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激光扫描共聚焦显微技术在本科实验教学中的应用
1
作者 张楚英 孙彩云 +2 位作者 许佳玲 陈笑霞 张雁 《实验室研究与探索》 北大核心 2025年第2期152-157,共6页
基于科教融合的教学理念,在本科生课程“生物科学综合实验”细胞培养单元中融入激光扫描共聚焦显微技术,进行不同细胞、不同培养条件设计,引导学生通过观察细胞形态,进一步分析在不同培养条件下细胞的变化。该实验教学改革不仅可以充分... 基于科教融合的教学理念,在本科生课程“生物科学综合实验”细胞培养单元中融入激光扫描共聚焦显微技术,进行不同细胞、不同培养条件设计,引导学生通过观察细胞形态,进一步分析在不同培养条件下细胞的变化。该实验教学改革不仅可以充分发挥学生主观能动性以及创新思维能力,还能拓宽学生科研视野,为开展课题研究提供更广泛的思路与方法。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 科教融合 生物科学 综合实验 细胞培养
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激光扫描共聚焦显微镜原位观测界面聚合反应过程的研究
2
作者 张滢滢 忻嘉辉 +3 位作者 张歆宁 郭毅 徐志康 倪旭峰 《实验技术与管理》 北大核心 2025年第7期87-92,共6页
界面聚合是合成高性能高分子材料的常用聚合方法,但受限于原位观测和表征手段,界面聚合过程中微观反应动力学及聚合物的结构演变一直难以深入研究。该实验基于聚集诱导发光效应,利用激光扫描共聚焦显微镜对界面聚合反应过程的不同阶段... 界面聚合是合成高性能高分子材料的常用聚合方法,但受限于原位观测和表征手段,界面聚合过程中微观反应动力学及聚合物的结构演变一直难以深入研究。该实验基于聚集诱导发光效应,利用激光扫描共聚焦显微镜对界面聚合反应过程的不同阶段进行实时荧光成像,通过对荧光图像进行定量分析,研究了聚合过程中聚合物的生成机制及其微观结构演变过程,揭示了界面处聚合物“疏-密-疏”的结构分布及聚合物结构与单体浓度的关系。该原位实时观测与全程可视化表征新方法可为界面聚合机理研究提供可视化平台,同时为功能聚合物的制备提供理论指导。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 界面聚合 聚集诱导发光 原位观测
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枯草芽孢杆菌无细胞上清液抑制单增李斯特菌生物被膜形成的研究 被引量：3
3
作者 胡安祺 杨慧轩 +5 位作者 姚现琦 董鹏程 朱立贤 罗欣 张一敏 刘昀阁 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期1-8,共8页
单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种常见的食源性致病菌,其生物被膜是导致食品污染和疾病传播的重要原因。该研究选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)无细胞上清液(cell free supernatant,CFS)作为抑制剂,探究B.subtilis CFS... 单增李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种常见的食源性致病菌,其生物被膜是导致食品污染和疾病传播的重要原因。该研究选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)无细胞上清液(cell free supernatant,CFS)作为抑制剂,探究B.subtilis CFS在抑制L.monocytogenes野生菌株118(以下简称No.118)生物被膜方面的作用和潜力。首先测定了B.subtilis CFS的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),接着采用结晶紫染色法测定了不同亚最小抑菌浓度下B.subtilis CFS对No.118的生物被膜抑制率,发现不同亚抑菌浓度下的CFS对No.118生物被膜均具有显著的抑制作用,且在1/64 MIC时生物被膜抑制率仍可达到47%;同时B.subtilis CFS对No.118生物被膜代谢活性、自聚集率、表面疏水性、群集泳动能力和膜外聚合物分泌也均有显著抑制作用;最后,通过激光共聚焦显微镜观察了在CFS作用下,No.118生物被膜结构和细胞分布的变化规律,经CFS处理后,No.118生物被膜结构松散,细菌数量明显减少。综上,B.subtilis CFS可通过影响No.118生物被膜细胞的代谢活性、自聚集能力和群集泳动能力以及膜外聚合物的分泌来抑制其生物被膜形成,对探究益生菌代谢产物作为生物被膜抑制剂方面的应用具有重要的参考价值。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 无细胞上清液 单增李斯特菌 生物被膜 激光共聚焦显微镜
