FMDV、BTV、PPRV多重RT-PCR检测方法的建立 被引量：4

1

作者 何亚鹏 张琪 +3 位作者 徐丽美 庞文静 付明哲 许信刚 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1584-1589,共6页

为建立能够同时检测并鉴别口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)、蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)和小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)感染的多重RT-PCR(反转录-聚合酶链式反应,Reverse transcriptio... 为建立能够同时检测并鉴别口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)、蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)和小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)感染的多重RT-PCR(反转录-聚合酶链式反应,Reverse transcription-polymerase chain reaction)方法,根据3种病毒的基因组全序列和保守区序列设计3对特异性引物,优化反应体系和扩增条件,建立能够同时检测3种病毒的多重RT-PCR方法。结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法敏感性强,对FMDV、BTV和PPRV的核酸最低检测量分别为15.42、6.29、16.50ng/μL;特异性试验结果表明所建立方法的特异性良好。建立的多重RT-PCR方法具有敏感性高、特异性强、重复性好、快速简便等特点,可以用于临床上3种病毒感染的诊断和鉴别。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 蓝舌病病毒 小反刍兽疫病毒 多重RT-PCR

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单一引物标记LUX荧光RT-PCR鉴别BTV和EHDV 被引量：2

2

作者 张彩虹 花群义 +7 位作者 阮周曦 杨俊兴 曾少灵 陶虹 陈兵 曹琛福 林庆燕 周晓黎 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期6-11,共6页

采用在线LUXTM专业软件,根据BTV-NS3基因序列和EHDV-NS3基因序列,通过特异性单一引物序列3′末端的荧光标记,分别设计出两对BTV和EHDV的LUX荧光PCR引物,并采用BLAST软件对各引物进行匹配性和特异性分析,根据分析结果选择合适的引物合成... 采用在线LUXTM专业软件,根据BTV-NS3基因序列和EHDV-NS3基因序列,通过特异性单一引物序列3′末端的荧光标记,分别设计出两对BTV和EHDV的LUX荧光PCR引物,并采用BLAST软件对各引物进行匹配性和特异性分析,根据分析结果选择合适的引物合成。经过各反应条件的优化和特异性、敏感性试验,并对BTV、EHDV、VSV、PPRV、BVDV、AKV的BHK-21细胞培养物和临床样品检测,与常规RT-PCR进行对比检测,建立了能同时鉴别检测BTV和EHDV的二重LUXTM荧光PCR方法。该二重LUXTM荧光PCR的BTV和EHDV各自引物只对相应的病毒呈阳性反应,两者没有交叉反应现象,对健康牛、羊和猪基因组DNA、BKH-21细胞对照,以及其他几种相似疾病如VSV、PPRV、BVDV、AKV均呈阴性反应。该法对病毒的细胞培养液鉴别检测敏感性可达1TCID50C以上,比常规RT-PCR敏感性提高10倍以上,从样品核酸纯化到完成二重LUXTM荧光PCR反应和熔解曲线分析,仅需3h,在进出口动物检验检疫中快速鉴别BTV和EHDV具有实际应用价值。 展开更多

关键词 LUX荧光RT-PCR 蓝舌病病毒 流行性出血病病毒

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常见水稻病虫害胁迫对转cry1C基因抗虫水稻Bt蛋白表达量的影响 被引量：1

3

作者 王欢 曹征鸿 +1 位作者 叶恭银 党聪 《生物安全学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期250-254,共5页

【目的】明确转Bt基因抗虫水稻在病虫害胁迫下对Bt蛋白表达量的影响。【方法】以Bt水稻T1C-19(表达Cry1C蛋白)为研究对象,探究褐飞虱、白叶枯病等6种水稻常见病虫害胁迫下其体内Bt蛋白的表达量变化。【结果】褐飞虱取食引起T1C-19水稻... 【目的】明确转Bt基因抗虫水稻在病虫害胁迫下对Bt蛋白表达量的影响。【方法】以Bt水稻T1C-19(表达Cry1C蛋白)为研究对象,探究褐飞虱、白叶枯病等6种水稻常见病虫害胁迫下其体内Bt蛋白的表达量变化。【结果】褐飞虱取食引起T1C-19水稻叶片中Bt蛋白含量降低,而黑尾叶蝉取食显著降低了T1C-19水稻叶鞘中的Bt蛋白含量,白叶枯病侵染导致Bt水稻叶鞘中的Bt蛋白含量显著上升。二化螟、水稻普通矮缩病、稻瘟病的胁迫对转基因水稻T1C-19叶片和叶鞘中的Bt蛋白含量均无显著影响。【结论】病虫害胁迫因种类不同对Bt水稻中Bt蛋白表达量的影响有所不同。这将为Bt水稻的抗虫效果评价提供数据基础,同时为Bt水稻病虫害综合治理提供科学依据。 展开更多

