大豆种子萌发过程中的差异蛋白质组研究 被引量：27

1

作者 徐晓燕 郑蕊 +2 位作者 李春梅 盖钧镒 喻德跃 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1106-1112,共7页

运用蛋白质组学技术对大豆(Glycinemax)N2899种子萌发0h、8h、36h、60h4个时期蛋白质的差异表达情况进行了研究.结果发现,在考马斯亮蓝染色的双向电泳pH3～10胶上,PDQuest图像分析软件可识别的点约350个,其中表达量变化2.5倍以上的蛋白... 运用蛋白质组学技术对大豆(Glycinemax)N2899种子萌发0h、8h、36h、60h4个时期蛋白质的差异表达情况进行了研究.结果发现,在考马斯亮蓝染色的双向电泳pH3～10胶上,PDQuest图像分析软件可识别的点约350个,其中表达量变化2.5倍以上的蛋白质点有24个,而绝大部分大豆种子贮藏蛋白在萌发期尚未降解.在萌发的第一阶段,24个差异表达蛋白中有10个蛋白质的丰度发生变化.第二阶段,差异表达蛋白的种类和量增加,其中15个蛋白质是动态变化的,14个蛋白质在胚根突破种皮时表达量达到峰值,表明吸胀后种子内的生命活动越来越强.对这24个蛋白质点进行胶内酶解,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定均获得肽质量指纹图谱.搜索大豆的UniGene库初步鉴定出6个蛋白质,分别是核苷二磷酸激酶、热激蛋白、硫氧还蛋白、35ku种子成熟蛋白及种子成熟蛋白PM36.对这些蛋白质在种子萌发过程中可能的作用进行了讨论. 展开更多

关键词 大豆 种子萌发 蛋白质组 双向电泳 基质辅助激光解吸飞行时间质谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用磷酸化蛋白质组学方法初步研究喉癌相关基因LCRG1的功能 被引量：6

2

作者 章晓鹏 肖志强 +6 位作者 李萃 李建玲 余艳辉 欧阳咏梅 冯雪萍 张鹏飞 陈主初 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期508-516,共9页

mRNA差异显示技术克隆的喉癌相关基因LCRG1,对不表达该基因的喉癌细胞系(Hep-2)的生长具有明显抑制作用.软件分析推测,LCRG1可能在细胞信号传导中发挥作用.为进一步地研究LCRG1的功能,应用RT-PCR和平板克隆形成实验证实,经多次传代的Hep... mRNA差异显示技术克隆的喉癌相关基因LCRG1,对不表达该基因的喉癌细胞系(Hep-2)的生长具有明显抑制作用.软件分析推测,LCRG1可能在细胞信号传导中发挥作用.为进一步地研究LCRG1的功能,应用RT-PCR和平板克隆形成实验证实,经多次传代的Hep-2/LCRG1细胞,仍表达LCRG1,且LCRG1具有显著的抑制细胞增殖的能力.抽提Hep-2/LCRG1和Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系总蛋白质,应用固相pH梯度(IPG)双向凝胶电泳(2DGE),结合抗酪氨酸磷酸化抗体的免疫印迹和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS),鉴定酪氨酸磷酸化的蛋白质.得到了分辨率较高、重复性较好的Hep-2/LCRG1和Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系的总蛋白质双向凝胶电泳图谱;结合免疫印迹反应、软件分析和质谱技术识别并鉴定了13个差异反应的酪氨酸磷酸化的蛋白质.这些蛋白质参与了细胞信号传导和细胞代谢等过程.推测LCRG1可能是通过调节这些蛋白质的酪氨酸磷酸化、去磷酸化状态,参与细胞增殖、代谢和凋亡等过程的调控,而发挥抑瘤作用.这为全面、真实地揭示LCRG1抑瘤作用的分子机理提供了新思路. 展开更多

关键词 LCRG1基因 Hep-2/LCRG1细胞系 Hep-2/pcDNA3.1(+)细胞系 双向凝胶电泳 MALDI-TOF-MS 免疫印迹 酪氨酸磷酸化蛋白质 蛋白质印迹

