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rhTNF-α生物活性测定方法的改进及其对人白血病早幼粒细胞HL-60作用机理研究被引量：10: 1; 作者王军志高凯饶春明《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期141-144,共4页; 目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA... 展开更多; 关键词 rhtnf-α 生物活性 IL-60细胞白血病; 在线阅读下载PDF 职称材料

rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维滑膜细胞PGE_2受体和Gαs的影响及芍药苷的作用被引量：1: 2; 作者戴杏郭晓蓉魏伟《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第8期1110-1115,共6页; 目的探讨rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维样滑膜细胞(FLS)PGE2受体(EP2)及Gαs表达的影响及芍药苷(Pae)的作用。方法体外培养人FLS,使用不同浓度的rhIL-1α和rhTNF-α刺激人FLS,观察EP2及Gαs蛋白表达的情况,观察Pae对其的影响。采用免疫... 展开更多; 关键词 rhIL-1α rhtnf-α 成纤维样滑膜细胞 PGE2受体 Gαs蛋白芍药苷; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗rhTNF-α单克隆抗体F(ab′)_2片段的制备: 3; 作者汤燕文邓宛明张振龙《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期76-79,共4页; 采用胃酶消化抗ｒｈＴＮＦ－αＭｃＡｂ制备了其Ｆ（ａｂ′）２片段。对胃酶消化的时间，酶／抗体的比例及片段回收率等条件做了比较。结果显示，胃酶在ｐＨ４．２于３７℃消化１８ｈ，可制备出完整的Ｆ（ａｂ′）２片段；非还原型ＳＤ... 展开更多; 关键词抗rhtnf-α 单克隆抗体制备 F(ab')2; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达载体pRSET C重组rhTNF-β的表达及其纯化被引量：2: 4; 作者邱莲女马志章 +3 位作者周晴李芳芳陈常庆丁仁瑞《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期167-169,共3页; 将hTNFβN端缺失23个氨基酸的基因,克隆在表达载体pRSETC的6个组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,rhTNFβ获得了高表达,表达量占细菌总蛋白的26%。其表达产物大部分以可溶性形式存在... 展开更多; 关键词表达载体 pRSET C rhtnf-β 表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

聚乙二醇存在下的离子交换层析纯化重组人肿瘤坏死因子被引量：4: 5; 作者张志强金业涛 +1 位作者冯小黎苏志国《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期340-345,共6页; 采用离子交换层析纯化了大肠杆菌表达的重组人肿瘤坏死因子（rhTNF－α），考察了PEG在离子交换层析中的作用，包括PEG分子量和浓度等的影响，初步探索了PEG和蛋白质相互作用机理。少量残余的杂蛋白继以疏水相互作用层析除去，获得了比... 展开更多; 关键词层析聚乙二醇肿瘤坏死因子 hTNF rhtnf-α; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人突变型471TNF-α及野生型TNF-α的表达及活性初步鉴定被引量：4: 6; 作者李瑶琛孔令洪 +3 位作者王一理尚宁宽耿宜萍司履生《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期14-16,29,共4页; 目的　采用原核表达系统 ,表达人突变型 471TNF α蛋白 ,并检测其生物学活性。方法　采用PCR技术扩增突变型 471TNF α及野生型TNF αcDNA片段 ,克隆入中间载体pUCm T中 ,并测序证实。以限制性内切酶切下目的片段 ,克隆入pBV2 2 0中 ,... 展开更多; 关键词 TNF-Α 突变体蛋白表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

新型肿瘤坏死因子免疫抑制剂的克隆和表达: 7; 作者韩苇赵宁 +2 位作者石继宏颜真张英起《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期332-335,共4页; 目的 :用鸡卵清溶菌酶 (henegg whitelysozyme ,HEL)T辅助细胞表位序列替换新型rhTNF α3’末端序列 ,构建和表达新型rhTNF α免疫抑制剂。方法 :克隆、表达、纯化和鉴定新型rhTNF α免疫抑制剂。结果 :DNA测序表明 ,重组新型hTNF αHEL... 展开更多; 关键词新型肿瘤坏死因子免疫抑制剂克隆表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

