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鼻咽癌组织的显微切割及其RNA线性扩增 被引量：8
1
作者 周艳宏 曾朝阳 +12 位作者 熊炜 罗晓敏 李小玲 范松青 张文玲 刘华英 李征 杨一新 武明花 唐珂 曹利 沈守荣 李桂源 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期463-467,共5页
从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,... 从微小体积鼻咽癌活检标本中获取纯净癌细胞一直是鼻咽癌分子生物学研究中的难题.为了寻找一种能从鼻咽癌活检组织中获得高纯度、高质量RNA来完成cDNA微阵列(cDNA Microarray)实验的简便实用方法,采用RNAlater技术保存鼻咽癌活检组织,显微切割技术来获得高纯度鼻咽癌细胞,利用RNA线性扩增技术得到cDNA微阵列实验所需RNA.结果表明:利用RNAlater技术可以很好地保持组织RNA的稳定,通过优化显微切割和RNA线性扩增的条件获得了cDNA微阵列实验所需的高纯度、高质量RNA. 展开更多
关键词 rnalater技术 手工显微切割 rna线性扩增技术 CDNA微阵列
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基于RNA恒温扩增技术分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体感染的流行病学特点 被引量：11
2
作者 王朝 王维 +4 位作者 郭伟 吕玲 李维超 李会强 林书祥 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期223-228,共6页
目的分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体(MP)感染的流行病学特点,探讨RNA恒温扩增技术(SAT)在MP检测中的应用。方法收集2016年5月-2018年5月在天津市儿童医院住院的1 782例呼吸道感染患儿的MP-RNA检测结果和其他临床资料,进行回... 目的分析天津地区呼吸道感染住院儿童肺炎支原体(MP)感染的流行病学特点,探讨RNA恒温扩增技术(SAT)在MP检测中的应用。方法收集2016年5月-2018年5月在天津市儿童医院住院的1 782例呼吸道感染患儿的MP-RNA检测结果和其他临床资料,进行回顾性分析。结果 2016年5月-2018年5月天津市儿童医院呼吸道感染住院儿童MP总检出率为39.79%,男性患儿MP检出率为36.62%,女性为43.63%,女性患儿平均年龄及MP检出率均高于男性(χ~2=9.04,P<0.05)。MP感染见于各年龄组住院儿童,新生儿与婴儿组、幼儿组、学龄前期组和学龄期组患儿的MP检出率分别为9.76%、26.28%、48.08%和63.51%。MP感染全年可见,春夏秋冬四季检出率分别为23.15%、31.65%、59.50%和44.73%,秋冬季MP检出率高于春夏季(χ~2=114.70,P<0.05)。肺泡灌洗液、痰液、咽拭子和胸腹水的MP-RNA阳性率分别为77.89%、20.38%、32.15%和27.27%。MP-RNA与MP-DNA检测结果存在差异(P<0.05)。结论天津地区呼吸道感染住院儿童中,女性患儿MP检出率高于男性,总的MP检出率随着患儿年龄的增大而增高,MP检出率秋季最高,肺泡灌洗液MP-RNA阳性率明显高于其他标本类型。RNA恒温扩增技术适用于MP感染早期诊断和病情监测。 展开更多
关键词 肺炎支原体检测 rna恒温扩增技术 流行病学分析 儿童
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无需逆转录的高通量多重呼吸道病毒RNA检测技术的建立 被引量：2
3
作者 杨丹丽 田晓怡 +1 位作者 石伟先 郑直 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期24-28,共5页
目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以L... 目的建立一种无需逆转录等复杂样品前处理步骤,只需简单样品裂解便可同时检测多种呼吸道病毒RNA的高通量核酸检测系统,为大规模流行病学监测提供新的技术手段。方法直接以裂解液中病毒RNA作为检测靶标,利用夹层杂交信号放大技术,结合以Luminex微球为基础的多指标同步分析(xMAP)多重检测平台,对一个样品同时检测A和B型流感病毒、A和B型呼吸道合胞病毒、1、2和3型副流感病毒,及偏肺病毒等8种病毒的靶标RNA,可一次实验并行检测96个样品。对该高通量检测系统进行了特异性、灵敏度评价。结果该检测方法可以特异性区分8种病毒的RNA靶标分子,检测下限均低于或等于4695个RNA拷贝。结论初步建立了可靠、灵敏、操作简便、高通量的多种呼吸道病毒RNA并行检测方法,为进一步实现在临床呼吸道样品中高通量检测呼吸道病毒提供了技术基础。 展开更多
关键词 呼吸道病毒 体外转录rna 多指标同步分析技术 信号放大
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