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棉花SEC1复合体组分的鉴定与GhSCY1基因功能验证
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作者 冯小康 梁倩 +2 位作者 王学峰 孙杰 薛飞 《生物技术通报》 北大核心 2025年第3期112-122,共11页
【目的】SEC1复合体是位于类囊体上的蛋白质转运系统,由SCY1、SECE1和SECA1共同组成。SEC1系统参与类囊体蛋白的转运和整合,对维持叶绿体结构的稳定起着非常重要的作用。利用生物信息学从陆地棉全基因组中鉴定SEC1复合体基因,旨在为光... 【目的】SEC1复合体是位于类囊体上的蛋白质转运系统,由SCY1、SECE1和SECA1共同组成。SEC1系统参与类囊体蛋白的转运和整合,对维持叶绿体结构的稳定起着非常重要的作用。利用生物信息学从陆地棉全基因组中鉴定SEC1复合体基因,旨在为光合机制研究和棉花高产抗逆育种提供新的基因资源。【方法】基于拟南芥SEC1系统组分基因蛋白序列,从陆地棉基因组中鉴定棉花SEC1系统组分,分析该系统组分各基因的理化性质、跨膜结构、蛋白互作、启动子元件及表达模式。利用VIGS和透射电镜技术,研究叶绿体主要通道蛋白组分GhSCY1对叶绿素合成、叶绿体结构和形态的影响。【结果】在陆地棉中鉴定出了SEC1转运系统的组分,GhSCY1A/D、GhSECE1A/D和GhSECA1A/D。GhSCY1A/D含有1个SecY保守结构域,7个跨膜结构域,GhSECE1D只含有1个跨膜结构域。预测GhSCY1A/D与GhSECE1D在SEC1转运系统中共同形成叶绿体跨膜通道蛋白。GhSECA1A/D拥有1个SecA结构域,不含跨膜结构域,主要为蛋白转运过程提供能量。SEC1系统各基因在叶片中的表达量较高,且能够参与温度胁迫的响应。沉默GhSCY1基因(GhSCY1A和GhSCY1D)后,棉花叶片出现斑驳的淡黄色表型,叶绿素含量明显下降,叶片叶绿体结构和形态异常,没有淀粉粒累积。【结论】棉花SEC1系统分别由GhSCY1A/D、GhSECE1A/D和GhSECA1A/D构成,其中GhSCY1A/D基因在维持叶绿体结构和形态及叶绿素生物合成方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 棉花 sec1系统 GhSCY1 叶色 叶绿体结构 温度胁迫 叶绿体蛋白转运
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SEC14L1P1对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响
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作者 郑文甜 公慧 +3 位作者 张馨月 郝嘉仪 王亚杰 蒋英英 《中国癌症杂志》 北大核心 2025年第3期309-319,共11页
背景与目的:SEC14L1P1是SEC14家族的一种假基因,已被发现与多种肿瘤的发生、发展密切相关,但其在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的作用尚未明确。本研究旨在深入了解SEC14L1P1在OSCC细胞内的表达特征和亚细胞定位... 背景与目的:SEC14L1P1是SEC14家族的一种假基因,已被发现与多种肿瘤的发生、发展密切相关,但其在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的作用尚未明确。本研究旨在深入了解SEC14L1P1在OSCC细胞内的表达特征和亚细胞定位,以及其对OSCC细胞增殖和迁移的影响。方法:通过ENCORI数据库对SEC14L1P1在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)组织中的表达进行分析;利用GDC和UCSC Xena数据库进一步分析SEC14L1P1在HNSCC中的表达及其与患者预后之间的关系。利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测SEC14L1P1在OSCC细胞系中的表达;采用RNA核质分离实验确定SEC14L1P1在OSCC细胞中的定位。对CAL-27细胞建立SEC14L1P1敲减(SS-SEC14L1P1)组和敲减对照(SS-NC)组,对HN30细胞建立SEC14L1P1过表达(SEC14L1P1)组和过表达对照(Vector)组。通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)和transwell迁移实验评估SEC14L1P1表达变化对各组细胞增殖、迁移能力的影响。采用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测SEC14L1P1表达改变对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关基因表达水平的影响。