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Cr含量对1000 MPa级高强钢熔敷金属组织演变的作用机制 被引量：1
4
作者 冯伟 于庭祥 +4 位作者 陈波 张庆素 才红广 张碧莹 马强 《焊接学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期76-83,共8页
设计开发了5种不同Cr含量的1000 MPa级高强钢埋弧焊材,采用丝极埋弧焊制备了Cr含量为0%~0.9%的熔敷金属,利用OM、SEM、TEM和CLSM等微观组织表征方法研究Cr含量对1000 MPa级高强钢熔敷金属组织演变的影响,并通过拉伸和冲击试验评估其力... 设计开发了5种不同Cr含量的1000 MPa级高强钢埋弧焊材,采用丝极埋弧焊制备了Cr含量为0%~0.9%的熔敷金属,利用OM、SEM、TEM和CLSM等微观组织表征方法研究Cr含量对1000 MPa级高强钢熔敷金属组织演变的影响,并通过拉伸和冲击试验评估其力学性能.结果表明,1000 MPa级高强钢熔敷金属随着Cr含量提高,铁素体转变起始温度由723.3℃提高到740.2℃,贝氏体转变起始温度由470.2℃降低到458.5℃,铁素体转变温度区间扩大,高Cr熔敷金属中贝氏体转变速率较快,熔敷金属中针状铁素体和贝氏体铁素体增加,M-A组元由弥散分布逐渐呈链条状偏聚,先共析铁素体与残余奥氏体减少.熔敷金属冲击断裂形式由低Cr的韧性断裂向高Cr的准解理断裂转变,熔敷金属拉伸强度不断提高,相比于无Cr的熔敷金属,0.9%Cr的熔敷金属抗拉强度和屈服强度分别提高12.4%和17.0%,熔敷金属冲击吸收能量先提高后降低,在−40℃条件下,0.6%Cr的熔敷金属的低温韧性最高为84 J,熔敷金属Cr含量为0.6%时强韧性匹配效果最佳. 展开更多
关键词 1000 MPa级高强钢 熔敷金属 Cr元素含量 组织演变 激光扫描共聚焦显微镜
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激光扫描共聚焦显微镜研究储层孔隙结构 被引量：69
5
作者 应凤祥 杨式升 +2 位作者 张敏 李豫喜 周宏燕 《沉积学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期75-79,共5页
这是一项首次应用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)的激光荧光技术于油气储层的孔隙结构研究。供LSCM用的样品 ,用环氧树脂加入荧光剂后 ,经加压灌注 ,磨制成岩石薄片 ,在LSCM显微镜下观察孔喉的分布 ,可以测量面孔率 ,并可标出需要测量的... 这是一项首次应用激光扫描共聚焦显微镜 (LSCM)的激光荧光技术于油气储层的孔隙结构研究。供LSCM用的样品 ,用环氧树脂加入荧光剂后 ,经加压灌注 ,磨制成岩石薄片 ,在LSCM显微镜下观察孔喉的分布 ,可以测量面孔率 ,并可标出需要测量的每个孔喉的大小以及观察孔喉形状及分布状况。该法的优点 :1.可直接测量和观察到 2 μm左右大小的孔喉。 2 .在LSCM显微镜下可区分孔隙空间中的充填粘土杂基等 ,因此面孔率的测定较一般镜下统计和图像分析更为精确 ,因粘土矿物由于吸附染色剂后在颜色或灰度上有的不易区分。 3.岩石薄片中的微裂缝 ,在LSCM显微镜下可以更清楚地观察到。 展开更多
关键词 激光扫描共焦聚焦显微镜 孔隙结构 荧光剂 油气储层 环氧树脂
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利用激光扫描共聚焦显微镜观察同源四倍体水稻胚囊的形成与发育 被引量：37
6
作者 张华华 冯九焕 +2 位作者 卢永根 杨秉耀 刘向东 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期380-384,共5页
激光扫描共聚焦显微镜是研究植物胚囊的形成与发育过程以及胚囊变异的理想工具。同源四倍体水稻是二倍体水稻染色体加倍形成的。本文利用激光扫描共聚焦显微镜直接观察经透明处理的水稻子房,研究加倍的基因剂量对于四倍体水稻的胚囊形... 激光扫描共聚焦显微镜是研究植物胚囊的形成与发育过程以及胚囊变异的理想工具。同源四倍体水稻是二倍体水稻染色体加倍形成的。本文利用激光扫描共聚焦显微镜直接观察经透明处理的水稻子房,研究加倍的基因剂量对于四倍体水稻的胚囊形成与发育的影响。结果表明,广陆矮4号四倍体大部分的胚囊形成与发育的过程基本是正常的,一部分胚囊出现异常现象,在成熟胚囊时期异常频率为10 61%;L202四倍体的异常频率较高,成熟胚囊时期异常频率达到45 65%。 展开更多