在线阅读 下载PDF 职称材料

三羟基异黄酮抑制乳腺癌细胞生长的质谱研究 被引量：4

3

作者 阮禹松 万明习 李晓华 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期435-441,共7页

目的初步研究低浓度的三羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制作用,并通过蛋白质组学方法探讨其分子机制。方法MCF-7细胞在含25μmol/L三羟异黄酮的培养液中分别培养1～7d后,进行MTT实验,测得生长曲线;采用顺序抽提的方法将细胞总... 目的初步研究低浓度的三羟异黄酮对人乳腺癌细胞系MCF-7的生长抑制作用,并通过蛋白质组学方法探讨其分子机制。方法MCF-7细胞在含25μmol/L三羟异黄酮的培养液中分别培养1～7d后,进行MTT实验,测得生长曲线;采用顺序抽提的方法将细胞总蛋白分级为水溶性和疏水性两个组分,并应用双向电泳方法对其进行分离,以获取蛋白质的表达谱;通过软件分析,找出表达量存在显著差异的蛋白质点;再应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)与生物信息学相结合的方法对差异表达蛋白点进行分析鉴定。结果25μmol/L的三羟异黄酮对MCF-7细胞具有明显的抑制作用,并在4d后观察到细胞凋亡现象的出现;双向电泳图谱分析表明无论是水溶性蛋白质还是疏水性蛋白都取得了很好的分离,并成功鉴定出24种差异表达蛋白,其中5种下调,19种上调。结论这些蛋白质的功能涉及了细胞的生长调节、应激反应、形态和凋亡等多个方面。 展开更多

关键词 乳腺癌 蛋白质组学 顺序抽提 双向电泳 基质辅助激光解吸离子化电离飞行时间质谱 三羟基异黄酮

在线阅读 下载PDF 职称材料

2型糖尿病视网膜病变患者的血清低分子量蛋白质指纹图谱 被引量：2

4

作者 杨叶虹 鹿斌 +5 位作者 张烁 刘维薇 董雪红 宋晓艳 朱禧星 胡仁明 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期1-5,共5页

目的研究2型糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者特异的血清低分子量蛋白质指纹图谱。方法应用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术,选用H4蛋白质芯片,优化技术参数,对16例正常人,27例2型糖尿病不伴DR患者... 目的研究2型糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者特异的血清低分子量蛋白质指纹图谱。方法应用表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术,选用H4蛋白质芯片,优化技术参数,对16例正常人,27例2型糖尿病不伴DR患者及21例2型糖尿病伴DR患者的血清标本进行检测,应用Biomarker Wizard软件筛选DR患者血清中差异表达蛋白质。结果H4芯片在激光强度210,灵敏度为9的条件下可获得较理想的图谱。在m/z2 000至20 000范围内共出现31个蛋白质/多肽峰;其中有5个差异表达蛋白质或多肽,m/z为7 440,7 639,7 839,8 147和8 925(P<0.05)。结论SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便和高通量分析方法,能直接筛选出DR患者血清中的潜在标记物。 展开更多

关键词 2型糖尿病 糖尿病视网膜病变 表面加强激光解吸电离-飞行时间-质谱 指纹图谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

真姬菇在高温胁迫下的差异表达蛋白分析 被引量：2

5

作者 刘琳 贾培培 +2 位作者 卢伟东 郭奇林 郭立忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期142-147,共6页

采用双向电泳分析Tris-饱和酚法获得的真姬菇菌丝体全蛋白,利用PDQuest8.0软件分析双向电泳图谱,比较最适温度(25℃)和高温胁迫条件下(42℃)真姬菇菌丝体蛋白的表达差异,筛选出与高温胁迫相关的蛋白,并对获得的差异蛋白进行基质辅助激... 采用双向电泳分析Tris-饱和酚法获得的真姬菇菌丝体全蛋白,利用PDQuest8.0软件分析双向电泳图谱,比较最适温度(25℃)和高温胁迫条件下(42℃)真姬菇菌丝体蛋白的表达差异,筛选出与高温胁迫相关的蛋白,并对获得的差异蛋白进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。结果显示,共鉴定7个蛋白点中,Spa2同源结构域的表达量下调,DEHA2G15532p、肽酶M76家族、HSP70、SNF2家族的DNA修复蛋白、细胞色素p450及AM域家族和锌指蛋白的混合物的表达量上调。这些蛋白参与了信号转导、蛋白处理、DNA修复等多种抗逆反应生理过程。 展开更多

关键词 真姬菇 双向电泳(2-DE) 高温胁迫 差异蛋白 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)

在线阅读 下载PDF 职称材料

以2-氨基-5-硝基噻唑为基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱的有效基质分析DNA及蛋白质样品 被引量：1

6

作者 周丽华 邓慧敏 +1 位作者 邓芹英 赵善楷 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2242-2246,共5页