关键词 水稻 病虫害 胁迫 bt蛋白 表达量

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海口市郊菜地病虫害及其防治调研与Bt制剂应用 被引量：3

4

作者 白成 岳建军 +1 位作者 孙燕芳 龙海波 《热带农业科学》 2014年第11期75-79,88,共6页

调查海南省海口市郊区菜地病虫害的发生情况及防治现状,并对采用生物农药Bt制剂防治白菜地害虫的效果进行初步研究。结果表明:龙头村蔬菜基地主要害虫为小菜蛾和斜纹夜蛾,主要蔬菜病害为白菜根肿病,其它病、虫害不明显。从龙头村白菜地... 调查海南省海口市郊区菜地病虫害的发生情况及防治现状,并对采用生物农药Bt制剂防治白菜地害虫的效果进行初步研究。结果表明:龙头村蔬菜基地主要害虫为小菜蛾和斜纹夜蛾,主要蔬菜病害为白菜根肿病,其它病、虫害不明显。从龙头村白菜地分离到昆虫病原线虫,可以杀死害虫。野外试验结果证明,应用Bt制剂可有效防治白菜地害虫,此结果可为海南省蔬菜病虫害的防治提供一定的参考。 展开更多

关键词 病虫害 调查 bt 制剂 防治 应用

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转Bt基因抗虫棉新品种金杂棉3号抗枯萎病效果研究

5

作者 章志兴 张伟春 +2 位作者 鲍艳红 王旭华 鲍兰新 《现代农业科技》 2011年第11期178-179,共2页

转Bt基因抗虫棉新品种金杂棉3号对枯萎病抗性的研究结果表明,转Bt基因抗虫棉金杂棉3号是一个对棉花枯萎病抗性优良的新品种,其蕾期病指为0～3.91,表现为抗至高抗;后期劈杆调查病指为1.44～1.57,表现为高抗;苗期病指为16.00～54.83,表现... 转Bt基因抗虫棉新品种金杂棉3号对枯萎病抗性的研究结果表明,转Bt基因抗虫棉金杂棉3号是一个对棉花枯萎病抗性优良的新品种,其蕾期病指为0～3.91,表现为抗至高抗;后期劈杆调查病指为1.44～1.57,表现为高抗;苗期病指为16.00～54.83,表现为感。在生产中需进行种子处理和土壤处理等预防措施。 展开更多

关键词 转bt基因 金杂棉3号 枯萎病 抗性

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2023年云南省边境地区虫媒病毒病流行病学调查

6

作者 寇美玲 谢佳芮 +3 位作者 王轶男 苏晓航 宋建领 苗海生 《中国动物检疫》 CAS 2024年第12期34-38,共5页

为揭示云南省边境地区虫媒病毒病的流行病学本底,2023年对云南省8个边境地区的1630份牛血清样品进行了蓝舌病病毒(BTV)和阿卡斑病毒(AKAV)抗体检测和数据分析。结果显示:BTV和AKAV平均阳性率分别为83.68%、6.87%,8个边境地区均检出BTV和... 为揭示云南省边境地区虫媒病毒病的流行病学本底,2023年对云南省8个边境地区的1630份牛血清样品进行了蓝舌病病毒(BTV)和阿卡斑病毒(AKAV)抗体检测和数据分析。结果显示:BTV和AKAV平均阳性率分别为83.68%、6.87%,8个边境地区均检出BTV和AKAV抗体阳性样品;入境牛的BTV和AKAV抗体阳性率均显著高于本地牛(P<0.05);规模场的BTV抗体阳性率显著高于散养户(P<0.05);水牛的BTV抗体阳性率显著高于黄牛,黄牛的AKAV抗体阳性率显著高于水牛(P<0.05)。结果说明:云南省边境地区普遍存在BTV和AKAV感染,其中BTV感染较严重,但不同地区、不同来源、不同品种牛的感染情况存在差异。建议持续开展边境地区的虫媒病毒血清学监测工作,加大入境牛的检验检疫力度,督促养殖场户做好驱虫防虫工作,并不断提高其饲养管理水平。 展开更多

