第四纪晚期中国大型哺乳动物古DNA研究进展 被引量：1

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作者 盛桂莲 郑铭旻 +1 位作者 肖博 袁俊霞 《遗传》 北大核心 2025年第1期46-57,共12页

从古DNA视角探讨古代生物的遗传组成已有40多年历史。自2005年开始,随着高通量测序技术平台的开发应用及对小片段DNA分子提取能力的加强,古DNA研究跨入全新的深时古基因组时代,不仅解决了诸多生物谱系系统学问题,丰富了包括人类在内的... 从古DNA视角探讨古代生物的遗传组成已有40多年历史。自2005年开始,随着高通量测序技术平台的开发应用及对小片段DNA分子提取能力的加强,古DNA研究跨入全新的深时古基因组时代,不仅解决了诸多生物谱系系统学问题,丰富了包括人类在内的多种生物的迁移、演化细节,而且启动了“全基因组-大数据-多物种”尺度研究生物对气候变化的分子响应,将古DNA研究涉及的样品年代从10万年以内拓展到近200万年前的早更新世。中国科学家近几年在东亚人群遗传演化和迁徙融合方面实现了诸多有影响力的突破,填补了现代人类演化进程中的重要“缺环”。相比而言,学界对除人类之外的脊椎动物古DNA研究关注度较低。本文回顾了第四纪晚期中国大型哺乳动物古DNA研究系列进展,分别总结了相关研究在揭示古代群体与现生群体的系统演化关系、古哺乳动物基因交流、动物种群对气候变化的分子响应等方面的研究突破,并对中国哺乳动物古基因组领域面临的机遇和挑战进行了展望。 展开更多

关键词 古dna 第四纪晚期 哺乳动物 二代测序 分子演化

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古DNA揭示青藏高原西部阿里地区史前人群遗传演化及区域人群互动历史 被引量：1

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作者 白帆 何伟 +2 位作者 高玉 平婉菁 付巧妹 《遗传》 北大核心 2025年第5期501-512,共12页

阿里地区位于青藏高原西部高海拔地区,自然环境恶劣,但因毗邻尼泊尔、印度和拉达克地区,作为连接中国西藏、中国新疆、中亚、南亚的十字路口,在早期人类的迁移和文化交流中可能扮演着重要的角色。近年来的考古学研究认为早在公元7世纪... 阿里地区位于青藏高原西部高海拔地区,自然环境恶劣,但因毗邻尼泊尔、印度和拉达克地区,作为连接中国西藏、中国新疆、中亚、南亚的十字路口,在早期人类的迁移和文化交流中可能扮演着重要的角色。近年来的考古学研究认为早在公元7世纪吐蕃王朝建立之前,阿里地区与克什米尔、尼泊尔、中国新疆等地存在大量文化交流。此外,阿里地区的生业经济也表现出与南亚等地的联系。最新的古DNA研究则从遗传学角度呈现出阿里地区古人群的动态演化历史及与其他地区人群的遗传交流。研究发现高原西部阿里地区古人群的遗传成分主要来自高原南部地区,且高原南部存在多次向西部的人群扩张。同时,阿里地区至少在距今2,300年就开始与邻近的中亚及南亚地区的古人群存在复杂的遗传互动,表明阿里地区与中亚和南亚地区不仅有文化上的互动,而且人群之间亦有着遗传上的交流。本文综合阿里地区古遗传学、考古学及动植物考古等相关研究,系统阐释了高原西部地区古人群的遗传来源、其人群内部的遗传结构,及其与高原其他地区和高原以外地区之间的文化交流和遗传互动等科学问题,为理解青藏高原西部地区古人群迁徙互动历史及其与区域考古文化、生业经济变化模式的复杂关系提供了重要参考。 展开更多

关键词 青藏高原 阿里地区 古dna 考古文化 生业经济

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中国黄牛驯化与扩散的古DNA研究进展

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作者 李心怡 侯佳雯 +1 位作者 陈宁博 雷初朝 《中国牛业科学》 2025年第2期55-59,共5页