关键词 胚囊 水稻 同源四倍体 成熟胚 发育 染色体加倍 利用 激光扫描共聚焦显微镜 观察 囊变
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大鼠骨髓间充质干细胞和颅骨成骨细胞在张应力下细胞骨架的改变 被引量：24
7
作者 戚孟春 胡静 +2 位作者 邹淑娟 韩力赤 罗恩 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期110-112,121,共4页
目的　探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)和颅骨成骨细胞(OB)在机械张应力刺激下的反应和细胞骨架蛋白F_actin的变化。方法　体外分离培养大鼠骨髓MSCs和颅骨OB ,应用四点弯曲加力系统对细胞施加2 0 0 0 με的机械张应力,加力时间分别为0... 目的　探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)和颅骨成骨细胞(OB)在机械张应力刺激下的反应和细胞骨架蛋白F_actin的变化。方法　体外分离培养大鼠骨髓MSCs和颅骨OB ,应用四点弯曲加力系统对细胞施加2 0 0 0 με的机械张应力,加力时间分别为0h、2h、6h、12h。采用激光共聚焦显微镜观察特异性荧光染料标记的微丝蛋白F_actin和细胞核,并用图像分析软件对细胞形态学参数进行测量。结果　MSCs和OB荧光强度减弱,F_actin纤维束稀疏,排列紊乱;胞核轮廓模糊,部分细胞可观察到凋亡小体;MSCs体积明显变小,OB体积变化不明显。定量分析表明,MSCs的细胞总面积、总荧光密度、绿色荧光(F_actin)密度均显著降低(P <0 0 5或P <0 0 1) ;OB的总荧光密度、绿色荧光密度和胞核红色荧光密度也显著下降(P <0 0 5或P <0 0 1)。结论　机械张应力刺激可引起MSCs和OB细胞骨架F_actin解聚和重排,部分细胞发生凋亡; 展开更多
关键词 间充质干细胞 成骨细胞 机械张应力 激光共聚焦显微镜
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葛根素对大鼠局灶性脑缺血后钙超载的保护作用 被引量：22
8
作者 张茹 郭荷娜 +2 位作者 吴海琴 成红学 王虎清 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1268-1271,共4页
目的探讨大鼠局灶性脑缺血钙离子分布的时空变化及葛根素对钙超载的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型,在缺血后不同时间点应用葛根素进行干预,运用TTC染色观察脑梗死体积的变化,利用激光共聚焦显微镜观察局... 目的探讨大鼠局灶性脑缺血钙离子分布的时空变化及葛根素对钙超载的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉局灶性脑缺血模型,在缺血后不同时间点应用葛根素进行干预,运用TTC染色观察脑梗死体积的变化,利用激光共聚焦显微镜观察局灶性脑缺血后不同时间点活脑片皮层及纹状体Ca2+的动态变化及其分布。结果缺血后2 h组梗死侧皮层及纹状体Ca2+荧光强度均开始升高,并随缺血时间的延长而进一步增强(P<0.001);假手术组皮层与纹状体Ca2+荧光强度无明显差异,而缺血后梗塞侧纹状体的Ca2+荧光强度明显高于皮层。与模型对照组各对应时间点相比,模型干预组2 h组、12 h组大鼠脑皮层和纹状体Ca2+荧光强度均明显下降,差异显著(P<0.05),24 h组Ca2+荧光强度虽有所下降,但尚无统计学意义。结论葛根素可能是通过减轻钙超载从而挽救半暗带,减小脑梗死体积,发挥神经保护作用的;12 h可能为葛根素治疗缺血性脑损伤的时间窗。 展开更多
关键词 葛根素 钙超载 激光扫描共聚焦显微镜 脑缺血
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15-HETE对肺动脉平滑肌细胞钙离子浓度的影响 被引量：18
9
作者 张荣 孟丽巍 +3 位作者 张一飞 吕昌莲 郑秋艳 朱大岭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期66-69,共4页
