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siRNA沉默ASIC1a基因对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞凋亡的影响研究 被引量:4
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作者 江晟 陈飞虎 +5 位作者 陈寸知 荣超 胡伟 吴繁荣 葛金芳 唐杰 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第3期256-262,共7页
目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)技术诱导佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默对细胞凋亡的影响。方法:通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1asiRNA-FAM,使用Lipo-fectamine 2000转染试剂盒... 目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)技术诱导佐剂性关节炎(adjuvant-induced arthritis,AA)大鼠关节软骨细胞中ASIC1a表达沉默对细胞凋亡的影响。方法:通过化学合成法合成特异性荧光短链ASIC1asiRNA-FAM,使用Lipo-fectamine 2000转染试剂盒将ASIC1asiRNA转染入关节软骨细胞,采用荧光显微镜、流式细胞术、实时荧光定量PCR(q-RT-PCR)及WesternBlot法检测siRNA转染效率及其对ASIC1amRNA和蛋白表达的抑制作用。同时采用An-nexin-V/PI流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:ASIC1asiRNA能成功转入软骨细胞,转染后AA大鼠关节软骨细胞中ASIC1amRNA表达显著低于对照组(P<0.01),最大抑制率为85.4%;Western Blot结果显示,转染特异性siRNA后ASIC1a蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。Annexin-V/PI流式细胞术结果表明,与模型组相比,siRNA-3转染引起ASIC1a表达沉默后AA大鼠软骨细胞凋亡明显减少。结论:siRNA介导的AA大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达沉默模型是研究酸敏感离子通道对软骨细胞代谢影响的可靠模型,siRNA-3转染对胞外酸化刺激条件下AA大鼠关节软骨细胞凋亡的保护作用可能与其调节的表达有关。 展开更多
关键词 关节软骨细胞 酸敏感离子通道(asics) 阳离子脂质体 表达沉默 细胞凋亡
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大鼠背根神经节酸感受离子通道(ASICs)的药理学特性研究 被引量:5
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作者 艾平 刘振伟 +2 位作者 戴薇薇 张树卓 郑建全 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期33-37,共5页
目的研究大鼠背根神经节(DRG)细胞酸感受离子通道(ASICs)的电生理学和药理学特性。方法应用全细胞膜片钳技术,在急性分散的成年大鼠DRG细胞上记录并分析由不同浓度H+(降低pH值)诱发的ASICs电流。结果在266个大鼠DRG神经元上记录到由H+... 目的研究大鼠背根神经节(DRG)细胞酸感受离子通道(ASICs)的电生理学和药理学特性。方法应用全细胞膜片钳技术,在急性分散的成年大鼠DRG细胞上记录并分析由不同浓度H+(降低pH值)诱发的ASICs电流。结果在266个大鼠DRG神经元上记录到由H+诱发的3种不同类型的ASICs电流,分别为ASIC1样电流(n=66,24·8%)、ASIC2样电流(n=81,30·4%)和ASIC3样电流(n=119,44·7%)。ASIC1样电流具有快速失活成份,衰减快;ASIC2样电流具有稳态失活成份,衰减十分缓慢;而ASIC3样电流具有快速失活与稳态失活双相成份。三者均不具有整流现象。此3种电流对细胞外H+表现出不同的敏感性,H+诱发电流的pH50分别是:ASIC1-like,pH5·82;ASIC2-like,pH5·18;ASIC3-like,pH6·24。氨氯吡咪以浓度依赖性方式可逆性阻断大鼠DRG神经元的ASICs,对3种ASICs电流的抑制效应差异有显著性。其IC50分别为:ASIC1-like,19·86μmol·L-1;ASIC2-like,42·73μmol·L-1;ASIC3-like,27·91μmol·L-1。结论成年大鼠DRG神经元细胞上表达了3种不同类型的ASICs,且其在表达率、H+敏感性、失敏以及氨氯吡咪敏感性等方面差异均有显著性。 展开更多
关键词 酸感受离子通道 背根神经节 全细胞膜片钳 氨氯吡咪
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幽门螺杆菌感染胃炎患儿胃黏膜ASICs表达在胃肠道动力中的作用 被引量:8
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作者 王金坤 袁丽萍 +1 位作者 李欢 肖红云 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第6期755-758,共4页
