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抗菌肽MaSAMP的生信分析、基因克隆及遗传转化
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作者 廖名静 李向阳 +5 位作者 吕远达 姜波 李娟 钟云 王婷 郑蓝艳 《热带作物学报》 北大核心 2025年第7期1554-1561,共8页
来源于澳指檬(Microcitrus australasica)的一种抗菌肽(stable antimicrobial peptide,SAMP),不仅可以降低已感染柑橘黄龙病的病树体内的黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)浓度、减轻病树症状,而且还可以诱导未感染黄... 来源于澳指檬(Microcitrus australasica)的一种抗菌肽(stable antimicrobial peptide,SAMP),不仅可以降低已感染柑橘黄龙病的病树体内的黄龙病菌(Candidatus Liberibacter asiaticus,CLas)浓度、减轻病树症状,而且还可以诱导未感染黄龙病的健康树先天免疫、阻止感染黄龙病。本研究对MaSAMP的功能结构、亚细胞定位、系统发育等进行分析,结果表明,MaSAMP的开放阅读框(open reading frame,ORF)全长为201 bp,编码67个氨基酸,编码的蛋白分子量为7.59959 kDa,理论等电点为5.38,不稳定指数[instability index(II)]为33.22,脂肪族氨基酸系数(aliphatic index)为87.16%,平均亲水系数(grandaverageofhydropathicity)为–0.091,属于亲水性蛋白,含有1个Dabb结构域,MaSAMP蛋白结构以α-螺旋、无规则卷曲为主。MaSAMP与甜橙胁迫响应A/B桶状结构域蛋白CISIN_(1)g033887mg、克里曼丁橘A/B桶状结构域蛋白HS1亲缘关系较近,蛋白相似度分别为97.01%、91.04%。亚细胞定位结果显示,MaSAMP定位于叶绿体。进一步通过同源重组成功构建了融合EGFP荧光标签的pCAMBIA1300-35S::MaSAMP-EGFP过表达载体,并借助农杆菌介导的原位转化技术获得柑橘转基因植株。本研究为后续MaSAMP的生物学功能研究提供材料基础。 展开更多
关键词 澳指檬 生物信息学分析 载体构建 基因
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金沙鲈鲤全长转录组测序分析与抗菌肽基因的鉴定
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作者 朱思艺 邓龙君 +4 位作者 李天才 张扬 郭勇垚 罗伟 杜宗君 《湖北农业科学》 2025年第3期167-175,共9页
为进一步丰富金沙鲈鲤(Percocypris pingi)基因信息数据库,采用PacBio测序平台对金沙鲈鲤进行全长转录组测序。共获得499 007个全长非嵌合序列(Full-length non-chimeric read,FLNC),通过聚类和去冗余获得70 321个isoforms,isoforms的... 为进一步丰富金沙鲈鲤(Percocypris pingi)基因信息数据库,采用PacBio测序平台对金沙鲈鲤进行全长转录组测序。共获得499 007个全长非嵌合序列(Full-length non-chimeric read,FLNC),通过聚类和去冗余获得70 321个isoforms,isoforms的平均长度和N50分别为1 882 bp、2 243 bp。将isoforms与NR、GO、KEGG、KOG和Swiss-Prot 5个公共数据库进行比对,成功注释了57 521个isoforms,并鉴定到2 310个TF、16 225个LncRNA和35 314条CDS。鉴定到5个抗菌肽基因,包括2个hepcidin基因和3个hemoglobin基因。