Wnt/β-连环蛋白信号途径活性的分析系统的建立 被引量：2

1

作者 冯涛 周兰 何通川 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期413-416,共4页

目的 :建立Wnt/ β -连环蛋白信号途径功能活性的分析系统。 方法 :首先构建一个表达 β -连环蛋白 -绿色荧光蛋白的融合蛋白的载体 ,pCMV -bcGFP ;再用之转染HEK2 93细胞 ,用G4 18和LiCl筛选出稳定表达该融合蛋白的细胞 ,克隆建株并鉴... 目的 :建立Wnt/ β -连环蛋白信号途径功能活性的分析系统。 方法 :首先构建一个表达 β -连环蛋白 -绿色荧光蛋白的融合蛋白的载体 ,pCMV -bcGFP ;再用之转染HEK2 93细胞 ,用G4 18和LiCl筛选出稳定表达该融合蛋白的细胞 ,克隆建株并鉴定。结果 :成功获得稳定表达该融合蛋白的细胞株 ,即 2 93-bc -GFP细胞株 ;在荧光显微镜下以及蛋白质印迹分析证实 :所获得的 2 93-bc -GFP细胞株表达该融合蛋白的基础水平极低 ;用Wnt1和LiCl处理后可以明显地使该融合蛋白在细胞内的水平升高。结论 :上述结果提示该分析系统是以Wnt依赖的方式、受 β -连环蛋白调节的。该分析系统可以用作一个功能报告系统 ,以鉴定肿瘤发生中导致 β-连环蛋白信号途径失调的潜在的上游因子 ,也同样可以用于筛选那些特异抑制人类肿瘤中 展开更多

关键词 wnt/β-连环蛋白信号途径 β-连环蛋白-绿色荧光蛋白 功能分析系统

在线阅读 下载PDF 职称材料

沉默CDC20基因通过抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的影响 被引量：2

2

作者 刘春静 杨钰杰 +2 位作者 赵薇 刘丽晶 王娜 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1305-1312,共8页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白20 (CDC20)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和细胞周期的影响,并阐明其作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和Western blotting法检测人子宫内膜基质T-HESC细胞和人EC细胞(KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞)... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白20 (CDC20)对子宫内膜癌(EC)细胞增殖和细胞周期的影响,并阐明其作用机制。方法:实时荧光定量PCR (RT-qPCR)和Western blotting法检测人子宫内膜基质T-HESC细胞和人EC细胞(KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞)中CDC20 mRNA及蛋白表达水平,选择RL95-2细胞用于后续实验。将CDC20 shRNA干扰慢病毒转染至RL95-2细胞中,分为对照组、sh-NC组(感染阴性对照慢病毒)、sh-CDC20组(感染CDC20 shRNA干扰慢病毒)、sh-NC+SM04690组(感染阴性对照慢病毒后,加入64 nmol·L^(-1) Wnt/β-连环蛋白信号通路抑制剂SM04690干预48h)和sh-CDC20+SM04690组(感染CDC20shRNA干扰慢病毒后,加入64 nmol·L^(-1) SM04690干预48 h)。RT-qPCR法和Western blotting法检测不同细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,BrdU法检测各组细胞中BrdU阳性细胞百分率,流式细胞术检测各组G2/M期细胞百分率,Western blotting法检测各组细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平。结果:与T-HESC细胞比较,KLE、RL95-2、ZJB-ENC1和ECC-1细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),其中RL95-2细胞中CDC20 mRNA和蛋白表达水平最高。与sh-NC组比较,sh-CDC20组和sh-NC+SM04690组细胞增殖活性和BrdU阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.05),细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与sh-CDC20组比较,sh-CDC20+SM04690组细胞增殖活性和BrdU阳性细胞百分率明显降低(P<0.05),G2/M期细胞百分率明显升高(P<0.05),细胞中β-连环蛋白、c-Myc和细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:EC细胞中CDC20呈高表达,沉默CDC20可能通过调控Wnt/β-连环蛋白信号转导诱导RL95-2细胞G2/M期阻滞,抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 细胞分裂周期蛋白20 细胞周期 细胞增殖 wnt/β-连环蛋白信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

WNT/β-连环蛋白信号转导通路在牙周组织再生中的作用 被引量：1

3

作者 郑桂婷 徐燕 《国际口腔医学杂志》 CAS 2013年第6期773-777,共5页

中重度牙周炎的牙周膜、牙槽骨和牙骨质等牙周组织丧失严重,其最有效的治疗是牙周组织再生技术。WNT/β-连环蛋白信号转导通路可以促进牙周膜细胞、成骨细胞和成牙骨质细胞增殖和分化,以维持牙周膜不断更新,促进牙槽骨和牙骨质的形成和... 中重度牙周炎的牙周膜、牙槽骨和牙骨质等牙周组织丧失严重,其最有效的治疗是牙周组织再生技术。WNT/β-连环蛋白信号转导通路可以促进牙周膜细胞、成骨细胞和成牙骨质细胞增殖和分化,以维持牙周膜不断更新,促进牙槽骨和牙骨质的形成和再生。本文就WNT/β-连环蛋白信号转导通路以及WNT/β-连环蛋白信号转导通路在牙槽骨和牙骨质形成及再生中的作用等研究进展作一综述。 展开更多

