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肿瘤抑制蛋白PDCD4结构特性与疾病关系解析及研究进展 被引量:1
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作者 李卉 吴光明 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期290-305,共16页
程序性细胞死亡蛋白PDCD4(programmed cell death 4)是一种肿瘤抑制蛋白,在多种肿瘤组织中下调并提示不良预后,是第一种被发现通过抑制翻译抵抗肿瘤转化、侵袭和转移的蛋白质。PDCD4自身结构与功能关系密切,并受细胞外信号影响,其蛋白... 程序性细胞死亡蛋白PDCD4(programmed cell death 4)是一种肿瘤抑制蛋白,在多种肿瘤组织中下调并提示不良预后,是第一种被发现通过抑制翻译抵抗肿瘤转化、侵袭和转移的蛋白质。PDCD4自身结构与功能关系密切,并受细胞外信号影响,其蛋白表达水平和功能与人体两大信号通路PI3K-Akt-mTOR和MAPK密切相关,通过多种机制调节与肿瘤相关的其他蛋白质。本文通过解析PDCD4结构、功能与疾病的关系,总结了近年来PDCD4在凋亡、自噬、肿瘤、炎症等生理过程和疾病中的作用,为PDCD4及相关蛋白的信号传导路径研究和以它们为靶标的疾病治疗提供启发和思路。 展开更多
关键词 pdcd4 翻译抑制 肿瘤 结构元件 功能
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沉默PDCD4表达可减轻脓毒症血管内皮细胞损伤:基于改善线粒体动力学
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作者 于佳池 李芮冰 +4 位作者 夏天 王佳楠 金家丞 袁漫秋 李绵洋 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期25-35,共11页
目的探究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在缓解脓毒症血管内皮细胞损伤中的作用机制。方法通过体外分别培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和小鼠血管内皮细胞(C166)并给予脂多糖(LPS)处理,建立脓毒症血管内皮损伤细胞模型。分别设立对照组(NC)、... 目的探究程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在缓解脓毒症血管内皮细胞损伤中的作用机制。方法通过体外分别培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和小鼠血管内皮细胞(C166)并给予脂多糖(LPS)处理,建立脓毒症血管内皮损伤细胞模型。分别设立对照组(NC)、LPS诱导组(NC+LPS)、si-PDCD4转染组(si-PDCD4)、si-PDCD4转染后LPS诱导组(si-PDCD4+LPS)、si-PDCD4转染后LPS诱导加线粒体分裂激动剂(FCCP)组(si-PDCD4+LPS+FCCP)。通过LC-MS/MS技术,分析PDCD4敲低前后蛋白组学变化。通过RT-PCR检测对照组和LPS组转染前后PDCD4、细胞炎症、凋亡以及线粒体分裂融合相关基因的mRNA表达量的变化;蛋白质印迹法检测线粒体分裂融合关键蛋白FIS1、DRP1和OPA1的表达水平;通过激光共聚焦技术观察JC-1、MitoSOX探针荧光强度以检测线粒体膜电位和线粒体活性氧变化。结果与对照组相比,LPS组炎症相关指标白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白1(MCP1)基因的mRNA表达升高(P<0.05);PDCD4在脓毒症血管内皮细胞损伤中高表达(P<0.05);蛋白组学分析结果表明,PDCD4敲低与线粒体动力学存在相关性;Westernblot结果表明与对照组相比,LPS组诱导线粒体分裂蛋白FIS1、DRP1表达增加,融合蛋白OPA1减低(P<0.05);MitoSOX和JC-1荧光探针结果提示LPS诱导下内皮细胞线粒体发生氧化应激,膜电位显著降低(P<0.05),敲减组的氧化应激和线粒体膜电位有所缓解。PDCD4敲减后的保护效应可被线粒体分裂激动剂FCCP逆转。敲减PDCD4后能够抑制LPS所引起的炎症和氧化应激水平,线粒体分裂和融合指标恢复平衡。结论沉默PDCD4基因通过调控线粒体的动力学维持线粒体功能正常,减轻氧化应激,从而有利于缓解脓毒症血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 脓毒症 血管内皮细胞 线粒体动力学 pdcd4 炎症
