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小鼠胚胎干细胞凝血因子Ⅸ基因的定向敲除被引量：5: 1; 作者戴旭明薛红 +3 位作者杨桦胡以平傅继梁陈竺《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期1-4,共4页; 目的：将小鼠胚胎干细胞中凝血因子Ⅸ（ｍＦⅨ）基因定向敲除，为建立血友病Ｂ的转基因小鼠模型奠定基础；摸索建立ＥＳ细胞基因打靶技术体系。方法：将线性化的针对小鼠ｍＦⅨ基因组的基因打靶置换型载体（ｐＭＦⅨＤＥＬ）ＤＮＡ用电... 展开更多; 关键词胚胎干细胞基因敲除凝血因子ⅸ 血友病B; 在线阅读下载PDF 职称材料

机采血小板悬液在保存过程中凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化被引量：3: 2; 作者杨江存李凤琴 +1 位作者李芒会任健康《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期162-164,共3页; 为了研究机采血小板悬液22℃振荡保存不同时间的凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化,采用SYSMEXCA-1500型全自动血凝仪对用CS-3000plus血细胞分离机采集的18份血小板悬液于22℃振荡保存条件下,测定0、12、24、48、72、96、120小时7个时间段的... 展开更多; 关键词机采血小板凝血因子凝血因子Ⅷ 凝血因子ⅸ; 在线阅读下载PDF 职称材料

结肠灌注重组腺相关病毒2/人凝血因子Ⅸ基因载体治疗血友病B的安全性研究被引量：1: 3; 作者彭捷王华 +2 位作者陈方平王光平彭建强《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期487-489,共3页; 目的分析结肠灌注重组腺相关病毒2/人凝血因子Ⅸ(rAAV2/CMV-hFⅨ)基因载体治疗血友病B小鼠的安全性。方法将rAAV2/CMV-hFⅨ(剂量为1×1013 v.g/kg)结肠灌注血友病B模型小鼠,分别检测抗重组腺相关病毒2(rAAV2)抗体和抗人凝血因子Ⅸ(h... 展开更多; 关键词重组腺相关病毒血友病B 凝血因子ⅸ 基因治疗结肠灌注安全性; 在线阅读下载PDF 职称材料

凝血因子Ⅸ/凝血因子Ⅹ结合蛋白家族的研究进展: 4; 作者徐小龙刘清亮《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期589-592,共4页; 凝血因子Ⅸ /Ⅹ结合蛋白家族是近来发现的C型动物凝集素超家族中一个亚家族 .它们存在于蝰科蛇毒中 ,不具有酶活性 ,通过与凝血因子Ⅸ或凝血因子Ⅹ结合来延长凝血时间 .在钙离子存在下结合在凝血因子Ⅸ /Ⅹ分子中γ 羧基谷氨酸区域 .它... 展开更多; 关键词抗凝剂凝血因子ⅸ/Ⅹ结合蛋白蛇毒钙离子; 在线阅读下载PDF 职称材料

基因打靶置换型载体的构建和应用研究被引量：6: 5; 作者戴旭明薛红 +2 位作者杨桦胡以平傅继梁《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期5-8,共4页; 目的：构建针对小鼠凝血因子Ⅸ（ｍＦⅨ）基因的基因打靶置换型载体，并用于小鼠胚胎干细胞基因打靶研究。方法：在用噬斑原位杂交法克隆ｍＦⅨ基因组ＤＮＡ并完成结构分析的基础上，利用常规的分子克隆技术，设计并构建置换型载体，经... 展开更多; 关键词基因打靶置换型载体胚胎干细胞凝血因子ⅸ; 在线阅读下载PDF 职称材料

原代小鼠骨骼肌细胞和C 2C 12细胞转人凝血因子IX基因后高效表达及分泌功能被引量：4: 6; 作者王健民侯军 KurachiK 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期593-597,共5页; 目的：研究骨骼肌细胞作为基因治疗靶细胞，其合成、加工和分泌外源性蛋白质的功能。方法：应用骨骼肌细胞特异性和非特异性表达载体（ｐｄＬＭｅ４ｂＡｈⅨｍ和ＬⅨ ＳＮ）转染联合免疫缺陷（ＳＣＩＤ）小鼠原代成肌细胞（ ... 展开更多; 关键词骨骼肌成肌细胞凝血因子ⅸ 基因治疗血友病B; 在线阅读下载PDF 职称材料

