期刊文献+
共找到41篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
基于YAP1/ACSL4/LPCAT3信号通路探讨槲皮素对LPS诱导的急性肺组织损伤小鼠铁死亡的抑制作用 被引量:1
1
作者 杨昊若 袁果 +2 位作者 任军华 樊茂蓉 杨斌 《中成药》 北大核心 2025年第4期1315-1320,共6页
目的探讨槲皮素对LPS诱导的急性肺组织损伤(ALI)小鼠铁死亡的抑制作用。方法小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组(5 mg/kg)及槲皮素高、低剂量组(100、10 mg/kg),每组10只,给药组灌胃给予相应剂量药物,对照组、模型组灌胃给予等体... 目的探讨槲皮素对LPS诱导的急性肺组织损伤(ALI)小鼠铁死亡的抑制作用。方法小鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组(5 mg/kg)及槲皮素高、低剂量组(100、10 mg/kg),每组10只,给药组灌胃给予相应剂量药物,对照组、模型组灌胃给予等体积生理盐水,每天1次,连续21 d。除对照组外,其余各组小鼠经鼻滴法给予LPS(50μg)构建ALI模型。测定双肺组织湿/干重比(W/D),细胞计数仪计数BALF炎性细胞总数,ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10水平,生化比色法及TBA法检测肺组织Fe^(2+)、MDA、4-HNE、GSH水平,HE染色观察肺组织病理变化,普鲁士蓝染色检测肺组织Fe^(2+)沉积,免疫荧光法检测肺组织ROS水平,免疫组化法及RT-qPCR法检测YAP1、ACSL4、LPCAT3、GPX4蛋白、mRNA表达。结果与对照组比较,模型组小鼠肺组织水肿严重,肺泡肿胀、变性,肺泡壁增厚,肺组织炎性细胞浸润明显,BALF炎症细胞总数及上清TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高(P<0.01),IL-10水平降低(P<0.01),肺组织MDA、4-HNE、ROS、Fe^(2+)水平升高(P<0.01),GSH水平降低(P<0.01),ACSL4、LPCAT3蛋白及mRNA表达升高(P<0.01),YAP1、GPX4蛋白及mRNA表达降低(P<0.01);与模型组比较,槲皮素各剂量组及地塞米松组肺组织水肿及肺组织细胞变性、坏死程度减轻,炎细胞浸润减少,肺组织病理损伤明显改善,BALF炎症细胞总数及上清TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.05),IL-10水平升高(P<0.05),肺组织MDA、4-HNE、Fe^(2+)、ROS水平均降低(P<0.05),GSH水平升高(P<0.05),ACSL4、LPCAT3蛋白及mRNA表达降低(P<0.05),YAP1、GPX4蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。结论槲皮素可抑制LPS诱导的急性肺组织损伤小鼠铁死亡,进而缓解肺组织病理损伤,修复肺组织功能,其机制可能与调控YAP1/ACSL4/LPCAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 槲皮素 急性肺组织损伤 铁死亡 炎症 yap1/ACSL4/LPCAT3信号通路
在线阅读 下载PDF
抑制YAP1提高肠道AKK菌丰度改善PD-1单抗相关肝损伤的机制
2
作者 路峻岚 龚艺 +6 位作者 张钰曼 高玉亭 杨彦广 梁华 岳圆 杨佳丽 石新丽 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期540-544,550,共6页
目的:探讨PD-1单抗治疗时,肝细胞特异性Yap1敲除小鼠提高Akkermansia muciniphila(AKK菌)的丰度并改善肝损伤的机制。方法:选用肝细胞特异性Yap1基因敲除小鼠(基因型为Yap1Flox/Flox;albumin-Cre,标记为Yap1LKO)和对照小鼠(基因型为Yap1... 目的:探讨PD-1单抗治疗时,肝细胞特异性Yap1敲除小鼠提高Akkermansia muciniphila(AKK菌)的丰度并改善肝损伤的机制。方法:选用肝细胞特异性Yap1基因敲除小鼠(基因型为Yap1Flox/Flox;albumin-Cre,标记为Yap1LKO)和对照小鼠(基因型为Yap1Flox/Flox,标记为Yap1Flox),采用马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)与四氯化碳(CCl4)诱导肝损伤模型,将Yap1LKO小鼠和Yap1Flox小鼠随机分为对照组和PD-1单抗组进行干预。干预结束后real-time PCR检测小鼠粪便微生物DNA中AKK菌的丰度变化,16S rRNA基因测序进一步分析肠道菌群变化,HE染色观察小鼠肝脏组织病理学改变。结果:Yap1Flox小鼠出现肝细胞气球样水肿变性、汇管区炎症因子浸润等现象;与Yap1Flox小鼠相比,Yap1LKO小鼠肠内AKK菌丰度降低,肝脏出现纤维化现象,损伤程度更重;单独PD-1单抗治疗不能提高小鼠肠内AKK菌的丰度且肝脏出现纤维增生现象;而PD-1单抗干预的Yap1LKO小鼠肠内AKK菌丰度增加、门水平上厚壁菌门(Firmicutes)与拟杆菌门(Bacteroidetes)的比值(F/B值)降低且肝细胞形态恢复正常、肝损伤程度减轻。结论:AAⅠ+CCl4导致的肝损伤小鼠模型中,肝细胞特异性Yap1敲除降低了肠道内AKK菌丰度,肝损伤程度比Yap1Flox小鼠严重;PD-1单抗治疗时,肝细胞特异性敲除Yap1能提高肠道内AKK菌的丰度、调节肠道菌群组成比例并减轻肝损伤的程度。 展开更多
关键词 PD-1单抗 yap1 Akkermansia muciniphila 肝损伤