组织胚胎学: 8; 《中国医学文摘（基础医学）》 CSCD 2005年第5期265-268,共4页; 0501811 sLe^x抗体对小鼠胚泡在E-选择素上黏附和扩展的影响；0501812 胰岛素样生长因子-Ⅰ对体外人滋养层细胞孕酮分泌的影响；0501813 不同条件下小鼠围着床期子宫内膜整合素αv和Le^y寡糖的表达；0501814 Forskolin及PGE2对人子宫内... 展开更多; 关键词组织胚胎学胰岛素样生长因子-Ⅰ rhtnf-α FORSKOLIN 子宫内膜整合素人滋养层细胞 E-选择素 sLe^x 腺上皮细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人肿瘤坏死因子-α体内外对HL-60细胞作用的研究: 9; 作者刘霞陈元仲 +3 位作者吴勇黄美娟杨大柳郭江睿《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期477-480,共4页; 为了研究重组人肿瘤坏死因子-α(recombinanthumantumornecrosisfactor-alpha,rhTNF-α)在体外及体内对人髓系白血病细胞株HL-60细胞的作用,应用MTT法和集落形成试验测定HL-60细胞的增殖抑制,采用AO/EB荧光染色法、流式细胞术和TdT酶介... 展开更多; 关键词重组人肿瘤坏死因子 HL-60 细胞增殖细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名rhTNF-α生物活性测定方法的改进及其对人白血病早幼粒细胞HL-60作用机理研究被引量：10: 1; 作者王军志高凯饶春明; 机构中国药品生物制品检定所生化室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期141-144,共4页; 文摘目的:通过对rhTNF-α生物活性方法的改进,建立了较规范的活性测定方法,避免了人为判定的误差,提高了测定精确性.方法:本研究应用L929鼠结缔组织来源纤维母细胞系,参照国际标准品测定rhTNF-α效价.分别用Northern Dot Blot杂交检测及DNA电泳等方法,观察不同效价rhTNF-α对HL-60人白血病早幼粒细胞生长的影响.结果:rhTNF-α对HL-60细胞的生长抑制作用与时间、剂量正相关,核酸水平检测初步发现c-myc基因表达量降低,且rhTNF-α对DNA有损伤作用.结论:rhT-NF-α的测定可用自动分析的方法进行.rhTNF-α抑制HL-60细胞生长,其机理不同于阿霉素.; 关键词 rhtnf-α 生物活性 IL-60细胞白血病; Keywords rhtnf-a bioassay c-myc gene HL-60 cells; 分类号 R392-33 [医药卫生—免疫学] R733.702 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维滑膜细胞PGE_2受体和Gαs的影响及芍药苷的作用被引量：1: 2; 作者戴杏郭晓蓉魏伟; 机构安徽医科大学临床药理研究所; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第8期1110-1115,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:31200675 81173075 +2 种基金 30973543 81330081) 安徽省自然科学基金资助项目(编号:1208085QH158); 文摘目的探讨rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维样滑膜细胞(FLS)PGE2受体(EP2)及Gαs表达的影响及芍药苷(Pae)的作用。方法体外培养人FLS,使用不同浓度的rhIL-1α和rhTNF-α刺激人FLS,观察EP2及Gαs蛋白表达的情况,观察Pae对其的影响。采用免疫荧光标记法结合激光共聚焦显微镜分析技术检测人FLS的EP2表达,Western blot检测Gαs表达。结果 rhIL-1α(0.1、1、10μg/L)和rhTNF-α(0.2、2、20μg/L)明显降低人FLS EP2和Gαs表达,Pae(10-8、10-7、10-6、10-5mol/L)可上调人FLS的EP2和Gαs表达。结论 Pae恢复rhIL-1α和rhTNF-α刺激后EP2和Gαs的表达可能是其抑制滑膜细胞增殖和亢进分泌功能的分子机制之一。; 关键词 rhIL-1α rhtnf-α 成纤维样滑膜细胞 PGE2受体 Gαs蛋白芍药苷; Keywords rhIL-1α rhtnf-α fibroblast-like synoviocytes prostaglandins E2 recepter Gαs paeoniflorin; 分类号 R967 [医药卫生—药理学] R593.22 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗rhTNF-α单克隆抗体F(ab′)_2片段的制备: 3; 作者汤燕文邓宛明张振龙; 机构卫生部北京生物制品研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期76-79,共4页; 基金国家863课题基金; 文摘采用胃酶消化抗ｒｈＴＮＦ－αＭｃＡｂ制备了其Ｆ（ａｂ′）２片段。对胃酶消化的时间，酶／抗体的比例及片段回收率等条件做了比较。结果显示，胃酶在ｐＨ４．２于３７℃消化１８ｈ，可制备出完整的Ｆ（ａｂ′）２片段；非还原型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ发现，有９０％以上的ＩｇＧ被降解为Ｆ（ａｂ′）２片段；Ｓ－２００层析柱纯化Ｆ（ａｂ′）２片段的回收率达４５％；双抗体夹心竞争抑制ＥＬＩＳＡ法测定Ｆ（ａｂ′）２片段的竞争抑制效价为２．６×１０７。中和Ｌ９２９细胞毒活性试验的结果表明，１４８ｎｇ的Ｆ（ａｂ′）２片段可中和１个单位ｒｈＴＮＦ－α的细胞毒作用。