关键词 wnt β-连环蛋白信号转导通路 牙周炎 再生 牙槽骨 牙骨质

在线阅读 下载PDF 职称材料

miR-200c通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路诱导膀胱癌细胞阿霉素耐药 被引量：4

4

作者 刘雷 李轶枭 +1 位作者 万波 曾青 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第5期510-516,共7页

目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/... 目的:探讨miR-200c表达与膀胱癌细胞阿霉素(DOX)耐药的关系。方法:过表达或抑制miR-200c表达后,检测DOX对膀胱癌细胞(RT4、RT112、T24和TCCSUP)生长抑制作用的变化。Western blot检测miR-200c对Wnt/β-连环蛋白信号通路的影响,检测Wnt/β-连环蛋白信号激活剂Wnt3a干预对miR-200c诱导膀胱癌DOX耐药作用的影响。结果:抗miR-200c转染后,T24和RT4细胞DOX的耐药性显著下降。DOX干预后,与对照组细胞相比,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞凋亡和S期积累明显增加。此外,抗miR-200c转染组膀胱癌细胞中Dkk1,Kremen2和s FRP2等Wnt/β-连环蛋白信号的负调控蛋白表达明显升高,Wnt/β-连环蛋白信号通路活性明显下降。Wnt3a干预能够拮抗抗miR-200c转染的膀胱癌细胞生长抑制作用。结论:miR-200c表达与膀胱癌细胞DOX耐药密切相关,且Wnt/β-连环蛋白信号通路激活介导了miR-200c诱导的膀胱癌细胞DOX耐药性。 展开更多

关键词 膀胱癌 阿霉素 微小核糖核酸 MIR-200C wnt/β-连环蛋白信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

Wnt/β-连环蛋白通路在免疫检查点抑制剂耐药中作用的研究进展 被引量：1

5

作者 王晨越 吴莉沙 +2 位作者 汤承博 王进 解伟 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期224-233,共10页

Wnt/β-连环蛋白信号通路是癌症领域最热门的分子靶点之一,与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关.Wnt/β-连环蛋白信号通路还广泛应用于肿瘤免疫调节,异常活化的Wnt/β-连环蛋白与肿瘤免疫抑制微环境密切相关.目前,免疫检查点抑制剂的研... Wnt/β-连环蛋白信号通路是癌症领域最热门的分子靶点之一,与许多恶性肿瘤的发生和发展密切相关.Wnt/β-连环蛋白信号通路还广泛应用于肿瘤免疫调节,异常活化的Wnt/β-连环蛋白与肿瘤免疫抑制微环境密切相关.目前,免疫检查点抑制剂的研究和应用已相当广泛,但是以靶向程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)/程序性死亡配体1(programmed cell death ligand 1,PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞抗原4(cytotoxic T lymphocyte antigen-4,CTLA-4)为代表的免疫检查点抑制剂存在患者响应率低和耐药的问题.Wnt/β-连环蛋白的激活会抑制肿瘤微环境CD8^(+)T细胞的浸润,抑制抗肿瘤免疫反应并诱导免疫检查点抑制剂耐药.重点讨论了Wnt/β-连环蛋白信号通路与免疫检查点的关系,并对Wnt/β-连环蛋白抑制剂联合免疫检查点抑制剂治疗恶性肿瘤的研究进展进行综述. 展开更多

关键词 wnt/β-连环蛋白信号通路 免疫检查点 免疫逃逸 免疫抑制微环境

在线阅读 下载PDF 职称材料

Wnt/β-catenin信号途径在糖尿病肾病患者肾小管间质损伤中的作用 被引量：9

6

作者 闫喆 姚芳 +3 位作者 杨林 邢玲玲 焦素敏 李绍梅 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期719-723,共5页

