急性白血病中MDR1 MRP和bcl-2基因表达及其临床意义 被引量：9

1

作者 王玮 岑建农 +4 位作者 李建勇 王阳 傅建新 薛永权 陈子兴 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期470-473,共4页

目的:研究多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)和调控细胞凋亡有重要作用的基因(bcl-2)在急性白血病(AL)中的表达以及它们与临床耐药之间的关系。方法:采用地高辛掺入的半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及常规RT-PCR方法检... 目的:研究多药耐药基因(MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(MRP)和调控细胞凋亡有重要作用的基因(bcl-2)在急性白血病(AL)中的表达以及它们与临床耐药之间的关系。方法:采用地高辛掺入的半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及常规RT-PCR方法检测了54例急性白血病患者和10例正常人骨髓单核细胞中基因的表达情况。结果:54例AL中MDR1/MRP/bcl-2三基因表达阳性率为16.7%(9/54),MDR1/MRP/bcl-2三基因表达均阴性,发生频率为46.3%(25/54)。46例资料完整的白血病患者中三基因表达均阴性者80.0%缓解(CR),MDR1/MRP或MDR1/MRP/bcl-2共表达者无1人CR(P<0.01)。单基因分析表明MDR1、MRP、bcl-2基因表达阳性率分别为28.3%、41.3%和47.8%,其中MDR1阳性者CR率7.7%,明显低于MDR1阴性者CR率72.7%(P<0.01);MRP阳性CR率21.1%,明显低于阴性CR率77.8%(P<0.01);bcl-2阳性CR率36.4%,亦低于阴性CR率70.8%(P<0.05)。结论:MDR1/MRP或MDR1/MRP/bcl-2共表达的患者不易获得CR,白血病患者的耐药除了与MDR1高表达密切相关外,还与非P-糖蛋白(P-gp)介导的MRP及bcl-2表达等因素相关。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 基因表达 抗药性 多药 白血病

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细菌药物钝化酶基因分布及其表达诱导与抑制机制的研究 被引量：6

2

作者 吴亦斐 孙爱华 +2 位作者 赵金方 葛玉梅 严杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期131-140,共10页

目的:了解临床常见病原菌药物钝化酶基因及其优势基因携带模式,抗生素诱导药物钝化酶基因表达上调的作用及其与细菌组氨酸激酶的关系。方法:采用PCR和测序法,了解金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌... 目的:了解临床常见病原菌药物钝化酶基因及其优势基因携带模式,抗生素诱导药物钝化酶基因表达上调的作用及其与细菌组氨酸激酶的关系。方法:采用PCR和测序法,了解金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌临床菌株携带的β-内酰胺类、氨基糖苷类、大环内酯类钝化酶基因。采用实时荧光定量RT-PCR,了解抗生素诱导及组氨酸激酶阻断剂氯氰碘柳胺抑制药物钝化酶基因表达的作用。结果:63株大肠埃希菌中检出4种β-内酰胺类、2种氨基糖苷类和1种大环内酯类钝化酶基因,优势基因携带模式为[TEM+CTX-M]+aac(3)-Ⅱ+mphA 16株(25.4%)和[TEM+CTX-M]+aac(6')-Ⅰb 13株(20.6%)。24株金黄色葡萄球菌中检出2种β-内酰胺类、3种氨基糖苷类钝化酶基因,优势基因携带模式为aph(3')(41.7%)或aac(6)-Ⅰe-aph(2)-Ⅰa(25.0%)。28株肺炎克雷伯菌中检出4种β-内酰胺酶、2种氨基糖苷类钝化酶基因,优势基因携带模式为[TEM+SHV]+[aac(6')-Ⅰb+aac(3)-Ⅱ](28.6%)和[TEM+SHV]+[aac(6')-Ⅰb+aac(3)-Ⅱ]+mphA(17.8%)。鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌也以携带两类或三类药物钝化酶基因为优势模式。1/4 MIC青霉素、头胞噻肟和链霉素,能诱导3种β-内酰胺类和4种氨基糖苷类钝化酶基因表达显著上调(P<0.05),该诱导作用可被氯氰碘柳胺所抑制(P<0.05)。结论:上述临床常见病原菌多携带多类药物钝化酶基因并存在不同的优势基因携带模式。低浓度抗生素可能诱导药物钝化酶基因表达上调,但可被组氨酸激酶阻断剂所抑制。 展开更多

关键词 抗药性 细菌 遗传学 药物耐受性 基因型 基因表达 聚合酶链反应 细菌 耐药基因 检测 药物钝化酶 表达 调控机制

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MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌组织中的表达及其意义 被引量：9

