库结果分析,鉴定出31个ELMOD3相关高置信度miRNA,结合starBase网站预测结果及既往研究基础筛选LINC01224、miR-193a-5p为核心分子;双荧光素酶报告实验分别验证LINC01224、ELMOD3与miR-193a-5p存在靶向结合关系;SNHL组LINC01224表达显著高于CON组(P<0.001);miR-193a-5p表达显著下调(P<0.0001),SNHL组和CON组中均未检测出ELMOD3 c.512A>G突变位点.结论生物信息学网站预测LINC01224、miR-193a-5p可能是ELMOD3上游调控基因;在SNHL患者及听力正常志愿者外周血中LINC01224、miR-193a-5p的表达具有显著差异性(LINC01224↑/miR-193a-5p↓),提示其表达可能与SNHL的发病相关,有进一步研究二者作为诊断SNHL血清标志物的价值;本研究SNHL患者中均未检测到ELMOD3 c.512A>G突变位点,需进一步扩大样本量及ELMOD3基因全外显子检测新的突变位点,验证其是否作为感音神经性耳聋患者的热点基因及位点. 展开更多
关键词 感音神经性耳聋 ELMOD3 LINC01224 mir-193a-5p
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miR-126a-3p靶向Bcl-6介导凋亡途径调控脓毒症Th1/Th2细胞平衡
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作者 李苗苗 王洁 +3 位作者 齐雅囡 王婷 王德伟 刘成 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第11期840-848,共9页
目的:探讨miR-126a-3p与B细胞淋巴瘤6(Bcl-6)的关系以及其对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及T细胞分化的影响和机制。方法:利用miRWalk数据库预测miR-126a-3p的靶基因,进一步利用Cytoscape软件筛选出核心靶基因。然后通过腹腔注射0.9%氯化钠... 目的:探讨miR-126a-3p与B细胞淋巴瘤6(Bcl-6)的关系以及其对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及T细胞分化的影响和机制。方法:利用miRWalk数据库预测miR-126a-3p的靶基因,进一步利用Cytoscape软件筛选出核心靶基因。然后通过腹腔注射0.9%氯化钠溶液(NS)和脂多糖(LPS;20 mg/kg)将小鼠随机分为正常对照组(sham组)、脓毒症组(LPS组)、LPS+miR-126a-3p mimic组(miR-126 mimic组)、LPS+miR-126a-3p inhibitor组(miR-126 inhibitor组)。48 h后从小鼠尾静脉采集外周血,通过密度梯度离心法提取T淋巴细胞,然后将miR-126a-3p模拟物(mimic)和抑制剂(inhibitor)转染至miR-126 mimic组和miR-126 inhibitor组脓毒症T淋巴细胞中。采用聚合酶链反应及蛋白质印记实验检测T细胞内Bcl-6 mRNA和蛋白水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测T淋巴细胞凋亡,流式细胞术检测辅助性T细胞(Th)1、Th2比例,最后通过GraphPad Prism 9.0软件对数据进行统计分析。结果:miRWalk数据库检索获得5930个miR-126a-3p的预测靶点,其中Bcl-6是miR-126a-3p的核心靶点之一。Bcl-6的表达水平与miR-126a-3p的表达水平呈正相关,两者具有靶向调控关系。且与sham组相比,LPS组Bcl-6 mRNA及蛋白表达减少,T淋巴细胞凋亡增多,T细胞向Th1分化增多,向Th2分化减少,Th1/Th2比值增加,差异均具有统计学意义(P<0.001);与LPS组相比,增强(miR-126 mimic组)或抑制(miR-126 inhibitor组)miR-126a-3p表达后,Bcl-6 mRNA和蛋白表达、T细胞凋亡及Th1和Th2细胞比例均表现出相应的增加或减少,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:脓毒症小鼠T淋巴细胞内抗凋亡蛋白Bcl-6表达异常,其表达水平受miR-126a-3p的靶向调控,从而影响T淋巴细胞的凋亡及Th1/Th2细胞分化,进而调节脓毒症免疫状态,该研究可以为脓毒症患者的治疗提供新的治疗靶点和理论依据。 展开更多
关键词 脓毒症 mir-126a-3p B细胞淋巴瘤6 细胞凋亡 T淋巴细胞
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miR-199a-3p靶向CD151对甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化的影响 被引量:4
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作者 覃艳 赵可雷 +2 位作者 李燕 朱云峰 曹萌 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期610-616,共7页