目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者肾小管间质损伤中的作用。方法收集DN患者46例,根据肾小管间质损伤程度分为轻+中度组及重度组,以10例肾肿瘤患者瘤旁组织作为对照组。采用免疫组化SP法检测肾... 目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者肾小管间质损伤中的作用。方法收集DN患者46例,根据肾小管间质损伤程度分为轻+中度组及重度组,以10例肾肿瘤患者瘤旁组织作为对照组。采用免疫组化SP法检测肾组织中Wnt4、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(phospho-glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)、β-catenin的表达;分析三者表达与临床指标、肾小管间质损伤积分的相关性。结果与轻+中度DN组及对照组相比,重度组DN尿蛋白增多,肾小管间质损伤积分增高。肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,e GFR)下降。DN轻+中度组肾小管上皮细胞Wnt4、p-GSK-3β、β-catenin表达较对照组增强;且三者表达与24 h尿蛋白、肾小管间质损伤积分呈正相关,与e GFR呈负相关。结论 Wnt/β-catenin信号途径可能参与DN患者肾小管间质纤维化的过程。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 肾小管间质 wnt/β-catenin信号途径 糖原合成酶激酶-3Β

在线阅读 下载PDF 职称材料

β-连环蛋白在毛囊形态发生及毛囊干细胞增生分化的作用 被引量：11

7

作者 林常敏 李宇 《医学研究生学报》 CAS 2004年第4期358-360,共3页

β 连环蛋白 (β catenin)是一个多功能、广泛分布的蛋白。它参与了包括胚胎形成及个体发育等许多生物过程 ,该文作者综述了β catenin在诱导毛囊形态发生及毛囊干细胞增生分化中的关键性作用。

关键词 β-连环蛋白 毛囊 wnt信号系统

在线阅读 下载PDF 职称材料

β-连环蛋白与大肠癌关系的研究进展 被引量：3

8

作者 杨平玲 江飞舟 徐敏丽 《实用医学杂志》 CAS 2008年第8期1286-1288,共3页

大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率常呈上升趋势，严重威胁人们生命健康。β-连环蛋白（β-catenin）是细胞重要的信号传递蛋白，参与细胞黏附、生长、增殖等过程。Wnt／β-catenin信号途径已被公认为肿瘤发生过程中关键的信号通... 大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，其发病率常呈上升趋势，严重威胁人们生命健康。β-连环蛋白（β-catenin）是细胞重要的信号传递蛋白，参与细胞黏附、生长、增殖等过程。Wnt／β-catenin信号途径已被公认为肿瘤发生过程中关键的信号通路之一，尤其在大肠癌的发生、发展上。目前研究表明，约90％的大肠癌发生与该通路过度激活有关。本文将系统阐述β-catenin与大肠癌发生发展关系的研究进展。 展开更多

关键词 β-连环蛋白 大肠癌 wnt/β-CATENIN 信号通路 肿瘤发生过程 细胞黏附 恶性肿瘤 传递蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

芒果苷通过调控Wnt/β-catenin信号通路对大鼠髋部骨折愈合的作用 被引量：1

9

作者 李东方 李浩亮 +1 位作者 李光辉 李扬 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期956-962,共7页

目的:探讨芒果苷(MGF)通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对大鼠髋部骨折愈合的作用,阐明其相关作用机制。方法:建立SD大鼠髋部骨折模型,造模成功后将大鼠分为模型组、MGF组和MGF+XAV-939(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂)组,... 目的:探讨芒果苷(MGF)通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对大鼠髋部骨折愈合的作用,阐明其相关作用机制。方法:建立SD大鼠髋部骨折模型,造模成功后将大鼠分为模型组、MGF组和MGF+XAV-939(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂)组,另设假手术组,每组15只。术后第1天各组大鼠按分组方法给予MGF或XAV-939干预,每2 d给药1次,共14次。采用Lane-Sandhu X射线评分法评估术后第2和4周各组大鼠骨折愈合情况,显微CT(Micro CT)检测各组大鼠骨显微结构参数骨体积(BV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁厚度(Tb.Th),HE染色观察各组大鼠骨痂组织形态表现,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中成骨标志物骨碱性磷酸酶(BALP)和Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)及破骨标志物抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)和Ⅰ型胶原羧基末端肽(CTX)水平,Western blotting法检测各组大鼠骨痂组织中β-catenin、Runt相关转录因子2(Runx2)和骨形态发生蛋白2(BMP-2)蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠骨折后第2和4周骨折线清晰,骨折部位存在较多纤维组织,未发现骨性骨痂,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均降低(P<0.05),血清中BALP水平降低(P<0.05),PINP、TRACP-5b和CTX水平升高(P<0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。与模型组比较,MGF组大鼠骨折后第2周新生骨痂明显增多,第4周骨折线基本消失,骨折愈合较快,骨折部位大量纤维组织被骨组织替代,骨性骨痂量明显增多,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均升高(P<0.05),血清中BALP水平升高(P<0.05),PINP、TRACP-5b和CTX水平降低(P<0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。与MGF组比较,MGF+XAV-939组大鼠骨折后第2和4周骨折部位仅有少量新生骨痂,髓腔未形成,Lane-Sandhu X射线评分及骨显微结构参数BV、Tb.N、BV/TV和Tb.Th均降低(P<0.05),血清中BALP水平降低(P<0.05),PINP、TRACP-5b和CTX水平升高(P<0.05),骨痂组织中β-catenin、Runx2和BMP-2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:MGF可促进大鼠髋部骨折愈合,其作用机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多

