m^(7)G甲基转移酶基因GhTRM8a/82调控棉花株高发育的研究

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作者 魏修振 门婧婕 +4 位作者 张慧 余志喜 张经博 赵惠新 黄耿青 《河北农业大学学报》 北大核心 2025年第3期11-21,共11页

m^(7)G-甲基腺苷(m^(7)G)作为细菌到人类的tRNAs中普遍存在的修饰之一,在基因表达调控方面具有重要作用,m^(7)G甲基转移酶核心复合物由METTL1及其辅助因子WDR4组成。本研究对陆地棉中m^(7)G甲基转移酶核心复合物成员GhTRM8a和GhTRM82家... m^(7)G-甲基腺苷(m^(7)G)作为细菌到人类的tRNAs中普遍存在的修饰之一,在基因表达调控方面具有重要作用,m^(7)G甲基转移酶核心复合物由METTL1及其辅助因子WDR4组成。本研究对陆地棉中m^(7)G甲基转移酶核心复合物成员GhTRM8a和GhTRM82家族成员进行鉴定和序列进化分析,发现TRM8a和TRM82在植物进化过程中保守性较高。GhTRM8a和GhTRM82在各个组织里均有表达,且其编码的蛋白均定位于细胞核中,能相互作用形成异源二聚体。病毒诱导基因沉默技术(VIGS)敲低GhTRM8a和GhTRM82的表达均导致茎秆变短,使棉花植株显著变矮。茎纵向石蜡切片试验显示,GhTRM8a和GhTRM82的沉默使茎秆细胞细胞长度显著变短,表明GhTRM8a/GhTRM82是通过影响茎秆细胞伸长来调控棉花株高发育的。QRT-PCR试验结果表明GhTRM8a和GhTRM82影响了包括赤霉素(GA)合成及生长素和独脚金内脂途径相关基因的表达,从而调控茎秆发育。综上所述,GhTRM8a和GhTRM82相互作用形成复合物,进而通过影响GA的合成来调节棉花茎秆发育。本研究可为棉花株型发育的机理提供理论依据。 展开更多

关键词 棉花 株高发育 m^(7)g甲基转移酶 ghTRM8a ghTRM82 gA合成

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玉米大斑病菌m^(6)A甲基转移酶基因的克隆及功能分析

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作者 朱蒙芳 刘志航 +4 位作者 李依纯 薛启鑫 巩校东 谷守芹 刘玉卫 《河北农业大学学报》 北大核心 2025年第3期22-29,共8页

本研究针对前期筛选到的玉米大斑病菌中m^(6)A甲基转移酶METTL4的同源基因StMETTL4,对其结构及功能进行了初步解析。以野生型菌株01-23的cDNA为模版克隆该基因,并运用生物信息学方法预测其结构特征及病菌不同发育时期的表达特征;利用qRT... 本研究针对前期筛选到的玉米大斑病菌中m^(6)A甲基转移酶METTL4的同源基因StMETTL4,对其结构及功能进行了初步解析。以野生型菌株01-23的cDNA为模版克隆该基因,并运用生物信息学方法预测其结构特征及病菌不同发育时期的表达特征;利用qRT-PCR技术检测其在病菌侵染玉米不同时期的表达量变化;构建StMETTL4的融合表达载体pET28a-StMETTL4,并在大肠杆菌BL21(DE3)中通过IPTG诱导目标蛋白的表达,采用SDS-PAGE技术验证其表达情况;通过Ni柱亲和层析技术纯化StMETTL4蛋白,并测定其是否具有m^(6)A甲基转移酶催化活性。结果表明,StMETTL4的CDS序列由1518个核苷酸组成,编码1个包含506个氨基酸、具有典型MT-A70结构域的蛋白质;对StMETTL4的表达模式分析发现,该基因在病菌的芽管与侵入钉发育时期表达量显著上升,且侵染玉米过程中表达量显著提高,其中24 h后表达量达到最高,由此推测其可能在病菌侵染结构发育及致病过程中发挥重要作用;SDS-PAGE结果显示该蛋白大小为72.85 kD;成功获得其纯化蛋白,且该蛋白具有m^(6)A甲基转移酶活性。该研究不仅明确了StMETTL4基因的结构特征及在病菌生长发育及侵染寄主过程中的表达模式,也证实了StMETTL4蛋白具有m^(6)A甲基转移酶催化活性,为深入揭示其功能奠定了基础。 展开更多

关键词 玉米大斑病菌 m^(6)A甲基转移酶 StMETTL4 原核表达 QRT-PCR

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精氨酸甲基转移酶(PRMT)7通过IGF-1信号通路调控人骨髓间充质干细胞成脂分化的研究

