Wnt5a/Frizzled-2/Ca^(2+)和Wnt3a/Frizzled通路的生理及病理学研究进展 被引量：9

1

作者 王海英 武心洁 +5 位作者 苑金香 韩逸君 张宇琪 孟慧 徐赫松 亚白柳 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期811-818,共8页

Wnt信号通路是一种古老且高度保守的信号通路,由Wnt配体蛋白、Wnt受体及其相关附件组成。Wnt通路可分为依赖β-连环蛋白(β-catenin)的经典信号通路和非依赖β-catenin的非经典信号通路两大类。Wnt3a和Wnt5a可分别激活经典的Wnt/β-cate... Wnt信号通路是一种古老且高度保守的信号通路,由Wnt配体蛋白、Wnt受体及其相关附件组成。Wnt通路可分为依赖β-连环蛋白(β-catenin)的经典信号通路和非依赖β-catenin的非经典信号通路两大类。Wnt3a和Wnt5a可分别激活经典的Wnt/β-catenin通路和非经典的Wnt/Ca^(2+)信号通路。2种通路在神经和心血管等各系统中广泛分布,参与调控胚胎发育、细胞增殖分化和癌症等重要生理和病理过程。Wnt5a/Frizzled-2/Ca^(2+)通路刺激成骨细胞和肺上皮细胞生成,维持成熟海马的突触可塑性和结构并营养神经元,加剧损伤后神经细胞和心肌细胞中的钙超载,维持心脏发育,在癌症的发生发展过程中起促进或抑制的双重作用。Wnt3a/Frizzled通路参与炎症反应并起抗炎作用,减少阿尔茨海默病等疾病中的神经元凋亡,与Frizzled-1或Frizzled-2结合可分别促进或抑制心脏成纤维细胞分化,促进肿瘤增殖、迁移和侵袭。现综述Wnt5a/Frizzled-2/Ca^(2+)和Wnt3a/Frizzled信号通路在胚胎发育、炎症、神经系统、心血管系统和癌症发生过程中的异常激活和抑制引起的生理及病理变化以及对疾病的发生发展及修复的影响,为Wnt信号通路在多系统生理及病理状态下作为研究和治疗靶点提供思路。 展开更多

关键词 wnt5a/frizzled-2/Ca^(2+) wnt3a/Frizzled 胚胎发育 神经系统 心血管系统 调控机制

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外源性Wnt5a激活K562细胞非经典Wnt5a／Ca^2＋信号途径研究 被引量：4

2

作者 李招权 司维柯 +3 位作者 邹全明 袁媛 潘静 赵宸 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期924-927,共4页

目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达... 目的观察外源性Wat5a对K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径的影响,进一步研究外源性Wnt5a诱导K562细胞的分化机制。方法激光共聚焦显微镜观察Ca2+内流的变化,以RT-PCR及免疫组化检测β-catenin的表达变化,以Western blot检测cyclinD1的表达变化。结果外源性Wnt5a能明显促进K562细胞Ca2+内流,显著下调cyclinD1表达,且能下调K562细胞β-catenin表达,但β-catenin表达下调无统计学意义。结论外源性Wnt5a能激活K562细胞非经典Wnt5a/Ca2+途径,外源性Wnt5a诱导K562细胞分化机制可能与此相关。 展开更多

关键词 wnt5a K562细胞 CA^2+ β-catenin CYCLIN D1

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Cl^-通道阻断剂对5-HT和CPA引起的兔脑椎基底动脉平滑肌细胞Ca^(2+)内流的影响 被引量：1

3

作者 丁岩 关永源 +2 位作者 熊大志 贺华 丘钦英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期83-89,共7页

目的　在培养的兔脑椎基底动脉平滑肌细胞上观察5 HT和CPA诱导的Ca2 + 内流的特性 ,电压依赖性Ca2 + 通道 (VDC)抑制药尼莫地平 ,非电压依赖性Ca2 + 通道抑制药SK&F963 65及Cl-通道阻断剂DIDS、NPPB对两种激动剂引起 [Ca2 + ]i 反... 目的　在培养的兔脑椎基底动脉平滑肌细胞上观察5 HT和CPA诱导的Ca2 + 内流的特性 ,电压依赖性Ca2 + 通道 (VDC)抑制药尼莫地平 ,非电压依赖性Ca2 + 通道抑制药SK&F963 65及Cl-通道阻断剂DIDS、NPPB对两种激动剂引起 [Ca2 + ]i 反应的影响 ,以探讨脑血管平滑肌细胞中 5 HT引起Ca2 + 内流的特性、Cl-通道与Ca2 + 内流的关系。方法　采用生物荧光双波长影像分析系统瞬即测定单细胞胞质[Ca2 + ]i 技术。结果　① 5 HT和CPA均能诱导平滑肌细胞[Ca2 + ]i 呈双相升高 ,并且 5 HT诱导的Ca2 + 释放是环匹阿尼酸 (CPA)敏感Ca2 + 池的一部分 ;②尼莫地平对 5 HT和CPA触发的Ca2 + 内流无明显影响 ,而SK&F963 65可阻止二者触发的Ca2 + 内流 ;③Cl-通道阻断剂DIDS、NPPB呈浓度依赖性抑制Ca2 + 内流 ,在SK&F963 65最大限度抑制Ca2 + 内流后 ,DIDS、NPPB可进一步抑制Ca2 + 内流 ;而Ca2 +内流被DIDS、NPPB分别最大抑制后 ,SK&F963 65也可进一步抑制Ca2 + 内流。结论　 5 HT引起的Ca2 + 内流是经SK&F963 65敏感的非VDC ,其中包含Ca2 + 释放引起的Ca2 + 内流 (CRAC)成分与非CRAC成分 ,并且这两部分Ca2 +内流均与DIDS。 展开更多