关键词 芒果苷 髋部骨折 愈合 XAV-939 wnt/β-连环蛋白信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

β-连环蛋白与细胞周期蛋白D1在宫颈鳞癌中的表达及意义 被引量：4

10

作者 史慧星 陈云 +2 位作者 游庆朋 杨磊 袁红 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第32期3642-3645,共4页

目的观察宫颈鳞癌组织中β-连环蛋白(β-catenin)与细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达,探讨它们在宫颈鳞癌发生、发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学法检测宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、正常宫颈组织中β-catenin与cyclinD1... 目的观察宫颈鳞癌组织中β-连环蛋白(β-catenin)与细胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表达,探讨它们在宫颈鳞癌发生、发展过程中的作用。方法应用免疫组织化学法检测宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、正常宫颈组织中β-catenin与cyclinD1的表达特点,结合临床病理资料进行分析。结果 (1)β-catenin在正常宫颈组织(n=8)、CIN(n=20)及宫颈鳞癌(n=42)中的异常表达率分别是0、35.0%及64.3%,三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);β-catenin在宫颈鳞癌不同分级组织中阳性表达分别为Ⅰ级25.0%、Ⅱ级63.6%、Ⅲ级91.7%,不同分级组织中差异有统计学意义(P<0.01)。宫颈鳞癌淋巴结阳性组的β-catenin异位阳性表达率与淋巴结阴性组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)cyclinD1在正常宫颈组织、CIN及宫颈鳞癌组织中的阳性表达率则分别是0、30.0%和61.9%,三组间比较差异有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌不同分级组织中cyclinD1的表达分别为Ⅰ级37.5%、Ⅱ级54.6%、Ⅲ级91.7%,三组间比较差异有统计学意义(P<0.05),cyclinD1在宫颈鳞癌淋巴结阳性组与阴性组的阳性表达率分别为70.0%和59.4%,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)β-catenin异常表达与cyclinD1的阳性表达呈正相关(r=0.885,P<0.05)。结论 (1)宫颈鳞癌中存在β-catenin和cyclinD1的异常表达,随着正常宫颈组织向CIN再向宫颈鳞癌的进展,β-catenin及cyclinD1的异常表达呈递增趋势且两者存在明显的相关性。提示Wnt/β-catenin信号通路在宫颈鳞癌的发生发展中可能起重要的作用。(2)β-catenin异位表达及cy-clinD1阳性表达均与宫颈鳞癌分化相关,但与淋巴结是否转移无关。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 癌 鳞状细胞 宫颈上皮内瘤样病变 β-连环蛋白 细胞周期蛋白D1 wnt信号传导通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

卵巢浆液性腺癌中Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc的表达及意义 被引量：6

11

作者 戴颖青 管群 +4 位作者 刘琦 王建军 余波 王建东 石群立 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期709-712,共4页

目的检测Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc在卵巢浆液性腺癌(ovarian serous adenocarcinoma,OSA)中的表达,探讨其与肿瘤FIGO分期、病理分级、复发的关系。方法应用免疫组化EnVision两步法检测60例OSA中β-catenin、c-myc的表达,并进... 目的检测Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc在卵巢浆液性腺癌(ovarian serous adenocarcinoma,OSA)中的表达,探讨其与肿瘤FIGO分期、病理分级、复发的关系。方法应用免疫组化EnVision两步法检测60例OSA中β-catenin、c-myc的表达,并进行预后分析。结果 (1)FIGO分期:β-catenin在Ⅲ+Ⅳ组中的表达高于Ⅰ+Ⅱ组(P=0.003);c-myc表达与FIGO分期无关(P=0.069)。(2)病理分级:β-catenin的表达与病理分级无关(P=0.817);c-myc在高级别组中的表达高于低级别组(P=0.016)。(3)复发:β-catenin、c-myc表达与患者复发均无关(P=0.349,P=0.171)。(4)预后分析:β-catenin、c-myc阳性组患者的生存率均低于阴性组(P=0.032,P=0.035)。结论 Wnt信号通路成分β-catenin、c-myc可能在OSA的发生、发展及患者的不良预后中发挥作用,检测其表达可能具有一定的临床意义。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 浆液性腺癌 wnt信号通路 β-连环蛋白 C-MYC 免疫组织化学