关键词 边境地区 蓝舌病 阿卡斑 竞争ELISA 流行病学调查

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广西家养反刍动物蓝舌病血清学监测分析 被引量：8

7

作者 林俊 白安斌 +3 位作者 华俊 闭丙芬 覃绍敏 吴健敏 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1580-1583,共4页

【目的】了解广西家养反刍动物蓝舌病毒(BTV)的感染情况,为防控广西蓝舌病(BT)提供参考依据。【方法】采用琼脂免疫扩散试验(AGID)对采自广西境内的2535份山羊血清和496份水牛血清进行BTV抗体检测,并对地理、气候因素与BTV区域分布情况... 【目的】了解广西家养反刍动物蓝舌病毒(BTV)的感染情况,为防控广西蓝舌病(BT)提供参考依据。【方法】采用琼脂免疫扩散试验(AGID)对采自广西境内的2535份山羊血清和496份水牛血清进行BTV抗体检测,并对地理、气候因素与BTV区域分布情况进行分析。【结果】广西山羊和水牛的总BTV抗体阳性率分别为36.53%和43.55%,且以南宁市的山羊、水牛BTV抗体阳性率最高,分别为78.13%和85.71%。广西家养反刍动物BTV抗体阳性率呈北低南高,高海拔地区BTV抗体阳性率低于低海拔地区,气温较高的南亚热带及北热带的BTV抗体阳性率高于气温较低的中亚热带,降水充沛的东部地区的BTV抗体阳性率高于降水较少的中部和西部地区。【结论】广西家养反刍动物普遍存在BTV感染,且分布受到纬度、海拔、气温与降雨量等地理、气候因素的影响。 展开更多

关键词 蓝舌病 家养反刍动物 抗体检测 阳性率 广西

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广西牛羊赤羽病和蓝舌病流行病学调查 被引量：14

8

作者 林俊 覃绍敏 +3 位作者 白安斌 曹颖颖 饶桂波 吴健敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期763-765,共3页

为了解赤羽病病毒（AKAV）和蓝舌病病毒（BTV）2种虫媒病毒（Arbovirus）在广西的流行与分布情况,本研究对采集自2010年～2011年广西11市的706份牛、羊血清样品进行检测,共检测出AKAV抗体阳性样品382份,总阳性率为54.11％.其中山羊血清8... 为了解赤羽病病毒（AKAV）和蓝舌病病毒（BTV）2种虫媒病毒（Arbovirus）在广西的流行与分布情况,本研究对采集自2010年～2011年广西11市的706份牛、羊血清样品进行检测,共检测出AKAV抗体阳性样品382份,总阳性率为54.11％.其中山羊血清82份,阳性率为28.37％（82/289）;牛血清300份,阳性率为71.94％（300/417）.BTV抗体阳性样品279份,总阳性率为39.52％.其中山羊血清95份,阳性率为32.87％（95/289）,牛血清样品184份,阳性率44.12％（184/417）.同时检测出2种虫媒病毒抗体185份,占样品总数的26.20％.本研究结果表明2种虫媒病毒在广西广泛流行,并首次证明广西存在AKAV的感染. 展开更多

关键词 血清学调查 赤羽病 蓝舌病 牛羊 广西

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4种重要虫媒病的核酸液相芯片高通量检测方法的建立 被引量：8

9

作者 詹爱军 王新卫 +5 位作者 卢体康 陈书琨 孙洁 陈兵 曾少灵 花群义 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期240-245,共6页

为建立可检测鹿流行性出血热病毒（EHDV）、阿卡斑病毒（AKV）、蓝舌病病毒（BTV）和水泡性口炎病毒（VSV）的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中BTV的VP7基因、EHDV的VP7基因、AKV的N基因和VSV的NP基因序列进行序列分析,... 为建立可检测鹿流行性出血热病毒（EHDV）、阿卡斑病毒（AKV）、蓝舌病病毒（BTV）和水泡性口炎病毒（VSV）的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中BTV的VP7基因、EHDV的VP7基因、AKV的N基因和VSV的NP基因序列进行序列分析,设计针对这些基因的特异性探针并标记生物素,分别与不同编号的荧光编码微球偶联后再与这些病毒相应基因的PCR产物杂交反应,用液相芯片检测仪（Liquichip 200）检测荧光信号建立了以上4种虫媒病的快速液相芯片检测方法。检测结果显示,该方法具有较好的特异性,偶联特异性探针的微球只与相应的病毒基因的PCR产物反应,而不与其他虫媒病病毒反应;检测灵敏度达到50~100个TCID50。本研究建立了可以同时检测鹿流行性出血热病毒、阿卡斑病毒、蓝舌病病毒和水泡性口炎病毒的快速高通量液相芯片技术,为其他类似病毒的快速高通量检测提供了借鉴和经验。 展开更多