关键词 Cl^-通道阻断剂 脑椎基底动脉 平滑肌细胞 CA^2+通道 CL^-通道 5-HT CPA

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Wnt/Ca^(2+)信号通路在肢体缺血/再灌注损伤机制中的研究进展 被引量：6

4

作者 申震 朱付平 +3 位作者 黄勇 范仪铭 周富强 潘成熙 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1344-1347,共4页

Wnt/Ca^(2+)信号通路属于Wnt非经典通路,该通路的失调与细胞调亡、炎症反应等病理改变,以及许多疾病的发生、发展、转归有着密切联系。肢体缺血/再灌注损伤(LIRI)是临床工作中常遇到的一类难题,而Wnt/Ca^(2+)通路可诱使细胞内Ca^(2+)浓... Wnt/Ca^(2+)信号通路属于Wnt非经典通路,该通路的失调与细胞调亡、炎症反应等病理改变,以及许多疾病的发生、发展、转归有着密切联系。肢体缺血/再灌注损伤(LIRI)是临床工作中常遇到的一类难题,而Wnt/Ca^(2+)通路可诱使细胞内Ca^(2+)浓度升高并可活化Ca^(2+)敏感信号成分,其介导的细胞凋亡、Ca^(2+)超载和机体炎症等反应在LIRI中扮演重要角色。该文就Wnt/Ca^(2+)信号通路在LIRI病机中所起的作用进行综述。 展开更多

关键词 wnt/Ca^2+信号通路 细胞凋亡 CA^2+超载 炎症反应 肢体缺血/再灌注损伤 病理机制

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长链非编码RNA NRSN2-AS1通过miR-129-5p/Wnt5a轴靶向调控Wnt/β-catenin信号通路对食管鳞状细胞癌发生、发展的影响 被引量：4

5

作者 徐同欣 颜朝阳 +3 位作者 路军涛 李晓旭 董稚明 郭炜 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1281-1286,共6页

目的探讨NRSN2-AS1对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其相关分子机制。方法应用qRT-PCR法检测96例ESCC和癌旁组织及ESCC细胞系中NRSN2-AS1的表达水平。通过体外细胞功能实验分析N... 目的探讨NRSN2-AS1对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移及侵袭的作用及其相关分子机制。方法应用qRT-PCR法检测96例ESCC和癌旁组织及ESCC细胞系中NRSN2-AS1的表达水平。通过体外细胞功能实验分析NRSN2-AS1过表达对ESCC细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;应用生物信息学分析和双荧光素酶报告基因实验,验证NRSN2-AS1和miR-129-5p的靶向关系及对Wnt/β-catenin信号通路的影响。应用qRT-PCR法分别检测NRSN2-AS1/miR-129-5p/Wnt5a分子轴的表达。结果NRSN2-AS1在ESCC组织中(2.48±0.90)的表达显著高于癌旁组织(1.02±0.73,t=4.480,P<0.01)。NRSN2-AS1在食管癌细胞系Eca109(1.99±0.04)、TE1(2.43±0.09)、TE13(3.68±0.21)和KYSE150(4.44±0.26)中的表达显著高于对照组(1.00±0.08,P均<0.01)。NRSN2-AS1过表达可促进Eca109细胞的增殖能力(P<0.01);上调NRSN2-AS1可促进Eca109细胞的迁移及侵袭能力(P均<0.01)。NRSN2-AS1可通过竞争性结合miR-129-5p,上调Wnt5a的表达,进而激活Wnt/β-catenin信号通路。结论NRSN2-AS1可通过miR-129-5p/Wnt5a轴激活Wnt/β-catenin信号通路,促进ESCC细胞的增殖、迁移及侵袭,其有望成为ESCC治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 食管肿瘤 鳞状细胞癌 长链非编码RNA NRSN2-AS1 miR-129-5p wnt/Β-CATENIN信号通路

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雌激素微环境下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路调控人牙周膜干细胞成骨分化的研究 被引量：11

6

作者 吴晓玲 郑茜 +4 位作者 吕佳岭 赵娴 徐洁 余京泓 徐晓梅 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第1期33-37,共5页