在线阅读 下载PDF
miR-200a抑制YAP1基因表达对肺癌细胞增殖的影响 被引量:11
3
作者 许璐 方玉松 +2 位作者 王丹云 王宗明 许鹏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期311-315,共5页
目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表... 目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平。用CCK-8法检测miR-200a对A549肺癌细胞增殖活性的影响。通过生物信息学方法预测miR-200a可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-200a对靶基因YAP1的调控作用。CCK-8法检测下调靶基因YAP1对A549肺癌细胞株增殖活性的影响。结果:miR-200a在非小细胞肺癌组织和肺癌细胞系中表达明显降低(P<0.01)。上调miR-200a表达后明显抑制A549肺癌细胞的增殖活力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性(P<0.01),Real-time PCR和Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞YAP1 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01)。CCK-8法显示下调YAP1的表达能够明显抑制A549肺癌细胞的增殖活性(P<0.01)。结论:miR-200a通过靶向作用于YAP1基因来抑制肺癌细胞的增殖,从而在肺癌中发挥抑癌基因的功能。 展开更多
关键词 miR-200a 肺癌 yap1 增殖
在线阅读 下载PDF
YAP1和β-catenin在大肠癌中的表达及相关性研究 被引量:10
4
作者 陈顺华 尹玉 +2 位作者 曹立宇 张聪 李玉洁 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期836-840,共5页
目的探讨Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)和β-连环蛋白(β-catenin)在大肠癌组织中的表达及其与肠癌患者临床病理因素间的关系。方法应用免疫组织化学Envision二步法检测YAP1和β-catenin在99例人大肠癌组织及30例正常肠... 目的探讨Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)和β-连环蛋白(β-catenin)在大肠癌组织中的表达及其与肠癌患者临床病理因素间的关系。方法应用免疫组织化学Envision二步法检测YAP1和β-catenin在99例人大肠癌组织及30例正常肠黏膜组织中的表达状况。结果YAP1蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率为56.57%(56/99),显著高于正常肠黏膜组织16.67%(5/30)(χ2=14.704,P<0.01);β-catenin蛋白在大肠癌组织中的异位(细胞质/核)表达率为51.52%(51/99),明显高于正常肠黏膜组织0%(0/30)(χ2=25.559,P<0.01)。YAP1蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及临床Duke's分期均无关;β-catenin蛋白的细胞核表达与大肠癌的分化程度及浸润深度相关(χ2=6.641、4.229,P<0.05);β-catenin蛋白的细胞质表达水平与大肠癌的分化程度相关(χ2=6.761,P<0.05);β-catenin蛋白的细胞膜表达水平与临床病理因素均无关。β-catenin蛋白细胞质、细胞核的表达与YAP1细胞核、细胞质/核的表达呈正相关性(P<0.05);β-catenin蛋白细胞核表达与YAP1细胞质的表达呈正相关性(P<0.05)。结论 YAP1和β-catenin在大肠癌的发生发展中均具有重要作用,β-catenin细胞的核表达可能有助于大肠癌的预后判断。 展开更多
关键词 大肠癌 yap1 Β-CATENIN 免疫组织化学
在线阅读 下载PDF
miR-590-5p通过靶向抑制YAP1的表达抑制A375恶性黑素瘤细胞侵袭和迁移 被引量:7
5
作者 王丽娟 史圣甲 +4 位作者 周艳 穆欣 韩丹 葛睿 牟宽厚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期326-330,336,共6页
目的探索miR-590-5p在A375恶性黑素瘤细胞中的表达及其对A375细胞侵袭和迁移能力的影响和机制。方法应用实时定量PCR技术检测A375细胞与人正常黑素细胞中miR-590-5p的表达水平;应用TranswellTM实验和划痕实验检测miR-590-5p对A375细胞... 目的探索miR-590-5p在A375恶性黑素瘤细胞中的表达及其对A375细胞侵袭和迁移能力的影响和机制。方法应用实时定量PCR技术检测A375细胞与人正常黑素细胞中miR-590-5p的表达水平;应用TranswellTM实验和划痕实验检测miR-590-5p对A375细胞侵袭和迁移的影响;应用荧光素酶报告基因实验明确yes相关蛋白(YAP1)是否为miR-590-5p的直接靶分子;应用实时定量PCR及Western blot法检测miR-590-5p对YAP1表达水平的影响。结果 miR-590-5p在A375细胞中的表达水平显著低于正常黑素细胞;与对照(miR-590-5p-NC)组相比,miR-590-5p mimcs组细胞侵袭和迁移能力均受到显著抑制;YAP1为miR-590-5p的直接靶分子;与miR-590-5p-NC组相比,miR-590-5p mimcs组细胞中YAP1 mRNA及蛋白的表达均受到抑制。结论 miR-590-5p在A375细胞中低表达,并通过靶向抑制YAP1的表达调控A375细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 miR-590-5p yap1 侵袭 迁移 恶性黑素瘤