目的探究miR-199a-3p过表达靶向CD151对甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化的影响。方法通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-199a-3p和CD151的靶向关系。构建CD151pcDNA载体过表达CD151,将miR-199a-3p mimic与pcDNA-CD15... 目的探究miR-199a-3p过表达靶向CD151对甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化的影响。方法通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-199a-3p和CD151的靶向关系。构建CD151pcDNA载体过表达CD151,将miR-199a-3p mimic与pcDNA-CD151单独或联合转染至B-CPAP细胞,将细胞随机分为4组:Control组、miR-199a-3p mimic组、pcDNA-CD151组和miR-199a-3p mimic+pcDNA-CD151组。BrdU染色检测细胞增殖水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;流式分选检测细胞周期分布;Transwell检测细胞侵袭能力;Western blot检测MMP-2、Ki-67、Cyclin D1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果CD151与miR-199a-3p存在靶向作用关系。与Control组比较,miR-199a-3p mimic组BrdU阳性细胞数降低,细胞凋亡率升高,G2/M、G1期比例降低,S期比例升高,侵袭细胞数降低,MMP-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低;pcDNA-CD151组BrdU阳性细胞数升高,细胞凋亡率降低,G2/M、G1期比例升高,S期比例降低,侵袭细胞数升高,MMP-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、Vimentin蛋白表达升高。与pcDNACD151组比较,miR-199a-3p mimic+pcDNA-CD151组BrdU阳性细胞数降低,细胞凋亡率升高,G2/M、G1期比例降低,S期比例升高,侵袭细胞数降低,MMP-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白表达降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(均P<0.01)。结论miR-199a-3p过表达靶向CD151抑制甲状腺癌B-CPAP细胞增殖、侵袭和上皮间质转化,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 甲状腺癌 mir-199a-3p CD151 凋亡 侵袭 上皮间质转化
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miR-133a-3p在胃癌组织和血浆中的表达及其对胃癌细胞增殖的影响 被引量:14
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作者 周欣亮 吴昊 +5 位作者 李丹 王霏霏 崔彦芝 赵连梅 桑梅香 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期613-619,共7页
目的:检测mi R-133a-3p在胃癌组织及患者血浆中的表达水平及其对胃癌细胞增殖的影响,并探讨其与患者预后的关系。方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年5月胃癌手术切除的组织标本及术前外周静脉血标本52例,每例组织标... 目的:检测mi R-133a-3p在胃癌组织及患者血浆中的表达水平及其对胃癌细胞增殖的影响,并探讨其与患者预后的关系。方法:收集河北医科大学第四医院普外科2012年5月至2013年5月胃癌手术切除的组织标本及术前外周静脉血标本52例,每例组织标本采集肿瘤组织(非坏死部分)和配对的癌旁组织。采用实时荧光定量RT-PCR(RT-q PCR)法检测mi R-133a-3p在胃癌组织、癌旁组织、血浆及健康体检者血浆(35例)的表达情况,分析mi R-133a-3p的表达水平与胃癌患者中位DFS及临床病理特征的关系。CCK-8法检测过表达或沉默mi R-133a-3p对胃癌SGC7901细胞增殖的影响。结果:mi R-133a-3p在胃癌组织中的表达明显降低(P<0.01),其表达水平与肿瘤TNM分期、肿瘤侵润深度(T)、淋巴结转移(N)及脉管瘤栓相关(P<0.01);在胃癌患者血浆中的表达明显升高(P<0.01),其表达水平与肿瘤TNM分期、淋巴结转移(N)及脉管瘤栓相关(P<0.05);与患者血清中CA199的表达水平正相关(P<0.01)。胃癌组织中mi R-133a-3p高表达组患者中位DFS明显高于低表达组(20.8 vs 14.8个月,P<0.05)。血浆中mi R-133a-3p的高表达组患者中位DFS明显低于低表达组(14.4 vs 20.3个月,P<0.05)。过表达mi R-133a-3p可明显抑制SGC7901细胞的增殖能力,同样沉默其表达可明显促进SGC701细胞的增殖能力(均P<0.05)。结论:mi R-133a-3p可明显抑制胃癌细胞SGC7901的增殖能力,在胃癌组织和血浆中存在明显异常表达,其表达与患者预后明显相关,可作为胃癌早诊早治及患者临床预后判定的潜在标志物。 展开更多