采用碱性新基质 2 -氨基 -5 -硝基噻唑对 DNA和蛋白质样品进行了基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱分析 .结果表明 ,2 -氨基 -5 -硝基噻唑能有效地解吸电离 DNA和蛋白质样品 .采用正离子检测模式 ,分析分子量小于 5 0 0 0的 pd( T) 1 ... 采用碱性新基质 2 -氨基 -5 -硝基噻唑对 DNA和蛋白质样品进行了基质辅助激光解吸 /电离飞行时间质谱分析 .结果表明 ,2 -氨基 -5 -硝基噻唑能有效地解吸电离 DNA和蛋白质样品 .采用正离子检测模式 ,分析分子量小于 5 0 0 0的 pd( T) 1 0 ,pd( C) 1 0 ,pd( A) 8,pd( G) 1 0 和 pd( 5′ATC GAT CGA T3′) DNA样品时 ,分辨率均可达到 1万以上 ;与分析 DNA样品的常用基质相比 ,2 -氨基 -5 -硝基噻唑解吸 /电离样品分子所需要的激光强度小 ,易于获得信噪比和分辨率高及重复性好的谱图 ;分析蛋白质胰岛素、细胞色素 C及牛血清白蛋白样品能达到与α-氰基 -4-羟基肉桂酸 ( HCCA)和 3 ,5 -二甲氧基 -4-羟基肉桂酸 ( SA)相同的效果 .采用负离子检测模式则能以较高的信噪比获得分子量达到 70 0 0的 DNA的分子离子峰信号 .此外 ,以 2 -氨基 -5 -硝基噻唑为基质的基质辅助激光解吸 /电离 ( MALDI) 展开更多

关键词 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱 2-氨基-5-硝基噻唑 DNA 蛋白质

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用MALDI-TOF MS快速鉴定bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌 被引量：2

7

作者 汪华学 张杰 +3 位作者 曹云松 徐阳 应冲涛 郭普 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期217-223,共7页

目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。... 目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。应用聚合酶链反应(PCR)方法筛选携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌。MALDI-TOF MS鉴定菌株并收集携带bla_(KPC-2)基因型和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的质谱图,各自选取其中70株菌株图谱,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra)。采用超级图库鉴定除建库以外的肺炎克雷伯菌,根据耐药表型和PCR结果,判断鉴定结果是否准确。结果共收集295株肺炎克雷伯菌,经耐药表型筛选耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)143株和CSKP 152株。CRKP中鉴定出140株携带碳青霉烯酶基因(134株检出bla_(KPC-2)基因,3株检出blaKPC-18基因,2株检出blaNDM-1基因,1株检出blaIMP基因),3株不携带碳青霉烯酶基因;其中2株同时检出bla_(KPC-2)基因和blaNDM-1基因。根据建库要求,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra);设置error值<0.5,二者重合率达80%;对比图发现,4154.4、8310.7、10880.8、3579、10079.3 m/z五个峰可作为区分携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌和CSKP的特征峰。选取除建库以外的155株肺炎克雷伯菌进行验证,准确率为92.90%(144/155);其中携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌准确率为94.52%(69/73),CSKP准确率为91.46%(75/82)。结论通过MALDI-TOF MS建立Super-Spectra,可快速预测bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌,为临床CRKP感染的诊疗及医院感染防控提供可靠的实验室依据。 展开更多

关键词 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 肺炎克雷伯菌 bla_(KPC-2) 超级图库

在线阅读 下载PDF 职称材料

虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅴ去折叠过程的色谱分析 被引量：1

8

作者 张鹏飞 肖顺勇 梁宋平 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期390-393,共4页

将纯化的天然虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅴ经盐酸胍变性 30min后 ,在pH 3 0、反应温度为 37℃的条件下与三羧甲基磷酸 (TCEP)反应 12min ,用反相高效液相色谱分离得到其全部去折叠中间体 ,通过基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOFMS)进... 将纯化的天然虎纹捕鸟蛛毒素 Ⅴ经盐酸胍变性 30min后 ,在pH 3 0、反应温度为 37℃的条件下与三羧甲基磷酸 (TCEP)反应 12min ,用反相高效液相色谱分离得到其全部去折叠中间体 ,通过基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOFMS)进行鉴定 ,并利用烷基化反应对这些去折叠中间体予以进一步确证。根据其保留时间 ,分析虎纹毒素 Ⅴ各去折叠中间体的色谱行为 ,初步探讨了多肽或蛋白质构象异构体反相色谱行为的多样性。 展开更多

