大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP质粒的构建及其在HEK293细胞中的表达

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作者 胡子有 漆松涛 +2 位作者 张遐 曹琼 吴炳义 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1351-1353,共3页

目的构建大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP表达质粒,并实现其在HEK293细胞的表达。方法提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增δ受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切、连接克隆入pIRES2-EGFP中,将获得的δ-pIRES2-E... 目的构建大鼠δ阿片受体基因的pIRES2-EGFP表达质粒,并实现其在HEK293细胞的表达。方法提取大鼠脑组织总RNA,通过逆转录巢式PCR,扩增δ受体全长cDNA,克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切、连接克隆入pIRES2-EGFP中,将获得的δ-pIRES2-EGFP重组子转染入HEK293细胞中,应用荧光显微镜观察EGFP和δ基因表达情况。结果酶切和测序结果表明δ基因正确构建入pIRES2-EGFP表达质粒中,转染了重组子的HEK293细胞在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,应用细胞免疫荧光,可以观察到δ基因高强度表达。结论利用巢式RT-PCR等成功构建了δ-pIRES2-EGFP表达质粒,并在HEK293细胞中实现了高效表达。 展开更多

关键词 Δ阿片受体 巢式PCR pires2-egfp HEK293

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阿片受体μ-Myc-pIRES2-EGFP的构建及其在CHO细胞中的表达

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作者 胡子有 漆松涛 +2 位作者 张遐 曹琼 吴炳义 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期179-182,共4页

目的:构建带Myc标签的大鼠μ型阿片受体的pIRES2-EGFP表达质粒(μ-Myc-pIRES2-EGFP),并实现其在CHO细胞中的表达。方法:以含大鼠全长μ阿片受体基因的μ-pMD20T载体为模板,通过引物设计和扩增,在μ基因C端引入Myc标签,AT克隆至pMD20-T... 目的:构建带Myc标签的大鼠μ型阿片受体的pIRES2-EGFP表达质粒(μ-Myc-pIRES2-EGFP),并实现其在CHO细胞中的表达。方法:以含大鼠全长μ阿片受体基因的μ-pMD20T载体为模板,通过引物设计和扩增,在μ基因C端引入Myc标签,AT克隆至pMD20-T载体中,测序鉴定,经酶切连接克隆入pIRES2-EGFP中,将获得的μ-Myc-pIRES2-EGFP转染入CHO细胞中,应用荧光显微镜观察EGFP表达情况,并用细胞免疫荧光和蛋白印迹检测μ-Myc的表达。结果:测序及酶切结果表明获得带Myc标签的μ基因,构建入pIRES2-EGFP表达质粒中,在荧光显微镜下,转染细胞可以观察到绿色荧光,应用免疫荧光和蛋白印迹观察到目的基因表达。结论:成功构建了μ-Myc-pIRES2-EGFP表达质粒,并在CHO细胞中实现了高效表达。 展开更多

关键词 Μ型阿片受体 pires2-egfp CHO

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人IGF-I基因真核表达质粒pIRES2-EGFP-IGF-I的构建

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作者 张海宁 侯筱魁 +2 位作者 杨冠珍 吴祥甫 吴小燕 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第5期359-361,共3页

目的 利用基因工程原理构建人胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)全长基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-IGF-Ⅰ。方法 应用PCR方法从人肝细胞cDNA文库中提取人IGF-Ⅰ全长cDNA序列,克隆人T载体pMD18中,经测序证实序列正确后,进行双酶切并定向插入... 目的 利用基因工程原理构建人胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)全长基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-IGF-Ⅰ。方法 应用PCR方法从人肝细胞cDNA文库中提取人IGF-Ⅰ全长cDNA序列,克隆人T载体pMD18中,经测序证实序列正确后,进行双酶切并定向插入真核表达载体pIRES2-EGFP中,利用双酶切、电泳和PCR证实插入片段的正确性。结果经测序证实,目的基因人IGF-Ⅰ的全长基因序列被正确扩增;构建的真核表达载体经双酶切和PCR鉴定证实,hIGF-Ⅰ被定向插入到真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点中。结论 利用基因工程原理可以正确地构建人IGF-Ⅰ全长基因的真核表达载体pIRES2-EGFP-IGF-Ⅰ。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子I 真核表达质粒 pires2-egfp-IGF-I 基因表达 构建方法

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pIRES2-EGFP/Cbfa1真核双表达载体的构建及鉴定

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作者 陈雄 尚永军 李东 《实用医学杂志》 CAS 2008年第5期704-706,共3页