关键词 胃癌 SGC7901细胞 mir-133a-3p 增殖 预后
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miR-125a-3p和miR-17-5p在激素性股骨头坏死中的作用 被引量:21
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作者 吴兴净 张永涛 +1 位作者 郭雄 王坤正 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期210-214,共5页
目的探讨激素性股骨头坏死中miRNA的差异性表达变化。方法取激素性股骨头坏死的坏死区域骨组织为实验组,其股骨颈基底部骨组织为对照组;分别提取总RNA并进行质检;采用miRNA芯片技术检测miRNAs的表达并对其表达谱进行分析;运用实时定量PC... 目的探讨激素性股骨头坏死中miRNA的差异性表达变化。方法取激素性股骨头坏死的坏死区域骨组织为实验组,其股骨颈基底部骨组织为对照组;分别提取总RNA并进行质检;采用miRNA芯片技术检测miRNAs的表达并对其表达谱进行分析;运用实时定量PCR对差异明显的miR-125a-3p和miR-17-5p进行验证。结果对激素性股骨头坏死中miRNA表达谱进行差异性分析。和对照组相比,实验组中倍数大于2倍,P<0.05的miRNA共有11个。8个miRNA表达上调,3个表达下调。实时定量PCR证实miR-125a-3p在坏死标本中高表达,而miR-17-5p呈现低表达,与miRNA芯片结果一致。结论激素性股骨头坏死区域骨组织与对照组相比miRNAs表达发生明显变化,以miR-125a-3p和miR-17-5p差异最为明显。这表明了它们最有可能参与了激素性股骨头坏死病理过程的调控。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 mir-125a-3p mir-17-5p MIRNA MIRNA芯片
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mir-130a-3p及smad 4在肝细胞癌组织中的表达及临床意义 被引量:12
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作者 周争光 汪蕊 +5 位作者 李玉梅 杨燕 苏方 赵福友 吴穷 孙国平 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期383-387,共5页
目的考察mir-130a-3p及靶基因smad 4在肝细胞癌(HCC)组织中表达及相关性,并分析两者表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。方法从石蜡组织包埋的51例肝癌组织及相应癌旁组织中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测mir-130a-3... 目的考察mir-130a-3p及靶基因smad 4在肝细胞癌(HCC)组织中表达及相关性,并分析两者表达与肝癌临床病理特征和预后的关系。方法从石蜡组织包埋的51例肝癌组织及相应癌旁组织中提取总RNA,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测mir-130a-3p的表达,并采用免疫组织化学Eli Vision(IHC)法测定肝癌组织及癌旁组织中smad 4表达,分析两者相关性、与临床病理参数及总生存时间(OS)之间的关系。结果 mir-130a-3p在肝癌组织中的表达水平(1.38±0.15)显著低于癌旁组织(2.48±0.16)(P<0.001)。在肝癌组织中,smad 4阳性表达率为72.5%(37/51),明显高于癌旁组织51.0%(26/51)(P<0.05)。mir-130a-3p和smad 4在肝癌组织中的表达呈负相关性(rs=-0.431,P<0.05)。mir-130a-3p和smad 4的表达水平与肝癌患者TNM分期有关(P<0.05),与年龄、性别、有无淋巴结转移、有无脉管癌栓及病理分级无关。肝癌组织中mir-130a-3p高表达患者中位OS(25.6个月)较低表达组(23.1个月)延长,但差异无统计意义;smad 4阴性表达组中位OS(26.7个月)较阳性表达组(20.0个月)显著延长(P<0.05)。结论 mir-130a-3p在肝癌组织中表达下调,可能通过调控smad 4的表达参与了肝癌的发生发展,mir-130a-3p有望成为肝癌潜在的治疗靶点及预后判断因子。 展开更多
关键词 mir-130a-3p SMAD 4 肝细胞肝癌
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miR-199a-3p在乳腺癌中的表达及其作用 被引量:10
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作者 马大昌 陈诚 +2 位作者 吴多明 王红磊 武力 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期481-486,共6页