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作者 郭倩 卿佳 +7 位作者 陆大壮 王叙 李扬 张慧 张应飞 刘云松 周永胜 张萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1406-1417,共12页

目的本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶(PRMT)7在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化,进而探索相应的调控机制。方法通过定量反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测hBMSCs成脂分化过... 目的本研究旨在明确精氨酸甲基转移酶(PRMT)7在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化过程中的变化以及是否调控hBMSCs成脂分化,进而探索相应的调控机制。方法通过定量反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹(Western blot)检测hBMSCs成脂分化过程中PRMT7的变化;通过qRT-PCR和Western blot实验证明PRMT7稳定敲低细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析,以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定敲低细胞系成脂分化水平的变化;通过裸鼠体内异位成脂实验,油红O染色检测PRMT7稳定敲低细胞系体内异位成脂的效果;通过qRT-PCR和Western blot证明PRMT7稳定过表达细胞系构建成功。进行油红O染色和定量分析以及qRT-PCR和Western blot实验检测PRMT7稳定过表达细胞系成脂分化水平的变化;通过q RT-PCR和Western blot实验检测敲低PRMT7和过表达PRMT7的细胞中IGF-1表达水平的变化。在PRMT7稳定敲低细胞系中转染siIGF-1并通过qRT-PCR和Western blot检测IGF-1的表达水平验证敲低效率。通过油红O染色和定量分析,qRT-PCR实验检测转染siIGF-1的敲低组hBMSCs成脂分化水平的变化。结果本文发现:在hBMSCs成脂过程中,PRMT7表达水平明显降低(P<0.01);敲低PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力增强(P<0.001);敲低PRMT7后hBMSCs的体内异位成脂分化能力增强;过表达PRMT7后hBMSCs的成脂分化能力减弱(P<0.01);PRMT7敲低后IGF-1表达水平增加(P<0.0001);PRMT7过表达后IGF-1表达水平降低(P<0.0001);转染siIGF-1后,各细胞系IGF-1表达水平明显降低(P<0.001);敲低组转染siIGF-1后成脂分化能力明显降低(P<0.01)。结论本研究通过细胞水平和裸鼠皮下移植实验发现PRMT7显著抑制hBMSCs成脂分化,机制研究发现PRMT7对hBMSCs成脂分化的调控作用依赖IGF-1信号通路。上述研究表明,PRMT7可能是治疗相关疾病的潜在分子靶点,为PRMT7和hBMSCs应用于相关疾病治疗提供了新思路。 展开更多

关键词 精氨酸甲基转移酶7 成脂分化 骨髓间充质干细胞 IgF-1信号通路

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儿茶酚胺氧位甲基转移酶-287A/G基因多态性与精神分裂症的关联性研究 被引量：1

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作者 吕路线 贾梅志 李文强 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期105-106,共2页

目的探讨儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)基因-287A/G多态性与精神分裂症的关系。方法纳入232例符合美国精神障碍诊断与统计手册第四版(DSM-Ⅳ)诊断标准的精神分裂症患者和141名正常对照,采用限制性片段长度多态技术测定受试者的COMT基因-... 目的探讨儿茶酚胺氧位甲基转移酶(COMT)基因-287A/G多态性与精神分裂症的关系。方法纳入232例符合美国精神障碍诊断与统计手册第四版(DSM-Ⅳ)诊断标准的精神分裂症患者和141名正常对照,采用限制性片段长度多态技术测定受试者的COMT基因-287A/G多态性。结果COMT基因-287A/G多态性突变率为10%,患者组和正常对照组间该多态性基因型及基因频率差异无统计学意义(P>0·05),按性别分层后比较结果仍同前;不同家族史患者组间的上述差异也无统计学意义;该多态性基因型在精神分裂症阳性亚型、阴性亚型、混合型和对照组中分布差异具有统计学意义(P<0·05),各亚型与对照组比较差异无统计学意义,但G/G基因型在阴性亚型出现的频率是混合型的6·30倍(OR=6·300),G等位基因在阴性亚型出现的频率是混合型的1·859倍(OR=1·859)。结论COMT基因-287A/G多态性在不同亚型精神分裂症患者中存在差异,G/G基因型和G等位基因可能是精神分裂症阴性亚型的危险因素。 展开更多

关键词 精神分裂症 儿茶酚胺氧位甲基转移酶 -287A/g多态性

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温胆汤对肥胖代谢相关基因B4 galt7、Sc5d启动子甲基化及表达的影响 被引量：1

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作者 杨海燕 李锦超 +2 位作者 任美玲 吴紫葶 王萍 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期177-183,共7页