近年来,古DNA技术快速发展,其获得的古老基因组数据极大地提高了人们对家畜的地理驯化中心、驯化时间和迁徙扩散模式的认识,并为过去选择和管理家畜的方式提供了新的见解。为深入探讨中国黄牛的起源、驯化、扩散路径及遗传适应机制,文... 近年来,古DNA技术快速发展,其获得的古老基因组数据极大地提高了人们对家畜的地理驯化中心、驯化时间和迁徙扩散模式的认识,并为过去选择和管理家畜的方式提供了新的见解。为深入探讨中国黄牛的起源、驯化、扩散路径及遗传适应机制,文章系统梳理了中国黄牛的古基因组学研究进展,整合现有数据,重建了其驯化时间线及种群扩散模式。研究表明,古DNA技术揭示中国黄牛为外源引入,其驯化过程伴随多次基因交流事件。这些发现为我国黄牛遗传资源保护提供了分子依据。未来研究应着重填补关键演化节点的数据空白并加强跨学科合作,以全面解析中国黄牛的驯化历史。 展开更多

关键词 古dna 黄牛 驯化 扩散 基因交流

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宗日文化人群的来源和流向:古DNA的视角

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作者 禄佳妮 柳雷亮 《青海民族研究》 北大核心 2025年第3期13-22,共10页

宗日文化主要分布于青海省黄河上游龙羊峡及共和盆地,被认为是马家窑文化之后由藏缅语人群始祖群体创造的最古老考古学文化之一,但宗日文化人群在全体藏缅语人群演化过程中的谱系地位尚不十分清晰。古今DNA结合的精细谱系分析有助于确... 宗日文化主要分布于青海省黄河上游龙羊峡及共和盆地,被认为是马家窑文化之后由藏缅语人群始祖群体创造的最古老考古学文化之一,但宗日文化人群在全体藏缅语人群演化过程中的谱系地位尚不十分清晰。古今DNA结合的精细谱系分析有助于确定人群的渊源与流向。现代藏缅语人群普遍存在四类核心奠基者父系类型,其中只有一类(N-M1819)出现在宗日文化人群中,且宗日文化人群很可能是这一父系的直接渊源。然而,宗日文化人群的其他两类父系和四类母系在现代藏缅语人群中的比例很低,其后裔并不繁荣。考古学文化要素的相关分析与此图景大致吻合。宗日文化人群可视为藏缅语人群始祖群体内部多样的亚群体中的西部分支,其核心支系的后裔广泛扩散并成为现代藏缅语人群的重要组成部分之一,但其他支系则没有参与后世藏缅语人群的人口扩张。 展开更多

关键词 宗日文化 古dna 分子人类学 来源和流向

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考古文化背景下的青藏高原人群古DNA研究进展

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作者 韦兰海 柳雷亮 《青海民族研究》 北大核心 2025年第2期1-13,共13页

青藏高原人群的起源形成历史及其适应性演化过程一直是国内外学术研究的焦点。近年来,相关考古学和古DNA研究已取得多项进展。系统梳理考古遗址的考古学文化背景和考古学文化变迁过程有助于更清晰、准确地解读古DNA研究所揭示的人群起... 青藏高原人群的起源形成历史及其适应性演化过程一直是国内外学术研究的焦点。近年来,相关考古学和古DNA研究已取得多项进展。系统梳理考古遗址的考古学文化背景和考古学文化变迁过程有助于更清晰、准确地解读古DNA研究所揭示的人群起源和混合过程。经研究发现,宗日遗址古人等四五千年前的古代人群与现代高原人群的遗传结构已很接近,前者可视为后者的直接祖源。近5000年来,高原不同区域间发生了多批次、多方向和多历史层次的人群文化交流与深度融合,共同塑造了现代高原人群的广泛共性和区域差异。然而,当前的古DNA研究仍存在时空覆盖度不足和古今联合研究较为缺乏等问题。本领域还存在较多尚待解决的重难点问题和关键议题,有待开展更深入的多学科联合研究。 展开更多

关键词 青藏高原 古dna 分子人类学 考古文化 交往交流交融

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新疆察吾呼沟古代居民线粒体DNA序列多态性分析 被引量：15

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作者 谢承志 刘树柏 +2 位作者 崔银秋 朱泓 周慧 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期538-540,共3页