目的　通过阻断细胞外钙离子 (Ca2+ )内流,观察 15 羟化二十烷四烯酸 ( 15 HETE)对兔肺动脉环收缩张力和肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度 ( [Ca2+ ]i)的影响,探讨缺氧时 15 HETE引起细胞钙动员的机制。方法　采用组织浴槽血管环方法观察L... 目的　通过阻断细胞外钙离子 (Ca2+ )内流,观察 15 羟化二十烷四烯酸 ( 15 HETE)对兔肺动脉环收缩张力和肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度 ( [Ca2+ ]i)的影响,探讨缺氧时 15 HETE引起细胞钙动员的机制。方法　采用组织浴槽血管环方法观察L 型钙通道阻断剂硝苯地平和无钙液对15 HETE诱导的兔肺动脉环收缩力的影响;酶法分离培养兔肺动脉平滑肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜测定 15 HETE对细胞内 [Ca2+ ]i的作用。结果　在正常组和缺氧组, 10μmol·L-1硝苯地平和无钙液对 1μmol·L-1 15 HETE引起的肺动脉环收缩均没有影响;培养的 15 HETE组细胞 (正常培养的细胞暴露于 1 μmol·L-1 15 HETE下继续孵育 8min)与正常对照组相比,细胞内 [Ca2+ ]i明显增加 (P<0 05)。结论　15 HETE可引起肺动脉平滑肌细胞 [Ca2+ ]i增加,且此钙来源于细胞内贮钙库的释放。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 正常 CA^2+ 细胞内 硝苯地平 缺氧 影响 钙动员 L-型钙通道 钙离子浓度
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粳稻蛋白质与蒸煮食味品质的关系 被引量：22
10
作者 丁毅 华泽田 +3 位作者 王芳 蔡卓 王嫘 郭丹霄 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第23期42-46,共5页
采用扫描电子显微镜(SEM)和激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)对直链淀粉含量相近而蛋白质含量差异较大的水稻籽粒及米饭粒的显微结构进行观察,研究蛋白质与蒸煮食味品质的关系。结果表明:通过感官评价和测定快速黏度分析(RVA)特征谱,确定越光... 采用扫描电子显微镜(SEM)和激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)对直链淀粉含量相近而蛋白质含量差异较大的水稻籽粒及米饭粒的显微结构进行观察,研究蛋白质与蒸煮食味品质的关系。结果表明:通过感官评价和测定快速黏度分析(RVA)特征谱,确定越光、m90、m119的食味品质随蛋白含量的升高而逐渐降低;SEM、CLSM观察糙米横断面,高蛋白含量的m119的大量蛋白体以近似于蜂窝状包围在复合淀粉粒的周围;CLSM观察浸水籽粒的掰断面,蛋白含量不同的品种的掰断面粗糙度也有区别,蛋白含量越高,掰断面越粗糙,即吸收水分少,反映了蛋白质对大米吸水性的影响;SEM、CLSM观察米饭的显微结构,发现高蛋白品种m119的大量蛋白体包围在复合淀粉粒周围,限制了淀粉的吸水糊化,导致蒸煮食味品质的降低。 展开更多
关键词 水稻 蒸煮食味品质 蛋白质 显微结构 激光共聚焦扫描显微镜
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MAP30苦瓜抗HIV蛋白对细胞内HBeAg表达抑制作用的定量分析 被引量：9
11
作者 王九平 王临旭 +5 位作者 孙永涛 白雪帆 李谨革 陈伟红 孙利 骆抗先 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期183-184,共2页
目的 :研究Mr 为 30 0 0 0的苦瓜抗HIV蛋白 (MAP30 )对 2 .2 .15细胞内HBV基因表达的抑制作用。方法 :将HBVDNA转染的人肝癌细胞株 2 .2 .15 ,在MAP30存在的情况下培养后 ,进行间接免疫荧光染色 ,用共聚焦技术定量分析细胞内HBeAg的表... 目的 :研究Mr 为 30 0 0 0的苦瓜抗HIV蛋白 (MAP30 )对 2 .2 .15细胞内HBV基因表达的抑制作用。方法 :将HBVDNA转染的人肝癌细胞株 2 .2 .15 ,在MAP30存在的情况下培养后 ,进行间接免疫荧光染色 ,用共聚焦技术定量分析细胞内HBeAg的表达。结果 :与对照组相比较 ,MAP30培养的细胞内HBeAg荧光量明显减少。结论 :MAP30对 2 .2 .15细胞内HBeAg的表达有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 MAP30 苦瓜抗HIV蛋白 基因表达 共聚焦显微镜
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灵芝多糖体外对小鼠腹腔巨噬细胞pH的影响 被引量：12
12
作者 李明春 雷林生 +3 位作者 梁东升 许自明 杨淑琴 孙莉莎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期513-516,共4页