背景与目的:多种微小RNA(micro RNA,mi RNA)在乳腺癌中异常表达,在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。mi RNA可能是治疗乳腺癌的新靶点。该研究旨在探讨mi R-199a-3p在乳腺癌中的表达水平,及其对乳腺癌癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:运... 背景与目的:多种微小RNA(micro RNA,mi RNA)在乳腺癌中异常表达,在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。mi RNA可能是治疗乳腺癌的新靶点。该研究旨在探讨mi R-199a-3p在乳腺癌中的表达水平,及其对乳腺癌癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:运用实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,QRT-PCR)检测乳腺癌患者癌组织、癌旁正常组织、人乳腺癌细胞和人乳腺细胞中mi RNA-199a-3p的表达水平,mi R-199a-3p mimic(或inhibitor)转染乳腺癌细胞MDA-MB-231过表达(或沉默)mi R-199a-3p的表达后,通过MTT法检测细胞增殖能力,Hoechst染色法和caspase-3活力测试检测细胞凋亡情况。结果:相对癌旁正常组织和人正常乳腺细胞,mi R-199a-3p在乳腺癌患者癌组织和人乳腺癌细胞中表达下调。在MDAMB-231中转染mi R-199a-3p mimic过表达mi R-199a-3p可抑制细胞增殖,促进其凋亡;在MDA-MB-231中转染mi R-199a-3p inhibitor沉默mi R-199a-3p可促进细胞增殖,抑制其凋亡。结论:mi R-199a-3p在乳腺癌中表达下调,并通过调节乳腺癌细胞增殖和凋亡发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 mir-199a-3p MDa-MB-231 增殖 凋亡
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miR-27a-3p对肝癌细胞化疗敏感性的影响及机制探讨 被引量:8
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作者 杨颖 杨志芳 +7 位作者 才层 张瑞丽 路鹏霏 贾春丽 李志鹏 毛睿 张华 包永星 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期788-794,共7页
背景与目的:肝细胞肝癌是一种临床上常见的恶性肿瘤,由于其对化疗药物的耐受,常导致预后较差。microRNA(miRNA,miR)是一类长链非编码小RNA,参与肿瘤的多种生物学功能。miR-27a-3p作为代谢相关的miRNA被广泛地研究,而与化疗敏感性之间关... 背景与目的:肝细胞肝癌是一种临床上常见的恶性肿瘤,由于其对化疗药物的耐受,常导致预后较差。microRNA(miRNA,miR)是一类长链非编码小RNA,参与肿瘤的多种生物学功能。miR-27a-3p作为代谢相关的miRNA被广泛地研究,而与化疗敏感性之间关系的报道较少。通过探讨miR-27a-3p参与肝癌化疗敏感性及其可能机制,为肝癌化疗提供新的理论依据。方法:应用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库分析miR-27a-3p在肝细胞肝癌患者癌组织与癌旁组织中的表达。采用LipofectamineTM 3000脂质体瞬时转染方法,将miR-27a-3p过表达质粒和阴性对照质粒(miR-control)转染肝癌细胞株HepG2,将敲低质粒miR-inhibitor-27a-3p和阴性对照质粒(miR-inhibitor-control)转染PLC细胞,分别加入不同浓度的顺铂(cisplatin,DDP)处理48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测细胞增殖情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白[质]印迹法(Western blot)技术检测磷脂酰肌醇3激酶和蛋白激酶B(phosphoinosmde-3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路相关的蛋白表达。结果:miR-27a-3p在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.05);在HepG2过表达细胞中,MTT结果显示,实验组miR-27a+DDP细胞对DDP的半数抑制浓度(IC50)为(1.02±0.03)μg/mL,较对照组miR-control+DDP(1.27±0.08)μg/mL、空白对照组+DDP(1.73±0.08)μg/mL均降低(P<0.05);细胞凋亡分析结果显示,实验组miR-27a+DDP的凋亡率[(31.03±0.20)%]显著高于对照组+DDP[(18.51±2.96)%]和空白对照组+DDP[(8.73±1.58)%](P<0.05);Western blot检测结果显示,miR-27a+DDP组的PI3K表达水平(0.28±0.01)较DDP组[(0.43±0.01)]、miR-27a组(0.57±0.11)及miR-control组(0.72±0.01)降低(P<0.05);miR-27a+DDP组的p-AKT的表达水平(0.29±0.01)与DDP组(0.46±0.05)、miR-27a组(0.67±0.01)及miR-control组(0.10±0.01)相比明显降低(P<0.05);而miR-27a+DDP组的C-caspase的表达水平(0.69±0.01)则高于DDP组(0.51±0.01)、miR-27a组(0.35±0.01)及miR-control组(0.18±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。