3

作者 张桂香 刘新兰 李金平 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期79-83,共5页

目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42... 目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42例乳腺癌组织、42例癌旁组织及50例乳腺良性病变中MDR1、BCRP和LRP mRNA的表达。结果乳腺癌组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的阳性表达率分别为40.47%、38.09%及61.90%,与癌旁组织及乳腺良性病变组织相比阳性表达率均有统计学差异(P<0.05)。MDR1mRNA表达与绝经状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01),与腋窝淋巴结状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01);BCRP mRNA表达与腋窝淋巴结状况呈正相关(r=0.355,P<0.05);LRP mRNA表达与绝经状况、年龄、腋窝淋巴结状况及肿瘤大小之间均无相关性(P>0.05);MDR1mRNA和BCRP mRNA表达呈正相关(r=0.652,P<0.01),LRP mRNA与MDR1mRNA表达无相关性(r=0.147,P>0.05);LRP mRNA和BCRP mRNA表达无相关性(r=0.111,P>0.05)。2个耐药基因共表达率为47.61%,2种或3种耐药基因共表达率为61.89%。结论乳腺癌组织中存在耐药基因MDR1、BCRP和LRP的表达,单基因和多基因协同作用,以多基因共表达为主;检测MDR1和BCRP基因表达水平可辅助临床判断乳腺癌患者的预后。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 耐药基因 mdr1 BCRP LRP RT-PCR

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肺炎链球菌comD/E/C基因重组表达及ComD/C与β-内酰胺类抗生素耐药的相关性 被引量：4

4

作者 樊欢 孙爱华 +2 位作者 夏肖萍 孙琦 严杰 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期276-282,共7页

目的：构建肺炎链球菌调控感受态形成的二元信号传导系统（TCS）基因comD/comE/comC的原核表达系统,探讨ComD和ComC封闭后细菌耐药性变化。方法：采用PCR扩增全长comD、comE和comC基因,并用常规基因工程技术建立其原核表达系统。采用SDS... 目的：构建肺炎链球菌调控感受态形成的二元信号传导系统（TCS）基因comD/comE/comC的原核表达系统,探讨ComD和ComC封闭后细菌耐药性变化。方法：采用PCR扩增全长comD、comE和comC基因,并用常规基因工程技术建立其原核表达系统。采用SDS-PAGE及Bio-Rad凝胶图像分析系统检测目的重组蛋白rComD、rComE和rComC表达量。免疫家兔制备rComD、rComE和rComC抗血清。检测肺炎链球菌菌株ComD和ComC被抗血清封闭后对青霉素和头孢胺噻耐药性的变化。结果：与报道序列比较,所克隆的comD、comE和comC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.4%-99.3%和99.1%-100%。所构建的工程菌E.coli BL21DE3pET42a-comD、E.coliBL21DE3pET42a-comE和E.coli BL21DE3pET32a-comC能有效表达目的重组蛋白rComD、rComE和rComC,其产量分别为细菌总蛋白的28%、25%和35%。rComD、rComE和rComC抗血清免疫双扩散效价分别为1∶4、1∶4和1∶8。ComD和/或ComC被抗血清封闭后,头孢胺噻敏感菌株可出现耐药性,但耐药菌株耐药性无明显改变,也不影响各菌株对青霉素的耐药性。结论：本研究成功地构建了肺炎链球菌comD/come/comC基因原核表达系统,为深入研究感受态形成相关TCS与耐药性关系奠定了基础。ComD和ComC与肺炎链球菌对头孢胺噻耐药性有关。 展开更多

关键词 链球菌 肺炎/遗传学 聚合酶链反应 信号传导 Β内酰胺酶类 抗药性 细菌 基因表达 重组蛋白质类 基因表达调控 细菌

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卵巢癌MDR1基因表达与近期化疗效果 被引量：1

5

作者 杨林 李学汤 +2 位作者 诸亚君 林晨 刘丽影 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1999年第3期173-176,共4页