目的:探讨雌激素作用下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells hPDLSCs)成骨分化的调控。方法:将第3代hPDLSCs分为空白组、对照组、雌激素组、抑制剂组,成骨诱导7d检测ALP活性,Real-time PC... 目的:探讨雌激素作用下非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells hPDLSCs)成骨分化的调控。方法:将第3代hPDLSCs分为空白组、对照组、雌激素组、抑制剂组,成骨诱导7d检测ALP活性,Real-time PCR检测各组Wnt信号通路基因及成骨基因表达水平。结果:ALP检测结果示对照组较空白组ALP活性增加(P<0.05),雌激素组和抑制剂组较对照组ALP活性增加(P<0.05),但雌激素组和抑制剂组ALP活性差异无统计学意义(P>0.05)。Real-time PCR检测结果显示对照组较空白组Wnt信号通路基因β-catenin、CaMKⅡ、NLK及成骨基因RUNX2、OCN表达增加(P<0.05),雌激素组和抑制剂组较对照组Wnt信号通路基因β-catenin、CaMKⅡ、NLK及成骨基因RUNX2、OCN表达增加(P<0.05);抑制剂组较雌激素组β-catenin表达下降(P<0.05),而CaMKⅡ、NLK表达增加(P<0.05),但两组成骨基因RUNX2、OCN表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:雌激素可能通过增强非经典Wnt/Ca^(2+)信号通路的活化促进hPDLSCs的成骨分化。 展开更多

关键词 hPDLSCs 雌激素 非经典wnt/Ca^2+信号通路 成骨分化

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Wnt信号通路相关蛋白在TA2小鼠自发性乳腺癌生成中的作用 被引量：1

7

作者 李莉 尹玉 张诗武 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第7期887-890,共4页

目的研究Wnt信号通路相关蛋白在TA2小鼠自发性乳腺癌生成中的作用。方法收集5例正常TA2小鼠的乳腺组织、5例自发性成瘤TA2小鼠的肿瘤组织及5例肿瘤对侧的乳腺癌前病变组织,用免疫组织化学方法检测TA2小鼠正常乳腺组织、自发性成瘤TA2小... 目的研究Wnt信号通路相关蛋白在TA2小鼠自发性乳腺癌生成中的作用。方法收集5例正常TA2小鼠的乳腺组织、5例自发性成瘤TA2小鼠的肿瘤组织及5例肿瘤对侧的乳腺癌前病变组织,用免疫组织化学方法检测TA2小鼠正常乳腺组织、自发性成瘤TA2小鼠乳腺癌前病变组织及肿瘤组织中Wnt1、Wnt5a、β-catenin蛋白的表达。结果1免疫组织化学检测结果显示:Wnt1、Wnt5a在小鼠正常乳腺组织中为阴性表达,在自发性成瘤小鼠乳腺癌前病变和乳腺癌组织胞质和细胞核中均有表达,且在自发性成瘤小鼠乳腺癌前病变的表达强度高于在乳腺癌组织中的表达。β-catenin在正常小鼠乳腺组织主要在细胞膜上表达,在自发性成瘤TA2小鼠乳腺癌前病变组织及肿瘤组织胞质中均有异常表达,且在肿瘤组织的表达强度高于其在癌前病变组织中的表达。2 Wnt1、Wnt5a、β-catenin在正常乳腺组、自发性成瘤小鼠乳腺癌前病变组、肿瘤组中的阳性细胞表达率分别为(4.46±3.57)%、(96.50±6.30)%、(90.00±1.17)%、(2.27±4.55)%、(96.24±6.00)%、(95.90±4.32)%、(4.78±3.57)%、(60.59±5.63)%、(84.87±2.56)%,三者在自发性成瘤小鼠乳腺癌前病变组、肿瘤组中的阳性细胞表达率与正常乳腺比较,差异有统计学意义(P<0.01)。Wnt1、Wnt5a在癌前病变组织中的阳性细胞表达率均高于肿瘤组织,Wnt1比较差异有统计学意义(P<0.05),Wnt5a比较差异无统计学意义(P>0.05)。β-catenin在癌前病变组织中的阳性细胞表达率低于肿瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Wnt1、Wnt5a、β-catenin在TA2小鼠自发性乳腺癌生成过程中起促进作用。 展开更多

关键词 wnt1 wnt5a Β-CATENIN TA2小鼠 免疫组织化学 自发性乳腺癌

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Wnt5a对中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响 被引量：2

8

作者 陆敏 卢伟 +1 位作者 杨勰 孙颖 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期826-831,共6页