目的:构建成骨细胞特异性转录因子Cbfa1双表达载体,以期用于成骨的体内、外研究。方法:以含有全长cDNA的pCMV/Cbfa1为模板,PCR扩增Cbfa1,T-A克隆,酶切亚克隆到pIRES2-EGFP载体上,酶切、PCR及测序鉴定正确后命名为pIRES2-EGFP,脂质体转染... 目的:构建成骨细胞特异性转录因子Cbfa1双表达载体,以期用于成骨的体内、外研究。方法:以含有全长cDNA的pCMV/Cbfa1为模板,PCR扩增Cbfa1,T-A克隆,酶切亚克隆到pIRES2-EGFP载体上,酶切、PCR及测序鉴定正确后命名为pIRES2-EGFP,脂质体转染NIH3T3细胞,G418筛选稳定表达后,提取细胞的总蛋白,Western blot检测Cbfa1蛋白的表达,以未转染组为对照。结果:酶切、PCR及测序证实pIRES2-EGFP/Cbfa1载体序列正确,脂质体法转染NIH3T3细胞后可见绿色荧光蛋白的表达,Western blot检测到Cbfa1在蛋白水平的表达。结论:pIRES2-EGFP/Cbfa1载体构建成功,可为后续研究奠定基础。 展开更多

关键词 成骨细胞 核心结合因子 plRES2-egfp 基因治疗

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preS1-preS2-HBsAg真核表达载体的构建及在293细胞中的表达

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作者 牛明福 吉萍 +3 位作者 武汉良 邵勇 高丽华 胡显文 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期810-815,共6页

目的研究含有前S1抗原、前S2抗原的乙肝病毒外膜蛋白(前S1蛋白+前S2蛋白+S蛋白)的跨膜特性。方法依据乙肝病毒大外膜蛋白的计算机模拟图将其分为分别命名为HBsAg1(1-174),HBsAg2(1-245),HBsAg3(1-294),HBsAg4(1-341),HBsAg5(1-373),HBsA... 目的研究含有前S1抗原、前S2抗原的乙肝病毒外膜蛋白(前S1蛋白+前S2蛋白+S蛋白)的跨膜特性。方法依据乙肝病毒大外膜蛋白的计算机模拟图将其分为分别命名为HBsAg1(1-174),HBsAg2(1-245),HBsAg3(1-294),HBsAg4(1-341),HBsAg5(1-373),HBsAg6(1-400),最终累加成一条连续的长链状态,贯穿在细胞内外形成四次跨膜区,并以此6个片段为模板设计6对引物。从含有乙肝病毒外膜蛋白基因的质粒pcDNA3.1-preS1-preS2-HBsAg中扩增出前S1,S2基因,采用重叠延伸PCR方法连接人尿激酶原信号肽+6×组氨酸(His)+前S1蛋白、前S2蛋白+HBsAg(1～6)+血细胞凝集素(HA);PCR产物经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入经同样处理的真核表达载体pIRES2-EGFP,构建含有Pro-UK,6×His,preS1,preS2,HBsAg跨膜序列及HA的表达载体pIRES2-EGFP/Pro-UK-6×His-preS1-preS2-HBsAg(1～6)-HA,该表达载体应能够共表达乙肝病毒外膜蛋白和绿色荧光蛋白。采用阳离子脂质体法将构建好的表达载体转染293细胞,经G418加压筛选阳性克隆,并进一步通过荧光观察、蛋白质免疫印迹、免疫双标等方法检测目的蛋白在293细胞的表达。结果 PCR结果显示,电泳片段大小符合HBsAg1～HBsAg6片段的600,810,957,1098,1194和1275 bp理论值。酶切鉴定正确的重组质粒测序结果与预期序列完全一致。转染和单克隆筛选后得到转染成功的HBsAg1～HBsAg6的293细胞,呈亮绿色,细胞形态良好,荧光表达强度高;Western印迹结果显示,在相对分子质量31 000,34 000,44 000,47000,54 000和60 000处有明显的阶梯状蛋白信号,条带清晰并与理论值相一致。结论成功构建了含有前S1、前S2蛋白的乙肝外膜蛋白基因的真核表达载体,并获得了能共表达乙肝外膜蛋白跨膜序列和绿色荧光蛋白的293细胞系。 展开更多

关键词 真核表达载体 pires2-egfp 乙肝外膜蛋白 293细胞

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鸡防御素基因GAL-2的克隆及其真核表达载体的构建 被引量：2

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作者 周莉 高其双 +2 位作者 陈志华 彭霞 卢顺 《上海畜牧兽医通讯》 2015年第1期6-8,共3页