从距今2500~3000年的新疆察吾呼沟墓地的9例古代人骨中成功地提取出古DNA分子.用4对套叠引物对线粒体DNA高可变Ⅰ区进行了PCR扩增和测序,得到9个364bp的线粒体序列.从GenBank搜索其共享序列并与欧洲、亚洲序列进行系统发育分析,结果表明... 从距今2500~3000年的新疆察吾呼沟墓地的9例古代人骨中成功地提取出古DNA分子.用4对套叠引物对线粒体DNA高可变Ⅰ区进行了PCR扩增和测序,得到9个364bp的线粒体序列.从GenBank搜索其共享序列并与欧洲、亚洲序列进行系统发育分析,结果表明,早在青铜至早期铁器时代,在我国新疆天山中部地区已经有蒙古人种存在.察吾呼沟古代居民应是一个欧洲和东亚人种混合的古代群体. 展开更多

关键词 察吾呼 古dna 序列分析 多态现象

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交河故城古车师人的线粒体DNA分析 被引量：11

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作者 崔银秋 段然慧 +4 位作者 季朝能 朱泓 李惟 毛裕民 周慧 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期1510-1514,共5页

从距今 2 0 0 0～ 2 5 0 0年左右的交河故城古代人骨中提取古 DNA,用 4对重叠引物对线粒体基因组的调控区 (3 63 bp)进行了扩增及测序 .线粒体基因组编码区的扩增片段用于限制性片段多样性分析 .结果显示4个个体中具有 3个 DNA序列 ,其... 从距今 2 0 0 0～ 2 5 0 0年左右的交河故城古代人骨中提取古 DNA,用 4对重叠引物对线粒体基因组的调控区 (3 63 bp)进行了扩增及测序 .线粒体基因组编码区的扩增片段用于限制性片段多样性分析 .结果显示4个个体中具有 3个 DNA序列 ,其中来自不同墓穴的两个个体的序列相同 ,说明这两者间有密切的母系遗传关系 .系统发育分析表明古车师的这 4个个体分散分布在现代新疆维吾尔人的序列之中 .从这些结果可以初步得出结论 ,即古车师人群并不是一个同源群体 ,在早期铁器时代 。 展开更多

关键词 交河矿城 古车师人 线粒体 dna 测序 限制性片段多样性分析 系统发育分析 古人类学

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古代DNA研究实验技术 被引量：8

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作者 杨淑娟 赖旭龙 +1 位作者 唐先华 盛桂莲 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期551-554,共4页

现代分子生物技术的发展,使从古代样品中获取微量DNA成为现实。在过去的十多年里,古DNA研究取得了重大进展,但实验方案还需要加以改进,其结果的分析与推论也需要多方面的验证。本综述着重介绍了古DNA研究的实验技术及可靠性分析。

关键词 古代dna 实验技术 古代样品 可靠性

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沉积物中古DNA在古生态、古环境和古气候研究中的应用 被引量：9

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作者 侯卫国 董海良 +2 位作者 蒋宏忱 李高远 杨渐 《地学前缘》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期286-291,共6页

随着分子生物学技术的发展,DNA技术的应用逐渐从生物学研究拓展到进化、环境和气候变化等研究领域。因为DNA容易受到水解、氧化、紫外辐射、酶解等过程的破坏,所以人们认为DNA很容易降解,保存时间不长,但是近年来的研究成果显示,古生物... 随着分子生物学技术的发展,DNA技术的应用逐渐从生物学研究拓展到进化、环境和气候变化等研究领域。因为DNA容易受到水解、氧化、紫外辐射、酶解等过程的破坏,所以人们认为DNA很容易降解,保存时间不长,但是近年来的研究成果显示,古生物和古人类的化石或骨骼、冻土、湖泊海洋沉积物等样品中包含已保存数千年甚至长达数百万年以来的古DNA。古DNA作为重要的信息载体,可以诠释人类、动植物和微生物进化和迁移过程及它们对环境和气候变化的响应。反过来,古DNA在古环境、古气候重建方面也起着重要作用,沉积物样品的古DNA往往保存了历史时期的水体和水体周围环境以及气候变化等信息。通过对沉积物中古DNA的研究,可以获得历史时期的水生生物(包括藻类、水生动植物等)的群落演化,和水体周围岸基生活的动植物群落(植物落叶、动物毛发冲带到水体并沉积下来)演替,进而反演水体和水体周围气候环境以及气候变化信息。通过研究古人类和动物化石中保存的DNA,可以探讨人类的迁徙和进化过程,溯源家畜的驯化历史。本文将介绍环境古DNA的保存和可靠性评价,重点探讨古DNA在古生态以及古环境、古气候重建研究中的优势及应用,并展望古DNA在生物进化和环境研究等领域的应用前景。 展开更多

