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蝉花CcPkd2基因对生长发育和活性物质合成的影响
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作者 孟奕颀 李雪倩 +2 位作者 刘宇威 王洪凯 蔡为明 《食用菌学报》 北大核心 2025年第5期1-14,共14页
通过基因敲除和回补实验探讨蝉花(Cordyceps chanhua)CcPkd2基因对生长发育和活性物质合成的影响。结果表明:CcPkd2基因影响蝉花的菌丝生长、分生孢子产量和孢梗束的形成;CcPkd2敲除菌株对不同氮源的利用率下降,且对高渗透和细胞壁胁迫... 通过基因敲除和回补实验探讨蝉花(Cordyceps chanhua)CcPkd2基因对生长发育和活性物质合成的影响。结果表明:CcPkd2基因影响蝉花的菌丝生长、分生孢子产量和孢梗束的形成;CcPkd2敲除菌株对不同氮源的利用率下降,且对高渗透和细胞壁胁迫表现出明显的敏感性;CcPkd2敲除菌株菌丝的腺苷含量减少,N^(6)-(2-羟乙基)腺苷含量增加。研究结果揭示了蝉花CcPkd2基因在发育及活性物质合成中的关键作用,为深入理解蝉花生长发育及代谢的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 蝉花 TRP通道 pkd2基因 功能分析 活性物质
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利用PCR-SSCP技术检测中国汉族人PKD2基因的突变 被引量:8
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作者 张殿勇 张树忠 +5 位作者 汤兵 张维莉 戴兵 盛茂 孙田美 梅长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期413-416,共4页
目的:检测中国汉族人Ⅱ型多囊肾病基因PKD2的突变。方法:筛选临床确诊的26个中国汉族家系中31例常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)患者,提取外周血白细胞DNA,应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP),取异常条带标本... 目的:检测中国汉族人Ⅱ型多囊肾病基因PKD2的突变。方法:筛选临床确诊的26个中国汉族家系中31例常染色体显性遗传性多囊肾病(ADPKD)患者,提取外周血白细胞DNA,应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP),取异常条带标本进行核苷酸序列测定,判别PKD2外显子突变位置及类型。结果:以20例健康志愿者为对照,从31例患者中成功检测出2种突变。1种为无义突变,系PKD2外显子13的第2407位碱基由胞嚼陡置换为胸腺嘧啶,形成1个终止密码子;另1种为错义突变,系PKD2外显子4的第964位碱基由胞嘧啶置换为胸腺嘧啶,使编码氨基酸由精氨酸变为色氨酸。结论:本研究建立了PCR-SSCP直接检测我国汉族人PKD2突变方法,检测出2种基因突变,为今后开展ADPKD患者囊肿前诊断提供了实验基础。 展开更多
关键词 中国 汉族人 Ⅱ型多囊肾病 常染色体显性遗传性多囊肾病 ADPKD 聚合酶链反应-单链构象多态性分析 PCR-SSCP 基因突变 pkd2
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PKD2基因在正常人和2型常染色体显性遗传性多囊肾病患者肾组织中的表达
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作者 周玉坤 梅长林 +2 位作者 孙田美 沈学飞 宋吉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期29-31,共3页
目的 :观察 PK D2基因在正常人和 2型常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)患者肾组织中的不同表达 ,探讨多囊肾病的发病机制。 方法 :抽提正常人肾组织细胞总 RNA ,通过 RT- PCR法获得 PK D 2基因第 12~ 13外显子 c DNA片段 ,以此为探... 目的 :观察 PK D2基因在正常人和 2型常染色体显性遗传性多囊肾病 (ADPKD)患者肾组织中的不同表达 ,探讨多囊肾病的发病机制。 方法 :抽提正常人肾组织细胞总 RNA ,通过 RT- PCR法获得 PK D 2基因第 12~ 13外显子 c DNA片段 ,以此为探针 ,用地高辛标记 ,对正常人和 2型 ADPKD患者肾组织分别进行原位杂交 ,并结合图像分析系统观察 PK D2基因表达情况。 结果 :正常人肾组织中 PK D2基因在 Henle襻的厚升支、远曲小管和皮质集合管有较强的表达 (平均光密度为 1.2 3± 0 .0 4 ) ;而 2型ADPKD患者肾组织中 PKD2基因仅在部分囊壁中有少量表达 (平均光密度为 0 .5 6± 0 .0 3)。 结论 :正常人肾组织中 PK D2基因表达量明显高于 2型 ADPKD患者 ,提示 PK D2基因表达降低在 2型 展开更多
关键词 多囊肾病 常染色体显性 原位杂交 pkd2基因