在线阅读 下载PDF
癌蛋白YAP1的研究进展 被引量:11
6
作者 郭海强 刘同阳 +1 位作者 贾舒婷 罗瑛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第3期254-259,共6页
Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)是Hippo信号通路(Hippo pathway)中的一个分子.早期研究人员发现,在Hippo信号通路正常的情况下,YAP1处于非激活状态;当Hippo信号通路中的某些分子出现突变时,YAP1处于超激活状态.此时,超激... Yes相关蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)是Hippo信号通路(Hippo pathway)中的一个分子.早期研究人员发现,在Hippo信号通路正常的情况下,YAP1处于非激活状态;当Hippo信号通路中的某些分子出现突变时,YAP1处于超激活状态.此时,超激活状态下的YAP1可以促进细胞增殖、转移、生存(survival)以及维持干细胞活性.由于YAP1的超激活可以促进肿瘤的发生与发展,因此,YAP1被定义为一个癌蛋白.近期,研究者发现,YAP1的突变体与小细胞肺癌病人的存活率有一定关系,YAP1与链蛋白(catenin)、Kras相互作用,调节肿瘤细胞的转移侵袭能力,此外,部分micro RNA也与YAP1有相互作用.基于YAP1的功能,可以制定一些抗癌策略,寻找一些抗癌靶点.本文对当前YAP1的研究进行综述,为肿瘤治疗的基础及临床研究提供一些依据. 展开更多
关键词 yap1 Hippo信号通路 超激活 增殖 转移
在线阅读 下载PDF
非小细胞肺癌中YAP1、SRPX2的表达与微血管密度及预后的相关性分析 被引量:12
7
作者 王婷婷 李忠华 +2 位作者 李慧峰 杨文秀 李晓蕾 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期264-269,共6页
目的探讨YAP1和SRPX2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达与微血管密度(microvessel density,MVD)及预后的关系。方法采用Western blot法检测NSCLC及其癌旁正常组织中YAP1和SRPX2的表达;采用免疫组化SP法检测NSCL... 目的探讨YAP1和SRPX2在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达与微血管密度(microvessel density,MVD)及预后的关系。方法采用Western blot法检测NSCLC及其癌旁正常组织中YAP1和SRPX2的表达;采用免疫组化SP法检测NSCLC及其癌旁正常组织中YAP1、SRPX2和CD34的表达,并结合临床病理特征进行相关性分析。结果Western blot实验显示YAP1和SRPX2在NSCLC组织中的表达均高于癌旁正常组织(P<0.05)。免疫组化结果显示YAP1和SRPX2在NSCLC组织中均阳性,阳性率分别为62.5%(50/80)和55%(44/80);YAP1、SRPX2的表达与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。YAP1和SRPX2阳性组的MVD值高于阴性组(P<0.05);NSCLC组织中YAP1和SRPX2表达水平均呈正相关(r=0.545,P<0.05),且YAP1和SRPX2表达与MVD值呈正相关。生存分析显示,YAP1和SRPX2阳性组生存期明显低于阴性组。结论YAP1和SRPX2在NSCLC中的表达具有相关性,两者可能在NSCLC的血管生成中发挥重要作用,联合检测YAP1和SRPX2的表达,可能为NSCLC的治疗提供新的预测指标和靶点。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 yap1 SRPX2 MVD 免疫组织化学
在线阅读 下载PDF
乳腺癌中Notch信号通路与YAP1/TAZ的交互作用研究 被引量:3
8
作者 赵琳 张玉姣 +5 位作者 雷福茜 罗安琪 景鑫 王璐 雷建军 邵珊 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期888-895,共8页
目的探讨Notch1与YAP1/TAZ在乳腺癌中的表达关系及其发病机制。方法选取MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞,利用慢病毒分别构建不同Notch1、YAP1表达水平的稳定感染细胞株,应用Western blotting、RT-qPCR、免疫共沉淀技术研究Notch1与YAP1/TA... 目的探讨Notch1与YAP1/TAZ在乳腺癌中的表达关系及其发病机制。方法选取MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞,利用慢病毒分别构建不同Notch1、YAP1表达水平的稳定感染细胞株,应用Western blotting、RT-qPCR、免疫共沉淀技术研究Notch1与YAP1/TAZ之间的关系。