采用RT-PCR方法从15日龄的仔鸡肾组织的总RNA中扩增出鸡防御素基因(GAL-2)序列,然后将其亚克隆到载体pIRES2-EGFP构建成真核表达载体pIRES2-EGFP-GAL-2。经PCR鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正... 采用RT-PCR方法从15日龄的仔鸡肾组织的总RNA中扩增出鸡防御素基因(GAL-2)序列,然后将其亚克隆到载体pIRES2-EGFP构建成真核表达载体pIRES2-EGFP-GAL-2。经PCR鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性。将构建好的真核表达质粒转染到Marc145细胞中进行瞬时表达,荧光检测证实细胞转染成功。pIRES2-EGFP-GAL-2真核表达载体的成功构建为下一步在细胞水平研究GAL蛋白功能以及进一步将其开发为兽用生物制品奠定了基础。 展开更多

关键词 鸡防御素(GAL) 真核表达载体 pires2-egfp 细胞转染

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干细胞相关基因Sox2在膀胱癌的表达及对膀胱癌细胞体外增殖影响

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作者 卫冰冰 徐卓群 +5 位作者 阮钧 杨树东 陈友干 诸明 周游 金柯 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期346-351,共6页

目的:初步研究干细胞相关基因Sox2在膀胱癌的表达及其对膀胱癌细胞体外增殖能力的影响。方法:利用免疫组织化学和免疫荧光法检测Sox2在膀胱癌组织及膀胱癌细胞株T24的表达;将构建成功的pcDNA3.1-SOX2-EGFP质粒转染膀胱癌细胞,采用半定量... 目的:初步研究干细胞相关基因Sox2在膀胱癌的表达及其对膀胱癌细胞体外增殖能力的影响。方法:利用免疫组织化学和免疫荧光法检测Sox2在膀胱癌组织及膀胱癌细胞株T24的表达;将构建成功的pcDNA3.1-SOX2-EGFP质粒转染膀胱癌细胞,采用半定量RT-PCR和Western blot检测Sox2的表达,进一步通过MTT实验初步探讨Sox2对膀胱癌细胞T24体外增殖能力的影响。结果:膀胱癌Sox2高表达率为68.6%;构建的pcDNA3.1-SOX2-EGFP转染膀胱癌细胞T24后能够成功表达;MTT实验显示,Sox2可促进膀胱癌细胞株T24体外增殖(P<0.05)。结论:Sox2在膀胱癌组织及细胞均可检测到表达,并能促进膀胱癌细胞株T24的体外增殖。 展开更多

关键词 膀胱癌 SOX2 PCDNA3 1-SOX2-egfp T24细胞

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共表达外源OCT4/SOX2可激活人胚肾细胞中内源NANOG的表达 被引量：1

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作者 李珍珍 成德 +1 位作者 高祎 王华岩 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期833-840,共8页

自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧... 自2006年诱导多能干细胞(iPS)技术诞生以来,采用病毒等载体进行的诱导方法已取得了成功.但是,其致瘤性的影响限制了病毒载体的推广与应用,而采用非病毒载体诱导iPS细胞成为研究的热点.本研究通过2个启动子的独立启动,构建了带有绿色荧光标记的OCT 4/SOX 2共表达诱导载体(pOct4/Sox2-EGFP).将该载体转染HEK 293FT细胞后,阳性克隆明显表达绿色荧光.并通过RT-PCR、免疫荧光等方法证明其中的转录因子OCT 4和SOX 2能在转染细胞中高效表达,同时诱导受体细胞中内源NANOG的转录表达.本研究说明,OCT 4/SOX 2共表达载体能激活NANOG基因的内源表达,暗示着非病毒不整合载体pOct4/Sox2-EGFP本身或与其它转录因子和小分子结合可用于诱导成体细胞的重编程.因此,本研究为下一步应用质粒载体诱导体细胞重编程为iPS细胞的研究奠定了工作基础. 展开更多

关键词 诱导多能干细胞(iPS) NANOG基因 pOct4/Sox2-egfp

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大鼠NeuroD2基因的克隆、真核表达载体的构建及其在小鼠MSCs细胞中的表达

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作者 姬菩忠 赵兴绪 +3 位作者 秦文 宋学文 张勇 赵红斌 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期134-141,共8页