关键词 反相高效液相色谱 基体辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 三羧甲基磷酸 去折叠 虎纹捕鸟蛛毒素-V

在线阅读 下载PDF 职称材料

Pten^(L/L)MEFs与Pten^(△/△)MEFs细胞系的差异表达蛋白质组分析

9

作者 段瑞峰 李刚 +2 位作者 胡迎春 吴德昌 霍艳英 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期269-273,共5页

目的研究PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异。方法运用双向电泳技术比较PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异,6个差异蛋白进行胶内酶切后运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析,肽质... 目的研究PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异。方法运用双向电泳技术比较PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异,6个差异蛋白进行胶内酶切后运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析,肽质量指纹图谱检索数据库后5个蛋白得到鉴定。结果同对照PTEN野生型细胞PtenL/LMEFs相比,磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglycerate mutase 1,PGAM1)和肽脯氨酰顺反异构酶C(pepti-dyl-prolyl cis-trans isomerase C,cyclophilin C)在Pten△/△MEFs细胞中表达上调而Transgelin 2蛋白在Pten△/△MEFs细胞中表达下调。经鉴定已知蛋白点B和F都是过氧化物氧化还原酶6(Peroxiredoxin-6),蛋白点B在Pten△/△MEFs细胞中表达而在Pten△/△MEFs细胞中检测不到,蛋白点B和F的分子质量相似而等电点不同,可能是由于翻译后修饰。结论同对照PTEN野生型细胞PtenL/LMEFs相比,PTEN缺失的Pten△/△MEFs细胞有明显的差异性蛋白表达谱。PTEN的缺失引起细胞内多种蛋白表达改变,这些表达改变的蛋白可能与PTEN缺失后细胞癌变相关。 展开更多

关键词 PTEN 双向电泳 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱 肽质量指纹图谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构的确证

10

作者 董标 梁月琴 +1 位作者 王杰 董方霆 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期125-127,共3页

建立单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构确证的方法。用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定单克隆抗体-白介素2融合蛋白的精确相对分子质量,毛细管等电聚焦方法测定其等电点,通过N_末端氨基酸序列的测定以及肽图分析,证实了抗体-白介素... 建立单克隆抗体-白介素2融合蛋白一级结构确证的方法。用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定单克隆抗体-白介素2融合蛋白的精确相对分子质量,毛细管等电聚焦方法测定其等电点,通过N_末端氨基酸序列的测定以及肽图分析,证实了抗体-白介素2融合蛋白一级结构表达的正确性,同时为单克隆抗体-白介素2融合蛋白的质量标准研究奠定了基础。 展开更多

关键词 单克隆抗体-白介素2融合蛋白 结构确证 基质辅助激光解吸飞行时间质谱 肽图 毛细管等电聚焦

在线阅读 下载PDF 职称材料

二元新基体--8-羟基喹啉／2，5-二羟基苯甲酸在激光解吸／电离飞行时间质谱分析糖蛋白中的应用

11

作者 周丽华 邓慧敏 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期63-66,共4页

采用8-羟基喹啉(8-HQ)、新二元基体8-HQ/2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、实验室常用基体3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸(SA)和DHB对糖蛋白A和糖蛋白B进行基体辅助激光解吸/电离质谱(MALDI-MS)分析。结果发现,虽然单一的8-HQ不能有效电离此两种糖蛋... 采用8-羟基喹啉(8-HQ)、新二元基体8-HQ/2,5-二羟基苯甲酸(DHB)、实验室常用基体3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸(SA)和DHB对糖蛋白A和糖蛋白B进行基体辅助激光解吸/电离质谱(MALDI-MS)分析。结果发现,虽然单一的8-HQ不能有效电离此两种糖蛋白,但由8-HQ和DHB组成的二元基体在优化的基体配比和合适的点样方式下,能极大地改善单一DHB基体和样品的共结晶状况,成功地解吸/电离糖蛋白样品。应用8-HQ/DHB能够解决常用基体SA及DHB不能分析某些实际糖蛋白样品的问题,为MALDI-MS分析糖蛋白提供新的基体选择。 展开更多

关键词 糖蛋白 二元基体 8-羟基喹啉 2 5-二羟基苯甲酸 激光解吸/电离质谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

唐菖蒲伯克霍尔德氏菌三种鉴定方法的比较 被引量：11

12

作者 赵梦馨 周帼萍 +4 位作者 黄庭轩 王安琪 杨祖顺 国译丹 范璐 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第11期56-61,共6页

