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Isolation of egg yolk IgY from hens immunized with S.mutans B29-33 and S.sobrinus 6715 被引量：6
1
作者 FAN Ming-wen, JIANG Qian-zhou, BIAN Zhuan, ZHANG Ping, LIU Ning-hui, LIU Jian.College of Stomatology, Wuhan University, Wuhan 430079 《口腔医学纵横》 CSCD 2000年第3期193-194,共2页
目的 :从鸡蛋中提取特异性抗体 ,鉴定抗体性质并分析其蛋白质含量 ,以探索一种制备被动免疫防龋抗体的制备方法。方法 :变形链球菌GTF高表达株S .mutansB2 9- 33及茸毛链球菌S .sobrinus 6 715免疫母鸡 ,采用硫酸铵沉淀法提取鸡蛋黄抗体... 目的 :从鸡蛋中提取特异性抗体 ,鉴定抗体性质并分析其蛋白质含量 ,以探索一种制备被动免疫防龋抗体的制备方法。方法 :变形链球菌GTF高表达株S .mutansB2 9- 33及茸毛链球菌S .sobrinus 6 715免疫母鸡 ,采用硫酸铵沉淀法提取鸡蛋黄抗体 ,SDS -PAGE凝胶扫描鉴定抗体性质 ,分析其纯度并用分光光度法测蛋白质含量。结果 :用硫酸铵沉淀法可提取出鸡蛋黄抗体 ,其性质为IgG ,蛋白质含量约为 7.0 0mg/ml。结论 :鸡蛋黄抗体含量高 ,作为被动免疫抗体的载体有较好的应用前景。 展开更多
关键词 鸡蛋黄 抗体 变形链球菌 制备
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变异链球菌SrtA小分子抑制剂的虚拟筛选与验证
2
作者 刘慕瑶 夏昕 庄沛林 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第2期214-221,共8页
目的:寻找变异链球菌转肽酶A(SrtA)的靶向小分子抑制剂,为探寻新型有效的防龋药物提供实验依据。方法:采用虚拟筛选技术,以变异链球菌UA159的SrtA酶为受体,以氨基酸Cys205为共价结合位点,利用分子共价对接技术和ADMET成药性过滤从化合... 目的:寻找变异链球菌转肽酶A(SrtA)的靶向小分子抑制剂,为探寻新型有效的防龋药物提供实验依据。方法:采用虚拟筛选技术,以变异链球菌UA159的SrtA酶为受体,以氨基酸Cys205为共价结合位点,利用分子共价对接技术和ADMET成药性过滤从化合物天然小分子类药分子库中筛选出潜在小分子化合物,通过最低抑菌浓度实验与细菌黏附性实验筛选出抑黏附不抑菌的小分子化合物,并通过分子动力学模拟验证小分子化合物与SrtA的结合模式与稳定性。结果:经分子共价对接技术和ADMET成药性过滤筛选得到20种小分子化合物,其中AK-968/40369373、AK-968/40385877等小分子化合物对变异链球菌黏附的抑制作用优于反式查尔酮,差异有统计学意义(P<0.05),分子动力学模拟验证证实AK-968/40369373,AK-968/40385877均可与SrtA形成稳定的共价结合。结论:虚拟筛选与验证是筛选变异链球菌SrtA潜在靶向抑制剂的有效方法,该实验筛选得到的AK-968/40369373、AK-968/40385877等小分子化合物有望作为新型变异链球菌SrtA的靶向小分子抑制剂。 展开更多
关键词 变异链球菌 转肽酶A(srtA) 虚拟筛选 小分子抑制剂
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变形链球菌F-ATPase亚基基因uncEBF基因多态性的研究 被引量：6
3
作者 杨德琴 刘天佳 +3 位作者 付春华 亓庆国 庄姮 李颂 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期219-222,共4页
目的研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase亚基c、a、b联合基因uncEBF的遗传多态性,并探讨基因多态与细菌耐酸力的关系。方法选取18株变形链球菌高耐酸株、20株低耐酸株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncEBF,行限制性内切酶长度多态... 目的研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase亚基c、a、b联合基因uncEBF的遗传多态性,并探讨基因多态与细菌耐酸力的关系。方法选取18株变形链球菌高耐酸株、20株低耐酸株,以特异引物从细菌组DNA扩增uncEBF,行限制性内切酶长度多态性分析(RFLP)和测序比较。结果不同限制性内切酶RFLP产生不同的基因型,测序证实了导致多态出现的基因变异;其中内切酶AluⅠ产生的A、B基因型在不同耐酸力菌株的分布不同(P<0.05),高耐酸性菌株中A型基因uncEBF的检出高于低耐酸力菌株。结论变形链球菌F-ATPase亚基联合基因uncEBF具有明显基因多态性,酸性环境下生存力强的菌株可能出现基因的适应性变异,可认为不同基因型uncEBF分布与耐酸力不同相关。 展开更多