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miR-21通过PDCD4调控肝癌细胞的生长和侵袭 被引量:13
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作者 印滇 杨莉 +3 位作者 张亮 缪亚军 冯秀 王以浪 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第4期412-416,共5页
目的探讨miR-21在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和细胞中的表达及其可能调控的靶基因。方法检测miR-21在HCC组织和细胞系中的表达,使用miR-21抑制剂后,观察HCC细胞活力和侵袭能力的变化;运用生物信息学分析预测miR... 目的探讨miR-21在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和细胞中的表达及其可能调控的靶基因。方法检测miR-21在HCC组织和细胞系中的表达,使用miR-21抑制剂后,观察HCC细胞活力和侵袭能力的变化;运用生物信息学分析预测miR-21可能的靶基因。应用miR-21抑制剂后,双荧光素酶报告基因系统检测其对靶基因活性的影响。结果HCC组织中miR-21表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05);HCC细胞中miR-21的表达水平显著高于肝细胞(P<0.01)。抑制miR-21后,HCC细胞的活力和侵袭能力降低(P<0.01)。抑癌基因程序性死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在HCC组织中的表达显著低于癌旁组织(P<0.01),在肝癌细胞中的表达水平显著低于肝细胞(P<0.01)。干扰PDCD4后,肝癌细胞的活力和侵袭能力提高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测显示,使用miR-21抑制剂后,PDCD4表达上调(P<0.01),肝癌细胞的侵袭和增殖能力降低(P<0.01)。干扰PDCD4后,肝癌细胞的侵袭和增殖能力升高(P<0.001)。结论miR-21可通过PDCD4调控肝癌细胞的生长和侵袭。 展开更多
关键词 肝肿瘤 MIR-21 pdcd4
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PDCD4重组慢病毒载体的构建、包装及其对前列腺癌细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 张克克 张小芳 +6 位作者 王福利 张翔 武国军 王磊 杨安钢 张瑞 袁建林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期609-612,共4页
目的构建表达程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的慢病毒表达载体,建立能够稳定表达目的基因的前列腺癌PC3细胞亚株。研究PDCD4分子对前列腺癌细胞增殖的影响。方法利用PCR扩增PDCD4编码区片段,克隆入pENTRA-3C入门载体,利用LR clonaseⅡ重组... 目的构建表达程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的慢病毒表达载体,建立能够稳定表达目的基因的前列腺癌PC3细胞亚株。研究PDCD4分子对前列腺癌细胞增殖的影响。方法利用PCR扩增PDCD4编码区片段,克隆入pENTRA-3C入门载体,利用LR clonaseⅡ重组酶将目的基因片段转接入pLenti-6.3慢病毒表达载体并包装相应的慢病毒,以表达红色荧光蛋白mCherry的pLenti-6.3-mCherry慢病毒载体包装的慢病毒为对照,感染人前列腺癌PC3细胞,通过杀稻瘟素(blasticidin)筛选出能够稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株。利用Western blot法检测PDCD4蛋白的表达量,MTT法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化。结果构建了重组慢病毒载体pLenti6.3-PDCD4。利用重组慢病毒表达系统筛选稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株,并用Western blot法进行了验证。MTT法及平板克隆形成实验结果显示PDCD4高表达的PC3细胞亚株的增殖能力受到抑制。结论成功构建了表达PDCD4分子的慢病毒表达载体,筛选出稳定表达PDCD4的PC3细胞株。过表达的PD-CD4分子可以显著抑制PC3前列腺癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 pdcd4 慢病毒 前列腺癌 细胞增殖