以食品及环境样品中初步分离的13株疑似唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)为研究对象,通过比较生理生化检测法、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法和rec A序列分析法,得到快速准确鉴定唐菖蒲伯克霍尔德氏菌... 以食品及环境样品中初步分离的13株疑似唐菖蒲伯克霍尔德氏菌(Burkholderia gladioli)为研究对象,通过比较生理生化检测法、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)法和rec A序列分析法,得到快速准确鉴定唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的方法。结果表明,13株疑似菌株经MALDI-TOF-MS法和rec A序列分析法鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌,而VITEK 2 COMPACT生理生化法鉴定8株(62%)为唐菖蒲伯克霍尔德氏菌,其他5株为栖稻假单胞菌(Pseudomonas oryzihabitans)。在唐菖蒲伯克霍尔德氏菌的鉴定方法中,MALDI-TOF-MS法和rec A序列分析法鉴定结果一致且准确,而VITEK 2 COMPACT生化检测法存在缺陷。相比传统生理生化鉴定方法,MALDI-TOF-MS法和rec A序列分析法在唐菖蒲伯克霍尔德氏菌鉴定中更为快速、准确。 展开更多

关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌 VITEK 2 COMPACT生化检测 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 recA序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

利用MALDI-TOF质谱技术研究MPEG-b-PCL两嵌段共聚物的嵌段长度及嵌段分布 被引量：2

13

作者 路显锋 刘志强 +1 位作者 邢俊鹏 刘淑莹 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1267-1270,共4页

利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)结合源后分解(PSD)技术对甲氧基封端的聚乙二醇-b-聚己内酯(MPEG-b-PCL)两嵌段共聚物进行了结构分析.根据得到的MALDI-TOFMS谱图和PSD碎片信息清晰地确定了嵌段共聚物的嵌段长度和嵌... 利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)结合源后分解(PSD)技术对甲氧基封端的聚乙二醇-b-聚己内酯(MPEG-b-PCL)两嵌段共聚物进行了结构分析.根据得到的MALDI-TOFMS谱图和PSD碎片信息清晰地确定了嵌段共聚物的嵌段长度和嵌段分布.结果表明,采用MALDI-TOFMS结合PSD技术研究这类嵌段共聚物链结构非常有效.这为更好地认识和应用这类嵌段共聚物提供了重要的依据,同时也建立了分析这类嵌段共聚物的方法. 展开更多

关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 源后分解 嵌段共聚物 嵌段长度

在线阅读 下载PDF 职称材料

两性离子双功能化超亲水金属有机框架纳米复合材料的制备及其用于糖肽的选择性富集 被引量：6

14

作者 李大鹏 谢光珊 +2 位作者 谢佩斯 朱林 蔡宗苇 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期205-210,共6页

蛋白糖基化是生物体中普遍发生且重要的生物学过程,其参与多种分子生物学的功能和途径,是临床诊断重要的生物标志物。但是,糖肽因其丰度低、离子化效率低、糖链异质性等难点,使糖蛋白分析一直面临巨大的挑战。因此,研究合成了一种新型... 蛋白糖基化是生物体中普遍发生且重要的生物学过程,其参与多种分子生物学的功能和途径,是临床诊断重要的生物标志物。但是,糖肽因其丰度低、离子化效率低、糖链异质性等难点,使糖蛋白分析一直面临巨大的挑战。因此,研究合成了一种新型的两性离子双功能化纳米金(AuGC)修饰的超亲水性沸石咪唑骨架(ZIF-8)纳米复合材料(AuGC/ZIF-8),并建立了亲水相互作用色谱(HILIC)和基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联用选择性富集糖肽的分析方法。谷胱甘肽和半胱氨酸双功能化的协同作用,使MOF具有超亲水性和低空间位阻,为糖肽选择性富集提供了更多的亲和位点。研究以辣根过氧化物酶(HRP)为模式糖蛋白,通过AuGC/ZIF-8富集后,MALDI-TOF MS分析。结果表明,AuGC/ZIF-8对HRP糖肽的富集能力高达250μg/mg,且在与牛血清白蛋白(BSA)混合溶液中(HRP-BSA(1∶200,质量比))显示出对HRP糖肽的高选择性,以及极低含量下(0.3 ng/μL)的高灵敏度。因此,在复杂生物样品糖蛋白的富集分离中具有很大的应用潜力。 展开更多

关键词 金属有机框架 亲水相互作用色谱 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 选择性富集 翻译后修饰 糖肽