目的:探讨Wnt5a对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap,NET)形成的影响及可能的调控机制。方法:采用50 ng/mL Wnt5a刺激人中性粒细胞3 h,以1μg/mL牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopo... 目的:探讨Wnt5a对中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular trap,NET)形成的影响及可能的调控机制。方法:采用50 ng/mL Wnt5a刺激人中性粒细胞3 h,以1μg/mL牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和1μg/mL大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS作为阳性对照,采用免疫荧光技术观察NET的形成,Sytox Green荧光法对胞外DNA进行定量,采用流式细胞术检测细胞产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,Western blot分析信号分子磷脂酰肌醇三激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/Akt和丝裂原活化蛋白激酶1/2(mitogen-activated protein kinase1/2,MEK1/2)、细胞外信号调节蛋白激酶1/2(extracellular regulated protein kinases1/2,ERK1/2)表达水平的变化。结果:Wnt5a刺激人中性粒细胞后,可观察到NET的形成和胞外DNA数量的增加(P <0.05),ROS水平较刺激前明显增高(P <0.05),Western blot检测显示,PI3K/Akt和MEK1/2、RK1/2磷酸化水平增高(P <0.05)。结论:Wnt5a可能通过PI3K/Akt、MEK1/2、ERK1/2磷酸化,调控ROS生成,进而促进人中性粒细胞形成NET。 展开更多

关键词 wnt5a 中性粒细胞胞外诱捕网 ROS PI3K/AKT MEK1/2-ERK1/2

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Wnt5a正反馈调控二氧化硅诱导的小鼠肺泡巨噬细胞铁死亡 被引量：3

9

作者 马佳 王婧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期699-706,共8页

目的探讨Wnt5a信号在二氧化硅诱导的小鼠巨噬细胞铁死亡过程中的调控作用。方法设置C57BL/6小鼠生理盐水组和二氧化硅处理组,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。免疫荧光细胞化学染色法检测小鼠BALF细胞Wnt5a、核因子κB p65(NF-κB p65)和T... 目的探讨Wnt5a信号在二氧化硅诱导的小鼠巨噬细胞铁死亡过程中的调控作用。方法设置C57BL/6小鼠生理盐水组和二氧化硅处理组,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)。免疫荧光细胞化学染色法检测小鼠BALF细胞Wnt5a、核因子κB p65(NF-κB p65)和Toll样受体4(TLR4)蛋白的表达;ELISA检测小鼠血浆和BALF上清白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞,Western blot法检测(50、100、150、200、300)μg/mL二氧化硅刺激下RAW264.7细胞磷酸化的NF-κB p65(p-NF-κB p65)、Wnt5a、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3(NLRP3)、裂解型胱天蛋白酶1(c-caspase-1)、消皮素D(gasdermin D)以及铁死亡蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)和转铁蛋白(transferrin)的表达;CellROX~?荧光探针负载法检测活性氧(ROS)的水平;实时荧光定量PCR检测Wnt5a、IL-6、IL-10以及TNF-α的mRNA表达水平;采用Wnt5a重组蛋白和小分子拮抗剂BOX5分别激活和抑制Wnt5a信号,观察Wnt5a信号在铁死亡发生过程中的调控作用。结果二氧化硅刺激激活小鼠肺泡巨噬细胞和RAW264.7小鼠巨噬细胞Wnt5a信号及相关炎性信号,释放炎性因子IL-6及TNF-α,抑制铁死亡调控因子GPX4的表达;激活Wnt5a信号协同二氧化硅作用进一步下调GPX4的表达,促进二氧化硅诱导巨噬细胞铁死亡,而Wnt5a抑制剂BOX5减缓二氧化硅的抑制GPX4作用。结论Wnt5a信号在二氧化硅诱导的小鼠巨噬细胞铁死亡发生过程中具有正反馈调控作用。 展开更多

关键词 wnt5a信号 二氧化硅(SiO2) 铁死亡(ferroptosis) 小鼠巨噬细胞

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敲低受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)抑制卡介苗诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞自噬 被引量：1

10

作者 郑雪迪 陈琪 +3 位作者 聂雪伊 骆佳 徐金瑞 王玉炯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1057-1062,共6页

目的探讨Wnt5a/受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)信号通路对卡介苗(BCG)感染引起的巨噬细胞自噬的调控作用。方法采用BCG感染RAW264.7小鼠巨噬细胞0、2、6、12、24 h,Western blot法检测Wnt5a、ROR2及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(... 目的探讨Wnt5a/受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)信号通路对卡介苗(BCG)感染引起的巨噬细胞自噬的调控作用。方法采用BCG感染RAW264.7小鼠巨噬细胞0、2、6、12、24 h,Western blot法检测Wnt5a、ROR2及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达。在敲低ROR2表达和BCG感染分别作用或共同处理RAW264.7细胞后,采用Western blot法检测RAW264.7细胞自噬相关基因5(ATG5)、P62、beclin-1、ATG7、LC3Ⅱ的蛋白表达,采用表达单体红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白和LC3的(mRFP-GFP-LC3)自噬双标腺病毒法检测细胞自噬流。结果与未感染对照组相比,BCG感染RAW264.7细胞6 h后,Wnt5a、ROR2、LC3Ⅱ的表达最高。与未感染对照组相比,BCG感染组自噬相关蛋白ATG5、P62、beclin-1、ATG7、LC3Ⅱ的表达上调,自噬体和自噬溶酶体数量增加;与BCG感染组相比,敲低ROR2并经BCG感染后,上述蛋白的表达下调,自噬体和自噬溶酶体数量减少。结论BCG感染小鼠巨噬细胞激活自噬,而敲低ROR2抑制BCG引起的细胞自噬。 展开更多