金沙鲈鲤的hepcidin-1、hepcidin-2与多鳞白甲鱼(Onychostoma macrolepis)的hepcidin亲缘关系较近;金沙鲈鲤的hemoglobin-1α与斑马鱼(Danio rerio)的hemoglobin α亲缘关系较近;金沙鲈鲤的hemoglobin-1β与斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)的hemoglobin 1β、hemoglobin 2β亲缘关系较近;hemoglobin-2β与多鳞白甲鱼的hemoglobin 2β亲缘关系较近。通过对金沙鲈鲤全长转录组的注释分析,阐明了金沙鲈鲤基因参与的生物过程、所在的代谢途径或信号通路等,可以更有效地探究抗菌肽在鱼类免疫中的作用。 展开更多
关键词 金沙鲈鲤(Percocypris pingi) 全长转录组 测序 基因 鉴定
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樱桃红蟑螂抗菌肽果蝇霉素基因SlDros克隆及体内诱导表达
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作者 刘露遥 桂航 +5 位作者 任书瑾 伊丽姆努尔·玉山 章冰川 李飞 何树林 周操 《昆虫学报》 北大核心 2025年第7期1023-1030,共8页
【目的】本研究旨在鉴定樱桃红蟑螂Shelfordella lateralis的抗菌肽果蝇霉素基因,并探究其发育和组织表达特性及其在细菌与杀虫剂诱导下的表达情况。【方法】基于樱桃红蟑螂转录组数据对樱桃红蟑螂的果蝇霉素基因进行鉴定,并通过RT-PCR... 【目的】本研究旨在鉴定樱桃红蟑螂Shelfordella lateralis的抗菌肽果蝇霉素基因,并探究其发育和组织表达特性及其在细菌与杀虫剂诱导下的表达情况。【方法】基于樱桃红蟑螂转录组数据对樱桃红蟑螂的果蝇霉素基因进行鉴定,并通过RT-PCR进行验证;利用RT-qPCR测定樱桃红蟑螂不同发育阶段(1龄若虫、4龄若虫及6日龄雌成虫和雄成虫)、4龄若虫不同组织(头、胸、肠道、足、脂肪体、血淋巴和体壁)及注射大肠杆菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus和溴氰菊酯(1×10-5 mg/L)后4龄若虫中果蝇霉素基因的表达量。【结果】克隆得到了樱桃红蟑螂果蝇霉素基因SlDros的cDNA序列(GenBank登录号:PQ464795),其开放阅读框长201 bp,编码66个氨基酸。SlDros在樱桃红蟑螂6日龄雄成虫中大量表达;SlDros在4龄若虫头、体壁、胸和血淋巴中的表达量较高;注射大肠杆菌后12,24和48 h时4龄若虫中SlDros的表达量显著高于对照组(注射蒸馏水);注射金黄色葡萄球菌后6,12,24和72 h时4龄若虫中SlDros的表达量都显著高于对照组(注射蒸馏水);注射溴氰菊酯96 h时4龄若虫中SlDros的表达量显著高于对照组(注射丙酮)。【结论】樱桃红蟑螂中存在抗菌肽果蝇霉素基因,并且细菌和杀虫剂胁迫均能诱导其表达。研究结果可为研究樱桃红蟑螂抗菌肽的功能及其进一步开发新型抗菌药物打下基础。 展开更多
关键词 樱桃红蟑螂 果蝇霉素 基因表达 溴氰菊酯
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海水养殖鲈鱼分离出一种hepcidin抗菌肽新基因 被引量:23
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作者 王克坚 周红玲 杨明 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期286-287,共2页
利用分子生物学技术,从我国海水养殖鲈鱼(Lateolabraxjaponicus)分离到一种hepcidin抗菌肽新基因,并在国际GenBank公布(accessionnumber为AY547281).初步研究结果表明,在我国鲈鱼分离到的hepcidin基因属于hep cidin抗菌肽基因家族的新成员.
