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粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和屎肠球菌(Enterococcus faecium)产生物胺交互作用研究 被引量:8
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作者 舒蕊华 卢士玲 徐幸莲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期16-20,24,共6页
粪肠球菌和屎肠球菌是发酵香肠中常检出的2种主要的产酪胺和苯乙胺微生物。将粪肠球菌和屎肠球菌按照不同比例进行混合接种培养,发现在48h连续培养过程中,当粪肠球菌和屎肠球菌以1∶9比例混和接种培养时,体系pH值、细菌数量和酪胺生成... 粪肠球菌和屎肠球菌是发酵香肠中常检出的2种主要的产酪胺和苯乙胺微生物。将粪肠球菌和屎肠球菌按照不同比例进行混合接种培养,发现在48h连续培养过程中,当粪肠球菌和屎肠球菌以1∶9比例混和接种培养时,体系pH值、细菌数量和酪胺生成量均显著低于其他各处理组;粪肠球菌有很强的产苯乙胺能力而屎肠球菌产苯乙胺能力较弱,当两者混合接种培养时,各混合体系的产苯乙胺水平相当,屎肠球菌产苯乙胺能力不受影响,而粪肠球菌产苯乙胺能力显著降低。 展开更多
关键词 粪肠球菌 屎肠球菌 酪胺 苯乙胺
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Enterococcus faecalis RQ15产低温中性蛋白酶的纯化及酶学性质 被引量:3
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作者 朱巍巍 李杨 +3 位作者 朱万琴 王艳华 冀宝赢 孙翠焕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第11期239-242,共4页
采用DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 75对Enterococcus faecalis RQ15产蛋白酶进行纯化和酶学性质研究。SDS-PAGE测定该蛋白酶分子质量为32.4kD,最适作用温度35~40℃,最适pH7.5。20~40℃之间酶活较高,pH值耐受范围广泛,具有低... 采用DEAE Sepharose Fast Flow和SuperdexTM 75对Enterococcus faecalis RQ15产蛋白酶进行纯化和酶学性质研究。SDS-PAGE测定该蛋白酶分子质量为32.4kD,最适作用温度35~40℃,最适pH7.5。20~40℃之间酶活较高,pH值耐受范围广泛,具有低温蛋白酶的特征。Zn2+对蛋白酶有激活作用,Ag+、Hg2+和EDTA-Na2对酶有显著抑制作用。纯酶最适作用条件下对酪蛋白底物的Km和Vmax分别为1.31×10-4mol/L和6.92×10-6mol/(L.s)。 展开更多
关键词 enterococcusfaecalis 低温蛋白酶 纯化
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粪肠球菌(Enterococcus faecalis)β酮脂酰ACP合成酶Ⅱ同源蛋白功能分析 被引量:3
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作者 王玉琪 孙益嵘 +1 位作者 陈艺彩 王海洪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第8期844-850,共7页
FabB和FabF是大肠杆菌(Escherichia.coli)脂肪酸合成的关键酶.生物信息学分析显示,粪肠球菌基因组中有2个与大肠杆菌fabF同源的基因:fabF1和fabF2,缺少与fabB同源的基因.用粪肠球菌(Enterococcus faecalis)V583总DNA为模板,PCR扩增fabF1... FabB和FabF是大肠杆菌(Escherichia.coli)脂肪酸合成的关键酶.生物信息学分析显示,粪肠球菌基因组中有2个与大肠杆菌fabF同源的基因:fabF1和fabF2,缺少与fabB同源的基因.用粪肠球菌(Enterococcus faecalis)V583总DNA为模板,PCR扩增fabF1和fabF2基因,以pBAD24为载体,构建了重组质粒pHW13(fabF1)和pHW14(fabF2).体内体外研究显示:fabF1基因能互补大肠杆菌fabB突变,FabF1具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性;fabF2能互补大肠杆菌fabF突变,FabF2具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅱ(FabF)活性.同时发现粪肠球菌FabF2不同于大肠杆菌FabF,它还拥有微弱β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性,可使大肠杆菌fabB突变株产生少量的不饱和脂肪酸.上述结果表明,FabF类酶(FabF like enzyme)同样可以具有β酮脂酰ACP合成酶Ⅰ(FabB)活性. 展开更多
关键词 粪肠球菌 FabF同源蛋白 β酮脂酰ACP合成酶
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粪肠球菌Enterococcus faecalis EC-12的万古霉素耐药基因检测 被引量:1