目的　探讨灵芝多糖（ＧＬＰ）对免疫细胞信号转导过程的影响。方法　采用激光扫描共聚焦显微镜技术，动态监测ＧＬＰ均一体组分ＧＬＢ７对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）胞内ｐＨ（［ｐＨ］ｉ）的影响。结果　ＧＬＢ７引起小鼠腹腔ＭΦ［ｐ... 目的　探讨灵芝多糖（ＧＬＰ）对免疫细胞信号转导过程的影响。方法　采用激光扫描共聚焦显微镜技术，动态监测ＧＬＰ均一体组分ＧＬＢ７对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）胞内ｐＨ（［ｐＨ］ｉ）的影响。结果　ＧＬＢ７引起小鼠腹腔ＭΦ［ｐＨ］ｉ明显升高，［ｐＨ］ｉ的升高与Ｎａ＋／Ｈ＋交换系统及细胞［Ｃａ２＋］ｉ有关。结论　ＭΦ是灵芝多糖作用的靶细胞，ＧＬＢ７引起ＭΦ［ｐＨ］ｉ快速升高的现象，是灵芝多糖产生作用的重要途径。 展开更多
关键词 灵芝 多糖 PH值 巨噬细胞
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灵芝多糖对小鼠T细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度和胞内pH的影响 被引量：23
13
作者 李明春 雷林生 +4 位作者 王庆彪 梁东升 许自明 杨淑琴 孙莉莎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期167-170,共4页
目的通过考察灵芝多糖（ＧＬＰ）对免疫细胞信号转导过程的影响，探讨ＧＬＰ免疫调节作用机制。方法采用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）技术，动态监测ＧＬＰ均一体组分ＧＬＢ７对小鼠Ｔ细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋）和胞... 目的通过考察灵芝多糖（ＧＬＰ）对免疫细胞信号转导过程的影响，探讨ＧＬＰ免疫调节作用机制。方法采用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）技术，动态监测ＧＬＰ均一体组分ＧＬＢ７对小鼠Ｔ细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋）和胞内 ｐＨ（［ｐＨ］ｉ）的影响。结果 ＧＬＢ７（２０ｍｇ·Ｌ－１）引起小鼠 Ｔ细胞中［Ｃａ２＋］；和［ｐＨ］；明显升高，１ｍｉｎ即分别升高至３３４．７０％±１６，４％（ｎ＝３）、１７１．６％ ± １０．４％（ｎ＝３），之后一直分别维持在该平台期，至 １０ ｍｉｎ仍维持高峰水平。加入ＥＣＴＡ和 ｖｅｒａｐａｍｉｌ处理后， １０ ｍｉｎ ＧＬＢ７ 引起 Ｔ细胞［Ｃａ２＋］；和［ｐＨ］；分别升高为 ２０２．４％± １３．６％（ｎ＝３）。１４０．２％±７．８％（ｎ＝３），与正常对照组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０1）。以 ＥＧＴＡ和 ｖｅｒａｐａｍｉｌ处理后，再分别以 ｈｅｐ－ｅｒｉｎ和 ｐrocaine处理细胞 １０ ｍｉｎ，之后以 ＧＬＢ７刺激Ｔ细胞，１０ｍｉｎ［Ｃａ２＋］ｉ值分别为１５１．５％±９．４％（ｎ＝３）、１４３．２％± ８．１ ％（ ｎ＝ ３），与 ＥＧＴＡ和 ｖｅｒａｐａｍｉｌ处理组相比差异有显著性（ Ｐ＜ ０．０１）。 展开更多
关键词 灵芝多糖 T细胞 游离胞浆Ca^2+浓度 PH值 激光扫描共聚焦显微镜
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细胞内钙在脑心综合征心律失常中作用研究 被引量：11
14
作者 张高小 王玲 +3 位作者 李超 孙丽华 潘国聘 杨宝峰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1607-1610,共4页
目的通过研究脑心综合征心肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化及其来源,以探讨其与脑心综合征心律失常的关系。方法线栓法建立脑心综合征模型,监测心电图,酶法分离心肌细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察心室肌[Ca2+]i的变化及其途径。... 目的通过研究脑心综合征心肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化及其来源,以探讨其与脑心综合征心律失常的关系。方法线栓法建立脑心综合征模型,监测心电图,酶法分离心肌细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察心室肌[Ca2+]i的变化及其途径。结果模型组QT间期较正常组和假手术组明显延长(P<0.01);在正常台氏液中,KCl诱发模型组心肌[Ca2+]i升高幅度高于假手术组(P<0.01),用1μmol·L-1和10μmol·L-1维拉帕米预孵育模型组后,10μmol·L-1维拉帕米明显降低KCl诱发的心肌[Ca2+]i升高幅度(P<0.01);在无钙台氏液中,caffeine诱发模型组心肌[Ca2+]i升高幅度高于假手术组(P<0.01)。结论通过心肌细胞L-型钙通道和肌浆网雷诺定受体介导的内钙异常升高可能是脑心综合征心律失常的原因之一。 展开更多