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circ-PKD2靶向miR-372-3p对结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:1
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作者 何峰 罗少锋 +3 位作者 王威 赵磊 王译文 张兴 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期903-909,共7页
目的 探讨环状RNA(circular RNA,circRNA)-PKD2在结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭中发挥的作用及可能的调控机制。方法 采用qRT-PCR分别检测结直肠癌组织、癌旁组织、结直肠癌细胞系(HCT116、HT-29、SW480、LoVo)与正常肠黏膜上皮细胞(HI... 目的 探讨环状RNA(circular RNA,circRNA)-PKD2在结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭中发挥的作用及可能的调控机制。方法 采用qRT-PCR分别检测结直肠癌组织、癌旁组织、结直肠癌细胞系(HCT116、HT-29、SW480、LoVo)与正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)中circ-PKD2的表达水平。应用MTS实验、划痕愈合实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。运用qRT-PCR和Western blot法分别检测circ-PKD2靶基因及下游蛋白的表达。结果 circ-PKD2在结直肠癌和癌旁组织中的表达量分别为1.28±0.14和6.38±0.29,circ-PKD2在结直肠癌组织中显著低表达(P<0.01)。与正常肠黏膜上皮细胞(HIEC)比较,circ-PKD2在结直肠癌细胞系中显著低表达(P<0.01),其表达水平最低的细胞系是HT-29细胞(P<0.01)。NC组和circ-PKD2组HT-29细胞中circ-PKD2的表达量分别为1.02±0.11和12.02±1.08,差异有统计学意义(P<0.01)。与NC组比较,circ-PKD2组HT-29细胞的增殖能力明显降低(P<0.05)。NC组和circ-PKD2组HT-29细胞划痕愈合率分别为(69.65±5.99)%和(25.58±4.33)%,NC组和circ-PKD2组HT-29细胞侵袭数分别为(89.28±11.07)个和(41.20±10.33)个。与NC组比较,circ-PKD2组HT-29细胞的迁移、侵袭能力明显降低(P均<0.01)。starBase v2.0软件分析circ-PKD2与miR-372-3p存在互补结合位点。circ-PKD2能够靶向结合miR-372-3p(P<0.01)。结直肠癌组织中circ-PKD2与miR-372-3p的表达呈明显负相关(P<0.01)。与NC组比较,circ-PKD2组HT-29细胞中miR-372-3p表达显著降低(P<0.01)。LATS2蛋白和Hippo信号通路蛋白的表达显著增加。结论 circ-PKD2在结直肠癌组织和细胞系中低表达,circ-PKD2通过靶向miR-372-3p抑制结直肠癌HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 circ-pkd2 miR-372-3p 增殖 迁移 侵袭
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斑马鱼pkd2基因功能的初步研究
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作者 韩霄 赵呈天 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期32-36,共5页
PKD2是一个存在于纤毛细胞膜表面的6次跨膜蛋白,其功能缺陷是造成人类多囊肾(PKD)疾病的主要因素之一。本文以斑马鱼作为模式生物,利用CRISPR/Cas9方法获得了一个新的pkd2突变体。与之前报道的pkd2突变体不同,该突变体仅缺失C端胞内区... PKD2是一个存在于纤毛细胞膜表面的6次跨膜蛋白,其功能缺陷是造成人类多囊肾(PKD)疾病的主要因素之一。本文以斑马鱼作为模式生物,利用CRISPR/Cas9方法获得了一个新的pkd2突变体。与之前报道的pkd2突变体不同,该突变体仅缺失C端胞内区。发现该胞内区的缺失足以影响PKD2的功能,突变体产生体轴向背侧弯曲的特殊表型。利用lefty2作为探针进行原位杂交的实验表明,突变体存在左右不对称缺陷。同时,进一步免疫组化的结果表明,pkd2的突变并未影响纤毛的发育。此外,我们对突变体中胶原蛋白的表达进行检测,结果并未发现明显异常,说明胶原蛋白可能不是影响pkd2突变体体轴弯曲的因素。最后,我们发现用FGF信号抑制剂处理胚胎,可使得突变体体轴弯曲的程度降低,揭示FGF可能参与影响了pkd2突变体体轴的发育。 展开更多
关键词 PKD pkd2 左右不对称 纤毛 FGF
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LncRNA PKD2-2-3对肺腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力的影响 被引量:2