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作者 刘洋 张欣 +4 位作者 陈建国 梁寒峭 程池 伊地知哲生 大盛達也 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期226-229,共4页
对粪肠球菌Enterococcus faecalis EC-12的万古霉素耐药基因进行了筛查。通过PCR方法,以7种典型肠球菌万古霉素耐药基因(vanA、vanB、vanC1、vanC2/C3、vanD、vanE和vanG)进行特异性扩增,结果均为阴性。采用PCR方法检测万古霉素耐药肠... 对粪肠球菌Enterococcus faecalis EC-12的万古霉素耐药基因进行了筛查。通过PCR方法,以7种典型肠球菌万古霉素耐药基因(vanA、vanB、vanC1、vanC2/C3、vanD、vanE和vanG)进行特异性扩增,结果均为阴性。采用PCR方法检测万古霉素耐药肠球菌简便、高效、准确。 展开更多
关键词 粪肠球菌 万古霉素 耐药基因 PCR
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藏灵菇中Enterococcus faecalis RQ15的分离及鉴定 被引量:1
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作者 孙翠焕 冀宝营 +2 位作者 朱巍巍 王艳华 朱万芹 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期89-92,共4页
以民间家庭制作酸奶用藏灵菇为试材,通过有氧与厌氧相结合的分离方式,从中分离到1株乳酸球菌。经形态学、生理生化特性研究及分子生物学鉴定,该菌株为粪肠球菌,编号Enterococcus faecalis RQ15。在12%复原脱脂乳中延时培养及冷藏保存该... 以民间家庭制作酸奶用藏灵菇为试材,通过有氧与厌氧相结合的分离方式,从中分离到1株乳酸球菌。经形态学、生理生化特性研究及分子生物学鉴定,该菌株为粪肠球菌,编号Enterococcus faecalis RQ15。在12%复原脱脂乳中延时培养及冷藏保存该菌株时,产生胨化现象。后续的研究表明Enterococcus faecalis RQ15产生的蛋白酶具有低温蛋白酶的特征。 展开更多
关键词 藏灵菇 粪肠球菌 分离鉴定 低温蛋白酶
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乳酸菌Enterococcuse faecalis TN-9低温蛋白酶的提纯及性质 被引量:2
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作者 袁清珠 林笃志 +1 位作者 北村良久 岛田贵志 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期20-25,共6页
对产自乳酸菌Enterococcuse faecalis TN-9的蛋白酶,进行了硫酸铵沉淀,DEAE-Sephadex A-25以及DEAE Cellulofine A-500离子交换层析的3步纯化和特性研究。纯化酶Native PAGE显示1条蛋白带。SDS-PAGE和凝胶层析分子量分别为30 ku及69 ku... 对产自乳酸菌Enterococcuse faecalis TN-9的蛋白酶,进行了硫酸铵沉淀,DEAE-Sephadex A-25以及DEAE Cellulofine A-500离子交换层析的3步纯化和特性研究。纯化酶Native PAGE显示1条蛋白带。SDS-PAGE和凝胶层析分子量分别为30 ku及69 ku。纯化酶最适作用温度为30℃,最适作用pH为7.5~8.0,在pH 6.0~9.5和45℃以下条件下稳定,在0℃下显示了6.1%的相对活性,60℃以上热处理完全失去酶活。该酶被EDTA-2Na,Hg^(2+)、Cu^(2+)、Ni^(2+)、Ag^(2+)、Co^(2+)及Pepstatin A不完全抑制。Zn^(2+)对蛋白酶具有明显的激活作用。纯化酶作用于偶氮酪蛋白的K_(rs)和V_(max)分别为0.098%和72 mg/(h·mg)。该酶为N末端VGSEVTLKNS的明胶酶(Gelatinase)的一种,性质属于低温蛋白酶。 展开更多
关键词 enterococcuse faecalis 低温蛋白酶 海洋深层水
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产细菌素肠球菌筛选鉴定及其对耐万古霉素菌跨膜抑菌效应的研究 被引量:1
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作者 张海涛 马丽艳 +1 位作者 张俊杰 迟海 《海洋渔业》 北大核心 2025年第3期405-412,共8页
细菌素是一种对亲缘微生物具有高效抑制作用的抗菌肽,是可以有效代替抗生素的抗菌物质之一。从江苏琼港采集的文蛤(Meretrix meretrix)中特异性分离肠球菌(Enterococcus),并以非入侵性的耐万古霉素的屎肠球菌(VREfm)和金黄色葡萄球菌(VR... 细菌素是一种对亲缘微生物具有高效抑制作用的抗菌肽,是可以有效代替抗生素的抗菌物质之一。从江苏琼港采集的文蛤(Meretrix meretrix)中特异性分离肠球菌(Enterococcus),并以非入侵性的耐万古霉素的屎肠球菌(VREfm)和金黄色葡萄球菌(VRSA)为指示菌,筛选具有抑制耐万古霉素菌株的肠球菌细菌素。结果显示,从江苏文蛤共提取出36株肠球菌,其中,有2株肠球菌对VREfm有抑制作用,经分子鉴定,这2株肠球菌分别为耐久肠球菌(E.durans)和海氏肠球菌(E.hirae);有1株肠球菌对VREfm和VRSA均有抑制作用,经分子鉴定为粪肠球菌(E.faecalis)。该粪肠球菌所产生的抑菌物质具有热稳定性强、耐低pH和易被蛋白酶分解等细菌素典型特征。此外,利用粪肠球菌细菌素粗提物对VREfm进行处理发现,粪肠球菌细菌素对细菌的抑制作用与浓度呈正相关性,随着浓度的升高,宏观上,菌液中蛋白质浓度、电导率、核酸含量和碱性磷酸酶显著升高(P<0.05);微观上,从荧光、透射和扫描显微镜的结果看,粪肠球菌细菌素对耐万古霉素菌的细胞壁结构有破坏作用,可以形成孔状结构,造成细胞质泄漏,从而对耐万古霉素菌有跨膜抑制作用。 展开更多