; 关键词抗rhtnf-α 单克隆抗体制备 F(ab')2; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达载体pRSET C重组rhTNF-β的表达及其纯化被引量：2: 4; 作者邱莲女马志章周晴李芳芳陈常庆丁仁瑞; 机构浙江大学生命科学学院免疫工程实验室中国科学院上海生物工程研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期167-169,共3页; 基金国家自然科学基金!No .39670 81 5 浙江省自然科学基金!No .3970 50; 文摘将hTNFβN端缺失23个氨基酸的基因,克隆在表达载体pRSETC的6个组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游。以重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,rhTNFβ获得了高表达,表达量占细菌总蛋白的26%。其表达产物大部分以可溶性形式存在。菌体裂解上清经0.45μm滤膜过滤后,用固定化金属配体亲和柱层析,纯度可达95%左右;经肠激酶酶切后,具有TNFβ的细胞毒活性,此活性为9.8×109U/g。; 关键词表达载体 pRSET C rhtnf-β 表达纯化; Keywords expressionvectorpRSETC rhTNF β expression immobilizedmetalaffinitychromatography; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名聚乙二醇存在下的离子交换层析纯化重组人肿瘤坏死因子被引量：4: 5; 作者张志强金业涛冯小黎苏志国; 机构大连理工大学生化工程研究所; 出处《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期340-345,共6页; 文摘采用离子交换层析纯化了大肠杆菌表达的重组人肿瘤坏死因子（rhTNF－α），考察了PEG在离子交换层析中的作用，包括PEG分子量和浓度等的影响，初步探索了PEG和蛋白质相互作用机理。少量残余的杂蛋白继以疏水相互作用层析除去，获得了比活性为3．21×107u·mg-1的rhTNF－α，纯化倍数为253，总回收率为91．3％。; 关键词层析聚乙二醇肿瘤坏死因子 hTNF rhtnf-α; Keywords chromatography polyethylene glycol tumor necrosis factor; 分类号 Q510.3 [生物学—生物化学] TQ464.7 [化学工程—制药化工]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人突变型471TNF-α及野生型TNF-α的表达及活性初步鉴定被引量：4: 6; 作者李瑶琛孔令洪王一理尚宁宽耿宜萍司履生; 机构西安交通大学生命科学与技术学院免疫病理研究室; 出处《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期14-16,29,共4页; 文摘目的　采用原核表达系统 ,表达人突变型 471TNF α蛋白 ,并检测其生物学活性。方法　采用PCR技术扩增突变型 471TNF α及野生型TNF αcDNA片段 ,克隆入中间载体pUCm T中 ,并测序证实。以限制性内切酶切下目的片段 ,克隆入pBV2 2 0中 ,转入大肠杆菌DH5α ,温度诱导表达野生型及突变型 471TNF α蛋白。初步纯化蛋白后 ,采用MTT法评估两者对L92 9细胞的杀伤作用。结果　①获得了测序正确的野生型TNF α及突变型 471TNF α的cDNA克隆 ;②构建了正常人野生型TNF α及突变型 471TNF α重组表达质粒 ;③经温度诱导 ,TNF α及突变型 471TNF α蛋白均获得了表达 ;④初步的生物学活性研究表明 ,突变型 471TNF α蛋白的杀伤作用显著高于野生型。结论　突变型 471TNF α的生物学活性优于野生型TNF α ,为进一步开展TNF; 关键词 TNF-Α 突变体蛋白表达; Keywords rhtnf-α mutant protein expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名新型肿瘤坏死因子免疫抑制剂的克隆和表达: 7; 作者韩苇赵宁石继宏颜真张英起; 机构第四军医大学生物技术中心; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期332-335,共4页; 文摘目的 :用鸡卵清溶菌酶 (henegg whitelysozyme ,HEL)T辅助细胞表位序列替换新型rhTNF α3’末端序列 ,构建和表达新型rhTNF α免疫抑制剂。方法 :克隆、表达、纯化和鉴定新型rhTNF α免疫抑制剂。结果 :DNA测序表明 ,重组新型hTNF αHEL的 3’末端序列与设计序列完全相同。将其转移到pBV2 2 0表达载体中 ,重组菌经 42℃诱导后做SDS PAGE分析 ,结果显示该重组体获得了表达 ,其表达量为菌体总蛋白量的 30 %,表达形式为包涵体 ,对该包涵体进行溶解和复性 ,再经阴离子交换柱纯化 ,获得的重组蛋白的纯度可达 90 %以上。免疫印迹鉴定结果证实 ,该表达蛋白可与抗TNF α抗体产生免疫反应。体外杀伤活性检测显示 ,该蛋白已完全丧失了新型TNF α的体外杀伤活性。结论 :上述实验证实 ,新型rhTNF α免疫抑制剂构建成功 ,该免疫抑制剂既保持了与TNF α抗体结合的能力又失去了TNF α的杀伤活性 ,为其下一步治疗作用的研究打下了基础。