目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染患儿胃黏膜中酸敏感离子通道(acid-sensing ion channels,ASICs)的表达及其在Hp感染胃炎胃肠功能中的作用。方法将22例经内镜诊断的胃炎患者分为幽门螺杆菌阳性组[Hp(+),n=11]和阴性组[H... 目的探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染患儿胃黏膜中酸敏感离子通道(acid-sensing ion channels,ASICs)的表达及其在Hp感染胃炎胃肠功能中的作用。方法将22例经内镜诊断的胃炎患者分为幽门螺杆菌阳性组[Hp(+),n=11]和阴性组[Hp(-),n=11]。免疫化学法检测胃炎患儿胃黏膜中ASICs的表达和定位。ELISA法测定血清CCK、SP、GAS和MTL水平。采用Pearson相关性分析ASIC3表达与胃肠道激素的相关性。结果 Hp感染患者胃黏膜ASIC3表达明显升高,血清CCK、SP、MTL水平明显升高。血清CCK、SP、MTL水平与ASIC3表达密切相关。结论 Hp可诱导胃黏膜ASIC3的表达,其影响Hp感染患者的胃肠激素分泌和胃肠功能。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道 幽门螺杆菌感染 胃炎
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酸敏感离子通道的功能及其相关调控 被引量:8
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作者 伍龙军 徐天乐 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期339-343,共5页
酸敏感离子通道 (ASICs)是一类由胞外酸化所激活的阳离子通道 .目前 ,已发现了 6个ASICs亚基 ,它们在外周和中枢神经系统中广泛表达 .利用基因敲除等技术 ,已证明它们在触觉、痛觉、酸味觉以及学习记忆中具有重要作用 .同时 ,它们也参... 酸敏感离子通道 (ASICs)是一类由胞外酸化所激活的阳离子通道 .目前 ,已发现了 6个ASICs亚基 ,它们在外周和中枢神经系统中广泛表达 .利用基因敲除等技术 ,已证明它们在触觉、痛觉、酸味觉以及学习记忆中具有重要作用 .同时 ,它们也参与某些病理反应 .ASICs可以被神经肽、温度、金属离子和缺血相关物质等调控 。 展开更多
关键词 酸敏感离子通道 功能 相关调控 asics亚基 细胞 信号
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酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利对佐剂性关节炎大鼠关节软骨细胞凋亡抑制作用的初步研究 被引量:5
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作者 张腾跃 陈飞虎 +3 位作者 王念 袁凤来 胡伟 吴繁荣 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第1期41-46,共6页
目的:研究酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利(Amiloride)对佐剂性关节炎(AIA)大鼠关节软骨组织的保护作用及机制。方法:将大鼠随机分为正常组、AIA模型组、阿米洛利(2.5、5.0、10.0mg·kg-1.d-1)组和阿司匹林(50mg/kg)对照组。弗氏完全... 目的:研究酸敏感离子通道阻断剂阿米洛利(Amiloride)对佐剂性关节炎(AIA)大鼠关节软骨组织的保护作用及机制。方法:将大鼠随机分为正常组、AIA模型组、阿米洛利(2.5、5.0、10.0mg·kg-1.d-1)组和阿司匹林(50mg/kg)对照组。弗氏完全佐剂(CFA)致AIA后第10天,大鼠出现继发性炎症,此时阿米洛利、阿司匹林灌胃给药,连续8d;正常组与模型组给予等容量的无菌注射用水。检测大鼠继发侧关节肿胀度,光学显微镜观察关节病理变化,透射电镜、Tunel法观察阿米洛利对AIA大鼠关节软骨细胞凋亡的影响,免疫组织化学技术测定阿米洛利对AIA大鼠关节软骨中的Ⅱ型胶原(COII)蛋白合成的影响,Alcian染色测定阿米洛利对AIA大鼠关节软骨中的PG合成的影响。结果:阿米洛利各剂量组对AIA大鼠的足肿胀未见明显影响;病理学观察关节软骨表面光滑,软骨细胞层次尚清晰,成熟软骨细胞数量增加;透射电镜观察软骨细胞核内异染色质轻度边集、细胞内粗面内质网轻度扩张、线粒体轻度肿胀,与模型组软骨细胞核膜皱缩、核染色质高度边集、核膜破裂、出现凋亡小体相比无明显细胞凋亡的特征;Tunel法原位检测显示凋亡阳性细胞数显著减少(P<0.01);免疫组化及Alcian染色检测显示关节软骨基质成分COII蛋白和PG的表达量增加。结论:ASICs阻断剂阿米洛利可通过抑制AIA大鼠关节软骨细胞凋亡发挥对关节软骨的保护作用。 展开更多
关键词 阿米洛利(Amiloride) 佐剂性关节炎(AIA) 酸敏感离子通道(asics) 细胞凋亡
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酸敏感离子通道研究进展 被引量:8
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作者 伍龙军 徐天乐 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期197-201,共5页