目的 分析中医化痰名方温胆汤对肥胖腹腔脂肪组织代谢相关基因B4 galt7、Sc5d启动子区甲基化及表达的影响。方法 首先采用高脂饲料喂养构建肥胖大鼠模型,通过高、中、低不同剂量温胆汤干预肥胖大鼠,观察药物减重降脂的效应;然后采用Mass... 目的 分析中医化痰名方温胆汤对肥胖腹腔脂肪组织代谢相关基因B4 galt7、Sc5d启动子区甲基化及表达的影响。方法 首先采用高脂饲料喂养构建肥胖大鼠模型,通过高、中、低不同剂量温胆汤干预肥胖大鼠,观察药物减重降脂的效应;然后采用Massarray技术检测B4Galt7、Sc5d基因启动子甲基化情况;再分别利用实时荧光定量RT-PCR技术、蛋白质印迹技术检测B4Galt7、Sc5d基因的表达情况,分析启动子区甲基化情况与表达间的关系。结果 (1)温胆汤的干预效果与药物浓度无明显剂量依赖关系,高、中剂量温胆汤对肥胖大鼠具有较好减轻体质量作用;温胆汤对改善肥胖大鼠的血脂中TG、TC、LDL-C水平有积极意义,尤其以高剂量组明显。(2)B4 galt7基因启动子区共检测到有31个位点发生甲基化改变。空白对照组与正常对照组比较平均甲基化程度上升,其中有24个位点甲基化程度上升。在此24个位点中,各药物组基本呈现与空白组相对的调控方向,即甲基化程度较空白对照组下降;Sc5d基因启动子区共检测到有37个位点发生甲基化改变。空白对照组与正常对照组比较平均甲基化程度下降,其中有20个位点甲基化程度下降。在此20个位点中,各药物组基本呈现与空白对照组相对的调控方向,即甲基化程度较空白对照组上升。(3)空白对照组与正常对照组相比B4Galt7 mRNA表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05);温胆汤干预后,各药物组表达低于空白对照组,但组间均无统计学差异(P>0.05);空白对照组与正常对照组相比Sc5d mRNA表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05);温胆汤干预后,各药物组与空白对照组比较表达降低,其中药物中剂量组降低明显,具有统计学差异(P<0.05)。(4)空白对照组与正常对照组比较,B4Galt7、Sc5d蛋白表达升高明显(P<0.01)。温胆汤干预后,各药物组B4Galt7、Sc5d蛋白表达明显低于空白对照组,且差异存在统计学意义(P<0.01)。结论 温胆汤对B4Galt7基因启动子甲基化程度的影响均与其表达无明显关系,而对Sc5d基因启动子的甲基化的影响与其表达有相关性。 展开更多

关键词 温胆汤 肥胖 代谢 β-1 4-半乳糖基转移酶7 甾醇-c5-去饱和酶 甲基化

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神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因和儿茶酚-O-甲基转移酶基因多态性与精神分裂症的关联研究

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作者 刘霞 孔凡芝 +4 位作者 彭志珍 万晓娜 王常青 程璐 洪晓虹 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期48-53,共6页

目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和C... 目的探讨CHRNA7、COMT基因多态性与精神分裂症的相关关系。方法采用聚合酶链反应及聚丙烯酰胺凝胶芯片技术,检测粤东地区精神分裂症患者(140例)与正常对照者(100例)CHRNA7基因3个单核苷酸多态性位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个单核苷酸多态性位点(rs4680、rs737865、rs165599),并对分型结果进行测序鉴定。结果所有位点的单核苷多态性与精神分裂症发病风险无关联(均P>0.05)。结论在中国粤东地区CHRNA7基因3个位点(rs2337980、rs1909884、rs883473)和COMT基因3个位点(rs4680、rs737865、rs165599)的基因多态性可能与精神分裂症无关,但此结论尚需要进一步扩大样本量进行验证。 展开更多

关键词 精神分裂症儿 茶酚-O-甲基转移酶基因 神经型烟碱乙酰胆碱受体α7亚单位基因

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CpG甲基转移酶诱导人结肠癌细胞凋亡的实验研究 被引量：2

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作者 王文辉 汪芳裕 +2 位作者 沈芸竹 王颖超 袁俊芳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第9期905-908,共4页