关键词 脑心综合征 激光扫描共聚焦显微镜 心律失常 钙
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激光扫描共聚焦显微镜 被引量：15
15
作者 李叶 黄华平 +3 位作者 林培群 卢雪莲 李勤奋 郑勇奇 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2015年第7期262-265,269,共5页
阐述了激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的原理和构造,分析了LSCM的优点和缺点,如获得清晰的图像,可光学切片、三维重建,实时多通道荧光,ZOOM放大,局部光操作,检测过程快、效果更灵敏、定位更准确。探讨了LSCM扫描方式及应用,如研究多种荧光... 阐述了激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)的原理和构造,分析了LSCM的优点和缺点,如获得清晰的图像,可光学切片、三维重建,实时多通道荧光,ZOOM放大,局部光操作,检测过程快、效果更灵敏、定位更准确。探讨了LSCM扫描方式及应用,如研究多种荧光定位分析,需选择XY扫描;研究标本空间实际位置信息,样品三维图像信息,需选择XYZ扫描;用于研究活体标本随时间的变化,或在不同时间采取不同的处理方法观察标本的荧光变化研究,得选择XYT扫描。并针对目前管理该仪器设备上存在的问题提出一些建议,以期对高校实验室的开放共享提供有益参考。 展开更多
关键词 激光扫描共聚焦显微镜 光学切片 三维重建 开放共享
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褪黑素在叠氮钠所致的海马锥体细胞钙超载中的神经保护作用 被引量：7
16
作者 徐海伟 黎海蒂 +3 位作者 范晓棠 吴旋 曹娟 唐军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期201-204,共4页
目的　观察叠氮钠对急性分离的大鼠海马锥体神经元胞内游离钙的作用以及不同浓度的褪黑素 (Melatonin ,MT)的影响。方法　海马锥体细胞的急性分离、新型游离钙荧光探针Fluo 4AM负载海马锥体细胞 ,激光共聚焦动态检测胞内游离钙的变化及... 目的　观察叠氮钠对急性分离的大鼠海马锥体神经元胞内游离钙的作用以及不同浓度的褪黑素 (Melatonin ,MT)的影响。方法　海马锥体细胞的急性分离、新型游离钙荧光探针Fluo 4AM负载海马锥体细胞 ,激光共聚焦动态检测胞内游离钙的变化及叠氮钠、褪黑素和荷包牡丹碱的作用。结果　在孵育液中加入叠氮钠 (0 8mg ml)能使急性分离的海马锥体细胞胞内游离钙在 2 0 0s内急剧升高并维持在高水平 ,处于钙超载状态。褪黑素能使NaN3所致的海马锥体细胞内处于超载状态的游离钙显著下降 ,并有量效关系。结论　叠氮钠导致海马神经细胞损伤的早期原因可能是钙超载 。 展开更多
关键词 褪黑素 钙超载 海马 激光共聚焦 大鼠
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水稻胚乳淀粉粒显微结构的初步观察 被引量：19
17
作者 刘海虹 周海鹰 张文绪 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期185-188,共4页
先后用共焦激光扫描显微镜 (CLSM)和扫描电镜对籼稻、粳稻、糯稻和普通野稻胚乳的淀粉粒作了光学断层扫描观察和半薄切片的扫描电镜观察。发现水稻淀粉粒是一空心结构 ,其空腔的体积约占淀粉粒体积的 12 5%左右。水稻不同种。
关键词 水稻 共焦激光扫描显微镜 扫描电镜 半薄切片 胚乳淀粉粒 显微结构 CLSM 光学断层扫描 食味品质差异
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激光共焦扫描显微镜在微机电系统中的应用 被引量：15
18
作者 曾毅波 蒋书森 +2 位作者 黄彩虹 张玉龙 张艳 《光学精密工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1241-1246,共6页