关键词 海水养殖 鲈鱼 hepcidin抗菌肽基因 分子生物学 基因分离
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斜带石斑鱼抗菌肽hepcidin基因克隆及其成熟肽的原核融合表达 被引量:11
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作者 陈大玮 邓利 +2 位作者 刘志刚 孟铂渊 马一见 《南方水产科学》 CAS 2011年第1期1-7,共7页
文章根据已报道的硬骨鱼类hepcidin cDNA序列设计简并引物,通过RT—PCR从重要海水经济鱼类斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)肝脏中扩增出1条具有完整开放阅读框的246bpcDNA序列,Blast分析表明该序列是鱼类hepcidin基因家族的一员... 文章根据已报道的硬骨鱼类hepcidin cDNA序列设计简并引物,通过RT—PCR从重要海水经济鱼类斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)肝脏中扩增出1条具有完整开放阅读框的246bpcDNA序列,Blast分析表明该序列是鱼类hepcidin基因家族的一员,被命名为斜带石斑鱼hepcidin样抗菌肽前体,该cDNA所推导的氨基酸序列有如下特点:1)信号肽序列与多数鱼类hepcidin信号肽的同源性在67%~87%之间;2)C端20个氨基酸序列具有绝大多数动物hepcidin成熟肽的共同典型保守序列特征,即在对应位置具有8个Cys;3)序列中不具有已报道的hepcidin前体肽转化酶作用典型基序[RX(K/R)R];4)与GenBank中已注册的2条斜带石斑鱼hepcidincDNA序列(GU391241和GU391242)所推导的氨基酸序列同源性分别为36%和33%,且NJ进化树显示不与这2条序列聚为一枝,表明该序列是斜带石斑鱼hepcidin基因家族中一种新亚型,其预测成熟肽融合表达载体成功在大肠杆菌(Escherichiacoli)中表达,为后续研究奠定基础。 展开更多
关键词 斜带石斑鱼 hepcidin 分子克隆 原核融合表达
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饲料中维生素D_3水平对黄鳝抗菌肽hepcidin基因表达的影响 被引量:8
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作者 黎德兵 李超 +3 位作者 张龚炜 唐勇 周定刚 李学伟 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1520-1526,共7页
本试验旨在探索饲料中维生素D3水平对黄鳝(Monopterus albus)抗菌肽hepcidin基因表达的影响。挑选体质健康、平均体重为(21.7±2.1)g的黄鳝360尾,随机分为6组,每组2个重复,每个重复30尾。6组黄鳝分别饲喂在基础饲料(0 IU/kg维生素D3... 本试验旨在探索饲料中维生素D3水平对黄鳝(Monopterus albus)抗菌肽hepcidin基因表达的影响。挑选体质健康、平均体重为(21.7±2.1)g的黄鳝360尾,随机分为6组,每组2个重复,每个重复30尾。6组黄鳝分别饲喂在基础饲料(0 IU/kg维生素D3)中添加0、250、500、1 000、2 000和4 000 IU/kg维生素D3的试验饲料。于投喂试验饲料后20、40和60 d,从各组随机选择6尾黄鳝,分别采集其肝胰脏、脾脏、头肾和后肠组织,采用荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测样品中hepcidin基因表达量。结果表明:投喂20、40和60 d后,黄鳝4种组织中均有hepcidin基因表达,并且肝胰脏中显著高于脾脏、头肾和后肠中(P<0.05);随维生素D3添加水平的增加,黄鳝hepcidin基因在4种组织的表达量同一时间点均呈现出先升高后降低的趋势;第20天时4种组织中的表达量均以2 000 IU/kg组为最高,显著高于其他各组(P<0.05);第40和60天时肝胰脏、头肾中的表达量均以500 IU/kg组为最高,其中第40天时显著高于0、250、4 000 IU/kg组(P<0.05),第60天时显著高于其他各组(P<0.05)。结果提示,短期(20 d)内在饲料中添加2 000 IU/kg的维生素D3可显著提高黄鳝内脏组织中hepcidin基因的表达量;饲喂周期较长(40或60 d)时,饲料中添加500 IU/kg维生素D3可显著提高hepcidin基因在黄鳝肝胰脏和头肾中的表达量。 展开更多
关键词 黄鳝 维生素D3 hepcidin基因
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牙鲆抗菌肽hepcidin基因在成鱼组织和不同发育时期胚胎中的表达分析 被引量:5
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作者 杨绒 陈松林 +1 位作者 李伟 王志坚 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2006年第6期84-87,共4页