结果通过基因表达谱交互分析(gene expression profiling interactive analysis,GEPIA),对肿瘤基因图谱数据库(the Cancer Genome Atlas,TCGA)中的乳腺癌数据分析发现,Notch1与YAP1/TAZ之间表达呈正相关;与对照组相比,shNotch1组YAP1/TAZ的蛋白水平与mRNA水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.05),N1ICD组YAP1/TAZ的蛋白表达水平升高,mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05),在Notch1过表达的MDA-MB-231细胞中,TAZ降解被抑制;免疫共沉淀实验结果显示,TAZ蛋白与Notch1、β-TrCP蛋白存在相互作用;与对照组相比,shYAP1组Notch1、JAG1的mRNA水平及蛋白水平均降低(P<0.05),YAP1组Notch1、JAG1的mRNA水平及蛋白水平均升高,差异具有统计学意义(P<0.05);JASPAR 2018网站预测TEAD家族为JAG1的转录因子;当siTEAD1/3/4#1、#2有效抑制TEAD1/3/4mRNA的转录与蛋白表达时,JAG1的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。结论在乳腺癌中,Notch1与YAP1/TAZ存在正反馈环路。YAP1/TAZ可能通过与TEAD家族结合调节JAG1的表达,活化Notch1信号通路。Notch1蛋白影响YAP1/TAZ蛋白的降解。 展开更多
关键词 乳腺癌 NOTCH1 yap1/TAZ TEAD
在线阅读 下载PDF
YAP1在肿瘤生长中的双向调控作用及其临床应用前景 被引量:5
9
作者 王海 陈肖 王建东 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期200-203,共4页
Hippo信号通路的主要功能是调控细胞生长、增殖和凋亡;YAP1是其下游的重要分子,主要负责细胞的增殖和转移。YAP1过表达与肿瘤演进和较差的预后高度相关。近年有文献报道YAP1在一部分肿瘤中(如乳腺癌)可能抑制肿瘤生长,诱导肿瘤凋亡。因... Hippo信号通路的主要功能是调控细胞生长、增殖和凋亡;YAP1是其下游的重要分子,主要负责细胞的增殖和转移。YAP1过表达与肿瘤演进和较差的预后高度相关。近年有文献报道YAP1在一部分肿瘤中(如乳腺癌)可能抑制肿瘤生长,诱导肿瘤凋亡。因此,YAP1在人类肿瘤中具有抑癌和促癌的双向作用,作用方式取决于组织类型。该文将对现阶段有关YAP1促癌和抑癌的功能研究进展作一综述,进一步探讨YAP1在肿瘤患者预后及治疗中的意义。 展开更多
关键词 肿瘤 yap1 HIPPO 文献综述
在线阅读 下载PDF
表达工程化剪接因子腺病毒的构建及其在调控乳鼠心肌细胞中的YAP1可变剪接中的应用 被引量:1
10
作者 李阳 赵倩 +1 位作者 宋晓伟 宋金超 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1013-1018,共6页
目的构建人工剪接因子,实现调控心肌细胞YAP1的可变剪接。方法本研究根据Pumilio1的序列特异性,针对YAP1的Exon6构建不同序列的剪接因子。实验分为3组:野生型PUF-SR作为阴性对照组、人工化的PUF-SR腺病毒转染组、质粒转染组。实验流程:... 目的构建人工剪接因子,实现调控心肌细胞YAP1的可变剪接。方法本研究根据Pumilio1的序列特异性,针对YAP1的Exon6构建不同序列的剪接因子。实验分为3组:野生型PUF-SR作为阴性对照组、人工化的PUF-SR腺病毒转染组、质粒转染组。实验流程:使用同源重组的方法构建腺病毒,将人工化的PUF-SR的PCR片段克隆到pAd-Track质粒中,再将重组质粒转化到大肠杆菌DH5α中进行质粒扩增。扩增后的质粒经PacⅠ酶切后,转染到293A细胞,进行腺病毒包装。将得到的腺病毒载体转染到培育的乳鼠心肌细胞中。选用Ad-Track质粒用于对照转染组,通过载体转染法将其转染到乳鼠心肌细胞中。定量和半定量PCR法检测YAP1的可变剪接,Westernblot法检测融合蛋白Flag的信号,并使用GAPDH抗体检测GAPDH作为加载对照。结果腺病毒转染组对心肌细胞的转染效率接近100%,质粒转染组中并没有发现荧光蛋白。在Westernblot实验中,阴性对照和靶向YAPExon6XULIE序列的Flag-SR-NLS-PUF都能够检测到融合Flag的蛋白的表达。在反转录PCR和PCR检测YAP1的可变剪接实验中,结果都显示YAP1的第4个target序列所构建的人工剪接因子能够有效调控YAP1 Exon 6的剪入(P<0.05)。结论本实验成功构建出能够调控YAP1可变剪接的腺病毒,并且在SD大鼠的心肌细胞中得到了验证。 展开更多
关键词 工程化剪接因子 腺病毒 yap1 可变剪接
在线阅读 下载PDF
TEAD1和YAP1对牛干扰素Tau基因表达调控的试验 被引量:1
11
作者 张金凤 侯振中 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2013年第5期26-29,共4页
为研究TEAD1和YAP1对牛IFNT基因的表达调控,利用PCR分析检测牛胚胎及各脏器中TEAD1和YAP1的表达情况。并通过IFNT荧光素酶报告基因,分析TEAD1和YAP1对牛IFNT基因在JEG3细胞中表达的影响。结果显示,TEAD1和YAP1基因在牛着床前胚胎中及各... 为研究TEAD1和YAP1对牛IFNT基因的表达调控,利用PCR分析检测牛胚胎及各脏器中TEAD1和YAP1的表达情况。并通过IFNT荧光素酶报告基因,分析TEAD1和YAP1对牛IFNT基因在JEG3细胞中表达的影响。结果显示,TEAD1和YAP1基因在牛着床前胚胎中及各脏器中都有表达。荧光素酶分析表明,在IFNT基因5′端上游区域逐渐切除或者点突变的情况下,YAP1对IFNT基因的表达都有显著的上调作用;TEAD1对IFNT基因表达的影响不显著;TEAD1和YAP1共同作用时,协同效果不显著。 展开更多
关键词 TEAD1 yap1 IFNT
在线阅读 下载PDF
绵羊YAP1基因的克隆及其真核表达载体和突变型载体的构建
12