; 关键词新型肿瘤坏死因子免疫抑制剂克隆表达; Keywords New rhtnf-α Chicken egg-white lysozyme Sequence of T-help cell Immune inhibitor; 分类号 R979.5 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组织胚胎学: 8; 出处《中国医学文摘（基础医学）》 CSCD 2005年第5期265-268,共4页; 文摘 0501811 sLe^x抗体对小鼠胚泡在E-选择素上黏附和扩展的影响；0501812 胰岛素样生长因子-Ⅰ对体外人滋养层细胞孕酮分泌的影响；0501813 不同条件下小鼠围着床期子宫内膜整合素αv和Le^y寡糖的表达；0501814 Forskolin及PGE2对人子宫内膜腺上皮细胞氯电流的影响；0501815 rhTNF-α在体外对人正常精子线粒体和质膜的影响；0501816 激活的星形胶质细胞分泌的TNF-α与癫痫发作的相关性。; 关键词组织胚胎学胰岛素样生长因子-Ⅰ rhtnf-α FORSKOLIN 子宫内膜整合素人滋养层细胞 E-选择素 sLe^x 腺上皮细胞; 分类号 R321-4 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人肿瘤坏死因子-α体内外对HL-60细胞作用的研究: 9; 作者刘霞陈元仲吴勇黄美娟杨大柳郭江睿; 机构福建医科大学附属协和医院福建省血液病研究所; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期477-480,共4页; 基金国家教委优秀年轻教师基金资助项目(编号:95-503) 国家"百千万人才工程"专项基金资助项目福建省教委科研基金资助项目(编号:k95033); 文摘为了研究重组人肿瘤坏死因子-α(recombinanthumantumornecrosisfactor-alpha,rhTNF-α)在体外及体内对人髓系白血病细胞株HL-60细胞的作用,应用MTT法和集落形成试验测定HL-60细胞的增殖抑制,采用AO/EB荧光染色法、流式细胞术和TdT酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测凋亡细胞;利用HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型观察给药后瘤体重量、组织病理的改变,并采用透射电镜以及TUNEL法检测瘤组织细胞的凋亡。结果表明:rhTNF-α对HL-60细胞的增殖具有明显的抑制作用,呈时间和浓度依赖性;AO/EB染色后可见rhTNF-α处理组HL-60细胞核内染色质浓缩聚集或成碎片,呈现凋亡表象;流式细胞术显示随着rhTNF-α浓度的增加,细胞凋亡阳性率逐渐增高;TUNEL法检测显示,3200U/mlrhTNF-α作用于HL-60细胞48小时凋亡阳性率可达37.5%。在体内,rhTNF-α可抑制HL-60细胞裸鼠异种移植瘤生长,抑制率最高可达60.33%;病理检查发现,rhTNF-α处理组的瘤组织有程度不等的出血坏死区域;透射电镜及TUNEL法检测表明,处理组的瘤组织可见有较多凋亡细胞。结论:rhTNF-α在体内、外均可抑制HL-60细胞增殖,并诱导其凋亡。; 关键词重组人肿瘤坏死因子 HL-60 细胞增殖细胞凋亡; Keywords rhtnf-α HL-60 cells Proliferation Apoptosis; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤] R979.1 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	rhTNF-α生物活性测定方法的改进及其对人白血病早幼粒细胞HL-60作用机理研究	王军志高凯饶春明	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	1999	10	在线阅读下载PDF 职称材料
2	rhIL-1α和rhTNF-α对人成纤维滑膜细胞PGE_2受体和Gαs的影响及芍药苷的作用	戴杏郭晓蓉魏伟	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗rhTNF-α单克隆抗体F(ab′)_2片段的制备	汤燕文邓宛明张振龙	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	表达载体pRSET C重组rhTNF-β的表达及其纯化	邱莲女马志章周晴李芳芳陈常庆丁仁瑞	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD	1999	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	聚乙二醇存在下的离子交换层析纯化重组人肿瘤坏死因子	张志强金业涛冯小黎苏志国	《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心	1999	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	重组人突变型471TNF-α及野生型TNF-α的表达及活性初步鉴定	李瑶琛孔令洪王一理尚宁宽耿宜萍司履生	《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	新型肿瘤坏死因子免疫抑制剂的克隆和表达	韩苇赵宁石继宏颜真张英起	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	组织胚胎学		《中国医学文摘（基础医学）》 CSCD	2005	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	重组人肿瘤坏死因子-α体内外对HL-60细胞作用的研究	刘霞陈元仲吴勇黄美娟杨大柳郭江睿	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料