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抑癌基因Pdcd4的表达调控及产物泛素化研究进展 被引量:6
5
作者 曹春明 孙震晓 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第4期353-357,共5页
程序性细胞死亡因子4(programmed cell death4,Pdcd4)基因是近年新发现的一种抑癌基因,它的表达产物通过抑制相关基因的转录和翻译抑制肿瘤生成.Pdcd4在多种人肿瘤组织细胞中表达缺失或低表达.有研究发现,5'CpG岛的甲基化可能是脑... 程序性细胞死亡因子4(programmed cell death4,Pdcd4)基因是近年新发现的一种抑癌基因,它的表达产物通过抑制相关基因的转录和翻译抑制肿瘤生成.Pdcd4在多种人肿瘤组织细胞中表达缺失或低表达.有研究发现,5'CpG岛的甲基化可能是脑胶质瘤中Pdcd4基因沉默的主要原因之一.另外,在多种肿瘤细胞中发现microRNA-21的表达水平与Pdcd4蛋白的表达呈负相关性,microRNA-21在转录后水平调控Pdcd4,其作用位点位于Pdcd4mRNA的3′-UTR区.肿瘤细胞中Pdcd4的表达水平与细胞对抗肿瘤药物的敏感性有关,上调Pdcd4表达会增加细胞对某些抗肿瘤药物的敏感性,反之,下调Pdcd4表达则会引起某些药物细胞毒活性的减弱.有些药物本身也可以影响细胞中Pdcd4的表达水平.Pdcd4可以抑制p53的乙酰基化.Pdcd4蛋白能被蛋白激酶Akt/PKB磷酸化,引起Pdcd4的核易位,并减弱Pdcd4对转录激活因子AP-1的抑制作用.Pdcd4可以被蛋白激酶S6K1磷酸化并在泛素连接酶SCFβTRCP介导下经泛素化途径降解. 展开更多
关键词 pdcd4 DNA甲基化 MICRORNA-21 AKT 泛素化
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miR-21及PDCD4在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义 被引量:2
6
作者 郑文博 唐炜 +2 位作者 潘凌霄 高进 叶熹罡 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第14期2351-2353,共3页
目的:了解miRNA-21(miR-21)和其靶基因程序性细胞死亡4(programmed cell death 4,PDCD4)在乳腺浸润性导管癌中的表达情况。方法:运用原位杂交及免疫组化技术检测128例乳腺浸润性导管癌组织中miR-21及PDCD4的表达情况,分析两者与临床病... 目的:了解miRNA-21(miR-21)和其靶基因程序性细胞死亡4(programmed cell death 4,PDCD4)在乳腺浸润性导管癌中的表达情况。方法:运用原位杂交及免疫组化技术检测128例乳腺浸润性导管癌组织中miR-21及PDCD4的表达情况,分析两者与临床病理特征之间的关系。结果:miR-21与PDCD4的表达呈负相关,相关系数rs=0.727(P<0.01);在远处转移组中miR-21的表达高于非远处转移组(P<0.001),PDCD4的表达则低于非远处转移组(P<0.001);两者表达均与肿瘤大小及淋巴结转移情况相关(P<0.05),而与激素受体以及绝经状况不相关(P>0.05)。结论:乳腺浸润性导管癌组织中miR-21高表达与PDCD4低表达相关,其或许均能提示该病较高的恶性程度。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 原位杂交 免疫组织化学 MIR-21 pdcd4
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孕烷X受体可上调HepG2细胞内PDCD4的表达 被引量:2
7