采用裸鼠皮下移植瘤模型观察SEC14L1P1在体内对OSCC细胞增殖的影响,将12只4周龄BALB/c裸鼠随机分为反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)-NC组和ASO-SEC14L1P1组,每组6只,每只裸鼠均做标记。进一步的机制研究通过RNAInter数据库分析与SEC14L1P1交互的分子,通过ENCORI数据库查询SEC14L1P1与DHX9的表达相关性。采用Western blot检测SEC14L1P1表达改变对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)通路的影响。结果:数据库分析显示,SEC14L1P1在HNSCC组织中的表达高于正常组织,且与患者的不良预后密切相关。RTFQ-PCR结果表明,SEC14L1P1在6种OSCC细胞系中均高表达;RNA核质分离实验结果显示,在CAL-27和HN30细胞中SEC14L1P1主要定位于细胞核内。与SS-NC组相比,SS-SEC14L1P1组中的相对表达水平明显降低,且能显著抑制细胞增殖和迁移能力;与Vector组相比,SEC14L1P1组中的相对表达水平明显升高,细胞增殖和迁移能力也明显升高。SEC14L1P1的下调伴随E-钙粘蛋白(E-cadherin)的mRNA表达和蛋白水平升高,N-钙粘蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的mRNA表达和蛋白水平降低,SEC14L1P1过表达后的结果则相反。裸鼠皮下移植瘤模型实验显示,与ASO-NC组比较,ASO-SEC14L1P1组皮下移植瘤体积和重量均减小。进一步的机制研究发现SEC14L1P1与DHX9表达呈正相关性,且已有研究表明DHX9能激活PI3K/AKT信号通路;敲减SEC14L1P1导致磷酸化PI3K(phosphorylated-PI3K,p-PI3K)和磷酸化AKT(phosphorylated-AKT,p-AKT)的蛋白表达减少,过表达SEC14L1P1则显示p-PI3K和p-AKT的蛋白表达增加。结论:SEC14L1P1在OSCC细胞和组织中呈现出较高的表达水平,并且能促进OSCC细胞增殖及迁移,这一现象可能与SEC14L1P1调控PI3K/AKT信号通路,进而促进EMT有关。 展开更多
关键词 sec14L1P1 口腔鳞状细胞癌 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间充质转化
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SEC1酶免疫电极免疫反应的AFM和电化学方法研究
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作者 董飒英 王洪仁 《电化学》 CAS CSCD 2002年第4期388-396,共9页
将一种肠毒素抗体共价耦联于自组装的金电极表面 ,利用原子力显微镜识别抗原抗体在多种实验条件下的形貌并通过统计数据进行定量分析 .用作控制实验的是非特异性牛血清白蛋白(BSA)抗原以及低浓度的SEC1抗原 .另外 ,酸性溶液可以打破抗... 将一种肠毒素抗体共价耦联于自组装的金电极表面 ,利用原子力显微镜识别抗原抗体在多种实验条件下的形貌并通过统计数据进行定量分析 .用作控制实验的是非特异性牛血清白蛋白(BSA)抗原以及低浓度的SEC1抗原 .另外 ,酸性溶液可以打破抗原与抗体之间的结合从而使得生物电极可以被重复使用 . 展开更多
关键词 sec1 酶免疫电极 免疫反应 AFM 电化学方法 原子力显微镜 自组装 抗体 肠毒素 金电极 解离剂
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抗B型葡萄球菌肠毒素(SEB)单克隆抗体的研制及其初步鉴定(简报) 被引量:1
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作者 李恩善 肖毅 +1 位作者 董邦权 赵宁 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第3期55-56,共2页
葡萄球菌肠毒素是一组分子量为24,000—34,000的单肽链蛋白质。已知有SEA、SEB、SECs(包括SEC1,SEC2及SEC8),SED及SEE等血清型。都能引起食物中毒。并证实SEA和SEB还具有强烈的有丝分裂原效应。对机体可产生广泛地免疫调节作用。因... 葡萄球菌肠毒素是一组分子量为24,000—34,000的单肽链蛋白质。已知有SEA、SEB、SECs(包括SEC1,SEC2及SEC8),SED及SEE等血清型。都能引起食物中毒。并证实SEA和SEB还具有强烈的有丝分裂原效应。对机体可产生广泛地免疫调节作用。因此,建立抗SEB单抗的杂交癌细胞系具有重要的实际意义。 展开更多
关键词 葡萄球菌肠毒素 单克隆抗体 初步鉴定 简报 研制 B型 免疫调节作用 有丝分裂原 SEB sec1 食物中毒 癌细胞系 SEA 分子量 蛋白质 血清型 SEE SED
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