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干扰素刺激基因ISG15对猪流行性腹泻病毒复制的作用及机制分析 被引量:2
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作者 刘莉莉 边缘 +2 位作者 吴圣龙 包文斌 吴正常 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2545-2555,共11页
【目的】探究干扰素刺激基因ISG15在猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制中所发挥的作用及机制。【方法】利用实时荧光定量PCR检测ISG15基因组织表达谱及肠道组织差异表达情况,同时以猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)为研究模型,检测PEDV CV777毒株感染... 【目的】探究干扰素刺激基因ISG15在猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制中所发挥的作用及机制。【方法】利用实时荧光定量PCR检测ISG15基因组织表达谱及肠道组织差异表达情况,同时以猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)为研究模型,检测PEDV CV777毒株感染细胞不同时间点PEDV M基因mRNA和N蛋白表达量,并从RNA和蛋白水平检测ISG15表达变化;分别构建猪ISG15基因干扰和过表达细胞,通过实时荧光定量PCR、Western blotting及间接免疫荧光试验检测ISG15基因表达对PEDV复制水平的影响;对ISG15基因过表达前后进行转录组测序分析,筛选其下游调控基因及信号通路。【结果】ISG15基因在仔猪肠道组织中特异性高表达,其中空肠和回肠中表达量极显著高于其他组织(P<0.01);PEDV感染组十二指肠、空肠及回肠中ISG15基因表达量显著或极显著高于健康组(P<0.05;P<0.01);M基因mRNA和N蛋白表达量出现上升趋势,与0 h相比,ISG15基因表达水平在24 h出现极显著上调(P<0.01);ISG15基因过表达后PEDV复制出现显著或极显著下降(P<0.05;P<0.01),而ISG15基因干扰后PEDV复制出现极显著上调(P<0.01);转录组测序发现,过表达ISG15基因前后存在1 532个差异表达基因,且其主要富集在自噬、MAPK、内吞等信号通路中。【结论】本研究揭示了PEDV感染过程中ISG15基因的调控功能及作用机制,发现ISG15基因上调可显著抑制PEDV复制,增进了对PEDV与宿主细胞互作分子机制的认识。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒(PEDV) isg15基因 病毒复制 转录组
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干扰素刺激基因(ISGs)的研究进展
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作者 李洲 范启修 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第5期414-417,共4页
干扰素刺激基因(ISGs)是干扰素作用机制研究的核心内容。干扰素与受体结合后,通过细胞内信号转换,激活胞浆转录调控因子与ISGs调控序列上的cis元件结合而诱导基因表达。
关键词 干扰素 干扰素刺激基因
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北疆部分马场虻传伊氏锥虫的DNA检测及遗传进化分析
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作者 金敏 巴依娜 +4 位作者 党文盈 高胜红 周娜 赵雪晴 巴音查汗·盖力克 《动物医学进展》 北大核心 2025年第11期68-73,共6页
为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的... 为了解北疆部分马场马虻的优势分布种及伊氏锥虫病的流行情况,为虻害及伊氏锥虫病的防治提供参考数据,采集北疆地区和静县某马场马体表吸血虻(n=650)和马血液样本(n=276);通过ISG 65基因检测伊氏锥虫感染情况,通过扩增COI基因确定虻的具体种类。PCR结果显示,马虻伊氏锥虫的携带率为24.2%(157/650);阳性产物测序结果显示与冈比亚布氏锥虫(登录号:XM_011773429.1)同源性为98.63%;经COI鉴定,采集的马虻为突额瘤虻;进化树结果显示,突额瘤虻与已发表的芬兰株(MZ626174.1)同源性为98.56%。血源性伊氏锥虫的感染率分别为塔城市11.3%(6/53)、阿勒泰清河县3.6%(4/111)、伊犁44.4%(16/36)、乌市周边8%(6/76)。试验结果表明媒介虻的伊氏锥虫携带率较高,以上地区马匹存在感染锥虫的风险,应加强对该病的综合防控措施。 展开更多
关键词 突额瘤虻 COI/isg基因 伊氏锥虫
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猪ifitm基因克隆及其序列和组织表达分析 被引量:3
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作者 张玉娟 赵婷 +5 位作者 徐朝 于琨 马倩 李超燕 郑文明 许君 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期359-363,388,共6页
为了研究ifitm基因的功能,本研究从猪肾PK15细胞中克隆了猪的3个ifitm c DNA序列,分析了猪ifitm1、ifitm2和ifitm3基因的染色体定位及其与其他物种基因序列的同源关系,并对不同ifitm在不同组织的表达进行分析和检测。结果显示,猪ifitm... 为了研究ifitm基因的功能,本研究从猪肾PK15细胞中克隆了猪的3个ifitm c DNA序列,分析了猪ifitm1、ifitm2和ifitm3基因的染色体定位及其与其他物种基因序列的同源关系,并对不同ifitm在不同组织的表达进行分析和检测。结果显示,猪ifitm和人、鼠ifitm具有相同的基因和蛋白结构,进化上与牛ifitm高度同源,ifitm1和ifitm3在脾、肾、心、肝等组织中大量表达,而ifitm2只在脾和肾中检测到表达,在其他组织中的表达量相对较小。猪ifitm基因的克隆、生物信息学及组织表达分析为进一步研究其在猪细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素刺激基因 猪干扰素诱导的跨膜蛋白 基因克隆 基因序列 组织表达差异
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黏病毒抗性蛋白A(MxA)通过增强干扰素刺激应答元件(ISRE)活性诱导HepG2细胞干扰素刺激基因表达 被引量:1
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作者 杨凯 潘颖 +4 位作者 刘萍 宇芙蓉 魏晓康 张发苏 王琴 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期704-709,共6页
目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达... 目的研究黏病毒抗性蛋白A(MxA)对HepG2细胞Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT)途径的影响。方法采用pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2细胞,免疫荧光细胞化学染色检测MxA蛋白在HepG2细胞的表达和定位,Western blot法检测MxA蛋白表达;采用MxA小干涉RNA(si-MxA)转染HepG2细胞并以α干扰素(IFN-α)处理细胞,实时荧光定量PCR检测HepG2细胞黏液病毒抗性蛋白A(MxA)、蛋白激酶R(PKR)和寡聚腺苷酸合成酶(OAS)的mRNA表达,Western blot法检测MxA、PKR、OAS、细胞信号转导子与转录激活子1(STAT1)、磷酸化的STAT1(p-STAT1)、STAT2、p-STAT2和干扰素调节因子9(IRF9)的蛋白表达。此外,pcDNA3.1-Flag-MxA与pISRE-TA-luc分别共转染至HepG2和HepG2.2.15细胞,荧光素酶活性检测干扰素刺激应答元件(ISRE)活性。结果MxA蛋白在HepG2细胞质和细胞核均有表达且细胞质表达量高于胞核。敲低HepG2细胞中MxA表达虽不影响IFN-α诱导的STAT1、p-STAT1、STAT2、p-STAT2和IRF9蛋白的表达,但显著降低抗病毒蛋白PKR和OAS的表达。过表达MxA的HepG2细胞ISRE活性增强且PKR和OAS蛋白表达增高,但这种效应却在HepG2.2.15细胞中被抑制。结论MxA通过增强JAK/STAT信号通路ISRE活性诱导抗病毒蛋白表达。 展开更多
关键词 黏病毒抗性蛋白A(MxA) Janus激酶/信号转导子和转录激活子(JAK/STAT) 干扰素刺激应答元件(ISRE) 干扰素刺激基因(isg)
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