进一步将miR-27a-3p在PLC细胞中敲低,并于DDP中刺激培养,MTT、细胞凋亡和Western blot实验结果显示,与HepG2过表达细胞的结果趋势相反,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-27a-3p可能通过调节PI3K/AKT信号通路调控肝癌细胞株对DDP的化疗敏感性,有望成为增强肝癌DDP化疗敏感性的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 肝癌细胞 mir-27a-3p pI3K/AKT通路 顺铂 化疗敏感性
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miR-29a-3p和miR-144a-3p下调人非小细胞肺癌细胞COL11A1表达并抑制其增殖、迁移和侵袭 被引量:7
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作者 赵田甜 左玮 淦鑫 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1696-1703,共8页
目的探讨XI型胶原α1(collagen type XI alpha 1,COL11A1)、miR-29a-3p和miR-144a-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用和它们之间的内在联系。方法用RT-qPCR法检测NSCLC组织和细胞中COL11A1 mRNA和与COL11A1... 目的探讨XI型胶原α1(collagen type XI alpha 1,COL11A1)、miR-29a-3p和miR-144a-3p在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用和它们之间的内在联系。方法用RT-qPCR法检测NSCLC组织和细胞中COL11A1 mRNA和与COL11A1具有可能靶向关系的miRNAs的表达水平。COL11A1 siRNA、miR-29a-3p mimic或miR-144a-3p mimic转入H520细胞后,CCK-8法检测细胞活性,EdU法检测细胞增殖,Transwells法检测细胞迁移和侵袭,Western blot法检测COL11A1、Ki67和MMP-2的蛋白表达水平。荧光素酶报告基因分析检测COL11A1是否是miR-29a-3p和miR-144a-3p在NSCLC细胞中的靶点。结果在NSCLC肿瘤组织和细胞中,CoL11A1的表达水平均明显上调(P<0.01),miR-29a-3p和miR-144a-3p的表达水平均明显下调(P<0.01)。敲低COL11A1或过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p均能抑制H520细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05或P <0.01),且过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p均能抑制COL11A1表达。荧光素酶报告基因实验证实miR-29a-3p和miR-144a-3p均可直接靶向COL11A1。结论过表达miR-29a-3p和miR-144a-3p可通过直接下调COL11A1表达来抑制NSCLC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 CoL11A1 mir-29a-3p mir-144a-3p 非小细胞肺癌 细胞增殖 迁移 侵袭
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miR-199a-3p靶基因预测及生物信息学分析 被引量:6
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作者 谢小娟 潘晶晶 +1 位作者 魏力强 陈葳 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期244-249,共6页
目的为深入研究miR-199a-3p在膀胱癌形成和发展中的作用提供理论依据。方法分析miR-199a-3p序列,预测其靶基因和转录因子,并对靶基因进行GO富集和KEGG Pathway分析;构建TF-miR-199a-3p-靶基因网络调控图。结果 miR-199a-3p序列在多物种... 目的为深入研究miR-199a-3p在膀胱癌形成和发展中的作用提供理论依据。方法分析miR-199a-3p序列,预测其靶基因和转录因子,并对靶基因进行GO富集和KEGG Pathway分析;构建TF-miR-199a-3p-靶基因网络调控图。结果 miR-199a-3p序列在多物种间具有高度保守性;GO分析发现miR-199a-3p的靶基因参与细胞调节、代谢调节、细胞大分子生物合成等生物过程(P<0.01);KEGG Pathway分析发现miR-199a-3p的靶基因显著富集在上皮细胞的细菌入侵通路、ECM受体的相互作用通路、PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、小细胞肺癌通路、癌症中的蛋白聚糖通路等;根据构建的TF-miR-199a-3p-靶基因网络调控图,挖掘出可能受miR-199a-3p调控的重要基因有MYC、SP1、mTOR、NFκB、NFκB1等。结论 miR-199a-3p可能通过直接靶向作用mTOR,调节PI3K-Akt-mTOR信号通路,从而参与膀胱癌的形成和发展。 展开更多