关键词 粪肠球菌 细菌素 筛选鉴定 抑菌机理 细胞壁成孔
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自然发酵虾酱中屎肠球菌的分离、鉴定及体外益生特性分析
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作者 王鑫 江宁 +5 位作者 张煜 孙荣雪 王成 杨慧晶 马艳弘 梁丽雅 《食品与发酵工业》 CAS 北大核心 2025年第1期136-142,共7页
从自然发酵的小龙虾酱中筛选出8株产酸菌,通过生理生化试验和16S rDNA序列分析对菌种进行鉴定,并根据发酵特性分析选取产酸能力最高的菌株LX12-2和LX18-9进行抑菌、抗氧化、体外益生特性分析及安全性评价。结果表明,有7株菌为乳酸菌,隶... 从自然发酵的小龙虾酱中筛选出8株产酸菌,通过生理生化试验和16S rDNA序列分析对菌种进行鉴定,并根据发酵特性分析选取产酸能力最高的菌株LX12-2和LX18-9进行抑菌、抗氧化、体外益生特性分析及安全性评价。结果表明,有7株菌为乳酸菌,隶属肠球菌属,其中5株为粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、2株为屎肠球菌(Enterococcus faecium);屎肠球菌LX18-9的产酸能力最高,具有广谱的抗菌活性和较高的抗氧化能力。其对单增李斯特菌生长的抑制作用最强,抑菌圈直径可达20.85 mm,对DPPH自由基的清除率达76.77%;该菌株对pH 2.0的酸性条件、0.5%胆盐以及人工胃肠液均具有良好耐受性,且不产组胺,无溶血性,安全性高。综上,该研究筛选的屎肠球菌LX18-9安全性高、且具有良好的抗菌、抗氧化及益生特性,在饲料发酵生产与水产养殖益生产品的开发中具有潜在应用价值。 展开更多
关键词 小龙虾 屎肠球菌 分离鉴定 益生特性 安全性
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一株鸭源粪肠球菌的分离鉴定和致病性检测 被引量:1
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作者 王海龙 鞠诗婷 +4 位作者 马佰贺 王紫苇 路振香 李文超 郭伟娜 《北京农学院学报》 2025年第1期54-61,共8页
【目的】对送检的病死麻鸭进行粪肠球菌的分离鉴定,并对分离菌的毒力基因、耐药基因和致病性进行检测,为了解该菌的致病机理及防治措施提供参考。【方法】无菌条件下从病死鸭肝脏组织中分离细菌,进行纯化培养、染色镜检、16S rRNA基因... 【目的】对送检的病死麻鸭进行粪肠球菌的分离鉴定,并对分离菌的毒力基因、耐药基因和致病性进行检测,为了解该菌的致病机理及防治措施提供参考。【方法】无菌条件下从病死鸭肝脏组织中分离细菌,进行纯化培养、染色镜检、16S rRNA基因序列分析,并对20种抗菌药物的敏感性检测。使用PCR方法扩增其6个毒力基因和11个耐药基因,昆明小鼠攻毒试验检测菌株的致病性。【结果】分离菌为1株革兰阳性、短链状或成对排列的球菌,在血琼脂培养基上为灰白色、α溶血、半透明、圆形、边缘整齐的小菌落。通过16S rRNA基因序列比对,分离菌与粪肠球菌菌株LMG 7937的相似度为99.73%,鉴定为粪肠球菌。分离菌的耐药性强,仅对氨苄西林、青霉素、米诺环素、强力霉素敏感,同时检测到氨基糖苷类耐药基因aac(6')/aph(2″)、ant(6)-I、aph(3')-III、大环内酯类耐药基因ermB、林可酰胺类耐药基因lsa(E),以及心内膜抗原基因efaA和胶原蛋白黏附素基因ace两个毒力基因。致病性试验显示,小鼠在注射高剂量菌液后于24 h内出现死亡,剖检发现脾脏肿胀、肝脏表面有白色纤维素渗出物覆着、肠道出血等,从病变组织中再次分离到粪肠球菌。【结论】成功从病死鸭中分离出1株粪肠球菌,该菌株高剂量可导致小鼠死亡,并携带有5个耐药基因和2个毒力基因,临床治疗可选择氨苄西林和米诺环素等药物。 展开更多
关键词 粪肠球菌 分离鉴定 药敏试验 耐药基因 毒力基因
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质粒介导的利奈唑胺耐药基因optrA在粪肠球菌的水平转移机制
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作者 杨佩霓 陈莉 +4 位作者 何薇 翟秀伟 吕梅 王清 杨旭 《中国感染控制杂志》 北大核心 2025年第1期67-76,共10页
目的研究临床上耐利奈唑胺粪肠球菌(LREf)携带的optrA基因通过质粒介导在粪肠球菌间的水平转移机制。方法收集昆明市某三级甲等医院2022年8月—2023年8月留取的非重复LREf,使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪进行鉴... 目的研究临床上耐利奈唑胺粪肠球菌(LREf)携带的optrA基因通过质粒介导在粪肠球菌间的水平转移机制。方法收集昆明市某三级甲等医院2022年8月—2023年8月留取的非重复LREf,使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪进行鉴定,VITEK 2 Compact、纸片扩散法、微量肉汤稀释法进行药敏试验,聚合酶链式反应(PCR)检测optrA基因,全基因组测序(WGS)分析LREf的分子生物学特征,以LREf为供体菌、临床来源粪肠球菌为受体菌进行接合实验。结果共收集17株LREf,12株LREf的质粒检测出optrA基因,检测出多种耐药基因及毒力基因。12株LREf菌株以ST16(50.0%)为主要分型。接合试验的24株接合子中有8株接合成功,接合率为33.3%,进一步分析发现,菌株接合前后位于质粒上的optrA基因上下游均存在IS1216E插入序列,且形成IS1216E-fexA-optrA-erm(A)-IS1216E样的转座单元。结论optrA基因可通过同时携带erm(A)、fexA基因的质粒介导在临床粪肠球菌间进行水平转移,而插入序列IS1216E在其水平转移过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 粪肠球菌 利奈唑胺 质粒 optrA 全基因组测序 水平转移