关键词 wnt5a 受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2) 自噬 RAW264.7巨噬细胞

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Wnt信号通路与神经管畸形关联性研究进展 被引量：1

11

作者 胡敏 茹意 +2 位作者 谢良骐 柴智 樊慧杰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期1597-1601,共5页

神经管畸形是一种常见的神经发育疾病,其分为开放型和闭合型两大类,以无脑畸形、脑膨出和颅脊柱裂为主要症状。Wnt信号通路与神经系统疾病发生的关系是近年来较热门的研究领域。Wnt信号通路包括Wnt/β-catenin通路、平面细胞极性通路、W... 神经管畸形是一种常见的神经发育疾病,其分为开放型和闭合型两大类,以无脑畸形、脑膨出和颅脊柱裂为主要症状。Wnt信号通路与神经系统疾病发生的关系是近年来较热门的研究领域。Wnt信号通路包括Wnt/β-catenin通路、平面细胞极性通路、Wnt/Ca^(2+)通路,其在神经管发育过程中发挥着重要的作用。本文综述了Wnt信号通路的研究现状,阐述了Wnt信号通路在神经管闭合过程中发挥的作用,为开发防治神经管畸形相关药物提供思路。 展开更多

关键词 神经管畸形 wnt/Β-CATENIN通路 平面细胞极性通路 wnt/Ca^(2+)通路

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氯通道阻断剂对KCl、5-HT引起的兔脑椎基底动脉血管环收缩效应的影响 被引量：7

12

作者 丁岩 关永源 +1 位作者 熊大志 贺华 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期267-271,共5页

目的　探讨不同种类氯通道阻断剂在不同激动剂引起的脑血管平滑肌收缩反应中的作用。方法　记录离体兔脑椎基底动脉环收缩反应。结果　①氯通道阻断剂DIDS、Furosemide及NPPB均浓度依赖性抑制高K+ 及 5 HT引起血管环收缩反应 ,DIDS、Fu... 目的　探讨不同种类氯通道阻断剂在不同激动剂引起的脑血管平滑肌收缩反应中的作用。方法　记录离体兔脑椎基底动脉环收缩反应。结果　①氯通道阻断剂DIDS、Furosemide及NPPB均浓度依赖性抑制高K+ 及 5 HT引起血管环收缩反应 ,DIDS、Furosemide及NPPB对 5 HT引起收缩的抑制作用明显强于对KCl的作用 ;②在 5 HT引起血管收缩反应中 ,给予SK&F96 36 5引起血管最大舒张的基础上 ,DIDS、Furosemide及NPPB均可引起血管进一步舒张。结论　氯通道可能参与了由高K+ 去极化和 5 展开更多

关键词 兔 脑 椎基底动脉血管环收缩效应 CA^2+通道 Cl^-通道阻断剂 KCL 5-HT

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TRPV5 TRPV6对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响 被引量：4

13

作者 张慧 刘模荣 +4 位作者 董辉 徐靖宇 谢睿 文国荣 刘莲花 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期577-582,共6页

目的:观察TRPV5和TRPV6蛋白表达水平对结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平及细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法:给予TRPV5、TRPV6通道激动剂1-25(OH)_2D_3及抑制剂CuCl_2作用结肠癌SW480细胞后,采用免疫组织化学法、Western blo... 目的:观察TRPV5和TRPV6蛋白表达水平对结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平及细胞增殖、凋亡、迁移等生物学行为的影响。方法:给予TRPV5、TRPV6通道激动剂1-25(OH)_2D_3及抑制剂CuCl_2作用结肠癌SW480细胞后,采用免疫组织化学法、Western blot及实时荧光定量PCR技术检测TRPV5、TRPV6蛋白及TRPV5、TRPV6 mRNA表达的变化。使用高速离子成像系统观察结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平的变化;通过MTT法、TUNEL法及划痕修复法观察结肠癌SW480细胞增殖、凋亡及迁移的变化。结果:1-25(OH)_2D_3明显上调结肠癌SW480细胞TRPV5、TRPV6 mRNA及蛋白表达水平,使结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平增加,促进结肠癌SW480细胞增殖、迁移及抑制其凋亡(P<0.05)。CuCl_2明显下调结肠癌SW480细胞中TRPV5、TRPV6蛋白及m RNA表达,使结肠癌SW480细胞内Ca^(2+)水平降低(P<0.05),抑制结肠癌SW480细胞的增殖、迁移及促进细胞的凋亡(P<0.05)。结论:结肠癌SW480细胞中TRPV5和TRPV6蛋白表达水平的变化,能通过调控细胞内Ca^(2+)水平影响细胞的增殖、迁移和凋亡等生物学行为。 展开更多