克隆大鼠NeuroD2基因,旨在构建p IRES2-Ac GFP1-ND2真核表达载体并检测其在小鼠MSCs中的表达。采用RTPCR技术克隆大鼠NeuroD2基因,分析该蛋白质结构、功能域、细胞定位及与其他物种同源性;构建pIRES2-AcGFP1-ND2表达载体并转染小鼠骨髓... 克隆大鼠NeuroD2基因,旨在构建p IRES2-Ac GFP1-ND2真核表达载体并检测其在小鼠MSCs中的表达。采用RTPCR技术克隆大鼠NeuroD2基因,分析该蛋白质结构、功能域、细胞定位及与其他物种同源性;构建pIRES2-AcGFP1-ND2表达载体并转染小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs);采用Real-time PCR、免疫荧光及Western blot技术检测重组质粒在小鼠MSCs中的表达。结果表明,大鼠NeuroD2基因CDS区全长1 149 bp,共编码382个氨基酸,属于b HLH家族,二级结构以α-螺旋和无规卷曲为主,空间结构呈现近似"螺旋-环-螺旋(HLH)"结构,主要分布在细胞核,氨基酸序列与家鼠(99%)、罗猴(98%)、人(97.7%)同源性较高;Real-time PCR结果表明转染组NeuroD2基因表达量显著高于对照组(P<0.05);免疫荧光及Western blot结果显示转染组NeuroD2蛋白表达量显著高于对照组(P<0.05)。成功克隆大鼠NeuroD2基因并构建了pIRES2-AcGFP1-ND2真核表达载体。 展开更多

关键词 NeuroD2 基因克隆 生物信息学分析 pires2-AcGFP1-ND2

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重构型人caspase-8基因的表达及其对HeLa细胞生长的影响 被引量：4

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作者 桂俊豪 贾林涛 +7 位作者 许彦鸣 金明 于翠娟 赵晶 王智 张淼丽 王成济 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期117-120,共4页

目的　　克隆人ｃａｓｐａｓｅ－８催化结构域基因片段，并将其改建成２种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因，转染ＨｅＬａ细胞，观察重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因的表达及其对ＨｅＬａ细胞生长的影响。　方... 目的　　克隆人ｃａｓｐａｓｅ－８催化结构域基因片段，并将其改建成２种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因，转染ＨｅＬａ细胞，观察重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因的表达及其对ＨｅＬａ细胞生长的影响。　方法　　用ＲＴ－ＰＣＲ法，克隆人ｃａｓｐａｓｅ－８催化结构域基因片段，经重组ＰＣＲ改造，构建大、小亚基基因次序颠倒的重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因。将其克隆入绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）真核表达载体ｐＩＲＥＳ２－ＥＧＦＰ，转染ＨｅＬａ细胞，用荧光显微镜和倒置显微镜镜观察细胞的形态和结构。　结果用ＲＴ－ＰＣＲ法，成功地克隆了人ｃａｓｐａｓｅ－８催化结构域基因片段，构建了３种重构型人　ｃａｓｐａｓｅ－８基因及其真核表达载体。转染ＨｅＬａ细胞后，重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因的表达可导致ＨｅＬａ细胞死亡。　结论重构型人ｃａｓｐａｓｅ－８基因在ＨｅＬａ细胞中的表达可以有效地引起ＨｅＬａ细胞死亡。 展开更多

关键词 重构 人caspase-8 pires2-egfp HELA细胞 基因表达

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突变型PUMA质粒的构建及表达 被引量：1

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作者 黄伟 万福生 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第4期341-345,共5页

目的构建促凋亡基因p53上调凋亡调制物(PU-MA)的真核表达载体和针对其磷酸化位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法从pCEP4-(HA)2-PUMA质粒中扩增PUMA基因,并克隆到pIRES2-EGFP载体上,构建PUMA真核... 目的构建促凋亡基因p53上调凋亡调制物(PU-MA)的真核表达载体和针对其磷酸化位点定点突变的真核表达载体,为进一步研究其功能奠定基础。方法通过PCR方法从pCEP4-(HA)2-PUMA质粒中扩增PUMA基因,并克隆到pIRES2-EGFP载体上,构建PUMA真核表达载体pIRES2-EGFP-(HA)2-PUMA,利用定点突变技术构建pIRES2-EGFP-(HA)2-PUMA-T28G,行PCR及测序鉴定;脂质体分别将两种质粒转染Hela细胞,同时设未转染的阴性对照组及转染空载体组(4个实验组);PI染色观察PUMA对细胞的促凋亡作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR检测PUMA的表达;Western blot检测突变型PUMA蛋白和标签蛋白的表达。结果经PCR及测序结果表明,正确构建野生型、突变型PUMA重组质粒,PUMA基因第10位氨基酸的第28～30位碱基由丝氨酸(TCC)突变为丙氨酸(GCC),其他碱基均无突变;野生型、突变型PUMA重组质粒转染Hela细胞荧光显微镜观察到绿色荧光,而PI染色观察到野生型、突变型PUMA对Hela细胞的促凋亡作用;流式细胞术检测结果显示突变型和野生型PUMA转染组凋亡率高于阴性对照组和空载体转染组;Western blot和RT-PCR检测出目的基因的高表达。结论成功构建了PUMA基因及其定点突变载体,为深入研究PUMA基因的抑癌功能及其翻译后调节奠定基础。 展开更多

