采用碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶分步水解法从羊骨中提取羊骨生物活性肽(sheep bone bioactive peptides,SBBP),本研究评估了其结构、氨基酸组成、分子质量分布及黄嘌呤氧化酶抑制活性。结果表明,双酶分步水解改变了羊骨蛋白的二级结构...采用碱性蛋白酶和中性蛋白酶双酶分步水解法从羊骨中提取羊骨生物活性肽(sheep bone bioactive peptides,SBBP),本研究评估了其结构、氨基酸组成、分子质量分布及黄嘌呤氧化酶抑制活性。结果表明,双酶分步水解改变了羊骨蛋白的二级结构,所制备的SBBP富含疏水性氨基酸、芳香族氨基酸和碱性氨基酸,且<1000 Da的肽段占比高达94.48%。SBBP在体外显示出黄嘌呤氧化酶抑制作用(半抑制浓度为14.27 mg/mL)。在高尿酸血症小鼠模型中,SBBP通过抑制黄嘌呤氧化酶和腺苷脱氨酶活性,显著降低血清尿酸、肌酐和尿素氮水平,并减轻肾脏组织病理学损伤。研究表明,SBBP具备预防和缓解高尿酸血症的潜力。展开更多
以透析除盐制备的金华火腿浓浆为酶解底物,以水解度(Degree of Hydrolysis,DH)、肽得率结合感官评价筛选出酶解金华火腿最适蛋白酶,通过正交试验确定最适蛋白酶制备金华火腿酶解液。结果表明:胰蛋白酶最适合用于金华火腿酶解液的制备,...以透析除盐制备的金华火腿浓浆为酶解底物,以水解度(Degree of Hydrolysis,DH)、肽得率结合感官评价筛选出酶解金华火腿最适蛋白酶,通过正交试验确定最适蛋白酶制备金华火腿酶解液。结果表明:胰蛋白酶最适合用于金华火腿酶解液的制备,最佳酶解条件为酶底比1600 U/g,pH8.0,底物浓度10%,酶解温度37℃,酶解时间5 h,优化后酶解液水解度为9.74%,肽得率为40.60%。酶解肽的DPPH自由基清除率IC_(50)为8.02 mg/mL,ABTS+自由基清除率IC_(50)为4.61 mg/mL,具有良好的抗氧化性,但对Fe^(2+)螯合能力活性较低。酶解肽具有良好的乙醇脱氢酶(Alcohol Dehydrogenase,ADH)激活能力,1 mg/mL时激活率为65.62%。酶解肽的分子量主要集中在2000 Da以下,占肽总量的88.95%。通过液相色谱-质谱联用(Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS)共鉴定出3235条金华火腿酶解肽单肽,其主要来源为肌球蛋白、ABC转运蛋白和肌动蛋白。研究结果将为产业界挖掘金华火腿生物活性物质提供新思路,为火腿行业发展提供新途径。展开更多