目的紧密连接蛋白(claudin)-7在结肠癌中表达上调,并与肿瘤的发生转移密切相关。文中探讨CpG甲基转移酶(CpG methyltransferase)又称M.SssI在体外对人结肠癌细胞HT-29细胞的凋亡诱导和增殖的抑制作用及对紧密连接蛋白-7表达的影响。方... 目的紧密连接蛋白(claudin)-7在结肠癌中表达上调,并与肿瘤的发生转移密切相关。文中探讨CpG甲基转移酶(CpG methyltransferase)又称M.SssI在体外对人结肠癌细胞HT-29细胞的凋亡诱导和增殖的抑制作用及对紧密连接蛋白-7表达的影响。方法分别用50U/ml M.SssI为过甲基化组,10μmol/L氮杂胞苷(5-azacytidine)为甲基化酶抑制组干预培养HT-29细胞,只加PBS为对照组。24 h后用流式细胞术观察3组细胞的凋亡情况。应用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测各组细胞的增殖能力。用细胞免疫荧光技术观察紧密连接蛋白-7的细胞学定位和表达程度在3组细胞中的差异。结果过甲基化组细胞早期凋亡率明显高于PBS对照组,P<0.05,而甲基化酶抑制组早期凋亡率低于对照组,差异无统计学意义,P>0.05。M.SssI显著抑制HT-29细胞增殖,P<0.05,抑制率达32.1%,而甲基化酶抑制剂5-氮杂胞苷可促进细胞增殖,但与对照组比较差异无统计学意义,P>0.05。与对照组和甲基化酶抑制组相比,紧密连接蛋白-7在过甲基化组表达明显下降,P<0.05,而5-氮杂胞苷组中紧密连接蛋白-7的表达量较对照组表达明显增强,P<0.05。结论CpG甲基转移酶可诱导HT-29细胞的凋亡、抑制增殖,可能与CpG甲基转移酶促使紧密连接蛋白-7基因启动子发生过甲基化,导致相应蛋白表达下降有关。 展开更多

关键词 Cpg甲基转移酶 HT-29细胞 细胞凋亡 紧密连接蛋白-7

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甲基转移酶SET7/9介导的底物甲基化修饰及其生理病理学功能的研究进展 被引量：1

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作者 刘旭骏 司文喆 《生理科学进展》 CAS 2022年第6期463-467,共5页

赖氨酸的甲基化修饰能够影响蛋白质的稳定性、基因表达、亚细胞定位或酶活性,该过程与多种生理病理现象密切相关。其中,包含SET结构域的组蛋白甲基转移酶7/9(SET domain containing 7/9,SET7/9)是最先被鉴定出来的甲基转移酶,SET7/9参... 赖氨酸的甲基化修饰能够影响蛋白质的稳定性、基因表达、亚细胞定位或酶活性,该过程与多种生理病理现象密切相关。其中,包含SET结构域的组蛋白甲基转移酶7/9(SET domain containing 7/9,SET7/9)是最先被鉴定出来的甲基转移酶,SET7/9参与的组蛋白甲基化修饰是重要的表观遗传修饰方式之一,在多个生物过程如转录激活和抑制、复制及DNA损伤修复中都有重要的作用。SET7/9对非组蛋白的甲基化修饰,不仅影响基因表达、调控、遗传等生理机制,且对于肿瘤等重大疾病的诊断、防治和预后判断有重要意义。本文就甲基转移酶SET7/9通过对组蛋白及非组蛋白底物的甲基化修饰及其生理学功能予以综述。 展开更多

关键词 甲基转移酶SET7/9 组蛋白底物 非组蛋白底物 甲基化修饰 生理及病理功能

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脂多糖诱导人和小鼠肠上皮细胞炎症并上调细胞甲基转移酶样蛋白3(METTL3)和METTL14表达 被引量：1

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作者 丁汝昕 李瑞凯 +2 位作者 刘俊丽 张健 韩继明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期308-315,共8页

目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量... 目的探讨N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A)修饰在HIEC-6人肠上皮细胞与MODE-K小鼠肠上皮细胞炎性状态下的变化。方法采用不同剂量的脂多糖(LPS)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞10 h或相同剂量LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α分别刺激HIEC-6细胞与MODE-K细胞(0、3、6、12、24)h。实时定量PCR检测细胞炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达;实时定量PCR和Western blot法分别检测m^(6)A修饰相关分子甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、METTL14、METTL16、Wilms瘤1相关蛋白(WTAP)、烷基化修复同源蛋白5(ALKBH5)、脂肪量和肥胖相关蛋白(FTO)、YTH结构域蛋白1(YTHDC1)、YTHDC2的mRNA和蛋白表达。结果与对照组相比,HIEC-6细胞与MODE-K细胞在LPS诱导的时间依赖与剂量依赖模型中IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达水平增高,并同步上调METTL3和METTL14 mRNA与蛋白水平。结论LPS可以诱导肠上皮细胞出现炎症反应,并上调肠上皮细胞中METTL3和METTL14的表达。 展开更多