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石河子市部分流浪犬源肠球菌耐药性及耐药基因检测
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作者 曹兴旺 冯麟博 +5 位作者 李志远 杨子为 徐道元 杨吉奥博 关团 孙志华 《山东农业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第2期236-249,共14页
为了解新疆石河子市部分流浪犬源肠球菌的耐药性以及耐药基因携带情况,本实验采集210份来自流浪犬粪便及其周边环境的样品。通过常规细菌分离鉴定法对肠球菌进行分离、纯化与鉴定,采用纸片扩散法测定分离株对14种抗菌药物的耐药性,利用... 为了解新疆石河子市部分流浪犬源肠球菌的耐药性以及耐药基因携带情况,本实验采集210份来自流浪犬粪便及其周边环境的样品。通过常规细菌分离鉴定法对肠球菌进行分离、纯化与鉴定,采用纸片扩散法测定分离株对14种抗菌药物的耐药性,利用PCR技术检测相关耐药基因携带情况。本实验共分离到163株肠球菌,其中119株来源于粪便,44株来源于环境。这些菌株包括23株粪肠球菌,129株屎肠球菌,11株其他肠球菌。药敏试验结果显示,流浪犬源肠球菌对磺胺异噁唑、克林霉素、利福平、泰妙菌素和庆大霉素表现出较高的耐药性,耐药菌株分别占100%、78.53%、67.48%、63.19%和53.37%;相比之下,对青霉素、氨苄西林、氟苯尼考的耐药率较低(2.45%~6.75%);值得注意的是,未检测出对万古霉素、替加环素、利奈唑胺耐药的菌株。多重耐药结果显示主要分布在4~6耐,占69.32%(113/163),其中6耐占比最高(25.15%),而1耐占比最低(1.23%)。此外,环境中肠球菌的耐药情况较粪便中肠球菌稍严重,且流浪犬源屎肠球菌的耐药情况也较粪肠球菌更为严重。耐药基因检测结果显示,检出erm(B)、aac(6′)/aph(2″)、aph(3′)-Ⅲ、tetM耐药基因,噁唑烷酮类药物相关耐药基因(optrA、cfr、poxtA)、万古霉素耐药基因(van)以及其他被检耐药基因均未检出。综上所述,流浪犬收容所很可能成为多重耐药菌的潜在储存库,存在相关耐药基因的流行风险。建议在治疗当地的宠物犬和流浪犬时,应根据细菌的耐药性结果来进行合理用药,并且加强对流浪犬细菌耐药性的监测,以减少耐药细菌传播的风险。 展开更多
关键词 流浪犬 肠球菌 粪肠球菌 屎肠球菌 耐药性
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两种细菌对斑节对虾免疫和DNA甲基化相关基因表达的影响
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作者 汪丽婷 黄建华 +7 位作者 周发林 李运东 姜松 杨其彬 江世贵 史健志 丁阳阳 杨丽诗 《南方水产科学》 北大核心 2025年第5期127-136,共10页
明确斑节对虾(Penaeus monodon)应对细菌感染的免疫应答机制及其表观遗传调控特征,可为病害防控策略提供重要理论支持。本研究通过体内注射革兰氏阴性菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、革兰氏阳性菌粪肠球菌(Enterococcus faecal... 明确斑节对虾(Penaeus monodon)应对细菌感染的免疫应答机制及其表观遗传调控特征,可为病害防控策略提供重要理论支持。本研究通过体内注射革兰氏阴性菌副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、革兰氏阳性菌粪肠球菌(Enterococcus faecalis)和磷酸盐缓冲液(PBS),探讨了两种细菌对斑节对虾组织学、免疫能力和DNA甲基化水平的影响。采用肝胰腺和鳃组织切片观察及实时荧光定量PCR(qRT-PCR)进行分析。苏木精-伊红(HE)染色结果显示,副溶血弧菌感染后,斑节对虾肝胰腺小管上皮细胞脱落,同时鳃丝收缩;注射粪肠球菌后,肝胰腺小管细胞出现坏死,鳃组织多发生水肿、出血现象。qRT-PCR结果表明,两种细菌刺激后均能显著上调抗菌肽基因(Crustin)和热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达;且脂多糖-β-1,3-葡聚糖结合蛋白基因(LGBP)在鳃组织中显著上调,脂肪酸结合蛋白基因(Fabp)在肝胰腺组织中显著上调。感染两种细菌均能显著上调肝胰腺和鳃组织中的甲基化CpG结合蛋白2基因(MBD2)、泛素样含植物同源结构域和环指结构域1基因(UHRF1)和DNA甲基转移酶2基因(DNMT2)的表达水平,但副溶血弧菌的刺激效果更明显。研究表明,斑节对虾的免疫基因及DNA甲基化相关基因在副溶血弧菌和致病性粪肠球菌的侵染下均显著上调表达,证实这些基因通过调控宿主生理功能在抗感染防御中发挥关键作用。 展开更多
关键词 斑节对虾 副溶血弧菌 粪肠球菌 组织学切片 免疫相关基因 DNA甲基化相关基因
