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猪萨佩罗病毒研究进展 被引量:1
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作者 韩园园 王静雯 +4 位作者 阮静娴 王栋涵 夏璐 朱河水 胡慧 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2653-2660,共8页
猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus, PSV)属于小RNA病毒科萨佩罗病毒属,是一种无包膜单股正链RNA病毒。与其他猪肠道病毒相似,PSV主要通过粪-口途径传播,也可通过接触和气溶胶传播。仔猪对该病毒易感,其可引起仔猪神经系统、呼吸系统、... 猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus, PSV)属于小RNA病毒科萨佩罗病毒属,是一种无包膜单股正链RNA病毒。与其他猪肠道病毒相似,PSV主要通过粪-口途径传播,也可通过接触和气溶胶传播。仔猪对该病毒易感,其可引起仔猪神经系统、呼吸系统、消化系统等的功能紊乱,严重时可导致猪死亡,不同毒株之间毒力与组织嗜性存在差异。临床中PSV常与猪捷申病毒、猪流行性腹泻病毒、猪库布病毒等多种病毒混合感染,使其临床症状复杂、诊断难度增加,从而加快病毒传播速度。此外,PSV存在的基因重组现象及跨种传播风险,对养猪业造成潜在威胁。目前已有核酸水平、蛋白水平、血清学等多种检测方法可用于PSV的实验室检测,已有多种细胞系可建立其体外感染模型,用于该病毒的相关研究。截至目前,PSV的研究主要集中于流行病学研究及其分离鉴定,有关PSV感染和致病机制研究较少且无商品化疫苗和有效的抗病毒药物。笔者对PSV的病原学特征、流行病学、致病机制、临床防控等方面的研究进展进行综述,以期为PSV的进一步防控研究提供理论依据。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒(psv) 流行病学 临床症状 致病机制
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猪萨佩罗病毒HLJ 2204株的分离鉴定及其致病性分析
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作者 杨建凤 赵飞鹏 +9 位作者 马欣傲 彭铭玥 唐丽杰 姜艳平 乔薪瑗 李佳璇 王晓娜 单智夫 周晗 李一经 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期1124-1131,共8页
为从东北地区腹泻仔猪粪便样品中分离猪萨佩罗病毒(PSV)流行株,本研究采集2020年~2022年东北地区不同猪场仔猪腹泻粪便样品,首先利用PSV特异性的RT-PCR方法对临床样品初步检测,将RT-PCR检测为PSV阳性样品接种PK-15细胞进行病毒分离并传... 为从东北地区腹泻仔猪粪便样品中分离猪萨佩罗病毒(PSV)流行株,本研究采集2020年~2022年东北地区不同猪场仔猪腹泻粪便样品,首先利用PSV特异性的RT-PCR方法对临床样品初步检测,将RT-PCR检测为PSV阳性样品接种PK-15细胞进行病毒分离并传至30代,然后将第30代病毒经PCR和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定,采用Reed-Muench法测30代分离病毒的TCID50及全基因组序列分析,最后将分离病毒经口服5 mL(10^(7.386)TCID_(50)/0.1 mL)感染3日龄仔猪进行致病性分析。结果显示,在采集的95份样品中有17份样品在624 bp左右出现目的条带,将PSV阳性粪便样品接种PK-15细胞,结果有1份样品于接种后24 h细胞出现变圆、皱缩和脱落等PSV特征性细胞病变,表明分离到1株PSV,将其命名为HLJ 2204株;病毒蚀斑纯化后的30代病毒效价为107.386TCID50/0.1 mL;HLJ 2204株基因组全长7306 bp,同源性分析结果显示其与GenBank中PSV基因组核苷酸的相似性为84.3%~91.5%,系统发育树结果显示,HLJ 2204株与上海流行株SHCM2019处于同一分支,亲缘关系最近。HLJ 2204株经口服感染3日龄仔猪进行致病性研究,结果发现仔猪感染后24 h出现腹泻、体重减轻、精神亢奋等症状,肠道、肺脏以及脑组织出现不同程度的剖检病变,肠黏膜上皮细胞脱落,黏膜下层明显水肿;脑组织神经元变形、神经细胞空泡化、神经纤突变短。感染组仔猪在感染后4 d粪便病毒载量最高,病毒主要分布在肠道组织。综上,本实验成功分离获得了PSV HLJ 2204株,并分析了其全基因组序列特征及致病性,对深入了解黑龙江地区猪病毒性腹泻的流行及防控具有重要意义,并进一步丰富了PSV病毒库,为开发设计新型疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 分离鉴定 遗传进化分析 致病性
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我国猪萨佩罗病毒分子流行病学及检测方法研究进展
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作者 申秋平 黄子惠 +2 位作者 王新茹 孙丽 庄林林 《畜禽业》 2024年第6期7-13,共7页
猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)是一种可引发仔猪腹泻、生长发育迟缓、肌肉震颤等多系统症状的重要病原体,严重影响养猪业的发展。已有研究表明,PSV已在我国多个省市呈现流行趋势,且不同地区的病毒毒株存在一定的差异。由于尚... 猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)是一种可引发仔猪腹泻、生长发育迟缓、肌肉震颤等多系统症状的重要病原体,严重影响养猪业的发展。已有研究表明,PSV已在我国多个省市呈现流行趋势,且不同地区的病毒毒株存在一定的差异。由于尚无抗病毒药物和有效疫苗,早期识别和精准诊断对科学防控PSV感染具有决定性的作用。目前,PSV分子检测方法主要分为2大类:免疫学检测技术和核酸检测技术。免疫学检测技术包括酶联免疫吸附试验和间接免疫荧光技术;核酸检测技术包括逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、多重RT-PCR、巢式RT-PCR、荧光定量PCR、多重荧光定量PCR、环介导等温扩增、重组酶聚合酶扩增以及原位杂交技术等。在此基础上,作者对PSV分子检测方法的优缺点进行了讨论,并对其未来发展方向进行了展望,以期为我国科学防控PSV提供参考依据。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 分子特征 流行病学 免疫学检测技术 核酸检测技术
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华东部分地区猪群中猪萨佩罗病毒分子流行病学调查 被引量:15
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作者 兰道亮 吉文汇 +5 位作者 王长松 孙焕 陈莫林 崔立 童光志 华修国 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第12期116-121,共6页
为了解华东地区猪群中猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus,PSV)感染流行情况,通过RT-PCR方法对该地区15个规模化养猪场960份猪粪便样本进行了检测。结果表明,所检测的15个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为17.2%,其中10周龄~20周龄... 为了解华东地区猪群中猪萨佩罗病毒(Porcine sapelovirus,PSV)感染流行情况,通过RT-PCR方法对该地区15个规模化养猪场960份猪粪便样本进行了检测。结果表明,所检测的15个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为17.2%,其中10周龄~20周龄的猪PSV最易感。进一步系统进化分析表明,所检阳性毒株同源性较高,不同地区的毒株交错分布在一起,不存在明显的地区差异,但大体可分为3个亚群,而且已有的国外PSV株均包括在这3个亚群中,这提示PSV可能至少存在3种不同的抗原亚型。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 分子流行病学 调查
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猪萨佩罗病毒间接免疫荧光方法的建立与初步应用 被引量:5
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作者 彭旺 唐小明 +3 位作者 葛猛 杨涛涛 屈泰龙 余兴龙 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期423-426,共4页
以分离的猪萨佩罗病毒PSV Hu N1/2016株感染PK15细胞,制备抗原板,建立检测猪血清中PSV抗体的间接免疫荧光(IFA)方法。结果表明:一抗最佳稀释浓度为1∶300;FITC标记的羊抗猪荧光二抗最佳稀释浓度为1∶300。该方法特异性强,敏感度高,既能... 以分离的猪萨佩罗病毒PSV Hu N1/2016株感染PK15细胞,制备抗原板,建立检测猪血清中PSV抗体的间接免疫荧光(IFA)方法。结果表明:一抗最佳稀释浓度为1∶300;FITC标记的羊抗猪荧光二抗最佳稀释浓度为1∶300。该方法特异性强,敏感度高,既能将PSV抗体与PRRSV、FMDV、PCV、CSFV抗体区分开,也可以检测到中和效价0.128的阳性血清。用该方法检测湖南省部分规模化猪场208份临床血清样品的总阳性率为68%,表明PSV在湖南省流行普遍,且其感染主要发生在保育阶段。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 间接免疫荧光 抗体检测 湖南
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四川省腹泻病猪的猪萨佩罗病毒检测及1B基因序列比较分析 被引量:4
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作者 李雨濛 郭博 +6 位作者 徐逸飞 陈瑛琪 蔡瑶 李小璟 龚双燕 徐志文 朱玲 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第12期1992-1999,共8页