关键词 变形链球菌 耐酸性 基因多态性
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不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基的筛选和鉴定 被引量：4
4
作者 王成龙 胡丹阳 +12 位作者 刘佼佼 李少华 苏东华 席庆 储冰峰 夏伟 赵强 丁红梅 罗燕萍 杨继勇 邓斌 徐娟 邵宁生 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期738-741,共4页
目的筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基并对其进行鉴定。方法利用完整细胞为靶子的消减SELEX技术筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基,通过放射性同位素、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA str... 目的筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基并对其进行鉴定。方法利用完整细胞为靶子的消减SELEX技术筛选不同致龋性变形链球菌临床分离株差异ssDNA配基,通过放射性同位素、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structue分析软件分析配基的一、二级结构并对筛选得到的配基进行鉴定。结果经过9轮消减SELEX筛选,放射性同位素检测文库已富集;流式细胞术检测经过测序和分析得到12条配基中的H1、H16、H4、L1、L10和H19与高致龋变形链球菌临床分离株特异结合,不与低致龋变形链球菌临床分离株特异结合,其中,H19的特异性结合程度最强,解离常数为69.45±38.53 nmol/L。结论筛选获得特异识别高致龋变形链球菌临床分离株的ssDNA配基。 展开更多
关键词 变形链球菌 配基 筛选 鉴定
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变形链球菌GTase高表达株免疫奶牛应用研究 被引量：19
5
作者 边专 樊明文 +3 位作者 杜民权 张平 陈文霞 王茜 《口腔医学纵横》 CSCD 1999年第1期1-3,共3页
目的：观察防龋疫苗免疫奶牛后，牛乳中特异性抗体的产生规律。方法：应用变链菌ＧＴａｓｅ—Ｉ高表达株免疫怀孕奶牛，收集牛乳，经间接ＥＬＩＳＡ检测牛乳中特异性抗变链菌抗体。结果：抗变链菌特异性抗体出现于初乳中，其含量于分娩... 目的：观察防龋疫苗免疫奶牛后，牛乳中特异性抗体的产生规律。方法：应用变链菌ＧＴａｓｅ—Ｉ高表达株免疫怀孕奶牛，收集牛乳，经间接ＥＬＩＳＡ检测牛乳中特异性抗变链菌抗体。结果：抗变链菌特异性抗体出现于初乳中，其含量于分娩后 １０ｄ达到高峰，在末次免疫后，特异性抗体可在 ６０ｄ内维持在较高水平。巴氏消毒（６２. ５℃，３０ｍｉｎ）对免疫牛乳中ＩｇＧ活性无明显影响。结论：变链菌ＧＴａｓｅ高产株可诱导奶牛分泌高效价抗变链菌特异ＩｇＧ。 展开更多
关键词 牛乳 抗体 变形链球菌 GTase高表达株 龋齿
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变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗防龋动物实验:Keyes龋齿计分研究 被引量：4
6
作者 杨德琴 刘天佳 +3 位作者 曹福娴 庄姮 刘建国 杨锦波 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期589-593,共5页