关键词 鹿流行性出血热病毒 阿卡斑病毒 蓝舌病病毒 水泡性口炎病毒 液相芯片检测技术

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2015年内蒙古地区蓝舌病及流行性出血热流行病学调查及血清型鉴定 被引量：18

10

作者 张胜男 李华春 +6 位作者 朱建波 李乐 苗海生 肖雷 寇美玲 吴树清 常建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期939-943,共5页

为了解内蒙古地区蓝舌病（BT）、流行性出血热（EHD）的流行分布情况及存在的血清型,本研究于2015年采集来自内蒙古11个地区的701份反刍兽血清样品,其中包括绵羊244份、山羊347份、牛110份。通过竞争ELISA、中和试验等方法对待检样品分... 为了解内蒙古地区蓝舌病（BT）、流行性出血热（EHD）的流行分布情况及存在的血清型,本研究于2015年采集来自内蒙古11个地区的701份反刍兽血清样品,其中包括绵羊244份、山羊347份、牛110份。通过竞争ELISA、中和试验等方法对待检样品分别进行BT和EHD的抗体检测及血清型鉴定。竞争ELISA检测结果显示,701份反刍兽血清样品中,79份为BT抗体阳性,总阳性率为11.27%（79/701）,其中绵羊阳性率为10.25%（25/244）、山羊阳性率为15.56%（54/347）、牛均为阴性。此外,10份为EHD抗体阳性血清,总阳性率为1.43%（10/701）,其中绵羊阳性率为2.46%（6/244）、山羊阳性率为1.15%（4/347）、牛均为阴性。中和试验结果显示：ELISA检测阳性血清可以与BTV 7型、10型、23型发生中和反应,但对应的抗体效价较低（介于1∶5~1∶20之间）,无法判断阳性血清的具体血清型;EHD血清型主要为6型。研究结果表明,内蒙古地区BT和EHD流行分布广泛、具有明显的地区差异性。本研究为内蒙古地区BT和EHD防制提供了实验依据。 展开更多

关键词 蓝舌病 流行性出血热 流行病学调查 竞争ELISA 中和实验

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2014～2016年江苏省部分地区及监控点山羊的蓝舌病血清学调查 被引量：2

11

作者 杨蕾蕾 李文良 +8 位作者 毛立 许宝军 唐朝忠 杨恒 郝飞 张纹纹 邵坤 李华春 江杰元 《江西农业学报》 CAS 2018年第2期76-79,共4页

为了解蓝舌病病毒(BTV)在江苏省羊群中的感染和流行现状,采用C-ELISA试剂盒对2014~2016年采自江苏省9个市的419份羊血清进行了BTV抗体检测,共检出BTV抗体阳性样品30份,总阳性率为7.2%。在盱眙县桂五镇选择1个监控点,建立了BTV病原及抗... 为了解蓝舌病病毒(BTV)在江苏省羊群中的感染和流行现状,采用C-ELISA试剂盒对2014~2016年采自江苏省9个市的419份羊血清进行了BTV抗体检测,共检出BTV抗体阳性样品30份,总阳性率为7.2%。在盱眙县桂五镇选择1个监控点,建立了BTV病原及抗体阴性山羊5头的监控动物群。从2014~2017上半年,每年5~10月每周采血1次,11月~次年4月每月采血1次,并采用BTV C-ELISA试剂盒进行BT血清学监测。结果发现:每年自8月开始,羊BTV抗体检测出现阳性结果,至12月,除2014年外监控羊群检测全为BTV抗体阳性。每年5~8月采用灯光诱捕法捕捉监测点蚊蠓,发现相较2015和2016年,2014年的蚊蠓捕捉数量明显偏少。对盱眙县地理位置和历年气候变化的分析结果表明:在库蠓活动高峰时期的持续低温阴雨天气,对BTV的感染可能有严重干扰。 展开更多