在线阅读 下载PDF 职称材料

转染nm23-H_1基因靶向阻断人大细胞肺癌细胞株L9981 Wnt信号传导通路 被引量：4

12

作者 付军科 周清华 +6 位作者 朱文 王艳萍 刘伦旭 陈小禾 聂强 李定彪 李印 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第4期294-297,共4页

目的　探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法　以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L998... 目的　探讨nm2 3 H1 基因转染靶向阻断人高转移大细胞肺癌细胞株L9981Wnt信号传导通路的可行性 ,为阐明nm2 3 H1 基因调控肺癌转移抑制的分子机制和靶向治疗提供实验依据。方法　以转染nm 2 3 H1 基因的L9981 nm 2 3 H1 、原代L9981、空载L9981 pLXSN三株人高转移大细胞肺癌细胞为研究对象 ,应用Westernblot检测比较各株肺癌细胞胞浆、胞核中Wnt信号传导通路关键激酶GSK 3 β和 β 连环蛋白表达的变化。结果　①GSK 3 β在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 63 41± 5 41)显著高于L9981( 373 6± 2 98)和L9981 pLXSN( 3 613± 3 83 ) (P <0 .0 0 1) ;②GSK 3 β在L9981 nm2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 4 3 5 6± 490 )显著高于L9981( 65 7± 5 7)和L9981 pLXSN ( 70 5± 75 ) (P <0 .0 0 1) ;③β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞浆中表达量IOD( 3 64 9± 118)显著高于L9981( 14 0 1± 3 1)和L9981 pLXSN ( 13 5 0± 5 5 )(P <0 .0 0 1) ;④β 连环蛋白在L9981 nm 2 3 H1 肺癌细胞胞核中表达量IOD( 2 945± 68)与L9981( 2 60 4± 2 3 )和L9981 pLXSN( 2 65 2± 5 3 )比较无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;⑤L9981与L9981 pLXSN两者间GSK 3 β和β 连环蛋白在肺癌细胞胞浆和胞核的? 展开更多

关键词 L9981 nm-23-H1基因 GSK-3Β β-连环蛋白 wnt信号通路 分子靶向阻断

在线阅读 下载PDF 职称材料

宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移和侵袭的影响及其Wnt/β-catenin信号通路机制 被引量：3

13

作者 刘晶 王景 +5 位作者 葛静 冯艳萍 房桂英 王旭 杨艳红 李林 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期798-803,I0006,共7页

目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电... 目的:探讨宫颈癌HeLa细胞外泌体对细胞迁移、侵袭及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路的影响,阐明其外泌体在宫颈癌发生发展过程中的可能作用机制。方法:取对数生长期宫颈癌HeLa细胞,采用超速离心法分离宫颈癌HeLa细胞外泌体,透射电镜下观察外泌体形态表现,Western blotting法检测外泌体标志蛋白CD63和CD81的表达,鉴定分离出来的外泌体。将HeLa细胞分为外泌体组(Exo组)和对照组,2组细胞分别用含和不含HeLa细胞外泌体的培养基培养。共聚焦显微镜下观察HeLa细胞摄取外泌体情况,其中外泌体采用PKH26荧光标记,HeLa细胞用DAPI荧光进行核染色,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞划痕实验测定细胞迁移能力,Western blotting法检测细胞中Wnt1、β-catenin和T细胞因子4(TCF4)蛋白表达水平。结果:透射电镜下观察,HeLa细胞中分离的外泌体为是圆形或椭圆形、直径为40~100 nm的囊泡状小体,且富含CD63和CD81蛋白。共聚焦显微镜下观察,Exo组HeLa细胞膜表面有外泌体附着,而对照组HeLa细胞膜表面无外泌体附着。Transwell小室实验,Exo组HeLa细胞中侵袭细胞数明显高于对照组(t=17.894,P<0.01)。细胞划痕实验,Exo组HeLa细胞迁移距离明显长于对照组(t=9.689,P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,Exo组HeLa细胞中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白Wnt1、β-catenin和TCF4蛋白表达水平均明显升高(t=13.159,P<0.01;t=15.478,P<0.01;t=7.734,P<0.01)。结论:宫颈癌HeLa细胞来源的外泌体可促进宫颈癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与HeLa细胞来源外泌体可促进Wnt/β-catenin信号通路的激活及下游TCF4基因的表达有关。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 外泌体 细胞迁移 细胞侵袭 wnt/β-连环蛋白信号通路 T细胞因子4

在线阅读 下载PDF 职称材料

柴胡桂枝汤加减通过调节Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的改善作用及机制研究 被引量：4

14

作者 郭中华 史栋梁 +9 位作者 曹玉举 王云飞 杨少祥 秦合伟 张仲博 任博文 周松林 王俊杰 王莉莎 万小冠 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第10期15-22,共8页