抗菌肽hepcidin是由hepcidin基因编码产生的小分子多肽,是机体天然免疫的重要因子。本文利用RT-PCR的方法分析表明,抗菌肽hepcidin基因在牙鲆成鱼不同组织和不同发育时期胚胎中普遍表达,但是表达水平存在着明显的差异。
关键词 牙鲆 hepcidin基因 RT-PCR 表达分析
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黄鳝抗菌肽hepcidin基因cDNA的克隆及表达分析 被引量:6
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作者 李伟 孙文秀 熊涛 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期304-308,共5页
根据已知鱼类抗菌肽hepcidin的同源性设计简并引物,利用同源克隆结合RACE法从黄鳝(Monopterus albus)肝脏中扩增得到了黄鳝hepcidin基因全长cDNA序列(GenBank accession number FJ436808).结果表明,黄鳝hepcidin基因cDNA全长712bp,5′... 根据已知鱼类抗菌肽hepcidin的同源性设计简并引物,利用同源克隆结合RACE法从黄鳝(Monopterus albus)肝脏中扩增得到了黄鳝hepcidin基因全长cDNA序列(GenBank accession number FJ436808).结果表明,黄鳝hepcidin基因cDNA全长712bp,5′端非翻译区有133bp,3′端非翻译区有306bp,包含1个273bp的开放阅读框,编码1个长90氨基酸的前体肽.同源性分析表明,黄鳝hepcidin推测的氨基酸序列与其他鱼类报道的hepcidin具有较高的同源性,并具有8个半胱氨酸这一典型特征,是hepcidin家族的1个新成员.采用半定量PCR法对该基因在健康成体不同组织的转录本和脂多糖(LPS)对该基因表达的影响进行了分析.结果发现,该基因在肝脏中表达量最高,其次是肾脏,在心脏、皮肤、脑、血液、小肠、脾脏和胃中的表达量较低,而在肌肉中没有检测到该基因的转录本;LPS注射24h后,各组织的hepcidin基因表达量都有明显升高. 展开更多
关键词 黄鳝 hepcidin基因 克隆 表达分析
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海水养殖花鲈鳃组织hepcidin-like抗菌肽基因克隆与序列分析 被引量:3
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作者 杨明 王克坚 +1 位作者 陈君慧 李少菁 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期330-335,共6页
本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增技术(3′RACE)克隆出海水养殖花鲈(Lateolabrax japonicus)鳃组织hepcidin-like抗菌肽基因cDNA(523bp),包含完整的编码区、3′端非翻译区(3′UTR)和典型的多腺苷酸化信号(AAT... 本研究利用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和cDNA末端快速扩增技术(3′RACE)克隆出海水养殖花鲈(Lateolabrax japonicus)鳃组织hepcidin-like抗菌肽基因cDNA(523bp),包含完整的编码区、3′端非翻译区(3′UTR)和典型的多腺苷酸化信号(AATAAA).该基因编码86个氨基酸,由信号肽、优势域和成熟肽组成.与花鲈肝脏分离到hepc1及国外发表白鲈(Morone chrysops)hepcidin氨基酸序列进行比较,结果显示花鲈鳃hepcidin-like基因编码的氨基酸与它们在27个位点上存在着差异;该hepci-din-like基因可能为hepcidin的不同变体,属于hepcidin抗菌肽家族的新成员. 展开更多
关键词 分子生物学 hepcidin 花鲈
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牙鲆抗菌肽hepcidin基因在大肠杆菌中的融合表达 被引量:8
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作者 李伟 陈松林 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期765-770,共6页