人凝血因子IX突变型研究现状被引量：5: 7; 作者颜景斌《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期833-838,共6页; 血友病B是一种性连锁隐性遗传病,其发病机制是位于X染色体上的人凝血因子IX(hFIX)基因发生了突变,导致血浆中hFIX含量或活性大幅下降,从而使得内源性凝血途径受到阻碍,无法进行正常的凝血。文章综述了hFIX基因及其编码蛋白质的结构和功... 展开更多; 关键词血友病B 人凝血因子ⅸ 突变凝血活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠胚胎干细胞凝血因子Ⅸ基因的定向敲除被引量：5: 1; 作者戴旭明薛红杨桦胡以平傅继梁陈竺; 机构中国科学院上海血液学研究所上海第二医科大学教授; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期1-4,共4页; 基金国家自然科学基金上海市生命科学研究中心课题军队"九五"医药科研规划重点课题; 文摘目的：将小鼠胚胎干细胞中凝血因子Ⅸ（ｍＦⅨ）基因定向敲除，为建立血友病Ｂ的转基因小鼠模型奠定基础；摸索建立ＥＳ细胞基因打靶技术体系。方法：将线性化的针对小鼠ｍＦⅨ基因组的基因打靶置换型载体（ｐＭＦⅨＤＥＬ）ＤＮＡ用电穿孔法转入小鼠ＥＳ细胞，经过Ｇ４１８和ＧＡＮＣ分组药物选择，用ＰＣＲ和基因组Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交两种方法，鉴定药物抗性细胞中发生同源重组的情况。结果：（１）从药物抗性细胞克隆中鉴定获得了４个发生了按所设计的方式进行了同源重组的ＥＳ细胞克隆；（２）观察到在ＥＳ细胞中，ｐＭＦⅨＤＥＬ载体ＤＮＡ与内源ｍＦⅨ基因发生同源重组的频率平均为１．６７×１０－６。结论：得到了４个ｍＦⅨ基因已被敲除的ＥＳ细胞克隆；建立了ＥＳ细胞基因打靶的技术体系。; 关键词胚胎干细胞基因敲除凝血因子ⅸ 血友病B; Keywords embryonic stem cells gene targeting gene knockout coagulation factor ⅸ haemophilia B; 分类号 R554.1 [医药卫生—血液循环系统疾病] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名机采血小板悬液在保存过程中凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化被引量：3: 2; 作者杨江存李凤琴李芒会任健康; 机构陕西省人民医院输血科陕西省血液中心陕西省医院检验科; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期162-164,共3页; 文摘为了研究机采血小板悬液22℃振荡保存不同时间的凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化,采用SYSMEXCA-1500型全自动血凝仪对用CS-3000plus血细胞分离机采集的18份血小板悬液于22℃振荡保存条件下,测定0、12、24、48、72、96、120小时7个时间段的FⅧ∶C和FⅨ∶C的活性。结果表明:机采血小板FⅧ∶C在0时活性为(100.51±44.02)%,保存12-120小时,其活性衰减了10%-40%;FⅨ∶C在0时活性为(120.93±20.50)%,保存24-120小时,其活性衰减了10%-35%。结论:机采血小板悬液于22℃振荡保存时凝血因子Ⅷ、Ⅸ仍保持有较高的生物学活性。; 关键词机采血小板凝血因子凝血因子Ⅷ 凝血因子ⅸ; Keywords plateletapheresis coagulation factors fⅧ,ⅸ; 分类号 R331.143 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结肠灌注重组腺相关病毒2/人凝血因子Ⅸ基因载体治疗血友病B的安全性研究被引量：1: 3; 作者彭捷王华陈方平王光平彭建强; 机构中南大学湘雅医院血液科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期487-489,共3页; 基金国家863项目(2001AA217181) 国家973项目(2004CB518806); 文摘目的分析结肠灌注重组腺相关病毒2/人凝血因子Ⅸ(rAAV2/CMV-hFⅨ)基因载体治疗血友病B小鼠的安全性。方法将rAAV2/CMV-hFⅨ(剂量为1×1013 v.g/kg)结肠灌注血友病B模型小鼠,分别检测抗重组腺相关病毒2(rAAV2)抗体和抗人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)抗体,并通过组织病理学、免疫组化和PCR技术分析病毒和hFⅨ的组织分布。