目的探讨柴胡桂枝汤加减(CGD)调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对骨质疏松大鼠的改善作用。方法将SD大鼠分组为Model组、CK组、高剂量CGD组(CGD-H组,20 g/kg)、低剂量CGD组(CGD-L组,5 g/kg)、戊酸雌二醇组(EV组,9 mg/kg)、DKK-1... 目的探讨柴胡桂枝汤加减(CGD)调节Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路对骨质疏松大鼠的改善作用。方法将SD大鼠分组为Model组、CK组、高剂量CGD组(CGD-H组,20 g/kg)、低剂量CGD组(CGD-L组,5 g/kg)、戊酸雌二醇组(EV组,9 mg/kg)、DKK-1组(Wnt/β-catenin通路抑制剂,100 mg/kg)和CGD-H+DKK-1组(20 g/kg+100 mg/kg),每组12只。除CK组外,其他组大鼠均通过灌胃70 mg/kg维甲酸的方式构建骨质疏松症(OP)大鼠模型,CK组大鼠灌胃等量的生理盐水。造模4周开始给予相应的药物干预4周。ELISA法检测大鼠血清中Ⅰ型胶-原C端肽(CTX-Ⅰ)、骨钙素(BGP)水平;观察股骨微观结构相关指标骨体积分数、骨小梁厚度、骨密度、骨小梁数量的变化;HE染色检测大鼠股骨病理变化;碱性磷酸酶(ALP)钙-钴染色检测大鼠股骨中成骨细胞活性;抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测大鼠股骨组织中破骨细胞活性;Western blot检测各组大鼠股骨组织中Wnt3a、β-catenin蛋白。结果与CK组比较,Model组大鼠股骨组织病理损伤严重,CTX-Ⅰ水平、破骨细胞活性升高,BGP水平、骨体积分数、骨小梁厚度、骨密度、骨小梁数量、成骨细胞活性、Wnt3a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05);与Model组比较,CGD-L组、CGD-H组、EV组大鼠股骨组织病理损伤减轻,CTX-Ⅰ水平、破骨细胞活性降低,BGP水平、骨体积分数、骨小梁厚度、骨密度、骨小梁数量、成骨细胞活性、Wnt3a、β-catenin蛋白表达升高,而DKK-1组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);与CGD-H组比较,CGD-H+DKK-1组大鼠股骨组织病理损伤严重,CTX-Ⅰ水平、破骨细胞活性升高,BGP水平、骨体积分数、骨小梁厚度、骨密度、骨小梁数量、成骨细胞活性、Wnt3a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05)。结论CGD可能通过激活Wnt/β-Catenin通路改善大鼠OP。 展开更多

关键词 柴胡桂枝汤加减 wnt/β-连环蛋白信号通路 骨质疏松症 成骨细胞 破骨细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

β-连环素及相关蛋白在脂多糖致急性肺损伤小鼠气道上皮的表达 被引量：4

15

作者 洪渊智 李娜萍 +2 位作者 吴人亮 刘明阁 马燕 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期421-424,共4页

目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时β-连环素(-βcate-nin,-βcat)在气道上皮细胞的表达变化及其意义。方法在建立LPS气管注射致小鼠急性肺损伤模型基础上,应用免疫组织化学染色检测-β... 目的研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)致小鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时β-连环素(-βcate-nin,-βcat)在气道上皮细胞的表达变化及其意义。方法在建立LPS气管注射致小鼠急性肺损伤模型基础上,应用免疫组织化学染色检测-βcat、糖原合成酶激酶3-β(GSK3-β)在气道上皮的表达;应用Western blot检测肺组织内蛋白激酶C(PKC)、GSK3-β、磷酸化GSK3-β(P-GSK3-β)以及-βcat蛋白的表达。结果免疫检测显示,与正常组小鼠相比,LPS致急性肺损伤的小鼠气道上皮中,胞膜上-βcat及胞质内GSK3-β蛋白含量均明显降低(均P<0.05);Western blot检测显示,肺组织内PKC、P-GSK3-β及-βcat蛋白含量均较正常组小鼠明显升高(均P<0.05),而GSK3-β蛋白含量显著下降(P<0.05)。结论由LPS所致的小鼠ALI,一方面引起胞膜上行使连接功能的-βcat含量显著下降;另一方面可能通过PKC激活、GSK3-β磷酸化失活,导致胞质内-βcat含量的增加,使-βcat转入核内并与转录因子结合,启动Wnt途径靶基因转录,从而在气道上皮的损伤修复中发挥重要作用。 展开更多