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作者 贾利晴 葛小路 +1 位作者 姜琳 周晓燕 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期717-725,共9页
背景与目的:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在肺腺癌患者中异常表达,与肿瘤的发生、发展和化疗耐药密切相关。本研究旨在探讨lncRNA蛋白激酶D2(lncRNA PKD2-2-3)在肺腺癌发生、发展过程中发挥的生物学功能,验证lncRNA PKD2... 背景与目的:长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)在肺腺癌患者中异常表达,与肿瘤的发生、发展和化疗耐药密切相关。本研究旨在探讨lncRNA蛋白激酶D2(lncRNA PKD2-2-3)在肺腺癌发生、发展过程中发挥的生物学功能,验证lncRNA PKD2-2-3对肺腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。方法:基于Affymetrix人类基因芯片转录组阵列2(Affymetrix?GeneChip Human Transcriptome Array 2.0,HTA2.0)分析3对肺腺癌组织及癌旁组织,寻找在肺腺癌组织中高表达的lncRNA,其中lncRNA PKD2-2-3的表达差异最大。利用基因表达综合数据库(Gene Expression Omnibus,GEO)中GSE19188和GSE30219的数据分析lncRNA PKD2-2-3在肺腺癌组织中的表达和对患者预后的影响。通过实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测lncRNA PKD2-2-3在细胞系(HBE、A549、PC9)中的表达情况。在A549和PC9两种细胞系中使用siRNA干扰技术敲低lncRNA PKD2-2-3的表达,通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)实验和克隆形成实验检测lncRNA PKD2-2-3表达对肺腺癌细胞增殖和克隆形成能力的影响;划痕实验和transwell实验分别检测lncRNA PKD2-2-3表达对肺腺癌细胞迁移和侵袭的影响。蛋白质印迹法(Western blot)检测敲低lncRNA PKD2-2-3表达后对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达水平的影响。皮下移植瘤模型探究lncRNA PKD2-2-3在体内对肺腺癌细胞增殖的影响。结果:LncRNA PKD2-2-3在肺腺癌组织中呈高表达,且高表达的患者预后较差。对比正常气管上皮永生化细胞HBE,lncRNA PKD2-2-3在肺腺癌细胞系A549和PC9中高表达,敲低lncRNA PKD2-2-3的表达抑制肺腺癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力。Western blot结果显示,敲低lnc RNA PKD2-2-3后,E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低。皮下移植瘤实验表明,在体内lncRNA PKD2-2-3敲低后抑制肺腺癌的生长。结论:lncRNA PKD2-2-3在肺腺癌组织中上调表达,且与患者的不良预后相关,lncRNA PKD2-2-3的高表达促进肺腺癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力,体内外实验表明lncRNA PKD2-2-3的表达与肺腺癌的EMT过程密切相关。 展开更多
关键词 肺腺癌 lncRNA pkd2-2-3 细胞迁移 细胞侵袭 上皮间质转化
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触脑脊液神经元的研究进展 被引量:2
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作者 李瑞 刘海鹰 +4 位作者 王家瑶 郭保霖 高方 武胜昔 王文挺 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期633-637,共5页
触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-... 触脑脊液神经元(cerebrospinal fluid-contacting neurons,CSF-cNs)是一种分布于脑室、中央管、脑室周器及脑实质等处与脑脊液接触的特殊神经元。根据分布位置不同可将CSF-cNs分为室管膜上、室管膜下和远位CSF-cNs三类,不同部位的CSF-cNs分泌不同的神经递质。以往研究CSF-cNs多采用脑室注射辣根过氧化物酶标记的霍乱毒素B亚单位(cholera toxin subunit B labeled with horseradish peroxidase,CB-HRP)进行逆行追踪. 展开更多
关键词 触脑脊液神经元 POLYCYSTIN KIDNEY disease 2-like 1(pkd2L1) Acid-sensing ion channels(ASIC)
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