组织酸化是生理和病理下常见的现象 .神经元可以通过酸敏感的离子通道 (ASICs)来感受细胞周围的pH值的降低 .ASICs属于NaC DEG家族的一个成员 .目前 ,已发现了 6个ASICs亚基 ,它们在外周和中枢神经系统中广泛表达 ,其同聚体和异聚体通... 组织酸化是生理和病理下常见的现象 .神经元可以通过酸敏感的离子通道 (ASICs)来感受细胞周围的pH值的降低 .ASICs属于NaC DEG家族的一个成员 .目前 ,已发现了 6个ASICs亚基 ,它们在外周和中枢神经系统中广泛表达 ,其同聚体和异聚体通道有着各种不同的电生理学特性 .ASICs在机体感觉尤其是痛觉中起着至关重要的作用 . 展开更多
关键词 组织酸化 酸敏感离子通道 痛觉 研究进展
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酸感受性离子通道生物学特性及其调控 被引量:1
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作者 翁谢川 郑建全 +1 位作者 彭双清 李锦 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期13-17,共5页
酸感受离子通道(ASICs)为H+-门控的阳离子通道,是一类新的配体门控性离子通道,属于钠通道超家族的新成员.作为近来研究的热点,ASICs具有许多重要的生物学功能,并很有可能成为抗癫痫、镇痛、提高学习记忆能力和保护神经元缺血损伤作用药... 酸感受离子通道(ASICs)为H+-门控的阳离子通道,是一类新的配体门控性离子通道,属于钠通道超家族的新成员.作为近来研究的热点,ASICs具有许多重要的生物学功能,并很有可能成为抗癫痫、镇痛、提高学习记忆能力和保护神经元缺血损伤作用药理学新靶点.近来,ASICs各个亚基已被克隆,它们在生物体内分布、表达、功能和相关调节因素的研究正受到广泛重视. 展开更多
关键词 酸感受离子通道(asics) 钠通道 生物学特性 功能 调控
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酸敏感离子通道的研究进展 被引量:4
8
作者 张政 蔡炳祥 关永源 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1414-1417,共4页
酸敏感通道广泛表达于中枢与外周神经系统,在疼痛、伤害感觉中发挥了重要的作用。其分子结构与分布特点、调控机制以及在某些病理生理过程中的作用已经得到了部分阐明。未来对其研究将是离子通道研究领域的热门课题。
关键词 酸敏感通道 痛觉 伤害感觉 缺血
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触脑脊液神经元的研究进展 被引量:2
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作者 李瑞 刘海鹰 +4 位作者 王家瑶 郭保霖 高方 武胜昔 王文挺 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期633-637,共5页
触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-... 触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-cNs分泌不同的神经递质。以往研究CSF-cNs多采用脑室注射辣根过氧化物酶标记的霍乱毒素B亚单位(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)进行逆行追踪. 展开更多
关键词 触脑脊液神经元 POLYCYSTIN KIDNEY disease 2-like 1(PKD2L1) acid-sensing ion channels(asic)
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酸敏感离子通道对细胞外酸化时海马锥体神经元发作性和非发作性癫痫样活动具有不同调控作用 被引量:2
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作者 刘帅 陈荣清 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期972-980,共9页
目的探讨细胞外酸化时酸敏感离子通道(ASICs)对癫痫样活动的调控作用及其潜在机制。方法在海马脑片上使用场电位记录方法研究细胞外酸化对高钾环境的高钾模型和使用GABAA受体拮抗剂的去抑制模型的癫痫样活动的影响;使用全细胞膜片钳技... 目的探讨细胞外酸化时酸敏感离子通道(ASICs)对癫痫样活动的调控作用及其潜在机制。方法在海马脑片上使用场电位记录方法研究细胞外酸化对高钾环境的高钾模型和使用GABAA受体拮抗剂的去抑制模型的癫痫样活动的影响;使用全细胞膜片钳技术记录方法研究细胞外酸化对神经元的兴奋性的影响;使用ASICs拮抗剂研究ASICs对癫痫样活动和神经元兴奋性影响。结果细胞外酸化在高钾模型明显减弱癫痫样放电的程度(P<0.001),明显减少癫痫样活动的单次峰电位数量(P<0.01)及其幅度(P<0.001),并且癫痫样放电的模式从发作性癫痫样放电转换为发非发作性癫痫样放电;ASICs的拮抗剂不能阻断细胞外酸化对神经元兴奋性的抑制作用以及对癫痫样放电的模式的转换的作用;ASICs的拮抗剂在细胞外酸化条件下可增强非发作性癫痫样放电的活动(P<0.05)。在去抑制模型中,细胞外酸化对癫痫样活动的抑制和癫痫放电模式的转换作用与高钾模型一致;细胞外酸化可明显升高动作电位的阈电位(P<0.01)、半波宽(P<0.05)和达到动作电位峰值的时间(P<0.01),可明显降低神经元兴奋性,并且这种减弱作用不能被ASICs拮抗剂和GABAA受体拮抗剂阻断。结论ASICs可以直接作用于兴奋性神经元,对癫痫样放电中的发作性癫痫样放电和非发作性癫痫样放电的活动有不同的调控作用。 展开更多
关键词 癫痫 细胞外酸化 酸敏感离子通道 asics 场电位记录
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