根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽hepcidin基因(GenBank登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽hepcidin基因融合表达载体pGEX-fhep,转化至大肠杆菌BL21(DE3)ply... 根据从实验室克隆的牙鲆抗菌肽hepcidin基因(GenBank登陆号DQ129693)的序列,设计了特异性引物,PCR扩增其成熟肽片段.重组至融合表达载体pGEX-4T-1中,构建成牙鲆抗菌肽hepcidin基因融合表达载体pGEX-fhep,转化至大肠杆菌BL21(DE3)plyS中,筛选得到的阳性克隆用IPTG进行诱导.SDS-PAGE电泳显示在29kD处有特异性的蛋白条带出现,Western-blotting 检测表明已经成功表达了融合蛋白,表达的融合蛋白最高占总蛋白的21%.纯化得到的GST-fhep用凝血酶切割后,用亲合层析得到牙鲆的抗菌肽hepcidin.抑菌实验结果表明抗菌肽对大肠杆菌(ATCC25922)有一定程度的抑制作用. 展开更多
关键词 牙鲆 hepcidin 大肠杆 表达 活性
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牙鲆抗菌肽hepcidin基因的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 李伟 陈松林 张玉喜 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-82,共5页
采用同源克隆的方法设计简并引物从牙鲆(Paralichthys olivaceus)肝脏中克隆了牙鲆hepcidin抗菌肽基因。牙鲆抗菌肽hepcidin基因组DNA全长821bp,序列分析表明该基因具有3个外显子和2个内含子。cDNA全长588bp,包含一个270bp的开放阅... 采用同源克隆的方法设计简并引物从牙鲆(Paralichthys olivaceus)肝脏中克隆了牙鲆hepcidin抗菌肽基因。牙鲆抗菌肽hepcidin基因组DNA全长821bp,序列分析表明该基因具有3个外显子和2个内含子。cDNA全长588bp,包含一个270bp的开放阅读框,编码一个长89氨基酸的前体肽。RT-PCR分析表明:该抗菌肽基因在正常牙鲆的肝脏、头肾、鳃、脾脏中表达量较高,在心脏、小肠中表达量较低;受到病原鳗弧菌感染的牙鲆各组织该基因表达量明显上升。牙鲆抗菌肽基因的克隆为水产养殖等领域的抗耐病品种的选育提供了基因源,为开发新的生物工程药物提供了基础理论和实验数据。 展开更多
关键词 hepcidin 牙鲆 表达
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黄鳝抗菌肽hepcidin基因大肠杆菌表达载体的构建 被引量:2
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作者 刘成都 邱庆崇 +1 位作者 耿晓雪 李伟 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第9期5245-5246,共2页
[目的]构建黄鳝抗菌肽hepcidin基因大肠杆菌表达载体。[方法]根据Genbank中黄鳝hepcidin基因序列设计引物进行PCR扩增,将测序正确的基因片段连接入载体pET-28a中。[结果]以黄鳝cDNA为模板,扩增出hepcidin基因片段,长度为291 bp,连接到pE... [目的]构建黄鳝抗菌肽hepcidin基因大肠杆菌表达载体。[方法]根据Genbank中黄鳝hepcidin基因序列设计引物进行PCR扩增,将测序正确的基因片段连接入载体pET-28a中。[结果]以黄鳝cDNA为模板,扩增出hepcidin基因片段,长度为291 bp,连接到pET-28a上。经PCR扩增、双酶切验证,证实成功构建原核表达载体。[结论]成功构建了黄鳝hepcidin基因大肠杆菌表达载体。 展开更多
关键词 黄鳝 基因 原核表达载体
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应用基因枪将蚕抗菌肽基因导入水稻获抗白叶枯病株系 被引量:33
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作者 简玉瑜 吴新荣 +3 位作者 莫豪葵 陈凤珍 董春 黄自然 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期1-7,共7页
将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚,获得转基因植株。经Basta抗性鉴定,应用PCR技术和Southern印迹分折表明,抗菌肽B基因已整合到水稻的基因组。T3抗白叶枯病株系Northern印迹分折证明抗菌... 将天蚕抗菌肽B基因应用基因枪法导入水稻发芽种胚,获得转基因植株。经Basta抗性鉴定,应用PCR技术和Southern印迹分折表明,抗菌肽B基因已整合到水稻的基因组。T3抗白叶枯病株系Northern印迹分折证明抗菌肽B基因在RNA水平有表达。 展开更多
关键词 B基因 基因 水稻 白叶枯病 病育种
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抗菌肽AD基因的改造及在毕赤酵母中的表达 被引量:25