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不同种间关系的复配菌组对大鼠生长及脂代谢的影响
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作者 李媛 周冰冰 +1 位作者 张明 罗璠 《中国饲料》 北大核心 2025年第5期192-198,共7页
为探讨不同复配关系的菌组对动物生长代谢的影响,本试验选取生长、产酸性能相近的菌株筛选互促菌组(植物乳杆菌J05与酿酒酵母Y21)以及互抑菌组(屎肠球菌B13与酿酒酵母Y21)饲喂SD雄性大鼠。试验共分为7个组:空白对照组(A组)饲喂基础饲粮... 为探讨不同复配关系的菌组对动物生长代谢的影响,本试验选取生长、产酸性能相近的菌株筛选互促菌组(植物乳杆菌J05与酿酒酵母Y21)以及互抑菌组(屎肠球菌B13与酿酒酵母Y21)饲喂SD雄性大鼠。试验共分为7个组:空白对照组(A组)饲喂基础饲粮、抗生素组(B组)饲喂基础饲粮+金霉素(70 mg/kg饲粮)、植物乳杆菌J05单菌组(C组)饲喂基础饲粮+2×10^(10) CFU/kg J05、屎肠球菌B13单菌组(D组)饲喂基础饲粮+2×10^(10) CFU/kg B13、酿酒酵母Y21单菌组(E组)饲喂基础饲粮+6.6×10^(8) CFU/kg Y21、互促菌组(F组)饲喂基础饲粮+2×10^(10) CFU/kg J05+6.6×10^(8) CFU/kg Y21、互抑菌组(G组)饲喂基础饲粮+2×10^(10) CFU/kg B13+6.6×10^(8) CFU/kg Y21。试验共饲喂28 d。结果表明:各组间平均日采食量差异显著(P<0.05),其中B组采食量最高,G组采食量最低;与B组相比,G组的平均日增重显著下降了22.48%(P<0.05),与F组无显著差异,但较F组低。G组的粗蛋白质表观消化率较其余各组均显著降低,其中较A组、B组、F组相比显著下降了3.47%、3.85%、3.26%(P<0.05);G组血清白蛋白含量与A组和D组相比显著降低了43.89%、55.01%(P<0.05),较F组低,但差异不显著。肝脏脂代谢相关基因表达分析显示,相较于G组,F组的CYP7A1和FAS基因的表达水平显著上调了105.36%、209.31%(P<0.05),而G组与各个单菌组均无显著差异。G组与F组的HMG-CoA与LCAT基因的表达量无显著差异。综上所述,本试验筛选出的互抑菌组对大鼠的生长性能和消化性能有消极影响,互促菌组可上调CYP7A1和FAS基因的表达,说明本试验中的菌株互作机制对调控大鼠脂代谢有一定的趋势性影响。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 屎肠球菌 酿酒酵母 大鼠 生长性能 脂代谢
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粪肠球菌致羔羊脑膜炎感染模型的构建
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作者 吴忧 魏勇 +6 位作者 赵鹏飞 焦陇玲 周明 张润泽 李永健 齐亚银 任静静 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第8期789-795,共7页
为探究致脑膜炎粪肠球菌(E.faecalis)对羔羊的致病性并构建该菌的羊感染模型,本实验将两株致脑膜炎粪肠球菌(XJ-1、XJ-6)分别感染小鼠后统计死亡率,经寇氏改良法计算两株菌对小鼠的半数致死量(LD_(50))。结果显示,粪肠球菌XJ-6株的毒力... 为探究致脑膜炎粪肠球菌(E.faecalis)对羔羊的致病性并构建该菌的羊感染模型,本实验将两株致脑膜炎粪肠球菌(XJ-1、XJ-6)分别感染小鼠后统计死亡率,经寇氏改良法计算两株菌对小鼠的半数致死量(LD_(50))。结果显示,粪肠球菌XJ-6株的毒力最强,其对小鼠的LD_(50)为1×10^(8.15)cfu,因此选择该菌株感染小鼠的LD10(01.12×10^(10)cfu/mL)剂量感染羔羊。将15只1月龄羔羊随机均分为5组:阴性对照组、菌株感染后24 h组、48 h组、60 h组和72 h组,采用LD100剂量的XT-6菌株以颈静脉注射感染实验羊后,观察感染后各组羔羊临床症状,取各组羊脑组织制备病理切片,并对脑组织进行细菌的分离鉴定,利用平板计数法统计各实验组羊脑组织、脾脏、肝脏载菌量;采集各组羊血清,利用ELISA检测降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的含量。观察可见感染羊出现与临床病例相似的脑膜炎症状,组织病变观察结果显示羔羊感染后各时间点脑组织均出现损伤情况,以感染后48 h、60 h时脑组织的病理变化最明显,可见细胞排列紊乱、胞体固缩、血管袖套、充血;从脑组织中可分离到感染菌株,羔羊脏器载菌量结果显示,与感染后24 h相比,感染后60 h脑组织载菌量极显著升高,达3.32×10^(2)cfu/g(P<0.0001),48 h组羔羊脾脏、肝脏载菌量极显著升高,分别为1.95×10^(5)cfu/g、8.3×10^(5)cfu/g(P<0.0001);ELISA检测结果显示,与阴性对照组相比,羊血清中PCT、CRP和MBP的含量在感染后48 h、60 h时显著上升(P<0.05),在感染后72 h下降。上述结果均表明粪肠球菌XJ-6株对羔羊有较强的致病性,并可造成其脑组织损伤。本实验构建了粪肠球菌致羔羊脑膜炎的感染模型,为进一步研究粪肠球菌介导的脑膜炎感染机制奠定了基础。 展开更多
关键词 粪肠球菌 脑膜炎 羔羊模型
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奶牛乳腺炎源粪肠球菌生物学特性研究