作者 李达 孙伟 +6 位作者 苏锐 张占英 马月辉 张有法 陈玲 吴文忠 周洪 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1198-1204,共7页
本研究旨在克隆绵羊YAP1基因CDS序列,构建并鉴定其真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A。本研究利用RT-PCR技术,从湖羊背最长肌克隆YAP1基因编码区序列,T-A克隆到pMD 19-T载体中,进行测序。利用酶切和T4... 本研究旨在克隆绵羊YAP1基因CDS序列,构建并鉴定其真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A。本研究利用RT-PCR技术,从湖羊背最长肌克隆YAP1基因编码区序列,T-A克隆到pMD 19-T载体中,进行测序。利用酶切和T4连接酶连接方法,将YAP1基因编码区克隆到pEGFP-C 1载体中,构建pEGFP-C 1-YAP1真核表达载体,以真核表达载体为模板,构建磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A,2种载体均进行PCR、BamHⅠ和XhoⅠ双酶切、BamHⅠ单酶切及测序鉴定。结果克隆出YAP1基因的全长cDNA序列,获得GenBank登录号JQ 714252,其长度为1 712bp,编码区1 212bp,编码403个氨基酸。重组质粒pEGFP-C1-YAP1经PCR、酶切、测序鉴定,证实YAP1基因CDS区已正确克隆入pEGFP-C1表达载体;经测序鉴定,YAP1第42位丝氨酸成功突变为丙氨酸。本研究成功克隆绵羊YAP1基因全长cDNA序列,并构建了重组真核表达质粒pEGFP-C1-YAP1及磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A,为进一步研究YAP1蛋白表达及其生物学活性奠定基础。 展开更多
关键词 绵羊 yap1基因 真核表达载体 磷酸化位点突变体
在线阅读 下载PDF
缺氧环境下YAP1的表达对子痫前期胎盘血管形成的影响及作用机制 被引量:3
13
作者 潘怡霞 刘睿 +2 位作者 卫婵 马强 王慰敏 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期547-553,共7页
目的探讨缺氧环境下维替泊芬抑制Yes-相关蛋白1(Yes-associated protein1,YAP1)表达对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡、迁移、侵袭能力和血管生成能力的影响,以及影响子痫前期胎盘血管形成的可能机制。方法MTT法检测缺氧环境下不同质量浓... 目的探讨缺氧环境下维替泊芬抑制Yes-相关蛋白1(Yes-associated protein1,YAP1)表达对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡、迁移、侵袭能力和血管生成能力的影响,以及影响子痫前期胎盘血管形成的可能机制。方法MTT法检测缺氧环境下不同质量浓度(0、4、8、12、16μg/mL)维替泊芬处理HUVEC 12、24 h时的细胞活性并计算IC50值,以选择后续实验药物浓度。流式细胞术分析缺氧环境下维替泊芬对HUVEC凋亡的影响;细胞划痕实验和Transwell小室实验检测缺氧环境下维替泊芬对HUVEC迁移、侵袭能力的影响;小管形成实验检测缺氧环境下维替泊芬对HUVEC血管生成能力的影响。Western blotting检测常氧及缺氧环境下维替泊芬对Hippo信号通路中YAP1、TEA转录因子1(TEAD1)蛋白表达的影响。结果缺氧环境下,维替泊芬处理HUVEC 12、24 h的IC50值分别为13.26、16.74μg/mL;使用维替泊芬可抑制HUVEC增殖(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与对照组相比,在缺氧环境下维替泊芬能诱导HUVEC凋亡(P<0.01)。细胞划痕、Transwell小室及小管形成实验结果显示,与对照组相比,在缺氧环境下使用维替泊芬抑制YAP1表达能够抑制HUVEC迁移、侵袭及血管形成能力(P<0.05)。Western blotting结果显示,在常氧环境下及缺氧环境下,维替泊芬处理HUVEC 24 h后YAP1及TEAD1蛋白表达均降低(P<0.01)。结论在缺氧环境下,维替泊芬通过抑制YAP1及TEAD1的蛋白表达而抑制HUVEC细胞增殖、促进细胞凋亡,并降低其迁移、侵袭能力和血管生成能力。证实Hippo-YAP1信号通路可能通过调控血管内皮细胞增殖和侵袭、影响子痫前期胎盘血管形成,参与子痫前期的发生。 展开更多
关键词 子痫前期 缺氧 Yes-相关蛋白1(yap1) 人血管内皮细胞 凋亡 侵袭 血管形成
在线阅读 下载PDF
虎杖苷调节YAP1/TAZ信号通路对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖与凋亡的影响 被引量:2
14
作者 刘文光 刘思佟 +5 位作者 张薇薇 庄桂银 谢思雨 田雪 李晓珊 谷强 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期68-74,共7页