目的 :了解变形链球菌基因疫苗 pcDNA3 pac和 pcDNA3 gtfB的免疫防龋效果。 方法 :2 8d龄Wistar大鼠 3 6只 ,随机分为pcDNA3 pac组 (A组 )、pcDNA3 gtfB组 (B组 )、pcDNA3 pac联合 pcDNA3 gtfB组 (C组 )、变形链球菌灭活全菌组 (D... 目的 :了解变形链球菌基因疫苗 pcDNA3 pac和 pcDNA3 gtfB的免疫防龋效果。 方法 :2 8d龄Wistar大鼠 3 6只 ,随机分为pcDNA3 pac组 (A组 )、pcDNA3 gtfB组 (B组 )、pcDNA3 pac联合 pcDNA3 gtfB组 (C组 )、变形链球菌灭活全菌组 (D组 )、pcDNA3空载体组 (E组 )和PBS液组 (F组 )进行 3次双侧颌下腺腺周注射免疫。建立定菌鼠模型 ,诱龋 3个月 ,根据Keyes经典评分方法从龋损范围及深度进行龋损综合评估和比较。结果 :龋损牙面计分在 pcDNA3与PBS组最高 ,其次为单基因疫苗免疫组 ,联合免疫和灭活全菌细胞最低 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;窝沟龋各级计分 :E级龋在单基因疫苗组 ,联合疫苗组、灭活全菌细胞组无区别 (P >0 .0 5 ) ,而PBS组和 pcDNA3组则较低 (P <0 .0 1) ;Dm级、Ds级则是联合免疫组与灭活全菌细胞组最低 ,单基因疫苗免疫组较高而PBS和 pcDNA3组最高 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ;Dx级四个免疫组发生率很低或不发生 ,显著低于PBS组和pcDNA3组 (P <0 .0 1)。结论 :重组质粒pcDNA3 gtfB和pcDNA3 pac具显著有效的免疫防龋作用 ,以联合基因疫苗免疫最好 ,是理想的防龋决策之一。 展开更多
关键词 变形链球菌 膜蛋白质类 葡糖基转移酶类 基因疫苗
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变形链球菌临床株F-ATPase亚基基因uncEBF在mRNA水平的表达 被引量：4
7
作者 杨德琴 刘天佳 +3 位作者 亓庆国 付春华 庄姮 李颂 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期737-741,共5页
目的:研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase c、a、b亚基联合基因uncEBF在mRNA水平的表达差异,探讨基因表达水平与细菌耐酸力以及uncEBF基因型的关系。方法:应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对18株来自不同... 目的:研究变形链球菌临床分离株耐酸因子F-ATPase c、a、b亚基联合基因uncEBF在mRNA水平的表达差异,探讨基因表达水平与细菌耐酸力以及uncEBF基因型的关系。方法:应用半定量RT-PCR两步法和凝胶成像系统定量软件分析,分别对18株来自不同基因型和不同耐酸力变链菌的uncEBF基因表达水平进行评价,以SPSS11.0软件分析和比较mRNA表达的差异。结果:不同基因型及不同耐酸力菌株un-cEBF的mRNA表达水平不同(P<0.05),表现为A基因型uncEBF表达高于B基因型,高耐酸力菌株un-cEBF表达高于低耐酸力菌株。结论:变链菌不同基因型uncEBF基因的表达水平不同,表达水平高低与菌株的耐酸力相关。 展开更多
关键词 变形链球菌 F-ATPAsE 半定量 RT-PCR 基因表达
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sortase A与变异链球菌致龋性关系的代谢组学研究 被引量：7
8
作者 宋颖 周京琳 +2 位作者 何远丽 李伟 邹玲 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期360-366,共7页
目的探索srt A基因编码的转肽酶sortase A(Srt A)影响变异链球菌致龋性的机制。方法采用基于1H核磁共振波谱(NMR)的代谢组学方法,比较野生型变异链球菌UA159与srt A基因缺陷型变异链球菌UA159的胞外代谢产物;联合使用主成分分析和正交... 目的探索srt A基因编码的转肽酶sortase A(Srt A)影响变异链球菌致龋性的机制。方法采用基于1H核磁共振波谱(NMR)的代谢组学方法,比较野生型变异链球菌UA159与srt A基因缺陷型变异链球菌UA159的胞外代谢产物;联合使用主成分分析和正交偏最小二乘法—判别分析鉴定不同菌株之间代谢产物的差异。结果大多数有差异性的代谢产物是未知的,可识别的差异性代谢产物有亮氨酸和缬氨酸(δ0.92×10-6~1.20×10-6)、乳酸(δ1.28×10-6)、酮戊二酸(δ3.00×10-6)、甘氨酸(δ3.60×10-6)。结论在进一步完善微生物代谢产物数据库的基础上,1H NMR代谢组学可用于龋病病因的研究。 展开更多
关键词 代谢组学 变异链球菌 sORTAsE A 1H核磁共振波谱 主成分分析 正交偏最小二乘法—判别分析
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利用shotgun蛋白组学策略构建变形链球菌蛋白质表达谱 被引量：3
9