关键词 结肠癌 钙离子通道 TRPV5 TRPV6 CA^2+

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糖尿病大鼠脑细胞周期依赖性蛋白激酶5和蛋白激酶A参与调节Tau蛋白磷酸化 被引量：1

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作者 曲忠森 李亮 +3 位作者 钟士江 倪宏 赵永波 王群 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1308-1313,共6页

细胞周期依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase5,Cdk-5)及蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)是调节Tau蛋白磷酸化的重要激酶,其对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠脑内Tau蛋白磷酸化的作用如何,目前尚不明确.为探讨胰岛素缺乏的DM大... 细胞周期依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependent kinase5,Cdk-5)及蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)是调节Tau蛋白磷酸化的重要激酶,其对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠脑内Tau蛋白磷酸化的作用如何,目前尚不明确.为探讨胰岛素缺乏的DM大鼠海马Cdk-5及PKA对Tau蛋白磷酸化的作用,用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)建立DM大鼠模型,Fura-2负载及荧光测定细胞内游离Ca2+浓度,免疫沉淀法测定Cdk-5活性,放射性配体结合实验检测PKA的活性,蛋白质印迹检测Tau蛋白磷酸化的水平.结果提示:在DM大鼠海马神经元,Ca2+浓度升高,Cdk-5及PKA活性升高,Tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202和Ser396/Ser404位点的磷酸化增强.Cdk-5的特异性抑制剂roscovitine可降低DM大鼠Cdk-5活性,但不能降低PKA活性,使Tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202位点磷酸化水平降低,但不降低Ser396/Ser404位点的磷酸化,roscovitine处理正常大鼠后,上述酶的活性及Tau蛋白的磷酸化无明显变化.首次从整体水平上证实DM大鼠海马Cdk-5及PKA活性升高,协同促进Tau蛋白在Ser198/Ser199/Ser202位点和Ser396/Ser404位点的磷酸化,神经元内游离Ca2+浓度升高可能起重要作用. 展开更多

关键词 糖尿病 细胞周期依赖性蛋白激酶-5 蛋白激酶A TAU蛋白 CA^2+ roscovifine

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O3氧化黑碳对SH-SY5Y细胞的毒性作用 被引量：1

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作者 尚羽 王田田 +3 位作者 吴美英 王璐 何慧心 安静 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期550-557,共8页

以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为模型,在细胞体系探讨经O3氧化过的黑碳(O3-oxidized black carbon,OBC)颗粒对神经细胞的毒性作用.应用MTT方法评估SH-SY5Y细胞的存活率;通过测定培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LHD)浓度评估... 以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为模型,在细胞体系探讨经O3氧化过的黑碳(O3-oxidized black carbon,OBC)颗粒对神经细胞的毒性作用.应用MTT方法评估SH-SY5Y细胞的存活率;通过测定培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LHD)浓度评估细胞膜的损伤程度;利用流式细胞术评价细胞凋亡率;使用荧光探针(Fluo 3-AM)检测细胞内Ca^2+浓度.结果显示,OBC颗粒对SH-SY5Y细胞暴露24和48 h的半致死浓度(IC50)分别为202.2和133.3μg/mL;随着BC颗粒染毒浓度的增加(0,5,10,20,40μg/mL),胞外LDH浓度、细胞凋亡率和Ca^2+浓度均逐渐升高,呈显著的剂量-效应关系(p<0.05).研究表明,OBC颗粒可导致神经细胞内Ca^2+浓度升高、细胞膜损坏,并最终导致细胞凋亡的发生. 展开更多

关键词 黑碳颗粒 SH-SY5Y细胞 细胞毒性 细胞凋亡 CA^2+

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氨甲环酸与Wnt信号通路中含kringle结构域蛋白的结合对新生小鼠骨密度的影响(英文)

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作者 陈新园 张菁 +2 位作者 苏艺晶 汪向民 刘建宁 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期470-477,共8页

最近研究发现Wnt信号通路在骨形成过程中发挥重要作用.Wnt受体如脂蛋白相关蛋白5(lrp5)和孤独受体(Ror2)的缺失或突变导致骨的不正常发育.Dkk是一个分泌型规范Wnt信号系统的抑制剂,通过与脂蛋白相关蛋白5和最近新发现的一种含kringle结... 最近研究发现Wnt信号通路在骨形成过程中发挥重要作用.Wnt受体如脂蛋白相关蛋白5(lrp5)和孤独受体(Ror2)的缺失或突变导致骨的不正常发育.Dkk是一个分泌型规范Wnt信号系统的抑制剂,通过与脂蛋白相关蛋白5和最近新发现的一种含kringle结构域的蛋白kremen形成三聚体复合物.这种复合物随即被细胞内吞,从而导致细胞表面Wnt受体脂蛋白相关蛋白5水平迅速下降,从而达到抑制Wnt信号通路的目地.通过对kremen和Ror2蛋白序列分析发现kremen和Ror2的胞外部分均含有一个结构上能与赖氨酸结合的kringle结构域.通过给怀孕母鼠注射一种赖氨酸类似物———氨甲环酸来研究kremen和Ror2的kringle结构域上的赖氨酸结合位点被占据对小鼠骨发育的作用.但是,研究结果表明AMCA组和对照组之间的骨密度并没有显著差异,揭示赖氨酸结合位点不参与骨的发育调控. 展开更多