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作者 乔亚蕊 苗宇航 +1 位作者 黄倩 周学章 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第5期2325-2339,共15页
旨在了解奶牛乳腺炎源粪肠球菌的耐药特征和毒力情况,本研究对107株患乳腺炎源粪肠球菌进行药物敏感性试验、耐药基因和毒力基因的检测;选取粪肠球菌F2为代表菌株,对该菌株进行全基因组测序和生物学特性研究,进一步用感染复数(MOI)为100... 旨在了解奶牛乳腺炎源粪肠球菌的耐药特征和毒力情况,本研究对107株患乳腺炎源粪肠球菌进行药物敏感性试验、耐药基因和毒力基因的检测;选取粪肠球菌F2为代表菌株,对该菌株进行全基因组测序和生物学特性研究,进一步用感染复数(MOI)为1000的肠球菌JH2-2和粪肠球菌F2感染奶牛乳腺上皮细胞(BMECs),检测F2菌株对BMECs的黏附、入侵能力和菌株对BMECs增殖和损伤的影响;最后建立大蜡螟幼虫感染模型,通过幼虫生存率和病理组织切片两个方面验证该菌株对幼虫组织损伤的病理学特征。结果表明,乳腺炎源粪肠球菌对林可霉素、四环素、红霉素耐药率最高,为100%~90%;分离菌株中有95株粪肠球菌检测出携带耐药基因,84株粪肠球菌检测出携带毒力基因,耐药基因携带率最高的是ermB(91.6%),毒力基因的携带率最高的是esp(78.6%)。对F2菌株全基因测序结果显示该菌株对林可酰胺类、大环内酯类、喹诺酮类等23类抗生素耐药,存在3个携带耐药基因的接合转移元件(ICE)和efaA、gelE、ace、AS等91个相关毒力因子。F2菌株具有较强的环境耐受性,在高温、酸性和碱性环境下存活率较高,具有运动能力和较强的生物膜形成能力(OD570 nm值>2 ODc),细菌侵染BMECs 6 h后,F2菌株对BMECs的黏附、入侵能力极显著(P<0.001)高于对照组,随着时间的推移F2菌株对BMECs的毒性增加,细胞损伤严重、死亡数量增加;F2感染大蜡螟幼虫1 d后,幼虫死亡率为100%,幼虫体内有大量炎性细胞浸润且体腔破坏严重。本研究显示,乳腺炎源粪肠球菌耐药性严重,存在多重耐药现象,可引起BMECs的损伤;该试验结果为后续研究乳源粪肠球菌耐药性和致病性的传播提供实验基础。 展开更多
关键词 粪肠球菌 奶牛乳腺炎 生物学特性 全基因组分析
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杭州市猪肉生产链中粪肠球菌耐药性及传播特性分析
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作者 钱敏 周炜 +3 位作者 周芷锦 张恩宝 韩剑众 曲道峰 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第5期31-40,共10页
【目的】评估猪肉生产链中粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)耐药情况及传播风险。【方法】从浙江省杭州市2家养猪场、1家屠宰场和2家市场中采集生猪体表、胴体及环境样品共300份。分别通过16S rDNA测序、肉汤微量稀释法(MIC)... 【目的】评估猪肉生产链中粪肠球菌(Enterococcus faecalis,E.faecalis)耐药情况及传播风险。【方法】从浙江省杭州市2家养猪场、1家屠宰场和2家市场中采集生猪体表、胴体及环境样品共300份。分别通过16S rDNA测序、肉汤微量稀释法(MIC)和PCR法进行菌株鉴定、耐药表型测定以及耐药基因型和毒力基因型鉴定,开展多位点序列分型(multilocus sequencing typing,MLST)分析和接合转移试验。【结果】分离得到的125株粪肠球菌对泰妙菌素、四环素和多西环素等抗生素有较高的耐药率,且养猪场分离株对抗生素的耐药率均高于屠宰场和市场。基因型鉴定结果表明,125株粪肠球菌中,10种耐药基因均有检出,其中optrA、tet(M)、tet(L)、erm(B)的检出率较高,耐药基因检出率排序为:养猪场>屠宰场>市场。已检测的毒力基因中,efaA的携带率最高,其他依次为gelE、asa1、ace、cylA、hyl、esp,毒力基因携带率排序为:养猪场>屠宰场>市场。MLST分析表明,水平传播是optrA在浙江省杭州市猪源粪肠球菌中流行的主要机制。接合转移结果显示,12株猪源菌株中,optrA可通过质粒接合作用转移到受体菌JH2-2中。【结论】作者对猪肉生产链中的粪肠球菌进行了耐药性评估与传播风险研究,为保障肉类食品安全提供了理论依据。 展开更多
关键词 粪肠球菌 猪肉生产链 耐药性 耐药基因 毒力基因
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热风辅助射频烘烤处理对扁桃仁抗氧化性及微生物安全性的影响
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作者 王绣珊 徐圆融 +1 位作者 敬璞 焦顺山 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第4期198-204,共7页