研究了激光共焦扫描显微镜(LSCM)在微结构分析中的应用,综述了该项应用的优势。LSCM的高分辨率和光强调节功能,使其可用于大角度测量;与图像处理系统相结合,便于微结构的定性和定量分析;而全自动样片台沿X轴和Y轴的自动扫描实现了图像... 研究了激光共焦扫描显微镜(LSCM)在微结构分析中的应用,综述了该项应用的优势。LSCM的高分辨率和光强调节功能,使其可用于大角度测量;与图像处理系统相结合,便于微结构的定性和定量分析;而全自动样片台沿X轴和Y轴的自动扫描实现了图像的拼接功能。实验结果表明:运用LSCM测量的斜面最大角度至少可以达到50°;在悬臂梁的形貌分析中,可获得清晰的三维形貌,同时通过二维定量分析精确测得其形变为3.145μm;在100×物镜下,运用拼接功能获得384μm×288μm的视场面积,解决了高放大倍数下,在单帧显微图像中无法获取所观测对象全貌的问题。LSCM在微结构分析中的应用弥补了其它形貌分析设备测量功能上的不足,提升了微机电系统的测试水平。 展开更多
关键词 激光共焦扫描显微镜 微机电系统 角度测量 形貌分析 图形拼接
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葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响 被引量：10
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作者 肖桂凤 宁钢民 +1 位作者 葛亚坤 郑筱祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1388-1392,共5页
目的探讨葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响。方法采用钙荧光探针F luo-3/AM标记培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察H2O2、ATP和高K+刺激作用下葛根素对培养的HUVECs中钙超载的影响... 目的探讨葛根素对培养人脐静脉内皮细胞钙超载的影响。方法采用钙荧光探针F luo-3/AM标记培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),激光共聚焦显微镜检测细胞胞内钙荧光信号,观察H2O2、ATP和高K+刺激作用下葛根素对培养的HUVECs中钙超载的影响。结果葛根素能抑制H2O2、ATP和高K+引起的[Ca2+]i升高,抑制率分别为72.2%、56.5%和78.2%;葛根素对高K+引起的钙超载的抑制作用与L-型电压依赖型钙通道的特异性拮抗剂Verapam il相似。结论葛根素可以缓解培养人脐静脉内皮细胞内钙超载,其作用机制可能与拮抗膜上电压依赖型钙通道和抑制内质网钙库释放有关。 展开更多
关键词 葛根素 内皮细胞 钙离子 激光共聚焦显微镜
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苦马豆素诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡作用机制的实验研究(英文) 被引量：13
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作者 孙纪元 王四旺 +2 位作者 朱妙章 谢艳华 缪珊 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第9期978-983,共6页
目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期... 目的:探讨SW体外诱导人胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:应用MTT法确定SW对体外培养的SGC7901细胞的作用剂量,通过流式细胞术及凋亡相关调控基因p53、cmyc、Bcl2的检测对细胞凋亡及细胞周期的测定,观察SW对胃癌细胞SGC7901增殖周期的影响以及抑制肿瘤细胞增殖的方式,同时利用激光共聚焦显微镜对细胞内Ca2+浓度的监测,研究SW与细胞内Ca2+超载的关系。结果:SW体外抗SGC7901细胞的完全致死剂量为6.2μg·ml-l,高于0.05μg·ml-l时抑制作用明显(P<0.05),其LC50为0.84μg·ml-l;经SW0.5～1.5μg·ml-l处理24h可引起凋亡抑制基因p53、Bcl2的明显下降、凋亡促进基因cmyc的明显升高以及肿瘤细胞内Ca2+超载,最终诱导SGC7901细胞凋亡。实验还证实SW主要作用于肿瘤细胞的S期,使瘤细胞主要积聚在S期。结论:SW通过多种途径诱导细胞凋亡可能是其发挥抗癌作用的重要机制。 展开更多
关键词 苦马豆素 胃癌 凋亡 流式细胞仪 细胞周期 激光共聚焦显微镜
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