目的　研究卵巢癌ＭＤＲ１ 基因表达对化疗的影响。　方法　应用免疫组织化学（ＡＢＣ） 法及改进的逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）分别检测ＰＧＰ和ＭＤＲ１ 基因ｍ ＲＮＡ 的表达水平。　结果　４９ 例卵巢癌中用ＡＢＣ法检... 目的　研究卵巢癌ＭＤＲ１ 基因表达对化疗的影响。　方法　应用免疫组织化学（ＡＢＣ） 法及改进的逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）分别检测ＰＧＰ和ＭＤＲ１ 基因ｍ ＲＮＡ 的表达水平。　结果　４９ 例卵巢癌中用ＡＢＣ法检测ＰＧＰ表达的阳性率为４２８％ ，其中有化疗史的阳性率为３６０％ ；无化疗史的为５００ ％ （ Ｐ＞ ００５）。ＰＧＰ染色阴性的近期化疗有效率为５３６ ％ ，而染色阳性的为１４３ ％ （Ｐ＜ ００５） 。有３７ 例卵巢癌用改进的ＲＴＰＣＲ 检测ＭＤＲ１ 基因ｍ ＲＮＡ 表达的阳性率为７０３ ％ 。有化疗史的阳性率为９５２％ ；而无化疗史的阳性率为３７５ ％（ Ｐ＜０００１） 。ＭＤＲ１ 基因ｍＲＮＡ表达阴性的近期化疗有效率为８１８ ％ ，而表达阳性的为２３１％ （Ｐ＜ ０００５）。此同样３７ 例卵巢癌免疫组化结果并未见与化疗史相关，但仍发现与近期疗效存在相关性。　结论　ＭＤＲ１ 基因表达与卵巢癌化疗密切相关，ＰＧＰ／ ＭＤＲ１ ｍＲＮＡ 有可能作为预测卵巢癌化疗效果的一项指标。改进ＲＴＰＣＲ 方法适用于临床耐药性检测。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 多药耐药性 基因表达 MDR1基因

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卵巢癌多药耐药相关药物的体外敏感性与MDR1基因表达 被引量：3

6

作者 刘东光 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期196-197,共2页

目的 :探讨卵巢癌多药耐药 (MDR)相关药物的体外敏感性与 MDR1基因表达的关系 ,为卵巢癌合理化疗提供理论依据。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法体外药物敏感 (药敏 )试验及逆转录—聚合酶链反应 (RT- PCR)技术 ,检测 37例卵巢癌... 目的 :探讨卵巢癌多药耐药 (MDR)相关药物的体外敏感性与 MDR1基因表达的关系 ,为卵巢癌合理化疗提供理论依据。方法 :采用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法体外药物敏感 (药敏 )试验及逆转录—聚合酶链反应 (RT- PCR)技术 ,检测 37例卵巢癌对 MDR相关药物的敏感性 ,及其 MDR1基因表达情况。结果 :卵巢癌 MDR1基因表达阳性率为30 % ,与 MDR相关药物耐药有关 ,与非 MDR相关药物耐药无关。结论 :MDR1基因表达是卵巢癌抗 MDR相关药物的主要原因。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 多药抗药性 基因表达 聚合酶链反应

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小鼠LIF编码基因的克隆与真核表达载体pcDNA3．1-LIF的构建

7

作者 姜秋 艾永华 +2 位作者 聂代邦 孙宏晨 欧阳红生 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期782-785,F0002,共5页

目的:通过克隆小鼠LIF编码基因,构建pcDNA3.1-LIF真核表达载体,为下一步建立转基因动物模型奠定基础。方法:采用ICR雌性小鼠子宫组织,提取总RNA,运用RT-PCR技术,扩增出小鼠LIF基因全长编码序列,采用同源重组方法构建具有新霉素抗性的小... 目的:通过克隆小鼠LIF编码基因,构建pcDNA3.1-LIF真核表达载体,为下一步建立转基因动物模型奠定基础。方法:采用ICR雌性小鼠子宫组织,提取总RNA,运用RT-PCR技术,扩增出小鼠LIF基因全长编码序列,采用同源重组方法构建具有新霉素抗性的小鼠LIF真核表达载体pcDNA3.1-LIF。结果:通过PCR获得了约612bp大小的特异性cDNA片段。经核苷酸序列分析,扩增得到的片段与小鼠LIFcDNA序列同源性为100%。经PCR及酶切鉴定筛选阳性克隆菌,表明LIF编码序列正确连入pcDNA3.1载体中。结论:成功克隆了小鼠LIF编码基因,并构建了真核表达载体pcDNA3.1-LIF。 展开更多

关键词 白血病抑制因子 聚合酶链反应 基因克隆 真核表达载体 小鼠 近交ICR

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新基因MTB139在儿童结核临床分离株中的表达及其临床意义的初步研究

8

作者 苏薇 黄延风 +3 位作者 许红梅 朱朝敏 郑改焕 郭倩 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期336-340,共5页

目的:检测并验证新基因MTB139在儿童结核临床分离株中的表达,通过比较其在不同耐药性结核结核分枝杆菌中的表达差异,探讨其与结核耐药性的关系。方法:应用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR... 目的:检测并验证新基因MTB139在儿童结核临床分离株中的表达,通过比较其在不同耐药性结核结核分枝杆菌中的表达差异,探讨其与结核耐药性的关系。方法:应用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)的方法检测60例临床结核分离株(9例耐多药株,24例非耐多药株,27例敏感株)中基因MTB139的表达。结果:60例结核分离株样本中有7例检测到MTB139基因的阳性表达,3个组(耐多药组、非耐多药组、敏感组)结核菌株中MTB139基因阳性表达率比较有统计学差异(P=0.000),其中耐多药组MTB139基因阳性表达率(5例,阳性表达率55.56%)明显高于非耐多药组(1例,阳性表达率4.17%)及敏感组(1例,阳性表达率3.70%),差异有统计学意义(P=0.003、P=0.002),非耐多药组与敏感组MTB139基因阳性表达率无统计学差异(P=1.000)。结论:新基因MTB139在耐多药结核菌株有高表达,可能与结核耐多药性相关。 展开更多