相较于传统烘烤方式,热风辅助射频(hot air-assisted radio frequency,HA-RF)技术用于坚果烘烤展现出巨大的优势。为探究HA-RF烘烤处理对扁桃仁抗氧化性以及微生物安全性的影响,该研究使用3种烘烤强度处理扁桃仁:HA-RF1(目标温度130℃,... 相较于传统烘烤方式,热风辅助射频(hot air-assisted radio frequency,HA-RF)技术用于坚果烘烤展现出巨大的优势。为探究HA-RF烘烤处理对扁桃仁抗氧化性以及微生物安全性的影响,该研究使用3种烘烤强度处理扁桃仁:HA-RF1(目标温度130℃,加热时间11 min,保持时间4 min)、HA-RF2(目标温度155℃,加热时间15 min)和HA-RF3(目标温度155℃,加热时间15 min,保持时间19 min),测定处理前后的色度和抗氧化性,并检测粪肠球菌(沙门氏菌替代菌)数量。结果表明,HA-RF烘烤后,扁桃仁的ABTS阳离子自由基清除能力提高,Fe^(3+)还原能力增强,整体抗氧化性得到提升。扁桃仁初始水分活度(a_(w))为0.65时,传统热风烘烤(155℃,20 min)仅能将粪肠球菌减少2 lg CFU/g左右,而HA-RF1可减少4 lg CFU/g以上,HA-RF3对粪肠球菌杀灭效果最好,可以降低7 lg CFU/g左右。综合分析可知,HA-RF烘烤可以提升扁桃仁的抗氧化性,有效减少粪肠球菌的数量,达到巴氏杀菌效果,比传统HA烘烤更能保证扁桃仁的微生物安全,研究结果可为HA-RF在扁桃仁中的应用提供指导。 展开更多
关键词 射频 烘烤 抗氧化性 粪肠球菌 致病菌
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赤芍活性成分联合应用对粪肠球菌的抑制作用及其机制
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作者 张加妮 赛杰 +2 位作者 周玉 杨淼 孙淑芬 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期680-690,共11页
目的:探讨赤芍活性成分芍药苷(PF)、原花青素(PC)和绿原酸(CA),联合应用对粪肠球菌(E. faecalis)及生物膜的抑制作用,并阐明其作用机制。方法:采用微量稀释法检测CA、PC和PF对E. faecalis的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),棋盘... 目的:探讨赤芍活性成分芍药苷(PF)、原花青素(PC)和绿原酸(CA),联合应用对粪肠球菌(E. faecalis)及生物膜的抑制作用,并阐明其作用机制。方法:采用微量稀释法检测CA、PC和PF对E. faecalis的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC),棋盘稀释法检测赤芍3种活性成分联合应用部分抑菌浓度指数(FICI)和部分杀菌浓度指数(FBCI)。实验分为对照组、高浓度单药组(PF-10组、PC-6组和CA-10组)及药物联合应用组(CA-2+PC-1组、CA-2+PC-2组、PF-4+PC-2组、PF-6+PC-2组、PF-4+CA-4组和PF-6+CA-4组)。结晶紫染色检测3种活性成分联合应用各组E. faecalis生物膜形成情况,扫描电镜(SEM)观察赤芍3种活性成分联合应用各组E. faecalis生物膜形态表现,点板试验检测赤芍3种活性成分联合应用对各组E. faecalis浮游菌和生物膜的抑制作用,SEM观察赤芍3种活性成分联合应用各组E. faecalis胞膜损伤情况,试剂盒检测赤芍3种活性成分联合应用各组E. faecalis浮游菌和生物膜中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)水平。结果:赤芍3种活性成分中PC的MIC为4 g·L^(-1), MBC为6 g·L^(-1);CA的MIC为8 g·L^(-1), MBC为10 g·L^(-1);PF的MIC和MBC均>10 g·L^(-1),选取PF浓度为10 g·L^(-1)。PC与CA联合应用具有协同作用,PC与PF联合应用具有相加作用,CA与PF联合应用具有相加作用。结晶紫染色,与对照组比较,PF-10组、PC-6组、CA-10组和各药物联合应用组E. faecalis生物膜形成量均明显降低(P<0.01);与PF-10组比较,PC-6组、CA-10组、CA-2+PC-1组、CA-2+PC-2组、PF-4+PC-2组、PF-6+PC-2组和PF-6+CA-4组E. faecalis生物膜形成量均明显降低(P<0.05或P<0.01)。扫描电镜观察,对照组E. faecalis生物膜较厚,细菌之间紧密连接,形态规则,且细胞膜完整;PF-10组、PC-6组和CA-10组E. faecalis生物膜厚度明显降低,细菌间的排列变得相对疏松;各药物联合应用组可见E. faecalis生物膜均明显减少乃至完全消失,高倍镜下可见生物膜结构完全消失,细菌碎片相互黏附聚集,失去原有的细菌形态。点板试验,与对照组比较,作用5、10和30 min后PF-10组、PC-6组及CA-10组E. faecalis浮游菌菌落明显减少,提示其对E. faecalis的杀伤作用逐渐增强;各药物联合应用组中,PC与CA联合应用在5 min内可见E. faecalis浮游菌菌落明显减少,对E. faecalis浮游菌菌落的杀伤作用较强。与PC组和CA组比较,作用5、10和30 min后各药物联合应用组E. faecalis浮游菌菌落未见明显减少;与对照组比较,作用30和60 min后PF-10组、PC-6组及CA-10组E. faecalis生物膜菌落逐渐减少,提示高浓度单药组对E. faecalis生物膜中细菌表现出逐渐增强的杀伤作用。其中PC-6组生物膜杀伤效果最为明显,在处理30 min后未见菌落形成;在各药物联合应用组中,作用30 min后CA-2+PC-2组E. faecalis生物膜仅见少许菌落,提示其可有效杀伤生物膜中的细菌;与PC-6组和CA-10组比较,各药物联合应用组在低浓度即可达到高浓度单药组的杀伤效果。扫描电镜观察,对照组E. faecalis呈椭圆形,且细胞膜完整;PF组E. faecalis形态改变,细胞膜完整性受损;CA组大部分E. faecalis细胞膜相对完整,但E. faecalis表面出现皱缩和凹陷现象,少数E. faecalis细胞膜完整性遭到破坏;PC组E. faecalis细胞膜的完整性破坏最为严重,导致内容物外泄,细胞碎片相互聚集形成絮状结构;各药物联合应用组E. faecalis细胞膜破裂、内容物外泄和细菌残片聚集,尤其是PC与CA联合应用时,可观察到E. faecalis细胞膜的完整性破坏最为明显,内容物完全外泄;PF与CA联合应用时,可观察到细菌表面凹坑和皱缩,偶见细胞膜破裂。