关键词 wnt 脂蛋白相关蛋白5 孤独受体2 Dkk kremen 骨密度 KRINGLE

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大豆ABA信号途径GmCDPK SK5基因异源表达探究 被引量：2

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作者 胡慧敏 蔡婉菡 +2 位作者 穆可彬 王爽 麻浩 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期737-747,共11页

为探究大豆CDPKI家族成员GmCDPK SK5参与防御逆境胁迫的途径,本研究分析外源ABA作用不同时间对大豆中GmCDPK SK5基因表达量的影响,克隆基因上游启动子序列并分析其顺式作用元件,构建GmCDPK SK5pro∷GUS融合植物表达载体,转化烟草和拟南... 为探究大豆CDPKI家族成员GmCDPK SK5参与防御逆境胁迫的途径,本研究分析外源ABA作用不同时间对大豆中GmCDPK SK5基因表达量的影响,克隆基因上游启动子序列并分析其顺式作用元件,构建GmCDPK SK5pro∷GUS融合植物表达载体,转化烟草和拟南芥,并通过GUS组织化学染色和定量表达分析方法研究GmCDPK SK5启动子对外源施加的Ca^(2+)和ABA的响应。结果显示:施加外源ABA能够诱导GmCDPK SK5基因下调表达。启动子顺式作用元件分析表明该启动子含有3个TATA盒和23个CAAT盒基本转录元件和多种与胁迫相关的顺式作用元件。烟草瞬时表达系统中,Ca^(2+)浓度增加,GUS酶活性增加,在50 mmol·L^(-1)Ca^(2+)条件下,处理组中GUS酶活性是对照的2.1倍;ABA浓度增加,GUS酶活性减弱,在0.1μmol·L^(-1)ABA条件下,对照组中的GUS酶活性是处理的5倍;ABA能诱导GmCDPK SK5基因下调表达。在拟南芥中,与WT和cpk4-1突变体株系相比,在外源施加ABA的条件下,GmCDPK SK5过表达株系在种子萌发、幼苗生长和气孔运动等方面表现得最敏感。3个株系中与ABA相关的基因ABF2、ABF4、ABI5、RD29A、RAB18和KIN1差异表达。结果说明GmCDPK SK5启动子对外源施加的Ca^(2+)和ABA有响应,且GmCDPK SK5通过影响与响应ABA相关基因的表达来增强植株对ABA的敏感性。 展开更多

关键词 大豆 GmCDPK SK5 启动子 GUS染色 ABA Ca^(2+)气孔运动

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骨质疏松分子生物学研究专家共识 被引量：11

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作者 《中国骨质疏松杂志》社 《中国骨质疏松杂志》骨代谢专家组 +2 位作者 张萌萌 毛未贤 马倩倩 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期157-162,共6页

骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活... 骨质疏松分子生物学研究在骨代谢分子信号通路、骨质疏松易感基因、骨质疏松相关蛋白、骨质疏松靶向治疗等方向取得了很大进展。核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素(RANK/RANKL/OPG)信号通路、核因子κB受体活化因子(NF-κB)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶(MAPK/ERK)信号通路、巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)信号通路、钙离子(Ca^(2+))信号通路、酪氨酸激酶、蛋白激酶B(Src、Akt)信号通路、蛋白激酶C(PKC)信号通路等骨代谢重要通路,维生素D受体(VDR)基因、低密度脂蛋白相关蛋白5(LRP5)基因、亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因、雌激素受体(ER)基因等易感基因,载脂蛋白E(Apo E)、Klotho蛋白(Klotho)、骨形态发生蛋白(BMP)、骨涎蛋白(BSP)等相关蛋白,以直接或间接的方式参与调控骨代谢,作用重叠相互联系,互为结果,已在本专业领域达成共识。 展开更多

关键词 核因子κB受体活化因子/核因子κB受体活化因子配体/骨保护素信号通路 核因子κB受体活化因子信号通路 丝裂原活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶信号通路 巨噬细胞集落刺激因子信号通路 钙离子信号通路 酪氨酸激酶、蛋白激酶B信号通路 蛋白激酶C信号通路 免疫球蛋白样受体信号通路 wnt/β-连环蛋白信号通路 Hedghog信号通路 骨形态发生蛋白2/Smad信号通路 胞内磷脂酰肌醇激酶/蛋白激酶B信号通路 维生素D受体基因 低密度脂蛋白相关蛋白5基因 亚甲基四氢叶酸还原酶基因 雌激素受体基因 Ⅰ型胶原α1和Ⅰ型胶原α2基因 甲状旁腺素基因 降钙素受体基因 甲状旁腺素相关蛋白受体基因 载脂蛋白E Klotho蛋白 骨形态发生蛋白 骨涎蛋白 低密度脂蛋白受体相关蛋白5 激活蛋白-1 硬化蛋白 靶向治疗 骨质疏松 分子生物学