关键词 炎症性肠病(IBD) N_(6)-甲基腺苷(m^(6)A) 甲基转移酶样蛋白3(METTL3) METTL14

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甲基转移酶样蛋白3(METTL3)通过NF-κB信号通路促进小鼠巨噬细胞活化和炎症反应 被引量：7

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作者 张天择 陈旭 +4 位作者 王微 席文锦 霍毅 杨安钢 王涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期727-732,共6页

目的研究参与腺嘌呤第6位氮原子上的甲基化修饰(m^6A)的甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在巨噬细胞活化中的作用。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,并以1μg/mL脂多糖(LPS)刺激0、2、4、6 h,检测METTL3的表达情况。设计合成的针对小鼠METTL... 目的研究参与腺嘌呤第6位氮原子上的甲基化修饰(m^6A)的甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在巨噬细胞活化中的作用。方法体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,并以1μg/mL脂多糖(LPS)刺激0、2、4、6 h,检测METTL3的表达情况。设计合成的针对小鼠METTL3的小干扰RNA(siRNA)敲低METTL3的表达,通过实时定量PCR和Western blot法检测干扰效率;利用siRNA下调METTL3表达48 h后,以1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞,采用实时定量PCR检测白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-12、IL-1β的mRNA水平,Western blot法检测核因子κB(NF-κB)信号通路中p65和磷酸化p65蛋白水平。结果LPS刺激后RAW264.7细胞METTL3的表达上调,设计合成的METTL3 siRNA能有效敲低METTL3的水平。敲低METTL3后,巨噬细胞LPS刺激诱导表达的IL-6、IL-12、TNF-α和IL-1β显著降低,同时伴有NF-κВ信号通路p65蛋白的磷酸化水平降低。结论METTL3通过激活NF-κВ信号通路促进LPS刺激的巨噬细胞活化和炎症反应。 展开更多

关键词 m^6A甲基转移酶 甲基转移酶样蛋白3(METTL3) 巨噬细胞 NF-κВ信号通路

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m^(6)A甲基化修饰在重度抑郁症中的作用

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作者 曲智 段东晓 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2024年第2期185-190,共6页

N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是真核生物RNA中常见且可逆的mRNA修饰,属于表观遗传学修饰之一。在甲基转移酶、去甲基化酶及阅读蛋白的调控下,m^(6)A修饰通过介导RNA转录、剪接、翻译等过程来影响相关蛋白质的表达,调... N^(6)-甲基腺苷(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是真核生物RNA中常见且可逆的mRNA修饰,属于表观遗传学修饰之一。在甲基转移酶、去甲基化酶及阅读蛋白的调控下,m^(6)A修饰通过介导RNA转录、剪接、翻译等过程来影响相关蛋白质的表达,调控机体的生理生化过程。重度抑郁症(major depressive disorder,MDD)作为一种发病率高,治愈率低且极易复发的精神类疾病,其致病因素诸多,如遗传因素、环境因素和表观遗传学因素等,但其发病具体机制尚不清楚。近期研究发现m^(6)A修饰与MDD发病之间存在密切关系,并逐渐成为研究MDD发病机制的热点。本文通过对m^(6)A甲基化修饰过程及相关酶类在MDD患者中枢神经系统的表达及作用进行综述,以期为重度抑郁症的研究和治疗提供新的思路及药物靶点。 展开更多

关键词 N^(6)-甲基腺苷 重度抑郁症 甲基化 m^(6)A甲基转移酶 m^(6)A去甲基化酶

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m^(6)A修饰在神经病理性疼痛发病机制中的作用研究:基于不同疾病与疼痛模型的探索

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作者 丁源隆 李鑫楠 罗靖 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第4期505-513,共9页

神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)是一类由神经系统损伤或疾病引发的慢性疼痛,主要表现为自发性疼痛、痛觉过敏及痛觉超敏,严重影响患者生活质量。NP的发病机制复杂,涉及外周敏化、中枢敏化、离子通道改变以及胶质细胞活化等异常调... 神经病理性疼痛(neuropathic pain,NP)是一类由神经系统损伤或疾病引发的慢性疼痛,主要表现为自发性疼痛、痛觉过敏及痛觉超敏,严重影响患者生活质量。NP的发病机制复杂,涉及外周敏化、中枢敏化、离子通道改变以及胶质细胞活化等异常调节。近年来,m^(6)A在NP中的作用引起了广泛关注,但是m^(6)A修饰在不同疾病与疼痛模型中的作用研究仍然有限,因此,阐明m^(6)A修饰在不同疾病与疼痛模型中的作用显得尤为重要。本文基于不同疾病与疼痛的模型,综述了近年来关于m^(6)A甲基化修饰在NP发病中的作用及机制的研究进展,尤其是综述了METTL3、METTL14、FTO、ALKBH5和YTHDF1等5种经典的m^(6)A修饰因子介导不同疾病与疼痛模型形成NP的作用机制,以期从m^(6)A修饰的角度为NP的药物开发和防治提供新的启示和思路。 展开更多