作者 赵洪岩 张志民 +2 位作者 周延民 张红 李荟 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期822-824,共3页
目的:建立变形链球菌蛋白质表达谱,为变形链球菌蛋白质组学研究奠定基础。方法:提取变形链球菌总蛋白,溶液内酶解,肽段混合物在色谱上分离后shotgun鉴定,并利用生物信息学软件对鉴定出的蛋白质进行分析。结果:建立了变形链球菌蛋白质表... 目的:建立变形链球菌蛋白质表达谱,为变形链球菌蛋白质组学研究奠定基础。方法:提取变形链球菌总蛋白,溶液内酶解,肽段混合物在色谱上分离后shotgun鉴定,并利用生物信息学软件对鉴定出的蛋白质进行分析。结果:建立了变形链球菌蛋白质表达谱,共鉴定出752种蛋白质,其中高可信度298种,并利用Gene Ontology软件对其按分子功能和生物学途径进行归类。结论:变形链球菌蛋白质表达谱的建立,为变形链球菌蛋白质组学研究提供了重要的信息和资料。 展开更多
关键词 变异链球菌 蛋白质表达谱 shotgun蛋白组学
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siRNA干扰对变形链球菌耐氟菌ffh基因产酸能力的影响 被引量：3
10
作者 李朋莲 张志民 +4 位作者 李振玲 张桐菲 李天博 闫胜男 戴莹 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期105-108,共4页
目的:探讨变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因siRNA干扰后对产酸能力的影响。方法:电穿孔法将siRNA转入UA159-FR与ffh基因序列靶向位点结合,将干扰前后细菌分别加入BHI培养液,含5%糖类的葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉中培养,pH调至7.5,24h... 目的:探讨变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因siRNA干扰后对产酸能力的影响。方法:电穿孔法将siRNA转入UA159-FR与ffh基因序列靶向位点结合,将干扰前后细菌分别加入BHI培养液,含5%糖类的葡萄糖、蔗糖、乳糖、淀粉中培养,pH调至7.5,24h后测终末pH。结果:转染结果成功;干扰前后不同糖培养基中变形链球菌耐氟菌ffh基因对产酸有显著差异(P<0.05);干扰前后在常规、葡萄糖、及乳糖中差异极显著(P<0.01);蔗糖中差异显著(P<0.05);淀粉中无显著差异。结论:变形链球菌耐氟菌中基因ffh对产酸能力影响显著。 展开更多
关键词 变形链球菌耐氟 ffh基因 sIRNA 产酸能力
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变异链球菌SMU.2055蛋白晶体结构及其小分子抑制剂设计与筛选 被引量：3
11
作者 陈晓丹 展秀荣 +2 位作者 吴昕彧 赵春燕 赵望泓 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期182-186,共5页
目的研究变异链球菌UA159中SMU.2055蛋白的三维晶体结构,并基于其结构进行小分子抑制剂的设计与筛选。方法运用结构基因组学研究方法,通过基因克隆和表达、蛋白质纯化、晶体筛选、晶体衍射数据收集,解析SMU.2055蛋白三维晶体结构,并运... 目的研究变异链球菌UA159中SMU.2055蛋白的三维晶体结构,并基于其结构进行小分子抑制剂的设计与筛选。方法运用结构基因组学研究方法,通过基因克隆和表达、蛋白质纯化、晶体筛选、晶体衍射数据收集,解析SMU.2055蛋白三维晶体结构,并运用计算机辅助药物设计方法,利用Libdock、Autodock两种程序,通过虚拟筛选和精确对接方式,建立与SMU.2055结构相匹配的小分子抑制剂虚拟模型。结果获得SMU.2055蛋白结晶,解析SMU.2055蛋白三维晶体结构,晶体衍射率为0.23 nm,属于C2221空间群,晶胞参数为a=9.20 nm,b=9.46 nm,c=19.39 nm,溶剂体积分数为56.7%。设计并筛选出与SMU.2055蛋白结构匹配度高的5个小分子化合物。结论变异链球菌SMU.2055蛋白质晶体学研究有助于从分子水平上深入了解变异链球菌蛋白质的结构和功能,筛选出的5个小分子化合物可能成为SMU.2055的有效小分子抑制剂,所建立的小分子抑制剂虚拟模型为基于蛋白质结构的防龋研究奠定基础。 展开更多
关键词 变异链球菌 蛋白质晶体学 小分子抑制剂
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Farnesol作用变异链球菌脱矿的实验研究 被引量：3
12