目的 探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+... 目的 探究虎杖苷(PD)对缺氧性肺动脉高压(HPH)新生大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖与凋亡的影响及其作用机制。方法 将新生大鼠随机分为6组:对照组、模型组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+Hippo通路抑制剂(PD高剂量+XMU-MP-1)组,每组10只。缺氧2周后,检测各组大鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理学变化,并计算肺动脉管壁厚度占总厚度的百分比(WT%)和管壁面积占总面积的百分比(WA%)。分离各组新生大鼠PASMCs,分为NC组、低氧(Hypoxia)组、PD低剂量组、PD中剂量组、PD高剂量组、PD高剂量+XMU-MP-1组。CCK-8和EdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹(Western blot)检测肺组织和PASMCs中Yes相关蛋白1(YAP1)、PDZ结合域的转录共刺激因子信号通路(TAZ)、哺乳动物不育系20样激酶1(MST1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠肺动脉管壁明显增厚,管腔变窄,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著升高(均P<0.05);与模型组相比,PD低、中、高剂量组大鼠肺动脉增厚减少,管腔变大,RVSP、RVHI、WT%、WA%、YAP1、MST1、TAZ蛋白表达显著降低,且PD各组间差异存在剂量依赖性(均P<0.05);XMU-MP-1可逆转这一结果。与NC组相比,Hypoxia组细胞A_(450nm)值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著升高,凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(均P<0.05);与Hypoxia组相比,PD低、中、高剂量组细胞A_(450nm)值、EdU阳性率、YAP1、MST1、TAZ、Bcl-2蛋白表达显著降低,凋亡率、Bax表达显著升高,且PD各组间有剂量依赖性(均P<0.05);XMU-MP-1可逆转这一结果。结论 PD可能通过抑制YAP1/TAZ信号通路抑制HPH新生大鼠PASMCs增殖,促进凋亡。 展开更多
关键词 缺氧性肺动脉高压 虎杖苷 肺动脉平滑肌细胞 增殖 凋亡 yap1/TAZ信号通路
在线阅读 下载PDF
YAP1在发情期不同繁殖力湖羊子宫内膜中的表达模式及功能分析 被引量:2
15
作者 王雅涵 郑宇婧 +2 位作者 钟沛 李晓丹 王锋 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期189-200,共12页
旨在分析Hippo信号通路的效应基因YAP1在不同繁殖力湖羊子宫内膜中的表达模式及功能。本研究根据系谱档案和BMPR-1B基因多态性分析,将9只体况相近且健康的经产母羊分为3组(HBB、LBB以及LB+,n=3)。提取不同繁殖力湖羊子宫内膜组织RNA,并... 旨在分析Hippo信号通路的效应基因YAP1在不同繁殖力湖羊子宫内膜中的表达模式及功能。本研究根据系谱档案和BMPR-1B基因多态性分析,将9只体况相近且健康的经产母羊分为3组(HBB、LBB以及LB+,n=3)。提取不同繁殖力湖羊子宫内膜组织RNA,并反转录为cDNA,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)分析Hippo信号通路中几个主效基因的表达模式。运用生物信息学方法分析YAP1在不同物种间的氨基酸同源性及其亲缘关系。体外分离湖羊子宫内膜基质细胞,利用RNA干扰和细胞转染技术体外干扰YAP1,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)分析YAP1基因对子宫容受性相关基因的影响。利用流式细胞术分析干扰YAP1对细胞凋亡的影响,同时利用RT-qPCR和Western blot检测干扰YAP1后凋亡及线粒体相关基因的表达。结果显示,Hippo信号通路中YAP1、LATS1、MST1基因在不同繁殖力湖羊子宫内膜组织中的表达水平存在差异,其中YAP1基因在高繁殖力(HBB)湖羊子宫内膜中的表达量显著高于两组低繁殖力(LB+、LBB)湖羊;氨基酸同源性及系统进化树分析显示,绵羊YAP1蛋白与山羊和牛的同源性最高,亲缘关系最近;干扰YAP1基因后,子宫内膜基质细胞中容受性相关基因(FOXO1、PRL、VEGF、OPN、COX-2)的mRNA表达水平均发生了显著的变化。同时,子宫内膜基质细胞的凋亡率显著升高,凋亡相关基因Bax、BIM、p53、caspase3、caspase8、caspase9表达水平及Bax/Bcl-2的比值显著升高,Bcl-2表达水平显著下调。此外,线粒体功能相关基因(FIS1、DNM1L、MFN2、PPARGC1A、OPA1)mRNA表达水平也发生了显著变化。YAP1可能通过抑制细胞凋亡和稳定线粒体功能等途径建立良好的子宫内膜容受性。 展开更多
关键词 湖羊 Hippo通路 yap1 子宫容受性
在线阅读 下载PDF
miR-186介导YAP1调控乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭 被引量:1
16
作者 秦福霞 杜娟 +4 位作者 吴琦 董哲 杨恩帅 刘金丽 郭素芬 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期469-472,共4页