关键词 沉积物 古dna 古生态 古环境 古气候

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4种古DNA抽提方法效果比较 被引量：11

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作者 蔡大伟 王海晶 +3 位作者 韩璐 李胜男 周慧 朱泓 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期13-16,共4页

目的：寻找到一种简便、快速、可靠、有效的古DNA抽提方法。方法：选择基于硅粒法和硅离心柱法的四种抽提方法（方法A：Modified Silica ParticlesMethod；方法B：Ceneelean Method；方法C：QIAamp Method；方法D：Modified QIAquick me... 目的：寻找到一种简便、快速、可靠、有效的古DNA抽提方法。方法：选择基于硅粒法和硅离心柱法的四种抽提方法（方法A：Modified Silica ParticlesMethod；方法B：Ceneelean Method；方法C：QIAamp Method；方法D：Modified QIAquick method））分别抽提5个距今约4000年的古绵羊线粒体DNA（mtDNA），并进行PCR扩增，通过琼脂糖凝胶电泳观察扩增成功与否，根据扩增成功率判断抽提方法的优劣。结果：4种方法的扩增成功率从20％～100％，基于硅离心柱法的抽提效果（60％，100％）明显的优于基于硅粒法（20％，40％），其中Modified Silica Particles Method的效果最差（20％），Modified QIAquick Method的效果最好（100％）。结论：Modified QIAquick Method方法使用Centrieon超滤管浓缩DNA抽提裂解液，结合硅离心柱进行DNA纯化，能有效去除PCR抑制物，同时得到较好的古DNA模板。 展开更多

关键词 古dna dna抽提 硅粒 硅离心柱

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一种简便高效的古代动物毛皮DNA提取方法 被引量：9

11

作者 蔡大伟 于慧鑫 +2 位作者 赵欣 韩璐 周慧 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期689-693,共5页

采用试剂盒QIAamp DNA Mini Kit从距今4000年前新疆小河墓地出土的黄牛毛皮中提取出古DNA,并对黄牛线粒体D-loop区部分片段进行了PCR扩增和序列测定.结果表明:所提取的古DNA真实可信;且该方法简便、高效,适用于古代动物毛皮DNA的提取.

关键词 动物毛皮 古dna dna抽提 线粒体D-LOOP

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系统发育分析在古DNA研究中的应用 被引量：9

12

作者 张小雷 崔银秋 +1 位作者 吕慧英 周慧 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期696-701,共6页

介绍了系统发育分析的基本原理及各种构树方法的统计学基础,阐述了各种分析方法在古DNA数据分析中的具体应用,并对各种方法的优缺点进行了评价.分析了系统发育分析的局限性和发展趋势,以及古DNA研究的不断发展对其所提出的问题.

关键词 系统发育分析 古dna序列 分子进化 系统发育树

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古DNA实验体系及技术 被引量：16

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作者 盛桂莲 赖旭龙 侯新东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期116-125,共10页

古DNA研究至今已经历20多年时间,近年来,在生物系统进化和谱系发生等方面有着越来越广泛的应用.我国古DNA研究起步较晚,主要集中于我国近几千年来古人类DNA提取和个体及群体遗传关系的研究,其他动植物古DNA研究相对较少.国际上古DNA研... 古DNA研究至今已经历20多年时间,近年来,在生物系统进化和谱系发生等方面有着越来越广泛的应用.我国古DNA研究起步较晚,主要集中于我国近几千年来古人类DNA提取和个体及群体遗传关系的研究,其他动植物古DNA研究相对较少.国际上古DNA研究不仅涉及内容广泛,而且在实验体系的规范和结果论证等方面有着严格的标准.本文系统介绍了规范古DNA实验体系的具体建立方法,强调空白提取对照、PCR水对照等各类对照的设立及可重复性实验在古DNA序列可靠性验证中的重要作用;并对近年来古DNA研究的新方法、新技术,如多重PCR、第二代高通量测序技术等进行了详细介绍. 展开更多