在线阅读 下载PDF 职称材料

激光解吸/激光后电离质谱法快速检测黄酒中酪胺 被引量：3

15

作者 冷宜昕 王彤彤 +2 位作者 殷志斌 刘蓉 杭纬 《质谱学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期46-52,共7页

黄酒是中国特有的酒类,营养丰富,酒曲中酶的作用可产生酪胺,人体中酪胺含量高低会影响神经传递过程。使用高效液相色谱-质谱法(HPLC/MS)分析黄酒中的酪胺,灵敏度高但需要复杂的样品前处理。本研究建立了激光解吸/激光后电离质谱法(解吸... 黄酒是中国特有的酒类,营养丰富,酒曲中酶的作用可产生酪胺,人体中酪胺含量高低会影响神经传递过程。使用高效液相色谱-质谱法(HPLC/MS)分析黄酒中的酪胺,灵敏度高但需要复杂的样品前处理。本研究建立了激光解吸/激光后电离质谱法(解吸激光波长532nm,后电离激光波长266nm)快速检测黄酒体系中的酪胺,通过对梯度浓度的酪胺纯样进行分析,计算酪胺纯样的检出限。将该方法直接用于黄酒样品的快速分析,使用标准加入法测定黄酒中酪胺含量。本方法对酪胺纯样的检出限为32μg/L,标准加入法测得的黄酒中酪胺含量约为68mg/L,在安全食用范围内。该方法无需任何样品前处理,快捷省时,且谱图简单清晰,信噪比高,适用于实际样品中酪胺成分的选择性快速检测。 展开更多

关键词 激光解吸/激光后电离质谱法(l2ms) 黄酒 酪胺 快速检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

人胰腺癌胰液蛋白质差异表达分析 被引量：6

16

作者 朱峰 吕顺莉 +2 位作者 高军 龚燕芳 李兆申 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期265-268,共4页

目的:应用蛋白质组学方法分析人胰腺癌患者胰液蛋白质表达。方法:通过内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)中放置鼻胰管引流收集患者胰液,利用双向凝胶电泳,分离5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液(200μg)的总蛋白质,用图... 目的:应用蛋白质组学方法分析人胰腺癌患者胰液蛋白质表达。方法:通过内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)中放置鼻胰管引流收集患者胰液,利用双向凝胶电泳,分离5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液(200μg)的总蛋白质,用图像分析软件识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪得到相应的肽质指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:1)经ERCP留置鼻胰管成功收集胰液标本,胰液量约为35～200ml,Brad-ford法测定蛋白质浓度为0.8～4.6μg/μl。同一胰液标本(200μg)的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性;5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液自身比较后可重复的蛋白质点均在75%以上。2)对图像分析软件识别的9个差异蛋白质点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,鉴定出胰腺癌相关的差异表达蛋白质。结论:人胰腺癌、慢性胰腺炎和胆总管结石患者胰液的蛋白质谱存在一定的差异。 展开更多

关键词 胰腺癌 胰液 双向凝胶电泳 MALDI—TOF—MS

在线阅读 下载PDF 职称材料

肟化衍生反应优化及其在聚糖分析中的应用

17

作者 朱文杰 雷家珩 +1 位作者 王华伟 林亚维 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期423-427,共5页

本文采用新型氨氧基荧光衍生化试剂4-氨氧基甲基-7-羟基-香豆素(AOHC)成功对聚糖进行荧光标记。实验使用麦芽七糖(DP7)为模型聚糖,利用响应面法与单因素法对AOHC与DP7的衍生反应参数,如标记试剂用量、反应pH、反应温度、反应时间以及催... 本文采用新型氨氧基荧光衍生化试剂4-氨氧基甲基-7-羟基-香豆素(AOHC)成功对聚糖进行荧光标记。实验使用麦芽七糖(DP7)为模型聚糖,利用响应面法与单因素法对AOHC与DP7的衍生反应参数,如标记试剂用量、反应pH、反应温度、反应时间以及催化剂进行了优化。结果表明,与传统标记试剂2-氨基苯甲酰胺(2-AB)相比,AOHC衍生化法具有反应时间短、灵敏度高且不需复杂富集和纯化步骤等优点。采用AOHC衍生化法对糖蛋白RNaseB中聚糖进行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)分析,成功检测出所有5种聚糖。AOHC衍生化方法操作简便、快速、灵敏,在聚糖分析中具有很好的应用前景。 展开更多

关键词 聚糖 荧光衍生 4-氨氧基甲基-7-羟基-香豆素 高效液相色谱 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱

在线阅读 下载PDF 职称材料