为了解猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)的流行及变异情况,采集2015-2016年四川地区12个县市34个猪场共计428份腹泻病料,采用QRT-PCR方法对PSV进行检测。结果显示:在428份病料中,共有114份为PSV阳性,阳性率为26.6%;所检测的34... 为了解猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)的流行及变异情况,采集2015-2016年四川地区12个县市34个猪场共计428份腹泻病料,采用QRT-PCR方法对PSV进行检测。结果显示:在428份病料中,共有114份为PSV阳性,阳性率为26.6%;所检测的34个猪场中,共有20个猪场显示PSV阳性,猪场阳性率为58.8%,表明PSV在四川地区普遍存在。此外,对来自不同县市共14份PSV阳性病料1B全基因进行PCR扩增,通过分子克隆,测序,再利用序列分析软件对四川部分地区猪萨佩罗病毒1B基因进行序列分析。结果表明,14条猪萨佩罗病毒1B基因核苷酸序列及推导出的氨基酸序列相似性分别为90.6%~100%和97.1%~100%。遗传进化分析显示,该研究获得的四川株与已知中国株分属于一个大的分支,说明我国猪萨佩罗病毒1B基因序列较为保守,没有发生大的基因变异。所有中国分离株与韩国株、德国株、英国株处在不同分支,又说明我国PSV的流行毒株可能存在独立进化。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 流行病学调查 1B基因 遗传进化分析
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猪萨佩罗病毒YC2011株1D基因的克隆及原核表达 被引量:4
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作者 陈俊伟 张祥斌 +7 位作者 张云静 周庆丰 宋延华 李薇 陈峰 薛春宜 毕英佐 曹永长 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第1期68-72,共5页
为研发猪萨佩罗病毒(PSV)检测试剂,根据PSV YC2011毒株核苷酸序列,设计针对1D基因的特异引物,以YC2011毒株为模板,利用RT-PCR方法,成功扩增出1D基因,将该基因与原核表达载体pET-32a(+)连接,转化表达菌株BL21。经PCR和测序鉴定,阳性菌株I... 为研发猪萨佩罗病毒(PSV)检测试剂,根据PSV YC2011毒株核苷酸序列,设计针对1D基因的特异引物,以YC2011毒株为模板,利用RT-PCR方法,成功扩增出1D基因,将该基因与原核表达载体pET-32a(+)连接,转化表达菌株BL21。经PCR和测序鉴定,阳性菌株IPTG诱导表达,融合蛋白1D进行SDS-PAGE和Western blot检测分析。结果表明,成功构建了原核表达菌株,其所表达的融合蛋白分子质量约为51ku,且可被猪萨佩罗病毒阳性血清所识别。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 1D基因 原核表达
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上海地区猪萨佩罗病毒的检测及遗传进化分析 被引量:4
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作者 李本强 刘惠莉 +5 位作者 刘佳佳 陶洁 程靖华 石迎 乔长涛 沈晓晖 《上海农业学报》 2023年第2期64-70,共7页
为了明确猪萨佩罗病毒在仔猪腹泻病情中的作用,2016—2020年采集上海市及周边11个猪场腹泻病料,共计1446份。利用RT-PCR方法对其进行PSV筛检,并对阳性样品进行病原分离及病毒特性研究。结果显示:共筛检出256份PSV核酸阳性样品,阳性率17... 为了明确猪萨佩罗病毒在仔猪腹泻病情中的作用,2016—2020年采集上海市及周边11个猪场腹泻病料,共计1446份。利用RT-PCR方法对其进行PSV筛检,并对阳性样品进行病原分离及病毒特性研究。结果显示:共筛检出256份PSV核酸阳性样品,阳性率17.7%。从阳性样品中成功分离到2株PSV病毒,全基因序列遗传进化分析显示2株PSV分离株聚集在中国PSV毒株集群上,分离株在3D区域4696—5945 bp处存在重组区域。病毒核苷酸分析发现中国PSV毒株与韩国PSV毒株核苷酸相似性为87%—88.5%,与欧洲PSV毒株核苷酸相似性为84.9%—87.3%。对VP1基因氨基酸序列分析发现分离株与参考株存在氨基酸位点突变,中间氨基酸序列保守,无突变及插入和缺少现象。PSV分离株与参考株均含有173位潜在糖基化位点,VP1蛋白分子表面抗原表位分布均匀。该研究可为猪萨佩罗病毒病原学及其疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒分离株 流行病学调查 VP1基因 遗传进化分析
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猪δ冠状病毒、猪流行性腹泻病毒和猪萨佩罗病毒多重RT-PCR检测方法的建立及初步临床应用 被引量:15
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作者 丁庆文 闫晓光 +6 位作者 张红垒 李倩倩 张云飞 舒祥力 单法 李林姣 胡慧 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期615-620,632,共7页
猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起新生仔猪腹泻、呕吐,猪萨佩罗病毒(PSV)可引起猪脑脊髓灰质炎、腹泻等多系统综合征,临床上这3种病毒混合感染很普遍,疾病症状相似,依靠临床症状和剖检变化很难对这3种病毒做鉴别检测... 猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)可引起新生仔猪腹泻、呕吐,猪萨佩罗病毒(PSV)可引起猪脑脊髓灰质炎、腹泻等多系统综合征,临床上这3种病毒混合感染很普遍,疾病症状相似,依靠临床症状和剖检变化很难对这3种病毒做鉴别检测,需借助实验室诊断方法。为了建立快速鉴别检测这种病毒的方法,本研究参照GenBank中登录的PEDV M基因、PDCoV N基因和PSV 2C基因的保守序列,利用Prime6.0软件设计3对引物,经各反应条件的优化建立了能同时检测PDCoV、PEDV和PSV的多重RT-PCR方法,并进行特异性、敏感度和重复性试验。结果显示,该方法除了对PDCoV、PEDV和PSV有特异性扩增外,对猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒、猪博卡病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒等猪常见病毒的扩增结果均为阴性,特异性较强;建立的多重RT-PCR方法对3种重组质粒标准品的最低检测限分别为1.40×10^(2)拷贝/μL(PDCoV)、1.53×10^(2)拷贝/μL(PEDV)、1.57×10^(3)拷贝/μL(PSV);而以3种质粒标准品为模板的各单一PCR对PDCoV、PEDV和PSV的检测限分别为1.40×10^(2)拷贝/μL、1.53×10^(2)拷贝/μL、1.57×10^(2)拷贝/μL,该方法虽然对PSV质粒标准品检测的敏感性较低,但总体而言敏感性较高。以PDCoV、PSV病毒核酸及PEDV阳性病料的cDNA为模板,不同时间重复检测3次,检测结果均一致,表明该方法重复性较好。利用该方法和各单一PCR分别对河南部分地市的92份临床腹泻猪的粪便样品和肠道样品进行检测。多重RT-PCR的检测结果显示,PDCoV、PEDV和PSV阳性检出率分别为39.13%(36/92)、57.61%(53/92)和22.83%(21/92);PDCoV、PEDV和PSV 3种病毒混合感染样品3份,阳性检出率为3.26%;与单一RT-PCR方法的检测结果均一致,且两种方法的符合率均为100%。本研究建立的多重RT-PCR检测方法为PDCoV、PEDV和PSV的快速检测和流行病学调查提供了技术手段。 展开更多
关键词 猪δ冠状病毒 猪流行性腹泻病毒 猪萨佩罗病毒 多重RT-PCR
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猪萨佩罗病毒3C蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量:7
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作者 孙杰 朱琳 +6 位作者 焦点 俞正玉 范宝超 郭容利 徐业芬 何孔旺 李彬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期697-701,共5页
为建立快速检测猪萨佩罗病毒(PSV)的血清学方法,本研究以原核表达的PSV 3C重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PSV重组3C蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该ELISA方法仅对PSV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼... 为建立快速检测猪萨佩罗病毒(PSV)的血清学方法,本研究以原核表达的PSV 3C重组蛋白为包被抗原,通过反应条件优化,建立了一种PSV重组3C蛋白的间接ELISA抗体检测方法。结果显示,该ELISA方法仅对PSV血清检测为阳性,与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无特异性反应,具有良好的特异性。该方法的批内和批间重复性变异系数均小于10%,血清稀释度可以达到1∶320;采用该ELISA方法对我国2016年间采集的江苏省6个不同地区猪场的281份临床血清样品进行了检测,阳性率高达38.43%,表明江苏地区猪群中存在PSV感染。本实验建立的ELISA方法可以用于检测临床样品中的PSV抗体,特异性强、敏感性高、重复性好,是PSV流行病学调查的一种有效工具,对该病的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 3C蛋白 原核表达 间接ELISA
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猪萨佩罗病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:4