关键词 古dna 实验体系 多重PCR 高通量测序技术 可靠性验证

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方兴未艾的古代DNA的研究 被引量：17

14

作者 蔡胜和 杨焕明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期41-46,共6页

保留在古代生物遗骸中的遗传物质DNA是一种重要的遗传资源。古代DNA的研究对于了解包括人类在内的各种生物的起源、进化和迁徙有重要意义。古代DNA的研究有其自身的特点 ,并且已经取得一系列重要成就。本文综述古代DNA研究的历史。

关键词 古代dna PCR 可靠性 dna

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一种实用可靠的古代DNA获取方法 被引量：4

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作者 刘冉冉 袁靖 +1 位作者 赵兴波 李宁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1495-1502,共8页

古代DNA序列信息能够为物种演化研究提供最直接的分子证据,但获取古代DNA的技术仍存在诸多瓶颈,尤其是扩增中存在受损伤DNA模板的干扰、获取成本高和实验周期长等问题.改进了异丙醇沉淀提取法,并采用了尿嘧啶糖苷酶(UNG)去除受损伤DNA... 古代DNA序列信息能够为物种演化研究提供最直接的分子证据,但获取古代DNA的技术仍存在诸多瓶颈,尤其是扩增中存在受损伤DNA模板的干扰、获取成本高和实验周期长等问题.改进了异丙醇沉淀提取法,并采用了尿嘧啶糖苷酶(UNG)去除受损伤DNA模板后进行扩增的方法,最终可以高效地获取真实的古代DNA序列.实验利用距今4300～3900年前的猪牙样本,将改进的古DNA获取方法与常规方法进行比较研究,结果表明,改进的异丙醇沉淀法提取结合UNG处理后进行PCR扩增的方法,可以在保证古代DNA获取成功率并提高获得的DNA序列可靠性的前提下,将经费投入和实验周期都各减少至常规方法的50%以下.这可以为开展大规模古代样本检测提供一种切实可行的DNA获取方法. 展开更多

关键词 古代dna dna提取 受损伤dna PCR

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内蒙古砧子山墓地古人的线粒体DNA多态性分析 被引量：4

16

作者 付玉芹 许雪莲 +3 位作者 王海晶 谢承志 周慧 朱泓 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期122-125,共4页

为了研究内蒙古元上都遗址砧子山墓地古代人群的遗传结构及其可能来源,对该墓地古人的DNA进行了抽提、扩增和测序,获得了10个个体的线粒体DNA高可变一区序列.结合现代东亚、北亚、中亚和欧洲人的线粒体DNA数据进行了系统发育分析和多维... 为了研究内蒙古元上都遗址砧子山墓地古代人群的遗传结构及其可能来源,对该墓地古人的DNA进行了抽提、扩增和测序,获得了10个个体的线粒体DNA高可变一区序列.结合现代东亚、北亚、中亚和欧洲人的线粒体DNA数据进行了系统发育分析和多维尺度分析.研究结果表明:埋藏在砧子山墓地的元代居民为汉族人,主要是来自中国北方地区的汉族.本研究为揭示元代的复杂社会结构和人群历史动态提供了新的方法. 展开更多

关键词 线粒体dna 古dna 统计学分析

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吐尔基山辽代贵族墓葬人骨遗骸线粒体DNA多态性分析 被引量：3

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作者 许月 张小雷 +3 位作者 张全超 崔银秋 周慧 朱泓 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期248-250,共3页

目的:利用分子生物学方法确定吐尔基山辽墓主人的身份及其与契丹贵族的关系。方法:对吐尔基山辽墓出土的人骨遗骸进行mtDNA研究,使用4对套叠引物对线粒体第一高可变区(360 bp)进行扩增和测序,利用契丹贵族人群的相关序列,对所得序列进... 目的:利用分子生物学方法确定吐尔基山辽墓主人的身份及其与契丹贵族的关系。方法:对吐尔基山辽墓出土的人骨遗骸进行mtDNA研究,使用4对套叠引物对线粒体第一高可变区(360 bp)进行扩增和测序,利用契丹贵族人群的相关序列,对所得序列进行分子系统学分析。结果:与剑桥序列进行比对,共有5个突变位点;系统发育分析结果表明,吐尔基辽与契丹贵族人群遗传距离最近,且在契丹贵族的2个家族中与耶律羽之家族的亲缘关系相对较近,验证了吐尔基山辽墓主人的贵族身份。此外,与其他已报道人群数据进行比较表明,吐尔基山辽墓主人与现代外蒙古人群遗传距离最近,其5个突变位点均为蒙古人的突变热点。结论:吐尔基山辽墓样本应属于北亚蒙古人种。 展开更多