关键词 神经病理性疼痛 N^(6)-甲基腺苷(m^(6)A) m^(6)A甲基转移酶 m^(6)A去甲基酶 m^(6)A阅读蛋白

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MGMT和MMP-7在星形细胞瘤中表达及临床意义 被引量：1

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作者 苏赓 周志宇 +2 位作者 李国成 莫秋荣 温伟 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期30-34,共5页

目的:研究星形细胞瘤组织中甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)和基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)基因蛋白的表达和意义。方法:应用免疫组化SP法检测49例星形细胞瘤中MGMT和MMP-7... 目的:研究星形细胞瘤组织中甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)和基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)基因蛋白的表达和意义。方法:应用免疫组化SP法检测49例星形细胞瘤中MGMT和MMP-7基因蛋白的表达。结果:MGMT、MMP-7蛋白在星形细胞瘤中的表达率分别为55.10%(27/49)和51.02%(25/49),MGMT和MMP-7的表达与星形细胞瘤组织病理分级有关(P<0.05),与其他临床因素无关(P>0.05);MGMT和MMP-7蛋白在星形细胞瘤中的表达率复发组与无复发组有明显差异(P<0.05),MMP-7抗原与MGMT表达呈负相关(rs=-0.488,P<0.01)。结论:MGMT和MMP-7可能共同参与了星形细胞瘤的发生与发展,MGMT的低表达甚至缺失和MMP-7高表达对星形细胞瘤的恶性程度及预后有指导意义。 展开更多

关键词 星形细胞瘤 甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶 基质金属蛋白酶-7 免疫组织化学

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SET7对Ang Ⅱ介导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响及其机制 被引量：1

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作者 马会军 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期135-141,共7页

目的:沉默含SET结构域赖氨酸甲基转移酶7(SET domain containing lysine methyltransferase 7,SET7)基因可改善缺血再灌注介导的心肌组织损伤,但是SET7对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)介导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响... 目的:沉默含SET结构域赖氨酸甲基转移酶7(SET domain containing lysine methyltransferase 7,SET7)基因可改善缺血再灌注介导的心肌组织损伤,但是SET7对血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)介导的心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响尚不明确。本研究旨在探讨SET7对心肌成纤维细胞增殖以及胶原合成的影响及其可能机制。方法:分离心肌成纤维细胞,采用免疫荧光法鉴定心肌成纤维细胞。将心肌成纤维细胞随机分为4组:对照组,正常培养细胞;Ang Ⅱ组,给予100 nmol/L Ang Ⅱ处理细胞24 h;siCtrl组,细胞转染siCtrl后给予100 nmol/L的Ang Ⅱ处理24 h;siSET7组,细胞转染siSET7后给予100 nmol/L的Ang Ⅱ处理24 h。采用CCK-8法和5-乙炔基-2’-脱氧尿苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)法检测细胞增殖情况;real-time PCR检测SET7、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)mRNA的表达;蛋白质印迹法检测SET7、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、音猬因子(sonic hedgehog,Shh)、跨膜蛋白patched1(Ptch1)、胶质瘤相关癌基因1(glioma-associated oncogene homolog 1,Gli1)和α-SMA蛋白质的表达。结果:在荧光显微镜下可见vimentin染色呈阳性,心肌成纤维细胞状态良好。与对照组比较,Ang Ⅱ组SET7 mRNA和蛋白质表达水平均显著上调,细胞增殖率和EdU荧光强度显著增加,collagen Ⅰ、collagen Ⅲ和α-SMA mRNA和蛋白质表达水平显著上调(均P<0.05);与siCtrl组比较,siSET7组SET7 mRNA表达水平显著下调,细胞增殖率和EdU荧光强度显著下降,collagen Ⅰ、collagen Ⅲ和α-SMA mRNA和蛋白质表达水平显著下调(均P<0.05)。结论:沉默SET7基因可抑制Ang Ⅱ介导的心肌成纤维细胞增殖和胶原合成,Shh信号通路可能参与这一过程。 展开更多

关键词 含SET结构域赖氨酸甲基转移酶7 心肌成纤维细胞 细胞增殖 sonic hedgehog信号通路

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sh-Set7/9表达载体的构建及其在HepG2细胞中的功能

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作者 马克君 施星臣 +4 位作者 李平 李晓强 任雯 秦龙 施鑫鹤 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期753-757,共5页