关键词 急性肺损伤 β-连环素 wnt信号途径 蛋白激酶C 糖原合成酶激酶3

在线阅读 下载PDF 职称材料

Wnt/β-catenin信号通路与microRNA相互作用的研究进展 被引量：1

16

作者 左慧敏 曾林祥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第14期2340-2342,共3页

Wnt 基因最早是1982年 Nusse等［1］在用小鼠乳头瘤病毒诱导小鼠产生乳腺癌的过程中发现的。 Wnt基因表达因子参与细胞生长、凋亡及干细胞分化等重要生理过程。 Wnt基因所编码的蛋白是一类分泌型糖蛋白，它具有分泌型生长因子的特点，W... Wnt 基因最早是1982年 Nusse等［1］在用小鼠乳头瘤病毒诱导小鼠产生乳腺癌的过程中发现的。 Wnt基因表达因子参与细胞生长、凋亡及干细胞分化等重要生理过程。 Wnt基因所编码的蛋白是一类分泌型糖蛋白，它具有分泌型生长因子的特点，Wnt 被分泌后，既可与自身细胞的膜受体结合发挥自分泌调节作用，也可与邻近细胞的膜受体结合发挥旁分泌作用。现已发现的Wnt通路分支有（1）经典Wnt／β-连环蛋白（Wnt／β-catenin）信号转导通路；（2）平行细胞极性通路；（3） Wnt／Ca＋通路；（4）调节纺锤体定向和不对称细胞分裂的通路［2］。其中经典Wnt 信号通路即 Wnt／β-catenin 通路，是 Wnt 信号中研究最清楚的一条通路，在整个进化过程中高度保守。微小RNA（microRNA）是广泛存在于真核生物中的一类长度约为22个核苷酸的内源性非编码单链小分子RNA，由一段具有茎环结构、长度为70～80个核苷酸单链RNA前体剪切而成，可通过与其相关的mRNA分子3′端非编码区（untranslated region， UTR）互补配对，与Argonaute 蛋白结合形成 RNA 诱导的沉默复合体（RISCs）促进靶mRNA的降解或抑制其翻译负调控基因表达而发挥生物学作用［3-5］，也可以通过甲基化及调节转录因子参与基因表达的转录后调控［6］。 展开更多

关键词 wnt β-catenin microRNA 信号通路 相互作用 wnt β-连环蛋白 调控基因表达 自分泌调节 信号转导通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

Wnt/β-catenin与NF-κB信号通路在邻苯二甲酸二丁酯诱导雄性大鼠发生尿道下裂中的表达

17

作者 张力峰 王勇 +5 位作者 常俊锴 魏俊峰 魏云飞 秦超 冯宁翰 张炜 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1533-1536,共4页

目的:利用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕晚期暴露诱导子代SD大鼠发生尿道下裂,验证Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)及核因子κB(NF-κB)信号通路中关键蛋白在胎鼠生殖结节中的差异表达,探讨该通路在DBP致大鼠生殖系统发育异常过程中的作用机制... 目的:利用邻苯二甲酸二丁酯(DBP)孕晚期暴露诱导子代SD大鼠发生尿道下裂,验证Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)及核因子κB(NF-κB)信号通路中关键蛋白在胎鼠生殖结节中的差异表达,探讨该通路在DBP致大鼠生殖系统发育异常过程中的作用机制。方法:孕SD大鼠20只,随机分为DBP组和对照组,在妊娠(GD)14～18天,每天分别通过灌胃给予DBP和大豆油800mg/kg,于GD19天处死后取胎鼠,鉴别出DBP组中发生尿道下裂的雄性胎鼠及对照组中的雄性胎鼠,分为尿道下裂组与正常对照组,提取生殖结节组织,Westernblot检测β-catenin、糖原合成酶-3β(GSK-3β)和NF-κB的表达情况。结果:DBP染毒后子代雄性胎鼠出生体重较对照组明显下降,肛门生殖器距离(AGD)明显缩短,尿道下裂发生率为46.7%,同时尿道下裂组与正常对照组中β-catenin相对表达量的比值为0.505±0.014(P<0.05),GSK-3β与NF-κB相对表达量的比值分别为1.903±0.018和3.661±0.021(P均<0.05)。结论:DBP可能通过干预生殖结节中Wnt/β-catenin和NF-κB信号通路的正常表达导致尿道下裂的发生。 展开更多

关键词 邻苯二甲酸二丁酯 尿道下裂 生殖结节 wnt/β-连环蛋白信号通路 NF-ΚB

在线阅读 下载PDF 职称材料

Wnt/β-catenin信号通路在强直性脊柱炎成骨中的研究进展 被引量：5

18

作者 高丽红 刘欣 +1 位作者 吴歆 徐沪济 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期435-439,共5页