结果灌注后,在小鼠体内能够检测到抗rAAV2抗体和抗hFⅨ抗体;组织病理学、免疫组化和PCR技术分析结果显示灌注部位肠组织无明显病理改变,rAAV2以及hFⅨ基因仅仅在灌注的肠上皮。结论结肠灌注重组腺相关病毒基因治疗血友病B小鼠,在所观测时间内是安全的。; 关键词重组腺相关病毒血友病B 凝血因子ⅸ 基因治疗结肠灌注安全性; Keywords recombinant adeno-associated viral vector hemophilia B blood coagulation factor ⅸ gene therapy enema safety; 分类号 R554.1 [医药卫生—血液循环系统疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名凝血因子Ⅸ/凝血因子Ⅹ结合蛋白家族的研究进展: 4; 作者徐小龙刘清亮; 机构中国科学技术大学化学系; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第6期589-592,共4页; 文摘凝血因子Ⅸ /Ⅹ结合蛋白家族是近来发现的C型动物凝集素超家族中一个亚家族 .它们存在于蝰科蛇毒中 ,不具有酶活性 ,通过与凝血因子Ⅸ或凝血因子Ⅹ结合来延长凝血时间 .在钙离子存在下结合在凝血因子Ⅸ /Ⅹ分子中γ 羧基谷氨酸区域 .它们彼此之间具有很高的序列同源性 ,都是由两条同源的肽链通过一对二硫键相连 .两条肽链都具有C型糖识别区的二硫键构型 ,各含一个钙离子结合位点 .其中habu凝血因子Ⅸ /Ⅹ结合蛋白的晶体结构已经测定 ,除掉相互交叠的中心环外。; 关键词抗凝剂凝血因子ⅸ/Ⅹ结合蛋白蛇毒钙离子; Keywords anticoagulant, coagulation factor ⅸ/factor Ⅹ-binding protein, snake venom, calcium ion; 分类号 R996.3 [医药卫生—毒理学] Q513 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基因打靶置换型载体的构建和应用研究被引量：6: 5; 作者戴旭明薛红杨桦胡以平傅继梁; 机构第二军医大学基础医学部医学分子遗传学开放实验室香港科技大学生物化学系; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期5-8,共4页; 基金国家自然科学基金上海市生命科学研究中心课题军队"九五"医药科研规划重点课题; 文摘目的：构建针对小鼠凝血因子Ⅸ（ｍＦⅨ）基因的基因打靶置换型载体，并用于小鼠胚胎干细胞基因打靶研究。方法：在用噬斑原位杂交法克隆ｍＦⅨ基因组ＤＮＡ并完成结构分析的基础上，利用常规的分子克隆技术，设计并构建置换型载体，经过限制性内切酶酶切鉴定和ＰＣＲ鉴定其结构正确后，用电穿孔法对体外培养的小鼠胚胎干细胞Ｒ１株进行基因转移，经Ｇ４１８／ＧＡＮＣ（Ｇａｎｃｙｃｌｏｖｉｒ）分组药物选择，进行ｐＭＦⅣＤＥＬ载体的应用研究。结果：构建获得包括正负双向选择基因的表达元件、长短同源臂等在内的基因打靶置换型载体ｐＭＦⅨＤＥＬ，在胚胎干细胞中能有效地发生重组，正负双向选择系统的应用对同源重组事件富集效率提高了２４倍。结论：本研究构建获得了针对ｍＦⅨ基因的置换型载体，在胚胎干细胞基因打靶中得到有效的应用。; 关键词基因打靶置换型载体胚胎干细胞凝血因子ⅸ; Keywords gene targeting replacement vector embryonic stem cells coagulation factor ⅸ; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名原代小鼠骨骼肌细胞和C 2C 12细胞转人凝血因子IX基因后高效表达及分泌功能被引量：4: 6; 作者王健民侯军 KurachiK; 机构第二军医大学长海医院血液内科美国密歇根大学人类遗传系; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期593-597,共5页; 基金国家自然科学基金上海市科委留学回国人员启动基金; 文摘目的：研究骨骼肌细胞作为基因治疗靶细胞，其合成、加工和分泌外源性蛋白质的功能。方法：应用骨骼肌细胞特异性和非特异性表达载体（ｐｄＬＭｅ４ｂＡｈⅨｍ和ＬⅨ ＳＮ）转染联合免疫缺陷（ＳＣＩＤ）小鼠原代成肌细胞（ＳＣＩＤ ＭＢ）和Ｃ２Ｃ１２成肌细胞系，观察这两种细胞在合成、加工和分泌人凝血因子Ⅸ（ＦⅨ）蛋白质方面的异同。