关键词 p53上调凋亡调制物 pires2-egfp 定点突变 真核表达载体

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重构型人caspase-8基因的表达诱导HeLa细胞凋亡 被引量：3

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作者 桂俊豪 赵晶 +4 位作者 许彦鸣 于翠娟 贾林涛 王成济 杨安钢 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期738-743,共6页

以两种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase 8基因的pIRES2 EGFP真核表达载体转染HeLa细胞 ,用间接免疫荧光染色、免疫细胞化学染色和电镜观察等方法 ,研究重构型人caspase 8基因在HeLa细胞中的表达及其促凋亡活性 .结果显示 ,两... 以两种大、小亚基基因次序颠倒的重构型人caspase 8基因的pIRES2 EGFP真核表达载体转染HeLa细胞 ,用间接免疫荧光染色、免疫细胞化学染色和电镜观察等方法 ,研究重构型人caspase 8基因在HeLa细胞中的表达及其促凋亡活性 .结果显示 ,两种重构型人caspase 展开更多

关键词 重构型人caspase-8基因 表达 诱导 HELA细胞 细胞凋亡

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小鼠OX40稳定表达细胞株的构建及其对B细胞促分化作用的研究 被引量：2

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作者 原江水 冯永堂 +4 位作者 王菲 宫伟雁 邸大琳 任杰 苗乃法 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期767-770,共4页

目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40... 目的:构建稳定表达小鼠OX40的细胞株HUVEC,并探讨其对B细胞的促增殖作用。方法:从ConA活化的小鼠胸腺淋巴细胞中提取总RNA,应用RT-PCR法扩增小鼠OX40的cDNA,并将其克隆到pUCm-T载体中,经PCR、酶切和测序分析,进而构建pIRES2-EGFP-OX40重组真核表达载体。以脂质体法转染HUVEC,经G418筛选后,用流式细胞术检测OX40分子的表达。采用3H-TdR掺入法,研究OX40信号对体外培养的B细胞的促分化作用。结果:构建了OX40基因的真核表达载体。经PCR、酶切和测序证实,插入的目的片段与GenBank登录的小鼠OX40cDNA序列完全一致。用G418筛选后,获得能稳定表达小鼠OX40蛋白的HUVEC细胞。3H-TdR掺入法结果显示,小鼠OX40稳定表达的细胞HUVEC对体外培养的B细胞具有促增殖、分化的作用。OX40/OX40L信号与CD40/CD40L信号具有协同作用。结论:成功地构建小鼠OX40稳定表达地细胞,OX40对B细胞具有促增殖、分化作用。 展开更多

关键词 OX40 绿荧光蛋白表达载体 稳定表达 增殖

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TRPM7通道过表达细胞株的建立、鉴定及其功能的初步研究

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作者 肖楚瑶 陈少锐 +3 位作者 余洋 章艳 刘培庆 蒋建敏 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期462-466,共5页

通过瞬时转染TRPM7-eGFP质粒至人胚胎肾细胞HEK293T细胞建立瞬时受体电位Melastatin的7型通道(TRPM7通道)过表达体系并利用此体系对通道特性进行研究。经荧光显微镜观察,转染率可达30%～40%,RT-PCR及Western印迹结果显示转染后的细胞在... 通过瞬时转染TRPM7-eGFP质粒至人胚胎肾细胞HEK293T细胞建立瞬时受体电位Melastatin的7型通道(TRPM7通道)过表达体系并利用此体系对通道特性进行研究。经荧光显微镜观察,转染率可达30%～40%,RT-PCR及Western印迹结果显示转染后的细胞在相应的基因及蛋白水平上均有明显的表达。膜片钳结果显示转染后全细胞电流可达2 800 pA,pH 7.4至pH 4.0时通道内向电流显著增加,200μmol/L二苯硼酸-2-氨基乙酯(2-APB)显著抑制通道外向电流。结果表明瞬时转染HEK293T细胞的TRPM7过表达体系成功构建,细胞外酸性条件及TRPM7通道抑制剂2-APB对通道电流有不同影响,提示该通道功能可受到多种因素的影响。 展开更多

关键词 瞬时转染 TRPM7-egfp质粒 TRPM7通道 膜片钳 二苯硼酸2-氨基乙酯

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