强直性脊柱炎(AS)是以骶髂关节和脊柱关节受累为主的免疫介导的慢性炎症性疾病,其主要病理特点为附着点炎和新骨形成导致关节融合,目前发病机制尚不明确。Wnt信号通路在正常骨稳态特别是成骨细胞新骨形成中尤为关键,可能在AS发病机制中... 强直性脊柱炎(AS)是以骶髂关节和脊柱关节受累为主的免疫介导的慢性炎症性疾病,其主要病理特点为附着点炎和新骨形成导致关节融合,目前发病机制尚不明确。Wnt信号通路在正常骨稳态特别是成骨细胞新骨形成中尤为关键,可能在AS发病机制中发挥重要作用。研究表明慢性炎症和遗传调控能够通过Wnt信号通路共同参与AS新骨形成。本文主要就近年来Wnt/β-catenin信号通路在AS骨代谢中的影响作一综述。 展开更多

关键词 强直性脊柱炎 wnt信号通路 β-连环蛋白 成骨

在线阅读 下载PDF 职称材料

Wnt/β-catenin信号通路调控哮喘气道重塑的机制研究 被引量：14

19

作者 贾宵宵 郑榕颖 +2 位作者 黄悦 曾泽宇 张维溪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1683-1689,共7页

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路调控哮喘气道平滑肌细胞(ASMC)的功能和参与哮喘气道重塑的机制。方法:建立大鼠哮喘模型,提取大鼠ASMC。Western blot法检测哮喘组和正常组大鼠ASMC中β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-... 目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路调控哮喘气道平滑肌细胞(ASMC)的功能和参与哮喘气道重塑的机制。方法:建立大鼠哮喘模型,提取大鼠ASMC。Western blot法检测哮喘组和正常组大鼠ASMC中β-连环蛋白(β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、原癌基因c-Myc和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的蛋白表达。抑制哮喘组和对照组ASMC中β-catenin和转录辅助因子p300/CBP间的相互作用后,采用CCK-8法和流式细胞术检测ASMC的细胞活力和周期变化。抑制P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)活性后,采用Western blot法检测c-Myc和cyclin D1的蛋白表达变化。结果:Western blot法显示哮喘组ASMC中β-catenin、c-Myc和cyclin D1的蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05),同时GSK-3β的蛋白表达水平则低于对照组(P<0.05)。抑制β-catenin和p300/CBP间相互作用后,哮喘组ASMC的细胞活力下降幅度和细胞周期改变程度均较对照组更为明显(P<0.05)。抑制P38 MAPK活性后,哮喘模型大鼠及对照大鼠ASMC中Wnt/β-catenin信号通路的靶蛋白c-Myc和cyclin D1的表达均下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路可能通过上调c-Myc和cyclin D1的表达、与P38 MAPK信号通路相互作用以及调控ASMC的生长和分化等途径,影响ASMC的功能,参与哮喘气道重塑。 展开更多

关键词 哮喘 气道重塑 气道平滑肌细胞 wnt/β-catenin信号通路 β-连环蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

灵芝三萜通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量：21

20

作者 蔡蕤 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1320-1324,共5页

目的 灵芝三萜通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 灵芝三萜(10、50、100 μg/mL)作用HepG2人肝癌细胞24、48、72 h,MTT和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡.100 μg/mL灵芝三萜作用HepG2细胞24、48、72 h,Western ... 目的 灵芝三萜通过Wnt/β-catenin信号通路对肝癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 灵芝三萜(10、50、100 μg/mL)作用HepG2人肝癌细胞24、48、72 h,MTT和流式细胞仪检测细胞增殖和凋亡.100 μg/mL灵芝三萜作用HepG2细胞24、48、72 h,Western blot检测c-myc、cyclinD1、caspase-3、caspase-8、β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达.分别以20 μmol/L XAV-939、20 mmol/L LiCl及100 μg/mL灵芝三萜联合20 mmol/L LiCl干预HepG2细胞,MTT和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡.结果 灵芝三萜(10、50、100 μg/mL)抑制HepG2细胞增殖(P<0.05),诱导细胞凋亡(P<0.05).100 μg/mL灵芝三萜作用HepG2细胞24、48、72 h,细胞caspase-3、caspase-8蛋白表达上调(P<0.05),而c-myc、cyclinD1、β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达下调(P<0.05).20 μmol/L XAV-939干预能抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡(P<0.05),20 mmol/L LiCl则能在一定程度上减弱灵芝三萜对HepG2细胞增殖的抑制和细胞凋亡的诱导作用(P<0.05).结论 灵芝三萜能够通过Wnt/[β-catenin信号通路调节c-myc、cyclinD1、caspase-3、caspase-8蛋白表达,抑制肝癌细胞增殖并诱导细胞凋亡. 展开更多

关键词 灵芝三萜 肝癌 wnt/β-连环蛋白信号通路 增殖 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料