关键词 新基因MTB139 结核结核分枝杆菌 逆转录聚合酶链式反应 耐多药性

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用逆转录多聚酶链反应法检测多药耐药基因（mdr1）的表达

9

作者 杨骅 曹江 +2 位作者 胡汛 郑树 董海涛 《浙江医科大学学报》 CSCD 1995年第2期49-51,共3页

以长春新碱诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＶＣＲ和阿霉素诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＤＯＸ及敏感细胞Ｋ５６２作为检测对象，采用逆转录多聚酶链反应法，并且以β２－微球蛋白（β２ｍ）基因作为内参照，检测和比较了上述细胞的多药耐药基因... 以长春新碱诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＶＣＲ和阿霉素诱导的耐药细胞Ｋ５６２／ＤＯＸ及敏感细胞Ｋ５６２作为检测对象，采用逆转录多聚酶链反应法，并且以β２－微球蛋白（β２ｍ）基因作为内参照，检测和比较了上述细胞的多药耐药基因ｍｄｒ１表达。经过３０个循环扩增，耐药细胞检测出ｍｄｒ１和β２ｍ基因的扩增产物，而敏感细胞无ｍｄｒ１扩增产物。结果提示，本方法可用以区分耐药和敏感细胞，有希望成为临床个体化疗敏感性预测的重要指标之一。 展开更多

关键词 聚酶链反应 抗药性 基因 长春新碱 阿霉素

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人肝细胞癌组织中抗药基因过量表达 被引量：2

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作者 黄承诚 吴孟超 +6 位作者 陈汉 屠振兴 胡韪 徐国威 李岱宗 蒋惠秋 顾健人 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期415-418,共4页

本研究用MDR_1基因为探针,用Northern blot的方法观察了肝癌组织癌旁肝组织及化疗前后肝癌组织之间MDR_1基因表达的差别。结果发现:肝癌组织中MDR_1基因的表达高于癌旁肝组织;化疗后肝癌组织中MDR_1基因的表达也高于未化疗肝癌组织。提... 本研究用MDR_1基因为探针,用Northern blot的方法观察了肝癌组织癌旁肝组织及化疗前后肝癌组织之间MDR_1基因表达的差别。结果发现:肝癌组织中MDR_1基因的表达高于癌旁肝组织;化疗后肝癌组织中MDR_1基因的表达也高于未化疗肝癌组织。提示MDR_1基因的过量表达可能与肝癌固有的和获得性抗药性密切相关。本文还报道了用多聚酶链反应定量分析肝癌组织中MDR_1基因表达的方法。 展开更多

关键词 肝细胞癌 抗药基因 表达 人类

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人抗药基因的克隆 被引量：2

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作者 黄承诚 吴孟超 +5 位作者 陈汉 屠振兴 李岱宗 徐国威 严根宝 顾健人 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第5期411-414,共4页

本研究根据抗药基因(Multidrug resistance gene_1,MDR_1)的cDNA序列,设计了3对DNA引物,它们的起止位置分别为:Ⅰ-64～46(5’)和1680～1698(3’);Ⅱ1471～1489(5’)和2905～2923(3’);Ⅲ2729～2747(5’)和3845～3863(3’)。用PCR技术分... 本研究根据抗药基因(Multidrug resistance gene_1,MDR_1)的cDNA序列,设计了3对DNA引物,它们的起止位置分别为:Ⅰ-64～46(5’)和1680～1698(3’);Ⅱ1471～1489(5’)和2905～2923(3’);Ⅲ2729～2747(5’)和3845～3863(3’)。用PCR技术分别将这3对引物间的cDNA从人正常肝组织中的mRNA中克隆出,它们的长度分别为1762bp,1452bp和1134bp。前两者均分别克隆于pBluescript SK,后者克隆于pGEM7Z。所得3个克隆分别称为pMDR1.7,pMDR1.4和pMDR1.1。DNA序列分析证实这3个克隆均为MDR_1基因。进一步亚克隆得到MDR_1的全长基因,长度为3927bp(pMDR3.9)。MDR_1全长基因的克隆成功为肿瘤抗药性的分子诊断和基因治疗提供了最基本的手段。 展开更多

关键词 抗药基因 聚合酶链反应 肝脏 人类

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