关键词 吐尔基山辽墓 古dna dna 线粒体 系统发育分析

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夏家店等古人骨DNA的提取、扩增及序列分析 被引量：11

18

作者 万诚 崔银秋 +3 位作者 段然慧 周慧 朱泓 李惟 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期636-641,共6页

古DNA从距今 2 0 0 0～ 50 0 0年的古代人骨 (编号为 :M89,ⅢM11,ⅢM12和AM4 )中提取出来 ,利用聚合酶链式反应分别对线粒体DNA中MTND4 基因中 112 10～ 11414(2 0 5bp)以及RegionV中 8196～ 83 16(12 1bP)进行了扩增 ,并被测序 .实验... 古DNA从距今 2 0 0 0～ 50 0 0年的古代人骨 (编号为 :M89,ⅢM11,ⅢM12和AM4 )中提取出来 ,利用聚合酶链式反应分别对线粒体DNA中MTND4 基因中 112 10～ 11414(2 0 5bp)以及RegionV中 8196～ 83 16(12 1bP)进行了扩增 ,并被测序 .实验结果表明古代人骨中仍存在有大量的遗传信息 ,通过提取、扩增可以得到真实可靠的序列 .对序列进行比较发现 112 4 8,112 4 9,112 83及 112 93为易发生突变的位点 .结果经同源性分析后发现 ,ⅢM11和ⅢM12有很高同源性 ,而M89和AM4与ⅢM11和ⅢM12的同源性却比较低 .这对人类学、考古学及分子进化的研究有重要的辅助作用 . 展开更多

关键词 古人骨dna 提取 测序 同源性 扩增

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饮牛沟墓地古人骨线粒体DNA的研究 被引量：2

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作者 王海晶 常娥 +3 位作者 葛斌文 张全超 周慧 朱泓 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期847-852,共6页

对内蒙古饮牛沟战国时期墓地的古代人群(Yng古代人群)进行分子生物学研究,获得了线粒体高可变一区DNA序列,初步确定了单倍型归属并搜寻其共享序列,与现代人群对比构建系统发育树和多维尺度分析.结果表明,饮牛沟古代人群与现代东亚人群... 对内蒙古饮牛沟战国时期墓地的古代人群(Yng古代人群)进行分子生物学研究,获得了线粒体高可变一区DNA序列,初步确定了单倍型归属并搜寻其共享序列,与现代人群对比构建系统发育树和多维尺度分析.结果表明,饮牛沟古代人群与现代东亚人群在母系遗传关系上较近. 展开更多

关键词 线粒体dna 古dna 系统发育分析

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古DNA实时荧光定量PCR实验中标准品的制备 被引量：2

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作者 盛桂莲 吴恋娟 赖旭龙 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期386-391,共6页

实时荧光定量PCR技术通过对PCR每一循环扩增产物的实时检测,可对模板的精确拷贝数进行绝对定量,从而用于古DNA实验中提取和扩增条件的比较和优化.本研究采用异硫氰酸胍碱裂解-SiO2吸附的方法,从采自黑龙江省的晚更新世斑鬣狗化石材料中... 实时荧光定量PCR技术通过对PCR每一循环扩增产物的实时检测,可对模板的精确拷贝数进行绝对定量,从而用于古DNA实验中提取和扩增条件的比较和优化.本研究采用异硫氰酸胍碱裂解-SiO2吸附的方法,从采自黑龙江省的晚更新世斑鬣狗化石材料中提取得到了斑鬣狗线粒体基因组古DNA.经常规PCR扩增后,将纯化的扩增产物克隆到微生物体内使其大量复制,再用M13通用引物扩增出含少量外源DNA的古DNA目标片段,从而建立了适用于古DNA荧光定量PCR扩增的标准品的制备方法.经检测分析,运用该方法制备的标准品性质稳定,能够准确地指示反应体系中较为精确的古DNA模板拷贝数,从而反映古DNA的提取和扩增效率,用于比较并优化古DNA提取和扩增条件. 展开更多

关键词 古dna 实时荧光定量PCR 标准品

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