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平面细胞极性通路在神经管缺陷中的作用

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作者 黄少勇 蔡润泽 陈永昌 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期102-107,共6页

神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)是一种常见的神经发育疾病,发病率约为千分之一。该疾病的发病机制较为复杂,是由遗传因素和环境因素共同决定的。研究发现适量补充叶酸能够降低新生儿NTDs的发病率,但尚没有有效的治疗方法。平面... 神经管缺陷(neural tube defects,NTDs)是一种常见的神经发育疾病,发病率约为千分之一。该疾病的发病机制较为复杂,是由遗传因素和环境因素共同决定的。研究发现适量补充叶酸能够降低新生儿NTDs的发病率,但尚没有有效的治疗方法。平面细胞极性(planar cell polarity,PCP)信号通路和汇聚延伸(convergent extension,CE)在神经管闭合过程中具有重要作用,一系列遗传因素调控神经管发育,其中SHROOM3、VANGL2和WNT5A这3个基因在PCP信号通路中不可或缺。本文通过综述SHROOM3、VANGL2和WNT5A的研究现状,阐述PCP信号通路在神经管闭合过程中发挥的作用,也对遗传性NTDs动物模型的研究进行了回顾。 展开更多

关键词 神经管缺陷 平面细胞极性通路 动物模型 SHROOM3 VANGL2 wnt5a

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微生物学

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《中国医学文摘（基础医学）》 CSCD 2005年第4期225-230,共6页

日本脑炎病毒E基因与流感病毒HA基因的串联表达及应用；HCV结构蛋白在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的组装；SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达；肠出血性大肠杆菌O157：H7紧密黏附素免疫保护性片段的基因克隆与表达；甲氧西林耐药的金... 日本脑炎病毒E基因与流感病毒HA基因的串联表达及应用；HCV结构蛋白在昆虫细胞中的表达及病毒样颗粒的组装；SARS冠状病毒M基因的克隆及其表达；肠出血性大肠杆菌O157：H7紧密黏附素免疫保护性片段的基因克隆与表达；甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学调查；一株西尼罗病毒株的生物学特征研究；JC病毒样颗粒可直接转运进人细胞核；我国HIV-1流行株gp41抗原表位筛选与串联表达；甲肝减毒活疫苗L-A-1疫苗株的核酸序列测定与比较分析；河南省分离的HIV-1B-Thai亚型流行株全基因组克隆及序列分析；HCV抗体检测试剂对血站HCV抗体初筛试剂的评价；巨细胞病毒感染后晚期mRNA表达与细胞病变相关性的研究；狂犬病北京3aG-V生产株的特性研究；丙型肝炎病毒NS5a高免疫原区人工合成多肽抗原性的研究；反义RNA体外抑制丙型肝炎病毒基因表达的研究；逆转录病毒载体介导的HSVtk基因表达及提高重组逆转录病毒滴度的研究；MMP-2、MT-MMP-2在实验性肝纤维化形成和逆转过程中表达的动态研究；北京地区2株人偏肺病毒的P和M蛋白基因序列分析；丙型肝炎病毒不同基因型NS3蛋白的抗原异质性分析；人УδT细胞TCR分子与结核杆菌多肽抗原特异性结合的证据；霍乱弧菌减毒活疫苗候选株IEM109的构建；问号钩端螺旋体内化过程中细胞内游离Ca^2＋水平变化及细胞凋亡；黏膜免疫戊型肝炎试验性疫苗的研究；表达流行性感冒病毒HA基因非复制型重组腺病毒的构建及免疫效果的研究；O157：H7原噬菌体消除菌株的鉴定与分析；结核分枝杆菌潜伏感染相关蛋白ICL的表达及鉴定；钩端螺旋体OmpL1抗原表位预测、克隆和表达；重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆和序列分析；结核分枝杆菌Rv1884基因的克隆、表达及亲和层析纯化；羊瘙痒因子263K经多种途径感染仓鼠的脑外组织PrP^Sc分子和沉积特点研究；流感病毒血凝素基因HA1区的克隆及其真核表达载体的构建；分枝杆菌融合表达ICL-GFP穿梭质粒的构建及鉴定；5-氟胞嘧啶耐药白色念珠菌的DNA与RNA的随机扩增多态性分析；通用引物检测儿童血和脑脊液的6种疱疹类病毒；人类免疫缺陷病毒1型RNA定量参考品的研制；广东2003年末SARS患者冠状病毒抗原抗体动态特征分析。 展开更多

关键词 肠出血性大肠杆菌O157:H7 丙型肝炎病毒NS5a 微生物学 SARS冠状病毒 分子流行病学调查 细胞内游离CA^2+ 人类免疫缺陷病毒1型 金黄色葡萄球菌 甲肝减毒活疫苗

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