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作者 黄亚东 郑青 +2 位作者 李校 姚汝华 黄自然 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第2期13-16,共4页
采用PCR技术改造抗菌肽AD基因 ,将其C末端改造为Asn编码 ,改造后的抗菌肽CecropinAD基因克隆到 pPICZα_A载体上 ,构建成酵母重组分泌型表达载体 ,转化毕赤酵母 (Pichiapastoris)受体菌GS115中 .采用zerocin抗性标记筛选重组转化子 ,经... 采用PCR技术改造抗菌肽AD基因 ,将其C末端改造为Asn编码 ,改造后的抗菌肽CecropinAD基因克隆到 pPICZα_A载体上 ,构建成酵母重组分泌型表达载体 ,转化毕赤酵母 (Pichiapastoris)受体菌GS115中 .采用zerocin抗性标记筛选重组转化子 ,经摇瓶发酵 ,浓缩发酵液进行酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析和抑菌活性检测 .结果表明 ,改造后的CecropinAD基因在毕赤酵母中获得了表达 ,表达产物经α_Factor信号肽引导分泌到胞外 ,具有较强的杀菌活性 . 展开更多
关键词 毕赤酵母 AD基因 基因克隆 基因表达 活性 Asn编码
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黑鲷抗菌肽hepcidin在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性 被引量:16
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作者 蔡晶晶 杨明 +3 位作者 蔡灵 郭庆 潘瑞珍 王克坚 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期738-743,共6页
鱼类抗菌肽hepcidin具有广谱抗菌活性.利用PCR技术扩增获得了黑鲷抗菌肽hepcidin(AS-hepc2)的前体肽和成熟肽cDNA序列,片段大小约250bp.将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建了分泌表达载体pPIC9K/AS-hepc2.电击法转化... 鱼类抗菌肽hepcidin具有广谱抗菌活性.利用PCR技术扩增获得了黑鲷抗菌肽hepcidin(AS-hepc2)的前体肽和成熟肽cDNA序列,片段大小约250bp.将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建了分泌表达载体pPIC9K/AS-hepc2.电击法转化重组表达载体,经过G418筛选和选择性培养基以及PCR鉴定,得到的克隆子都为Mut+.以甲醇诱导pPIC9K/AS-hepc2,分泌表达上清中获得10ku左右的表达产物,与预期的目的蛋白黑鲷hepcidin的前体肽和成熟肽的大小相符.表达试验证明,随时间的延长,表达产物量增多,至120h达到高峰.表达产物具有很强的热稳定性.用抑菌圈法测定重组蛋白Pro-AS-hepc2的抗菌活性,发现能抑制革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的生长. 展开更多
关键词 黑鲷hepcidin AS-hepc2 毕赤酵母 分泌表达 活性
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农杆菌携带柞蚕抗菌肽基因转入烟草的研究 被引量:22
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作者 黄自然 徐飞 +5 位作者 庄楚雄 管志文 李乃坚 袁四清 崔植琳 戴冕 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 1992年第4期1-5,共5页
柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能,对烟草等茄科作物的青枯病假单胞菌(Pseudomonassolanacearum)具有较强的杀菌效果。人工合成抗菌肽基因(122 bp)转入根癌农杆菌(Agrobnctcrium tumefaciena),感染烟草叶盘,诱导成苗。通过对卡那霉素敏感筛选... 柞蚕抗菌肽具有广谱杀菌功能,对烟草等茄科作物的青枯病假单胞菌(Pseudomonassolanacearum)具有较强的杀菌效果。人工合成抗菌肽基因(122 bp)转入根癌农杆菌(Agrobnctcrium tumefaciena),感染烟草叶盘,诱导成苗。通过对卡那霉素敏感筛选,胭脂碱脱氢酶检定及抗菌肽片段探针杂交,确认抗菌肽基因已转入烟草。现正研究其在烟草中表达及抗青枯病的可能性。 展开更多
关键词 柞蚕 烟草 基因转导
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大口黑鲈抗菌肽hepcidin cDNA序列和结构分析 被引量:10