目的构建sh-Set7/9表达载体并筛选稳定转染HepG2细胞株,考察其干扰效果,为后续研究Set7/9基因的功能及其在肝癌细胞系中的作用提供实验基础。方法寻找靶向序列,设计siRNA片段,构建针对人Set7/9基因的shRNA和对照载体,将干扰载体和载体... 目的构建sh-Set7/9表达载体并筛选稳定转染HepG2细胞株,考察其干扰效果,为后续研究Set7/9基因的功能及其在肝癌细胞系中的作用提供实验基础。方法寻找靶向序列,设计siRNA片段,构建针对人Set7/9基因的shRNA和对照载体,将干扰载体和载体稳定转染肝癌细胞HepG2,Real-time PCR检测细胞中Set7/9基因的表达水平;同时利用Western blot方法在蛋白质水平进行检测,确定该基因的干扰效果。结果成功构建载体Set7/9-shRNA;Real-time PCR结果显示该基因表达水平明显被抑制(P<0.05),同样Western blot检测表明其蛋白表达也显著下调。此外,与其相关的Sirt1蛋白表达水平提高8.4倍,Suv39h1蛋白表达水平升高1.1倍。结论构建稳定转染株后,可以显著下调Set7/9基因的表达,同时影响与其相关的Sirt1和Suv39h1蛋白表达水平,提示对肝癌HepG2细胞活性产生影响。 展开更多

关键词 Set7/9 HEPg2细胞 WESTERN BLOT 甲基转移酶 载体构建 肝癌

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下调METTL3-LYN m^(6)A-IGF2BP2通路抑制内皮细胞迁移 被引量：3

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作者 白秦 陈燕华 +2 位作者 卢尧 吴煌 文爱清 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期845-851,共7页

目的研究甲基转移酶样蛋白3(methyltransferase like 3,METTL3)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)迁移能力的影响,并初步探究其作用机制。方法通过在线设计靶向METTL3第1个外显子的sgRNA,构建到lentiC... 目的研究甲基转移酶样蛋白3(methyltransferase like 3,METTL3)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)迁移能力的影响,并初步探究其作用机制。方法通过在线设计靶向METTL3第1个外显子的sgRNA,构建到lentiCRISPR v2载体;Western blot和免疫荧光染色实验检测METTL3蛋白表达水平;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;m^(6)A甲基化RNA免疫沉淀实验检测细胞迁移相关基因酪氨酸激酶LYN mRNA上m^(6)A甲基化修饰情况;荧光定量PCR(qPCR)检测LYN的表达情况;利用shRNA敲低m^(6)A识别蛋白IGF2BP1和IGF2BP2,siRNA敲低m^(6)A识别蛋白YTHDF2,qPCR检测识别蛋白敲低水平及LYN的mRNA表达情况;RNA免疫沉淀实验进一步检测IGF2BP2与LYN mRNA的结合情况;放线菌素D抑制转录后,qPCR检测LYN mRNA半衰期。结果利用CRISPR-Cas9技术成功构建METLL3基因敲低的HUVECs细胞系。METTL3基因敲低后,内皮细胞的迁移能力下降(P<0.05),细胞迁移相关基因LYN mRNA上m^(6)A甲基化修饰水平显著降低(P<0.01),且LYN mRNA的表达明显下调(P<0.05)。敲低m^(6)A识别蛋白YTHDF2和IGF2BP1,对LYN mRNA的表达量无显著影响(P>0.05),而敲低IGF2BP2,LYN的mRNA表达量显著下调(P<0.01),RNA免疫沉淀实验结果显示IGF2BP2与LYN mRNA结合。mRNA半衰期实验结果表明敲低IGF2BP2降低LYN mRNA稳定性。结论敲低METTL3抑制内皮细胞迁移,其机制可能通过IGF2BP2识别并结合LYN mRNA上m^(6)A修饰位点,调控其mRNA稳定性来发挥作用。 展开更多

关键词 甲基转移酶样蛋白3 内皮细胞 细胞迁移 m^(6)A甲基化修饰

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RNA m^6A甲基化修饰的研究进展 被引量：5

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作者 茹文秀 沈雪梅 +1 位作者 张晓燕 陈宏 《中国牛业科学》 2019年第4期44-49,共6页