作者 徐双波 虞丽华 +1 位作者 秦天牧 魏昕 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第3期228-231,共4页
目的 Farnesol(法尼醇)作为密度感应分子,具有影响变异链球菌生物膜代谢以及介导肿瘤细胞凋亡的作用。文中研究Farnesol对变异链球菌脱矿的影响。方法将变异链球菌UA159菌悬液接种于放置牙釉质切片的培养皿中,分为5组,即变链+0μmol/L F... 目的 Farnesol(法尼醇)作为密度感应分子,具有影响变异链球菌生物膜代谢以及介导肿瘤细胞凋亡的作用。文中研究Farnesol对变异链球菌脱矿的影响。方法将变异链球菌UA159菌悬液接种于放置牙釉质切片的培养皿中,分为5组,即变链+0μmol/L Farnesol组、变链+50μmol/L Farnesol组、变链+100μmol/L Farnesol组、变链+200μmol/L Farnesol组和对照组。对照组中加入无菌去离子水。采用扫描电镜观察釉质表面的变异链球菌生物膜,显微硬度仪检测实验前后釉质表面显微硬度(surface microhardness,SMH),并用粗糙度仪测定釉面粗糙度。结果随着Farnesol浓度的递增,变异链球菌生物膜生长受抑制,釉质表面粗糙度减少,釉质显微硬度的下降幅度减小,当Farnesol浓度为200μmol/L时釉质显微硬度值[(270.87±12.19)N/mm2]较[变链+50μmol/L Farnesol组、变链+100μmol/L Farnesol组、变链+0μmol/L Farnesol组的(224.63±18.98)、(228.06±10.40)、(198.57±8.19)N/mm2]明显升高(P<0.01),各实验组的SMH较对照组[(368.60±7.33)N/mm2]低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Farnesol可抑制变异链球菌对牙釉质的脱矿作用。 展开更多
关键词 FARNEsOL 变异链球菌 扫描电镜 表面显微硬度 粗糙度
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酸性环境对变形链球菌spaP基因表达的影响 被引量：3
13
作者 姜颖 张铁柱 +2 位作者 杨锦波 刘天佳 王君 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期780-783,共4页
目的:观察酸性环境对变形链球菌初始黏附相关基因spaP表达的影响。方法:变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始黏附相关基因spaP的表... 目的:观察酸性环境对变形链球菌初始黏附相关基因spaP表达的影响。方法:变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始黏附相关基因spaP的表达。结果:pH5.5的酸性环境中变形链球菌spaP基因表达显著下调(P<O.05);黏附较强的变形链球菌菌株无论在中性还是酸性的环境中,其spaP基因的表达总体上高于黏附较弱的菌株。结论:酸性环境抑制变形链球菌spaP基因表达可能是酸性环境中变形链球菌初始黏附下降的机制之一;变形链球菌对牙面的黏附力可能与其spaP表达的量有关。 展开更多
关键词 变形链球菌 初始黏附 TaqMan实时荧光定量PCR
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变异链球菌luxS基因敲除重组质粒的构建 被引量：3
14
作者 童忠春 马丽芳 +1 位作者 倪龙兴 侯波 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期182-185,共4页
目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除。方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到... 目的:构建一个含有抗卡那霉素基因和变异链球菌luxS基因上下游区同源序列的重组质粒,以便以后转化入变异链球菌进行luxS的敲除。方法:设计引物,以质粒pEGFP-N1为模板,进行PCR得到抗卡那霉素的DNA片断,再以变异链球菌的DNA为模板,PCR得到luxS基因上下游序列,最后将这3段DNA片断分别按顺序插入到pMD19-T载体的多克隆酶切位点中,转化大肠杆菌的感受态中,通过在卡那霉素和氨苄青霉素的培养基进行筛选。结果:kana+基因和luxS基因两侧同源序列成功连入到pMD19-T载体相应酶切位点,酶切、测序结果正确。结论:成功构建变异链球菌luxS基因敲除重组质粒,为将来构建变异链球菌luxS突变株打下基础。 展开更多
关键词 变异链球菌 LUXs基因 pMD19-T载体 pEGFP-N1质粒 pMD19-TUKD
