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Computational Simulation of Aptamer-target Binding Mechanisms 被引量:1
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作者 YANG Yuan-Yuan XU Fei WU Xiu-Xiu 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1550-1562,共13页
Aptamers are a type of single-chain oligonucleotide that can combine with a specific target.Due to their simple preparation,easy modification,stable structure and reusability,aptamers have been widely applied as bioch... Aptamers are a type of single-chain oligonucleotide that can combine with a specific target.Due to their simple preparation,easy modification,stable structure and reusability,aptamers have been widely applied as biochemical sensors for medicine,food safety and environmental monitoring.However,there is little research on aptamer-target binding mechanisms,which limits their application and development.Computational simulation has gained much attention for revealing aptamer-target binding mechanisms at the atomic level.This work summarizes the main simulation methods used in the mechanistic analysis of aptamer-target complexes,the characteristics of binding between aptamers and different targets(metal ions,small organic molecules,biomacromolecules,cells,bacteria and viruses),the types of aptamer-target interactions and the factors influencing their strength.It provides a reference for further use of simulations in understanding aptamer-target binding mechanisms. 展开更多
关键词 computational simulation aptamer TARGET binding mechanism intermolecular forces
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SELEX技术及Aptamer研究的新进展 被引量:19
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作者 邵宁生 李少华 黄燕苹 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第4期329-335,共7页
综述了近几年指数富集的配体系统进化(SELEX)技术的改良与寡核苷酸配基(aptamer)研究应用方面的新进展.Aptamer是指利用SELEX(systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment)技术,从随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶分子... 综述了近几年指数富集的配体系统进化(SELEX)技术的改良与寡核苷酸配基(aptamer)研究应用方面的新进展.Aptamer是指利用SELEX(systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment)技术,从随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶分子特异结合的短单链寡核苷酸配基,通常具有纳摩尔到皮摩尔的亲和力.高通量筛选的技术特点与aptamer精确识别、易体外合成与修饰等特性,使得aptamer在分析化学与生物医药研究方面具有广阔的应用前景. 展开更多
关键词 指数富集的配体系统进化(SELEX) 寡核苷酸配基(aptamer) 高通量筛选
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H22肿瘤细胞aptamer的筛选与结构分析 被引量:2
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作者 周宇凡 张桂梅 +2 位作者 冯作化 袁野 张志仁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2006年第6期841-844,909,共5页
目的:获得与H22肿瘤细胞特异性结合的aptamer。方法:利用SELEX技术,以小鼠DC细胞为反筛选细胞,以H22肿瘤细胞为靶细胞,从体外合成的80bp随机单链DNA文库中筛选出能与H 22肿瘤细胞特异结合的aptamer。采用荧光标记引物法检测aptamer与H 2... 目的:获得与H22肿瘤细胞特异性结合的aptamer。方法:利用SELEX技术,以小鼠DC细胞为反筛选细胞,以H22肿瘤细胞为靶细胞,从体外合成的80bp随机单链DNA文库中筛选出能与H 22肿瘤细胞特异结合的aptamer。采用荧光标记引物法检测aptamer与H 22肿瘤细胞的亲和力。所获得的aptamer采用MACAWv2.05软件进行aptamer序列的一级结构同源序列比较,用DNASIS v2.5软件计算分析序列最低二级结构能量值,获得其二级结构模拟图。结果:本实验设计的文库序列:5′-CGTCGCTGCACATTCCG-N46-CGCACAGCTGGGA GTAC-3′具有较高的扩增效率,适合于aptamer与以细胞为靶物质的筛选。经过11轮循环筛选,随机单链DNA文库与靶细胞结合的荧光强度从1%上升到59%,结合曲线进入平台期,表明结合已基本处于稳定状态,因此可以判断aptamer与靶细胞的结合基本已经处于饱和状态。对所获得的32个aptam er进行测序,然后进行一级结构和二级结构分析。一级结构分析获得5个保守序列:AGGGA、AGAAGG、GTGAXAA、ATAGT、CAAGG,其余10个aptamer无同源序列。二级结构分析表明,aptamer形成的茎环、凸环结构可能是与H 22肿瘤细胞特异性结合的结构基础。亲和力检测结果表明第24号aptamer具有最强的亲和力。结论:利用随机单链寡核苷酸文库成功获得与H22肿瘤细胞特异结合的aptamer,其一级和二级结构与亲和力密切相关。 展开更多
关键词 H22肿瘤细胞 SELEX aptamer
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An Aptamer-based Microelectrode with Tunable Linear Range for Monitoring of K^(+)Pin the Living Mouse Brain
4