目的探讨miR-186介导的YAP1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用qRT-PCR和Western blot法检测miR-186、YAP1蛋白在正常乳腺细胞MDA-kb2及人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达;利用Lipofectamine 2000试剂将miR-186 mimic转染至乳... 目的探讨miR-186介导的YAP1对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用qRT-PCR和Western blot法检测miR-186、YAP1蛋白在正常乳腺细胞MDA-kb2及人乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达;利用Lipofectamine 2000试剂将miR-186 mimic转染至乳腺癌细胞,荧光显微镜下观察转染效率;采用CCK-8法检测乳腺癌细胞的增殖能力;细胞划痕实验检测细胞的迁移能力;Transwell细胞侵袭实验检测细胞的侵袭能力;Western blot法检测YAP1蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-186与YAP1的靶向关系。结果与正常乳腺细胞相比,乳腺癌细胞中miR-186表达量显著减少(P<0.01),YAP1蛋白表达量显著增加(P<0.01)。与对照组相比,miR-186过表达可明显降低乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05),同时降低了YAP1蛋白表达(P<0.01)。miR-186和野生型YAP1载体共转染细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.01)。结论miR-186在乳腺癌细胞中表达下调,过表达miR-186通过介导YAP1抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 miR-186 yap1 增殖 迁移 侵袭
在线阅读 下载PDF
miR-410-3p通过靶向YAP1调节IL-22诱导的人角质形成细胞增殖和凋亡 被引量:2
17
作者 孙敏 任虹 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期261-265,272,共6页
目的:探究miR-410-3p在银屑病中的表达及其对角质形成细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法:收集12例寻常型银屑病患者和12例健康志愿者空腹静脉血,qRT-PCR检测血清miR-410-3p表达。将常规培养的人角质形成细胞HaCaT分为:对照组、IL-22组、... 目的:探究miR-410-3p在银屑病中的表达及其对角质形成细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法:收集12例寻常型银屑病患者和12例健康志愿者空腹静脉血,qRT-PCR检测血清miR-410-3p表达。将常规培养的人角质形成细胞HaCaT分为:对照组、IL-22组、miR-NC组和miR-410-3p组。后3组使用100 ng/ml IL-22刺激24 h,体外建立银屑病模型。miRNC组和miR-410-3p组加入IL-22前48 h分别转染miR-NC和miR-410-3p,对照组不进行任何处理。CCK-8分析细胞活力,BrdU检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,qRT-PCR检测miR-410-3p和YAP1 mRNA表达,Western blot分析YAP1蛋白表达。Starbase软件和双荧光素酶报告基因分析miR-410-3p和YAP1的靶向关系。转染miR-410-3p的HaCaT银屑病细胞模型中同时过表达YAP1,检测细胞活力和凋亡。结果:miR-410-3p在银屑病患者血清中的表达显著低于健康志愿者(P<0.05)。与对照组相比,IL-22组miR-410-3p表达降低,YAP1 mRNA和蛋白表达增加,细胞活力增强,BrdU阳性细胞增多,凋亡率降低(均P<0.05);与IL-22组相比,miR-410-3p组miR-410-3p表达增加,YAP1 mRNA和蛋白表达减少,细胞活力减弱,BrdU阳性细胞减少,凋亡率升高(均P<0.05)。此外,本实验证实miR-410-3p与YAP1存在靶向结合关系,过表达YAP1可逆转miR-410-3p对IL-22诱导的HaCaT细胞增殖和凋亡的影响。结论:miR-410-3p在银屑病患者中表达减少,上调其表达可通过靶向YAP1抑制IL-22诱导的角质形成细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-410-3p 银屑病 角质形成细胞 增殖 凋亡 yap1
在线阅读 下载PDF
大黄素抑制胃癌AGS细胞YAP1、FOXD1基因表达及相关机制 被引量:2
18
作者 顾天 刘春宏 +4 位作者 张飞 钱薇 朱艳秋 褚明亮 刘杰民 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期59-64,71,共7页
目的探讨大黄素抑制胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭及癌基因YAP1、FOXD1基因表达的可能机制。方法培养胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS,使用不同浓度大黄素进行干预。通过CCK8实验、划痕实验、Transwell小室实验验证大黄素处理后AGS细... 目的探讨大黄素抑制胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭及癌基因YAP1、FOXD1基因表达的可能机制。方法培养胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS,使用不同浓度大黄素进行干预。通过CCK8实验、划痕实验、Transwell小室实验验证大黄素处理后AGS细胞的生物学表型变化。使用在线软件分析TCGA数据库中糖酵解代谢关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1在胃癌组织及正常组织中的表达情况。印迹法验证大黄素对AGS中糖酵解代谢关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1蛋白的影响变化。