试剂盒检测,与对照组比较,各组E. faecalis浮游菌及生物膜中ATP水平均明显降低(P<0.01);与PF-10组比较,CA-10组、CA-2+PC-2组、PF-4+CA-4组和PF-6+CA-4组E. faecalis浮游菌中ATP水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),CA-10组和CA-2+PC-2组E. faecalis生物膜中ATP水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:赤芍活性成分PF、PC和CA联合应用对E. faecalis及生物膜形成具有明显抑制作用,3种活性成分两两联合应用均有一定的协同或相加作用,其中PC与CA联合应用协同作用最为明显,作用机制可能与破坏E. faecalis胞膜完整性和抑制细菌中ATP水平有关。 展开更多
关键词 赤芍活性成分 粪肠球菌 绿原酸 原花青素 芍药苷
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一例野生东方白鹳疑似棘头虫继发沙门氏菌和大肠杆菌感染的病例报告
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作者 吴名杰 粟海军 《野生动物学报》 北大核心 2025年第2期407-412,共6页
2023年12月,在贵州省黄平县境内发现1只濒死东方白鹳(Ciconia boyciana),在送医途中死亡。剖检观察发现,其空肠内侧黏膜出现大量的溃疡灶及孔状空洞,肠道外侧浆膜内可见大量囊泡状结节,结节内容物为半固体状肉糜,初步诊断疑似由囊棘蚴(E... 2023年12月,在贵州省黄平县境内发现1只濒死东方白鹳(Ciconia boyciana),在送医途中死亡。剖检观察发现,其空肠内侧黏膜出现大量的溃疡灶及孔状空洞,肠道外侧浆膜内可见大量囊泡状结节,结节内容物为半固体状肉糜,初步诊断疑似由囊棘蚴(Echinococcus)引起的寄生虫疾病,经PCR检测确定该病原为棘头虫(Acanthocephalus)。对内脏组织器官和结节内容物进行细菌分离培养鉴定,结果显示肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、大肠杆菌(Escherichia coli)和粪肠球菌(Enterococcus faecalis)阳性。对鼻咽分泌物、内脏器官、肠道组织和结节内容物进行RT-PCR检测,未扩增出禽流感和新城疫病毒特异性片段。因此,该东方白鹳疑似为肠道棘头虫感染,引起肠炎沙门氏菌、大肠杆菌和粪肠球菌继发感染而致死。这是我国首次野生东方白鹳感染此类疾病的案例,为野生东方白鹳疾病诊断提供了重要的基础数据,对鸟类棘头虫的诊断与研究具有参考价值。 展开更多
关键词 东方白鹳 棘头虫 肠炎沙门氏菌 大肠杆菌 粪肠球菌
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粪肠球菌对育成期籽鹅生长性能、肉品质、腿肌中与蛋白质代谢相关基因表达及肠道菌群的影响
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作者 武震宇 王秋菊 +2 位作者 孙晓燕 孙思雨 刘磊 《动物营养学报》 北大核心 2025年第6期3840-3851,共12页
本研究在籽鹅饮水中添加粪肠球菌,旨在探究其对籽鹅生长性能、肉品质、腿肌中与蛋白质代谢相关基因表达以及肠道菌群的影响。试验选取60只30日龄、体重相近的健康公籽鹅,随机分为对照组和试验组,每组5个重复,每个重复6只鹅。对照组正常... 本研究在籽鹅饮水中添加粪肠球菌,旨在探究其对籽鹅生长性能、肉品质、腿肌中与蛋白质代谢相关基因表达以及肠道菌群的影响。试验选取60只30日龄、体重相近的健康公籽鹅,随机分为对照组和试验组,每组5个重复,每个重复6只鹅。对照组正常饲喂并自由饮水,试验组在正常饲喂的基础上,饮用添加粪肠球菌(浓度为1×10^(8)CFU/mL)的饮水。试验期45 d。结果表明:1)与对照组相比,试验组平均日增重、平均日采食量极显著提高(P<0.01)。2)与对照组相比,试验组腿肌滴水损失显著降低(P<0.05),其他肉品质指标(如pH、蒸煮损失和肉色)无显著差异(P>0.05)。3)试验组血清总蛋白和白蛋白含量显著高于对照组(P<0.05),血清尿素氮含量显著低于对照组(P<0.05)。4)与对照组相比,试验组腿肌叉头框蛋白O3(FOXO3)和肌肉生长抑制素(MSTN)基因相对表达量极显著降低(P<0.01),而哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、蛋白激酶B(AKT)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)基因相对表达量极显著升高(P<0.01)。5)与对照组相比,试验组Chao1指数和Observed_species指数显著升高(P<0.05);同时,厚壁菌门和放线菌门的相对丰度也显著增加(P<0.05),而螺杆菌属的相对丰度则显著降低(P<0.05),棒杆菌属的相对丰度显著提高(P<0.05)。综上所述,饮水中添加粪肠球菌可以有效调节育成期籽鹅的肠道菌群结构,促进肠道菌群平衡,并通过影响蛋白质代谢提升籽鹅的生长性能。 展开更多
关键词 粪肠球菌 籽鹅 生长性能 肉品质 蛋白质代谢 肠道菌群
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