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作者 李倩倩 赵福杰 +2 位作者 丁庆文 张云飞 郑兰兰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第11期10-16,共7页
【目的】建立快速、特异、灵敏的猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)TaqMan实时荧光定量(RT-qPCR)检测方法,为临床快速检测PSV提供新方法。【方法】参照GenBank中PSV的全基因序列,针对PSV 5′端保守区设计1对特异性引物,PCR扩增目... 【目的】建立快速、特异、灵敏的猪萨佩罗病毒(porcine sapelovirus,PSV)TaqMan实时荧光定量(RT-qPCR)检测方法,为临床快速检测PSV提供新方法。【方法】参照GenBank中PSV的全基因序列,针对PSV 5′端保守区设计1对特异性引物,PCR扩增目的片段,将目的片段克隆至pMD-18T载体,构建阳性重组质粒,并以阳性质粒标准品为模板,建立标准曲线。在此基础上,设计特异性引物与探针,进行反应体系和反应条件优化,建立PSV TaqMan RT-qPCR检测方法,并对方法的敏感性、特异性和重复性进行验证。应用建立的方法对2018-2019年在河南不同地区猪场收集的83份样品(粪便样品39份,肠道样品44份)进行检测。【结果】建立了PSV TaqMan RT-qPCR检测方法,该方法的灵敏度为3.88×10^(1)拷贝/μL;与猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪δ冠状病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒均无交叉反应,特异性良好;批内与批间变异系数均小于1.0%,重复性较好。临床样品检测结果表明,TaqMan RT-qPCR检测PSV呈阳性的样品有31份(22份粪便样品,9份肠道样品)检出率为37.3%(31/83),显著高于普通PCR检测结果(检出率12.0%(10/83))。【结论】建立了TaqMan RT-qPCR检测方法,该方法灵敏度高,特异性好。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 5′非编码区 TaqMan实时荧光定量PCR 河南
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中国几省市猪萨佩罗病毒巢式RT-PCR检测与遗传进化分析 被引量:4
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作者 张备 李春秋 +4 位作者 苏明俊 刘秋瑾 乔成鹏 朱金海 孙东波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2019年第3期32-37,共6页
为了准确了解猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)在中国流行情况及遗传进化规律,试验针对PSV 5’-NTR基因利用巢式RT-PCR方法对2015~2017年来自中国部分省市规模化猪场采集的368份样品进行检测,将阳性样品对VP1基因进行克隆、测序... 为了准确了解猪萨佩罗病毒(Porcine Sapelovirus,PSV)在中国流行情况及遗传进化规律,试验针对PSV 5’-NTR基因利用巢式RT-PCR方法对2015~2017年来自中国部分省市规模化猪场采集的368份样品进行检测,将阳性样品对VP1基因进行克隆、测序、构建进化树。巢式RT^PCR检测结果表明,368份样品中24份样品为阳性,总阳性率为6.52%;8份样品测序成功,序列分析结果表明核苷酸同源性为77.0%~99.7%,推导的氨基酸序列同源性为83.6%~100.0%,遗传进化分析结果显示,中国地区的PSV病毒呈现出遗传多样性,其中3个毒株与德国参考毒株亲缘关系较近,2个毒株与国内外参考毒株的亲缘关系均较远,变异较大。研究丰富了PSV分子流行病学资料,为进一步研究该病毒提供了参考。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 VP1 基因 分子流行病学
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猪萨佩罗病毒在四川地区猪群中的感染调查 被引量:10
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作者 范忠良 林宝山 +1 位作者 黄偲 兰道亮 《四川畜牧兽医》 2015年第6期29-30,33,共3页
为了解四川地区猪群中萨佩罗病毒(PSV)的感染流行情况,本研究通过RT-PCR方法对不同区域10个规模化养猪场的250份临床健康猪粪便样本进行了检测。结果表明,所检10个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为20.4%,其中10~20周龄的... 为了解四川地区猪群中萨佩罗病毒(PSV)的感染流行情况,本研究通过RT-PCR方法对不同区域10个规模化养猪场的250份临床健康猪粪便样本进行了检测。结果表明,所检10个养殖场均存在PSV感染,总体平均阳性率为20.4%,其中10~20周龄的猪最易感。 展开更多
关键词 猪萨佩罗病毒 感染 流行
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