添加外源性糖酵解代谢产物丙酮酸,增强糖酵解代谢活性,验证癌基因YAP1和FOXD1的相应变化。结果胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS在不同浓度大黄素干预后,发现GES-1的大黄素半数致死量浓度明显高于AGS(P<0.05)。进一步的CCK8增殖实验、划痕实验、Transwell小室实验结果均发现大黄素可以明显抑制AGS的增殖、迁移、侵袭等肿瘤生物学能力(P<0.05)。TCGA生物信息数据库分析发现糖酵解途径关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1在胃癌组织中的表达明显高于胃正常组织的表达(P<0.05)。大黄素可以明显抑制糖酵解关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达(P<0.05)。补充外源性糖酵解代谢产物丙酮酸后,癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论大黄素对胃癌AGS细胞有显著的药理抑制作用,可以明显抑制其肿瘤生物学表型。大黄素在显著抑制糖酵解代谢关键酶HK2的同时,也显著抑制癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达。当添加外源性丙酮酸增强糖酵解代谢通路后,癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达显著升高。以上提示YAP1、FOXD1和糖酵解代谢的密切相关性,大黄素可能通过抑制胃癌AGS细胞糖酵解代谢,抑制癌基因YAP1和FOXD1。 展开更多
关键词 大黄素 胃癌 HK2 yap1 FOXD1 糖酵解代谢
在线阅读 下载PDF
鸭YAP1基因编码区的克隆、生物信息分析及其组织表达特性 被引量:1
19
作者 邱佳闵 刘贺贺 王继文 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期71-77,88,共8页
【目的】旨在克隆鸭YAP1基因,预测其蛋白结构、功能及其组织表达特性。【方法】以北京肉鸭为材料,采用RT-PCR技术克隆鸭YAP1基因CDS区,利用多种生物信息学分析软件预测其结构与功能,并应用荧光定量PCR检测其组织表达特性。【结果】结果... 【目的】旨在克隆鸭YAP1基因,预测其蛋白结构、功能及其组织表达特性。【方法】以北京肉鸭为材料,采用RT-PCR技术克隆鸭YAP1基因CDS区,利用多种生物信息学分析软件预测其结构与功能,并应用荧光定量PCR检测其组织表达特性。【结果】结果表明:鸭YAP1基因CDS全长1 248bp,编码415个氨基酸,氨基酸水平上与鸡相似性最高,达99.7%;氨基酸序列分析发现鸭YAP1蛋白相对分子量为45 417.5Da,主要定位在细胞核,属水溶性蛋白,不属于分泌蛋白;预测鸭YAP1氨基酸含有磷酸化、糖基化位点各30个;含两个WW结构域,且不同物种间结构域较保守;二级结构以无规则卷曲为主,三级结构呈弯曲状螺旋结构;荧光定量结果显示,YAP1在胰脏中表达量最高,肌肉组织中最低。【结论】鸭YAP1基因非常保守,结构、功能与哺乳动物具较高一致性。 展开更多
关键词 yap1基因 生物信息学分析 荧光定量PCR
在线阅读 下载PDF
Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进人视网膜微血管内皮细胞的血管生成 被引量:4
20
作者 梁晓茜 陈王灵 陈运信 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2023年第2期94-98,共5页
目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24... 目的探讨Piezo拮抗剂GsMTx4对人视网膜微血管内皮细胞(hRMECs)血管生成能力的影响与机制。方法体外培养hRMECs,随机分为对照组、GsMTx4组、GsMTx4+维替泊芬(VP)组、GsMTx4+Stattic组。GsMTx4组用2.5μmol·L^(-1)的GsMTx4处理细胞24 h,GsMTx4+VP组用GsMTx4联合Yap1的拮抗剂VP(4μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h,GsMTx4+Stattic组则用GsMTx4联合STAT3的拮抗剂Stattic(1.5μmol·L^(-1))处理hRMECs 24 h。CCK-8法检测各组hRMECs的增殖能力。小管形成实验观察各组hRMECs的血管生成能力,记录小管分支数。qRT-PCR和Western blot检测对照组和GsMTx4组hRMECs中Piezo、Yap1、STAT3 mRNA和蛋白的表达水平。使用免疫共沉淀技术检测各组hRMECs中Yap1和STAT3的结合作用。结果与对照组相比,GsMTx4组hRMECs的增殖率和小管分支数均明显增加(均为P<0.05),Piezo蛋白表达下调,而Yap1、STAT3蛋白表达均上调,且Yap1和STAT3的结合作用明显增加(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs中Yap1和STAT3的蛋白表达均下调,且Yap1和STAT3的结合作用减弱(均为P<0.05)。与GsMTx4组相比,GsMTx4+VP组和GsMTx4+Stattic组hRMECs增殖率和小管分支数均降低(均为P<0.05)。结论Piezo拮抗剂GsMTx4通过激活Yap1/STAT3信号通路促进hRMECs的血管生成。 展开更多
关键词 Piezo拮抗剂GsMTx4 yap1/STAT3信号通路 人视网膜微血管内皮细胞 血管生成
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部