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变形链球菌中LuxS介导的群体感应系统的研究进展 被引量：4
15
作者 王蓉 边专 聂敏 《国际口腔医学杂志》 CAS 2007年第1期7-9,共3页
LuxS介导的群体感应系统以自体诱导物-(2AI-2)分子作为通用信号,可介导不同细菌的交流。作为口腔致龋生物膜中主要致病菌的变形链球菌中也存在这种感应系统。本文就LuxS信号系统在变形链球菌生物膜形成和毒力因子分泌方面的作用以及它... LuxS介导的群体感应系统以自体诱导物-(2AI-2)分子作为通用信号,可介导不同细菌的交流。作为口腔致龋生物膜中主要致病菌的变形链球菌中也存在这种感应系统。本文就LuxS信号系统在变形链球菌生物膜形成和毒力因子分泌方面的作用以及它所介导的变形链球菌与口腔中其他细菌的交流等内容作一综述。 展开更多
关键词 自体诱导物-2 群体感应 变形链球菌
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变异链球菌gtfs在不同pH条件下表达的差异性 被引量：2
16
作者 陆玉 刘天佳 杨锦波 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期667-669,共3页
目的检测具有不同产胞外多糖(EPS)能力的变异链球菌菌株在不同pH条件下产EPS的能力及其与gtfA、gtfB、gtfC、gtfD表达变化的关系。方法选取变异链球菌(血清型c)临床分离株502(高产糖株)和参考株UA159(低产糖株),以实时定量逆转录聚合酶... 目的检测具有不同产胞外多糖(EPS)能力的变异链球菌菌株在不同pH条件下产EPS的能力及其与gtfA、gtfB、gtfC、gtfD表达变化的关系。方法选取变异链球菌(血清型c)临床分离株502(高产糖株)和参考株UA159(低产糖株),以实时定量逆转录聚合酶链反应(real-timeRT-PCR)方法检测在不同pH条件下与变异链球菌产糖能力密切相关的毒力因子gtfA、gtfB、gtfC、gtfD的表达变化。结果在pH5.5条件下,高产糖株和低产糖株gtfA、gtfB、gtfD的表达均有不同程度的升高,而gtfC略降低,高产糖株gtfB、gtfC的表达水平高于低产糖株。结论gtfs的表达水平与变异链球菌的致龋力密切相关。 展开更多
关键词 变异链球菌 葡萄糖基转移酶 实时定量逆转录聚合酶链反应
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LuxS基因缺失对变形链球菌耐酸性的影响 被引量：1
17
作者 于丹妮 陈杰 +1 位作者 张耀超 韩育植 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期838-841,共4页
目的:探讨变形链球菌Ingbritt C(血清C型)国际标准株与LuxS基因缺失的变形链球菌突变株之间耐酸能力的差异。方法:配制相同浓度的变形链球菌标准株与LuxS缺陷株菌悬液,分别在不同pH值(pH3.5～7.0)的BHI液体培养基中培养相同时间后,用紫... 目的:探讨变形链球菌Ingbritt C(血清C型)国际标准株与LuxS基因缺失的变形链球菌突变株之间耐酸能力的差异。方法:配制相同浓度的变形链球菌标准株与LuxS缺陷株菌悬液,分别在不同pH值(pH3.5～7.0)的BHI液体培养基中培养相同时间后,用紫外分光光度计测定吸光度,比较2种菌株的生长情况;先在轻度酸性环境(pH5.5)中预酸化,再将2种菌株于致死性pH值环境(pH3.0)中培养,比较其适应性耐酸能力。结果:①pH值为6.0～7.0时,2种菌珠在相同pH值条件下生长情况间的差异无显著性(P>0.05),且3组不同pH值条件下细菌生长情况间的差异亦无显著性(P>0.05);②pH值为4.5～5.5时,2种菌株的生长情况的差异有显著性(P<0.05);③在pH值为3.0时,LuxS缺陷株的生存率(0.006 5%)要明显低于标准株的生存率(0.078%),差异有显著性(P<0.05)。④在pH值5.5环境下预酸化后,LuxS缺陷株的生存率(0.747%)约为标准株生存率(8.65%)的1/10。结论:在亚致死性pH值中,变形链球菌标准株与LuxS缺陷株的耐酸能力具有差异,标准株的耐酸能力强于LuxS缺陷株,2种菌株均表现出了适应性耐酸的能力;变形链球菌LuxS缺陷株对酸的敏感性增加,而适应性耐酸能力仍然存在。 展开更多
关键词 变形链球菌 LUXs基因 耐酸性 突变株
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变形链球菌luxS基因同源重组克隆载体的构建实验 被引量：2
18
作者 黄正蔚 刘正 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期70-72,共3页