RNA m^6A甲基化修饰是发生在RNA腺嘌呤(A)第6位N原子上的一种转录后修饰方式。它是由甲基转移酶和去甲基酶以及识别蛋白所催化的一种动态可逆的修饰方式,具有重要的调控功能。本文综述了m^6A甲基化的发现、相关酶的作用以及在生命过程... RNA m^6A甲基化修饰是发生在RNA腺嘌呤(A)第6位N原子上的一种转录后修饰方式。它是由甲基转移酶和去甲基酶以及识别蛋白所催化的一种动态可逆的修饰方式,具有重要的调控功能。本文综述了m^6A甲基化的发现、相关酶的作用以及在生命过程中的重要功能,以期对未来研究m^6A在牛的遗传育种方面的调控作用提供重要的理论支持。 展开更多

关键词 m^6A甲基化 甲基转移酶 去甲基酶 识别蛋白 调控功能

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METTL3在RNA m^6A甲基化修饰的研究进展 被引量：9

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作者 黄芳芳 周诺 《生理科学进展》 CAS 北大核心 2019年第6期458-463,共6页

m^6A是RNA分子广泛存在的一种表观遗传修饰,主要影响mRNA剪接、翻译和稳定性以及某些非编码RNA的表观遗传效应等。目前研究表明,m^6A甲基化转移酶METTL3在肿瘤、大脑发育、调控干细胞命运等起着重要作用。本文结合近期的研究进展对METTL... m^6A是RNA分子广泛存在的一种表观遗传修饰,主要影响mRNA剪接、翻译和稳定性以及某些非编码RNA的表观遗传效应等。目前研究表明,m^6A甲基化转移酶METTL3在肿瘤、大脑发育、调控干细胞命运等起着重要作用。本文结合近期的研究进展对METTL3这一m^6A甲基化转移酶组分进行了综述,旨在为mRNA和非编码RNA上发生m^6A动态修饰代表的新的遗传信息调控方式提供新的研究思路和治疗靶点。 展开更多

关键词 METTL3 m^6A 甲基化 甲基化转移酶

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m^(6) A RNA甲基化修饰与肿瘤关系的研究进展 被引量：5

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作者 董晓沛(综述) 康小红(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第3期315-320,共6页

N6-甲基腺苷(m^(6) A)是动态可逆的转录后修饰,是真核信使RNA(mRNA)上最普遍的内部修饰。越来越多的证据表明,m^(6) A可改变基因表达,从而调节细胞的自我更新、分化、侵袭和凋亡等过程,并且m^(6) A甲基化失调与异常的RNA代谢直接相关,... N6-甲基腺苷(m^(6) A)是动态可逆的转录后修饰,是真核信使RNA(mRNA)上最普遍的内部修饰。越来越多的证据表明,m^(6) A可改变基因表达,从而调节细胞的自我更新、分化、侵袭和凋亡等过程,并且m^(6) A甲基化失调与异常的RNA代谢直接相关,可导致肿瘤的发生和药物反应的改变。m^(6) A修饰主要由m^(6) A甲基转移酶催化,m^(6) A去甲基酶去除,并由m^(6) A结合蛋白识别,从而参与mRNA的所有代谢过程。文章就m^(6) A RNA修饰与肿瘤发生发展相关研究的最新进展进行综述。 展开更多

关键词 m^(6)A修饰 甲基转移酶 去甲基化酶 结合蛋白 肿瘤

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大豆Glyma04G227700生物信息学分析及与Glyma08G11030互作研究 被引量：1

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作者 罗飞 刘灿 +1 位作者 于月华 倪志勇 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期182-187,共6页

咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid-O-methyltransferase, COMT)是一种催化苯丙素类化合物羟基上氧原子的甲基化酶。前期研究表明,大豆抵御干旱胁迫的F-box基因Glyma08G11030编码蛋白可能与COMT蛋白Glyma04G227700发生互作,为了预测分... 咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid-O-methyltransferase, COMT)是一种催化苯丙素类化合物羟基上氧原子的甲基化酶。前期研究表明,大豆抵御干旱胁迫的F-box基因Glyma08G11030编码蛋白可能与COMT蛋白Glyma04G227700发生互作,为了预测分析大豆COMT基因Glyma04G227700的功能及二者的互作关系,本研究克隆Glyma04G227700基因,并对其进行生物信息学分析,通过实时荧光定量检测方法分析其在大豆不同组织中的表达情况,并利用酵母双杂交系统验证蛋白互作情况。结果显示:Glyma04G227700基因全长1 095 bp,编码366个氨基酸,与野大豆(RZC17879.1 Glycine soja)亲缘关系较近。Glyma04G227700在大豆的根、茎、叶、子叶中都有表达,且在根和茎中表达量较高,在子叶中表达量最低。酵母双杂结果表明Glyma08G11030与Glyma04G227700蛋白不存在互作。 展开更多

关键词 大豆 咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT) glyma04g227700 基因克隆 生物信息学分析 酵母双杂 glyma08g11030

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