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作者 白俊杰 刘碧莲 +2 位作者 劳海华 叶星 简清 《广东海洋大学学报》 CAS 2008年第1期1-5,共5页
以大口黑鲈为材料,提取肝脏总RNA,经RT-PCR扩增出hepcidin cDNA的开放阅读框(ORF)及3′端非编码区序列,应用5′RACE方法得到大口黑鲈hepcidin cDNA5′末端。将所获得的两个片段分别克隆到T载体后进行测序,并拼接成大口黑鲈hepcidin全... 以大口黑鲈为材料,提取肝脏总RNA,经RT-PCR扩增出hepcidin cDNA的开放阅读框(ORF)及3′端非编码区序列,应用5′RACE方法得到大口黑鲈hepcidin cDNA5′末端。将所获得的两个片段分别克隆到T载体后进行测序,并拼接成大口黑鲈hepcidin全长cDNA。序列分析表明:大口黑鲈hepcidin全长cDNA为564bp,含有一个258bp的ORF,编码86个氨基酸残基,由信号肽(24个残基)、前肽(42个残基)和成熟肽(20个残基)3部分组成hepcidin前体。在前肽部分具有前肽转化酶典型的RX(K/R)R基元,成熟肽部分含有8个保守的半胱氨酸残基,可形成四个链内二硫桥,使β-折叠结构保持稳定。大口黑鲈Hepcidin与其他鱼类的同源性在29.7%-90.5%间,尤其是信号肽区域,与鳜、尼罗罗非鱼、真鲷、花鲈、黑鯛、金眼狼鲈仅有2-3个氨基酸的差别。 展开更多
关键词 大口黑鲈 hepcidin CDNA克隆 序列分析
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抗菌肽AD基因的合成 被引量:15
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作者 郑青 鲍时翔 +4 位作者 姚汝华 苏智慧 黄自然 郑学勤 王宇光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第2期178-180,共3页
设计并合成了一种新型抗菌肽基因,合成的抗菌肽(cecropin)AD基因全长140个碱基对,克隆于pCRTM21载体上,经DNA序列分析证实,合成的cecropinAD基因的碱基序列与设计序列完全一致.
关键词 合成 AD基因
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家蚕抗菌肽基因研究进展 被引量:13
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作者 孙伟 沈以红 +1 位作者 向仲怀 张泽 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期196-203,共8页
抗菌肽是昆虫先天性免疫系统中十分重要的效应因子,近年来一直是昆虫免疫学研究的热点。家蚕作为鳞翅目昆虫的代表,其抗菌肽研究取得了长足进展。根据已经研究获得的抗菌肽基因序列在家蚕基因组中进行同源搜寻,共获得了40个家蚕抗菌肽... 抗菌肽是昆虫先天性免疫系统中十分重要的效应因子,近年来一直是昆虫免疫学研究的热点。家蚕作为鳞翅目昆虫的代表,其抗菌肽研究取得了长足进展。根据已经研究获得的抗菌肽基因序列在家蚕基因组中进行同源搜寻,共获得了40个家蚕抗菌肽基因。这些基因编码的多肽在大小、氨基酸组成和性质上差异很大,但基于结构性质可以分成3类:(1)具有α-螺旋结构并且缺乏半胱氨酸(cysteine,Cys)的线性抗菌肽;(2)富含脯氨酸或甘氨酸的组成性抗菌肽;(3)富含半胱氨酸的环形抗菌肽。以这3类结构作为主线,综述了家蚕抗菌肽近年来的研究进展。 展开更多
关键词 家蚕 基因 结构 线性 组成性 环形
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抗菌肽基因导入桑树获得抗病转基因植株 被引量:25
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作者 王勇 贾士荣 +3 位作者 陈爱玉 唐益雄 夏志松 王晓峰 《蚕业科学》 CAS CSCD 1998年第3期136-140,共5页
用携带抗菌肽基因的农杆菌处理桑子叶,在含有羧苄青霉素(Cb)400~500mg/L和卡那霉素(Km)20mg/L的MS培养基上,有32.4%的子叶产生了不定芽;66.5%的不定芽在含有Cb300mg/L和Km30~40mg/L的培养基中,正常生长成2~3cm高的新稍... 用携带抗菌肽基因的农杆菌处理桑子叶,在含有羧苄青霉素(Cb)400~500mg/L和卡那霉素(Km)20mg/L的MS培养基上,有32.4%的子叶产生了不定芽;66.5%的不定芽在含有Cb300mg/L和Km30~40mg/L的培养基中,正常生长成2~3cm高的新稍;新梢在含Cb50mg/L和Km10mg/L的生根培养基中有72.6%形成完整根系。3次转化共获得12个株系55株KmR植株。不同株系桑苗叶片DNA点杂交分析显示,7个株系有阳性杂交信号。KmR株系桑苗的抗病性测定显示,5个株系共14株桑苗对青枯病具有较强抗性. 展开更多
关键词 桑树 基因 基因植株 病性
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