关键词 蓝舌病 血清学调查 监控

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双价转基因抗虫低酚棉的抗病虫特性研究 被引量：4

12

作者 陈旭升 狄佳春 +2 位作者 许乃银 刘剑光 肖松华 《江西农业学报》 CAS 2004年第2期20-24,共5页

研究了2个转Bt+CPTI双价基因抗虫低酚棉"C020"和"C022"的抗虫性及抗病性,室内棉叶鉴定结果显示,2个抗虫低酚棉对棉铃虫的抗性表现为低抗,其抗性虽略高于常规有酚棉"泗棉3号",但明显不如抗虫有酚棉"S... 研究了2个转Bt+CPTI双价基因抗虫低酚棉"C020"和"C022"的抗虫性及抗病性,室内棉叶鉴定结果显示,2个抗虫低酚棉对棉铃虫的抗性表现为低抗,其抗性虽略高于常规有酚棉"泗棉3号",但明显不如抗虫有酚棉"SGKz9";而田间罩笼接蛾鉴定结果显示,2个抗虫低酚棉的抗性综合评价均表现高抗,其抗性等级与抗虫有酚棉"SGKz9"一致,明显优于有酚常规棉"泗棉3号"。但抗虫低酚棉的抗病性表现一般,其中"C020"高抗枯萎病、感黄萎病;"C022"耐枯萎病、感黄萎病。 展开更多

关键词 双价转基因抗虫低酚棉 抗病虫特性 抗性等级 bt+CPTI基因

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2019年云南省景洪市哨兵动物多种虫媒病毒的分离鉴定 被引量：2

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作者 杨振兴 寇美玲 +6 位作者 廖德芳 高翔 胡忠燕 李占鸿 谢佳芮 李华春 杨恒 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第12期4127-4137,共11页

本研究旨在了解云南省景洪市虫媒病毒的流行情况。2019年在景洪市勐罕镇设立了3头哨兵动物牛,定期采血进行虫媒病毒的分离与鉴定,共获得7株病毒分离物。经病毒核酸的RT-PCR鉴定,分离到2株血清型分别为6型和7型流行性出血热病毒(epizooti... 本研究旨在了解云南省景洪市虫媒病毒的流行情况。2019年在景洪市勐罕镇设立了3头哨兵动物牛,定期采血进行虫媒病毒的分离与鉴定,共获得7株病毒分离物。经病毒核酸的RT-PCR鉴定,分离到2株血清型分别为6型和7型流行性出血热病毒(epizootic haemorrhagic disease virus,EHDV),2株血清型分别为4型和5型的蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV),1株帕利亚血清群病毒(palyam serogroup virus,PALV)中的D’Aguilar virus(DAV)血清型病毒和2株未鉴定出的环状病毒。经病毒Seg-2、Seg-3序列ORF区的比对和进化分析显示,7株病毒的地域型均为Eastern型,与日本、澳大利亚和印度毒株具有最近的亲缘关系。3头哨兵动物的血液和血清,经病毒核酸及血清中和试验检测,证明3头动物均被相应的病毒感染。动物感染病毒后,血清中的特异性抗体迅速上升,3~4周后达最高点并能够在该水平维持较长时间,而血液中病毒核酸含量2~4周到达最高点后则呈迅速下降趋势。本研究报道了景洪虫媒病毒的分离、毒株序列特征以及在动物上的感染特性,研究结果为进一步了解当地的牛虫媒病毒提供数据支撑,同时3头牛分离获得7株病毒,提示当地可能还存在更多种类的虫媒病毒。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒(btV) 流行性出血病病毒(EHDV) 帕利亚血清群病毒(PALV) 病毒分离鉴定

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蓝舌病病毒基因产物及其生物学功能 被引量：1

14

作者 童亮 柴俊 +1 位作者 张以芳 肖晶 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第7期132-135,共4页

蓝舌病病毒(bluetongue disease virus,BTV)是呼肠孤病毒科环状病毒属的双股RNA病毒,其核酸由3个大片段(L1～L3)、3个中片段(M4～M6)和4个小片段(S7～S10)等10个节段组成,分别编码7种结构多肽(VP1～VP7)和4种非结构多肽(NS1、NS2、NS3a... 蓝舌病病毒(bluetongue disease virus,BTV)是呼肠孤病毒科环状病毒属的双股RNA病毒,其核酸由3个大片段(L1～L3)、3个中片段(M4～M6)和4个小片段(S7～S10)等10个节段组成,分别编码7种结构多肽(VP1～VP7)和4种非结构多肽(NS1、NS2、NS3a、NS3b)。通过dsRNA基因组进行体外翻译,再根据各基因与所编码蛋白的关系,查明了各基因编码的蛋白质及其分子质量和功能。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒 基因结构 基因产物 编码蛋白 生物学功能