目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究。方法利用高保真的pfuDNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH1+质粒的卡那霉素抗性... 目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究。方法利用高保真的pfuDNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH1+质粒的卡那霉素抗性基因片段(Kana),依次采用相应的双酶切反应将这些片段连接入噬菌体载体pBluescriptS(K+)Phagemids,以构建目的质粒Xukd-pbsk重组载体。结果经酶切鉴定目的质粒各片段插入无误,插入片段的测序报告也显示碱基无错配,含目的质粒的菌株可在含30mg/L卡那霉素的LB培养基内生长良好,证明插入的卡那霉素抗性基因体外表达良好。结论本研究构建的变形链球菌luxS基因同源重组克隆载体正确,可用于今后对于变形链球菌luxS基因突变株构建的研究。 展开更多
关键词 变形链球菌 LUXs基因 同源重组克隆载体
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基于LAMP与智能手机端对龋病致病菌快速检测平台的构建
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作者 尚进 张晓东 +5 位作者 王敬夫 王玥晖 杨晨 王贺靓 刘佼佼 张然 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第5期595-599,共5页
目的:建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)对变异链球菌的快速、定量、可视化的快速检测方法。方法:提取变异链球菌DNA,通过LAMP技术对DNA中的特异性片段进行检测,建立基于LAMP技术的检测方案,对检测实验条件进行优化,建立针对变异链... 目的:建立一种基于环介导等温扩增技术(LAMP)对变异链球菌的快速、定量、可视化的快速检测方法。方法:提取变异链球菌DNA,通过LAMP技术对DNA中的特异性片段进行检测,建立基于LAMP技术的检测方案,对检测实验条件进行优化,建立针对变异链球菌的LAMP定量检测技术,运用基于移动端检测设备对阳性实验结果进行定量分析。结果:建立的LAMP定量检测方法可在23 min内检测时间内对样本进行检测,具有良好的特异性和灵敏性,检测精度达到1.625×10^(-3)ng/μL。使用移动端应用程序对阳性结果进行采集、识别并进行了量化,绝对G值与DNA浓度呈良好线性关系,方程为y=3.2x+57.133(R^(2)=0.9882)。结论:LAMP定量检测变异链球菌的新方法灵敏度高、特异性强、结果可视化、方便省时、可以对细菌DNA进行定量等特点,具有广泛的临床应用前景。 展开更多
关键词 LAMP 变异链球菌 DNA 定量检测
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葡糖基转移酶多肽疫苗HDS免疫大鼠的实验研究 被引量：1
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作者 丁芸 凌均■ 陈罕 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期353-355,共3页
目的　动物体内研究葡糖基转移酶多肽疫苗HDS免疫原性和防龋效果。方法　构建大鼠人工龋模型 ,分别用人工抗原HDS_KLH ,多肽抗原HDS ,葡糖基转移酶 (GTF)免疫大鼠 ,酶联免疫吸附法检测大鼠血清和唾液中抗HDS、GTF抗体 ;体视显微镜下观... 目的　动物体内研究葡糖基转移酶多肽疫苗HDS免疫原性和防龋效果。方法　构建大鼠人工龋模型 ,分别用人工抗原HDS_KLH ,多肽抗原HDS ,葡糖基转移酶 (GTF)免疫大鼠 ,酶联免疫吸附法检测大鼠血清和唾液中抗HDS、GTF抗体 ;体视显微镜下观察各组大鼠磨牙龋坏情况 ,并用Keyes计分法计分。结果　HDS_KLH免疫组大鼠唾液、血清中抗HDSIgG和IgA水平均高于对照组 (P <0 0 5 ) ;HDS_KLH ,HDS ,GTF免疫组大鼠龋Keyes计分均低于对照组 (P <0 0 1) ,光滑面防龋效果最为显著。结论　人工抗原HDS_KLH能刺激机体产生针对GTF的保护性免疫 ,并减少实验大鼠龋齿发生。 展开更多
关键词 葡糖基转移酶 多肽 疫苗 HDs 免疫 大鼠 实验 龋病 人工抗原
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