关键词 mir-199a-3p 生物信息学 MTOR GO富集分析 KEGG pathway分析 膀胱癌 pI3K-AKT MApK 蛋白聚糖
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lncRNA ZFAS1靶向miR-193a-3p调控宫颈癌细胞Siha放射敏感性的分子机制研究 被引量:6
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作者 刘晓娟 王静 +2 位作者 张娟 高月月 王虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期195-200,共6页
目的:探讨lncRNA ZFAS1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响以及其作用机制。方法:实验设置pcDNA组、pcDNA-ZFAS1组、si-con组、si-ZFAS1组、IR+si-con组、IR+si-ZFAS1组、si-ZFAS1+anti-miR-con组、si-ZFAS1+anti-miR-193a-3p组、IR+si-ZFAS1... 目的:探讨lncRNA ZFAS1对宫颈癌细胞放射敏感性的影响以及其作用机制。方法:实验设置pcDNA组、pcDNA-ZFAS1组、si-con组、si-ZFAS1组、IR+si-con组、IR+si-ZFAS1组、si-ZFAS1+anti-miR-con组、si-ZFAS1+anti-miR-193a-3p组、IR+si-ZFAS1+anti-miR-con组、IR+si-ZFAS1+anti-miR-193a-3p组。qRT-PCR检测miR-193a-3p和ZFAS1表达;Western blot检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞克隆形成实验检测宫颈癌细胞的放射敏感性;双荧光素酶报告实验检测荧光活性。结果:宫颈癌放射抵抗组织和不同剂量射线照射后的宫颈癌细胞中ZFAS1高表达,miR-193a-3p低表达;沉默lncRNA ZFAS1可促进宫颈癌细胞凋亡并增加细胞放射敏感性,促进Cleaved Caspase-3、γ-H2AX表达,抑制Cyclin D1表达。ZFAS1靶向调节miR-193a-3p表达;抑制miR-193a-3p表达逆转了沉默ZFAS1对宫颈癌细胞的放射增敏和细胞凋亡促进作用。结论:lncRNA ZFAS1可增加宫颈癌细胞的放射敏感性,并促细胞凋亡,其机制可能与调控miR-193a-3p有关,为宫颈癌的放疗提供新靶点和新思路。 展开更多
关键词 lncRNA ZFAS1 mir-193a-3p 宫颈癌 放射敏感性 凋亡
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miR-130a-3p对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及对SPOCK1的调控作用 被引量:9
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作者 宋歌 董彪 朱照伟 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第4期541-546,共6页
目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质... 目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质蛋白多糖(SPOCK1)mRNA及蛋白的表达。取5637细胞,分别转染miR-130a-3p mimics或si-SPOCK1,同时设阴性对照和空白对照,用MTT法检测细胞存活,Transwell小室法测定细胞侵袭和迁移,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测MMP-2和Caspase-3蛋白的表达;用生物学信息预测和双荧光素酶报告实验分析miR-130a-3p和SPOCK1的靶向关系。结果:与癌旁组织和SV-HUC-1细胞相比,膀胱癌组织和细胞中miR-130a-3p的表达下调,SPOCK1 mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05)。转染miR-130a-3p或沉默SPOCK1均可抑制膀胱癌细胞存活、侵袭和迁移,诱导其凋亡,并抑制MMP-2蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。经验证SPOCK1是miR-130a-3p的靶基因。结论:miR-130a-3p可能通过靶向调控SPOCK1的表达来抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 膀胱癌 凋亡 mir-130a-3p SpOCK1
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