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青海省牛羊蓝舌病血清学调查 被引量：9

15

作者 贺晓龙 《中国动物检疫》 CAS 2011年第3期62-63,共2页

从青海省玉树、共和、格尔木、果洛、大通、祁连、德令哈、同德8个地区采集牛羊血清样品413份,应用琼脂免疫扩散法对蓝舌病进行了血清学调查。结果在被检的209份羊血清中,共检出阳性血清样品4份,平均阳性率为1.91%;而在被检的204份牛血... 从青海省玉树、共和、格尔木、果洛、大通、祁连、德令哈、同德8个地区采集牛羊血清样品413份,应用琼脂免疫扩散法对蓝舌病进行了血清学调查。结果在被检的209份羊血清中,共检出阳性血清样品4份,平均阳性率为1.91%;而在被检的204份牛血清中则未检测到阳性样品。 展开更多

关键词 蓝舌病 血清学 调查 琼脂免疫扩散

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蓝舌病的研究现状 被引量：12

16

作者 殷丽霞 《吉林畜牧兽医》 2009年第5期8-10,共3页

蓝舌病是由蓝舌病病毒引起的、以昆虫为传播媒介的反刍动物的一种非接触性传染病。本文从蓝舌病的病原、流行病学、发病机理、临床症状、诊断及疫苗研究等方面进行了论述。

关键词 蓝舌病 流行病学 疫苗

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蓝舌病病毒、流行性出血病病毒和帕利亚姆血清群病毒三重RT-qPCR检测方法的建立及应用

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作者 杨振兴 李占鸿 +6 位作者 肖雷 谢佳芮 廖德芳 李卓然 李华春 朱建波 杨恒 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期17-25,共9页

【目的】建立蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)、流行性出血病病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)及帕利亚姆血清群病毒(Palyam serogroup virus,PALV)快速筛查和诊断的三重RT-qPCR检测技术。【方法】选择BTV的NS3、EHDV... 【目的】建立蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)、流行性出血病病毒(Epizootic hemorrhagic disease virus,EHDV)及帕利亚姆血清群病毒(Palyam serogroup virus,PALV)快速筛查和诊断的三重RT-qPCR检测技术。【方法】选择BTV的NS3、EHDV的NS1以及PALV的VP7基因作为靶基因,设计3组特异性引物和探针,建立3种病毒的三重RT-qPCR检测方法。对检测方法的灵敏度、特异性和重复性进行验证,同时使用我国分离的BTV、EHDV与PALV不同血清型毒株和对应的阳性血液样本,与24个BTV血清型及6个EHDV血清型参考毒株对该三重法的检测效果进行验证。【结果】三重RT-qPCR的扩增效率均可达90%以上,对3种病毒核酸拷贝数的检测下限均为10μL-1级别,与单重法的检测灵敏度相当;与阿卡斑病毒、小反刍兽疫病毒、口蹄疫病毒和牛流行热病毒之间无交叉反应;Ct值批内、批间变异系数均在2%以内;可检测出24种BTV血清型、6种EHDV血清型与3种PALV血清型,具有群特异性;可有效检测血液中的病毒核酸,检测结果与单重法一致。【结论】本研究建立的BTV、EHDV与PALV三重RT-qPCR具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于临床样本中对3种病毒的同时诊断与筛查。 展开更多

关键词 三重RT-qPCR 蓝舌病病毒 流行性出血病病毒 帕利亚姆血清群病毒 病毒检测

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蓝舌病在全球的分布概况 被引量：14

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作者 李茂林 张七斤 徐青元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期881-890,共10页