结果：在ＳＣＩＤ ＭＢ中，ｐｄＬＭｅ４ｂＡｈⅨｍ可表达的ＦⅨ 达２０００ｎｇ·１０－６ ·（２４ｈ）－１，凝血活性达９５％～１０３％。比较细胞内和培养上清液中的ＦⅨ蛋白及细胞内ＦⅨｍＲＮＡ丰度变化表明，Ｃ２Ｃ１２细胞分泌ＦⅨ的功能不如ＳＣＩＤ ＭＢ，而合成、加工ＦⅨ的能力与ＳＣＩＤ ＭＢ相似。结论：原代小鼠骨骼肌细胞可高效表达、加工和分泌外源性基因产物；在以骨骼肌细胞作为靶细胞进行基因治疗研究时，应尽量应用原代细胞。本研究为临床应用骨骼肌细胞作为基因治疗靶细胞奠定了实验基础。; 关键词骨骼肌成肌细胞凝血因子ⅸ 基因治疗血友病B; Keywords skeletal myoblasts coagulation factor ⅸ gene therapy; 分类号 R554.305 [医药卫生—血液循环系统疾病] R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人凝血因子IX突变型研究现状被引量：5: 7; 作者颜景斌; 机构上海交通大学医学遗传研究所; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期833-838,共6页; 基金国家863高科技研究发展项目(编号:2002AA206201)~~; 文摘血友病B是一种性连锁隐性遗传病,其发病机制是位于X染色体上的人凝血因子IX(hFIX)基因发生了突变,导致血浆中hFIX含量或活性大幅下降,从而使得内源性凝血途径受到阻碍,无法进行正常的凝血。文章综述了hFIX基因及其编码蛋白质的结构和功能,并分类详细论述了血友病B中发现的几种主要突变类型。其中包括奠基者效应造成的突变、调控区的突变、编码区的突变、内含子剪切位点的突变及另外两种较为特殊的突变,同时介绍了这些突变所造成的生物学效应。最后还简要介绍了一种能提高hFIX蛋白凝血活性的突变类型(第338位Arg→Ala),并对其应用作了展望。; 关键词血友病B 人凝血因子ⅸ 突变凝血活性; Keywords hemophilia B human coagulation factor ⅸ （hfIX） mutation clotting activity; 分类号 R554 [医药卫生—血液循环系统疾病]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	小鼠胚胎干细胞凝血因子Ⅸ基因的定向敲除	戴旭明薛红杨桦胡以平傅继梁陈竺	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1998	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	机采血小板悬液在保存过程中凝血因子Ⅷ、Ⅸ生物活性的变化	杨江存李凤琴李芒会任健康	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2006	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	结肠灌注重组腺相关病毒2/人凝血因子Ⅸ基因载体治疗血友病B的安全性研究	彭捷王华陈方平王光平彭建强	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	凝血因子Ⅸ/凝血因子Ⅹ结合蛋白家族的研究进展	徐小龙刘清亮	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	2000	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	基因打靶置换型载体的构建和应用研究	戴旭明薛红杨桦胡以平傅继梁	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1998	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	原代小鼠骨骼肌细胞和C 2C 12细胞转人凝血因子IX基因后高效表达及分泌功能	王健民侯军 KurachiK	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	1999	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	人凝血因子IX突变型研究现状	颜景斌	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料