作者 Yuan-Dong Liu Jia-Run Li +1 位作者 Li-Min Zhang Yang Tian 《电化学》 CAS 北大核心 2023年第6期48-55,共8页
Potassium ion(K^(+))is widely involved in several physiopathological processes,and its abnormal changes are closely related to the occurrence of brain diseases of cerebral ischemia.In vivo acquirement of K^(+)variatio... Potassium ion(K^(+))is widely involved in several physiopathological processes,and its abnormal changes are closely related to the occurrence of brain diseases of cerebral ischemia.In vivo acquirement of K^(+)variation is significant to understand the roles of K^(+)playing in brain functions.A microelectrode based on single-stranded DNA aptamers was developed for highly selective detection of K^(+)in brain,in which the aptamer probes were designed to contain an aptamer part for specific recognition of K^(+),an alkynyl group used for stable confinement of aptamer probe on the gold surface,and an electrochemical redox active ferrocene group to generate current response signal.The response range of the microelectrodes could be rationally tuned by varying the chain length of the aptamer probe.The optimized electrode,LAC,displayed high selectivity for in vivo detection of K^(+),and suitable linear range from 10 mmol·L-1e10 mmol·L-1,which could fulfill the requirement of K^(+)detection in brain.Eventually,the microelectrodes were successfully applied for the detection of K^(+)in the living mouse brains followed by hypoxic. 展开更多
关键词 aptamer Functional microelectrode Potassium ion Brain
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RNA类药物在疾病治疗中的研究进展 被引量:1
5
作者 彭艳 洪海燕 +1 位作者 焦炳华 倪健 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2004年第1期70-72,共3页
RNA类小分子可作为治疗性药物应用于各类疾病的治疗。这类小分子主要包括基因表达抑制剂、基因修复剂、蛋白拮抗剂及RNA疫苗,目前已有多种反义RNA和核酶作为基因表达抑制剂正在进行各期临床试验,它们主要用于心血管疾病、肿瘤、药物代... RNA类小分子可作为治疗性药物应用于各类疾病的治疗。这类小分子主要包括基因表达抑制剂、基因修复剂、蛋白拮抗剂及RNA疫苗,目前已有多种反义RNA和核酶作为基因表达抑制剂正在进行各期临床试验,它们主要用于心血管疾病、肿瘤、药物代谢性疾病、病毒性肝炎和艾滋病等疾病的治疗。蛋白拮抗剂aptamers已作为治疗老年性黄斑和血栓药物进入临床Ⅱ,Ⅲ期试验。RNA疫苗作为免疫调节剂治疗前列腺癌和肾癌的临床试验也在进行中。 展开更多
关键词 反义RNA aptamers RNA疫苗
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SELEX实验中核酸-蛋白复合物分离方法对富集库亲和力的影响
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作者 胡承香 顾长国 +1 位作者 朱旭东 李磊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期680-682,共3页
目的 比较SELEX实验中 ,核酸 蛋白复合物分离技术的差异对筛选富集库亲和力的影响。方法 以 β 转化生长因子Ⅱ型受体为靶目标 ,采用不同技术路线从ssDNA随机库中获取亲和富集库 :技术路线 1,靶目标预先被吸附到 96孔微量滴定板后 ,... 目的 比较SELEX实验中 ,核酸 蛋白复合物分离技术的差异对筛选富集库亲和力的影响。方法 以 β 转化生长因子Ⅱ型受体为靶目标 ,采用不同技术路线从ssDNA随机库中获取亲和富集库 :技术路线 1,靶目标预先被吸附到 96孔微量滴定板后 ,再进行筛选 ,从滴定板上洗脱结合核酸 ;技术路线 2 ,溶液中筛选、硝酸纤维膜截留核酸 蛋白复合物 ,从膜上回收结合核酸 ;通过膜结合测定、凝胶阻滞测定实验检测筛选富集库对靶目标的亲和力。结果 经 4轮筛选后 ,技术路线 1来源的富集库与初始随机库相似 ,对靶目标无亲和力 ;而技术路线 2来源富集库对靶目标的亲和力较初始随机库有显著提高。结论 SELEX实验中 ,溶液中筛选、膜截留结合核酸的技术路线与固 液相筛选、固相中直接获取结合核酸的途径相比较 。 展开更多
关键词 SELEX aptamer 富集库 亲和力
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靶向G蛋白偶联受体偏向性信号的药理学研究
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作者 孙金鹏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第B11期9-10,共2页
GPCR是临床处方药的最重要靶点,靶向单个G蛋白或Arrestin信号途径的药物开发是目前国际上的研究热点.我们应用蛋白组学的方法阐明了Arrestin偏向性信号途径的磷酸化网络[1],发展了体外定量鉴定受体偏向性配体的效价的融合蛋白同位素结... GPCR是临床处方药的最重要靶点,靶向单个G蛋白或Arrestin信号途径的药物开发是目前国际上的研究热点.我们应用蛋白组学的方法阐明了Arrestin偏向性信号途径的磷酸化网络[1],发展了体外定量鉴定受体偏向性配体的效价的融合蛋白同位素结合测定方法[2].我们在最新的研究中,应用非天然氨基酸整合技术和NMR方法发现了Arrestin偏向性信号途径的笛子模型,阐明了受体通过Arrestin进行信号转导的磷酸编码机制,提出了新假说[3].我们还在糖尿病的研究中,阐明了胆囊收缩素受体对胰岛功能及肾上腺素受体对胰岛稳态的调控作用[4,5],发展了靶向胆囊收缩素受体的偏向性Aptamer,为进一步治疗糖尿病的药物开发奠定了基础. 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 信号途径 靶向 胆囊收缩素受体 药理学 aptamer 非天然氨基酸 肾上腺素受体
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