蓝舌病为OIE规定的需通报疫病,我国将其列为一类动物疫病。该病已经给全球大部分流行地区造成巨大经济损失。我国于1979年首次证明该病存在,且在我国流行初期即造成大量易感动物死亡,给我国畜牧业带来了重大经济损失。但蓝舌病在我国仍... 蓝舌病为OIE规定的需通报疫病,我国将其列为一类动物疫病。该病已经给全球大部分流行地区造成巨大经济损失。我国于1979年首次证明该病存在,且在我国流行初期即造成大量易感动物死亡,给我国畜牧业带来了重大经济损失。但蓝舌病在我国仍属冷门研究方向,我国到底分离鉴定出多少个血清型的蓝舌病病毒,该病在我国的分布范围到底有多广?许多畜牧兽医工作者对这些问题并不是非常清楚。特别是在近年来鲜有蓝舌病引起动物发病死亡报道的前提下,人们对蓝舌病的重视程度进一步降低。本文对蓝舌病在全球的流行概况进行简要阐述,同时,对蓝舌病在我国40年的流行情况进行回顾,希望该病在我国能够得到足够的重视。 展开更多

关键词 蓝舌病 疫病监测 病毒分离 疫病流行

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几种外来动物病毒多重普通和实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及其初步应用

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作者 赵文华 李富祥 杨仕标 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期27-33,38,共8页

为了能够同时开展对小反刍兽疫病毒(PPRV)、蓝舌病血清8型病毒(BTV8)、鹿流行性出血热血清1型病毒(EHDV1)和非洲马瘟病毒(AHSV)4种外来动物疫病病原体的核酸检测,本试验根据GenBank中相关病毒序列设计引物和探针,建立多重普通逆转录PCR(... 为了能够同时开展对小反刍兽疫病毒(PPRV)、蓝舌病血清8型病毒(BTV8)、鹿流行性出血热血清1型病毒(EHDV1)和非洲马瘟病毒(AHSV)4种外来动物疫病病原体的核酸检测,本试验根据GenBank中相关病毒序列设计引物和探针,建立多重普通逆转录PCR(RT-PCR)和实时荧光定量RT-PCR检测方法,并在采集的临床样本检测中进行初步应用验证。结果显示:建立的PPRV/BTV8/EHDV1三重实时荧光定量RT-PCR检测方法仅对PPRV、BTV8和EHDV1有特异荧光信号,检测敏感度可达10^(1.70)~10^(2.08) copies/μL DNA;建立的PPRV/BTV8/EHDV1/AHSV四重普通RT-PCR方法可特异性同步检测PPRV、BTV8、EHDV1和AHSV,检测敏感度可达10^(3) copies/μL DNA;2种方法对羊痘、羊口疮、口蹄疫、阿卡斑、牛病毒性腹泻等临床相似的病毒均无扩增。在925份临床样本中检测出1例PPRV核酸阳性样本;经核苷酸序列测定及BLAST比对确定为谱系Ⅳ型PPRV毒株序列。本试验所建立的三重实时荧光定量RT-PCR检测方法和四重普通RT-PCR方法可特异性同步检测相应的3种或4种病毒病原,且具有临床样本检测的应用潜力。 展开更多

关键词 小反刍兽疫病毒 蓝舌病病毒8型 流行性出血热病毒1型 非洲马瘟病毒 四重普通RT-PCR 三重实时荧光定量RT-PCR

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云南省边境地区送检牛血清样品蓝舌病病毒抗体检测与血清型鉴定 被引量：3

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作者 寇美玲 谢佳芮 +1 位作者 李乐 苗海生 《中国动物检疫》 CAS 2020年第10期16-20,共5页

为了解云南边境地区的蓝舌病流行和分布情况,采用竞争ELISA方法,2019年对云南省边境地区5个州市12个县(市)的1580份牛血清样品进行蓝舌病病毒抗体检测,同时从检出的阳性血清中,每县(市)随机选取15~55份,采用微量血清中和试验进行血清型... 为了解云南边境地区的蓝舌病流行和分布情况,采用竞争ELISA方法,2019年对云南省边境地区5个州市12个县(市)的1580份牛血清样品进行蓝舌病病毒抗体检测,同时从检出的阳性血清中,每县(市)随机选取15~55份,采用微量血清中和试验进行血清型鉴定。结果显示:12个边境县(市)均检出阳性血清样品,但有一定的地区差异,其中芒市最高(94.1%),沧源县最低(17.0%);本地牛和境外牛血清样品阳性率差异不大(P>0.05),均在70.0%以上;各县(市)均存在5个以上血清型的交叉感染。结果表明,蓝舌病在云南边境地区广泛存在,且呈多种血清型混合流行态势,需要持续开展血清学调查。本研究为我国西南边境地区蓝舌病防控提供了数据参考。 展开更多

关键词 蓝舌病 边境地区 竞争ELISA 微量血清中和试验 阳性率

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