作者 王少兰 李涛 +2 位作者 杜婧 韩曼 鞠迪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期370-375,共6页
目的探究孕烷X受体(PXR)对HepG2细胞程序性细胞死亡因子(PDCDs)的调控作用及其分子机制。方法 HepG2细胞给予不同的PXR激动剂刺激24 h,分为利福平(10μmol/L)组、SR12813(1μmol/L)组和DMSO对照组;采用持续激活型PXR的腺病毒感染HepG2细... 目的探究孕烷X受体(PXR)对HepG2细胞程序性细胞死亡因子(PDCDs)的调控作用及其分子机制。方法 HepG2细胞给予不同的PXR激动剂刺激24 h,分为利福平(10μmol/L)组、SR12813(1μmol/L)组和DMSO对照组;采用持续激活型PXR的腺病毒感染HepG2细胞(VP-PXR组和Mock对照组)36 h。应用qRT-PCR技术检测PDCD2、PDCD4、PDCD5、PDCD6基因以及miRNA21的表达变化,采用Western blot技术检测PDCD4的蛋白表达水平。运用生物信息学方法预测PDCD4启动子区存在的潜在PXR结合反应元件(PXREs)。结果 qRT-PCR结果显示利福平与对照组相比,PDCD2的表达显著下调(t=-2.875,P<0.05),PDCD4表达则显著上调(t=4.209,P<0.01),而PDCD5和PDCD6无明显差异。SR12813与对照组相比,PDCD4表达明显升高(t=4.574,P<0.01),PDCD2、PDCD5和PDCD6均无明显变化。同时,利福平、SR12813组与对照组相比,PXR经典靶基因MDR1的表达显著升高(P<0.05);VP-PXR与Mock对照组相比,PDCD2和PDCD6的基因表达无明显差异,PDCD4基因的表达则显著上调(t=3.343,P<0.05),MDR1的表达也显著升高(t=3.343,P<0.01);给予利福平刺激后,PDCD4的蛋白表达比对照组显著升高(t=2.779,P<0.05);PDCD4的蛋白在VP-PXR组也显著高于Mock组(t=3.066,P<0.05);机制研究发现利福平或VP-PXR腺病毒刺激细胞后与各自对照组相比,PDCD4上游负调控因子miRNA21表达均无明显差异。利用生物信息学软件分析后发现,PDCD4启动子区存在PXREs。结论 PXR活化上调HepG2细胞内PDCD4的表达,但不依赖于miRNA21,PDCD4在HepG2细胞可能是PXR的靶基因。 展开更多
关键词 孕烷X受体 pdcd4 miRNA21 HEPG2细胞
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PDCD4增强鼻咽癌细胞系CNE1对顺铂化疗敏感性机制研究 被引量:1
8
作者 李琳 王文红 王洪梅 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2019年第1期9-13,共5页
目的:探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4(the programmed cell death 4,PDCD4)在促进化疗药物顺铂(CDDP)诱导肿瘤细胞凋亡中的作用及可能的机制。方法:CCK8法检测人鼻咽癌系CNE1细胞转染PDCD4前后对CDDP导致的细胞毒性作用影响; Annexin ... 目的:探讨抑癌基因程序性细胞死亡因子4(the programmed cell death 4,PDCD4)在促进化疗药物顺铂(CDDP)诱导肿瘤细胞凋亡中的作用及可能的机制。方法:CCK8法检测人鼻咽癌系CNE1细胞转染PDCD4前后对CDDP导致的细胞毒性作用影响; Annexin V/FITC和PI凋亡检测转染PDCD4前后对CDDP诱导凋亡的作用; Western blot实验初步探讨其可能的分子机制。结果:PDCD4增强CDDP对人鼻咽癌系CNE1细胞的杀伤作用; PDCD4增加CDDP诱导人鼻咽癌系CNE1细胞凋亡率;机制研究发现PDCD4显著降低人鼻咽癌系CNE1细胞中Twist及MDR1蛋白的表达量,从而促进化疗敏感性。结论:PDCD4通过抑制Twist蛋白增强化疗药物敏感性,提示其参与了鼻咽癌化疗治疗进程。 展开更多
关键词 鼻咽癌 pdcd4 TWIST 顺铂
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PDCD4基因小干扰RNA的筛选及其对人白血病细胞药物敏感性的研究 被引量:1
9
作者 谷景义 朱雪娇 费嘉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期553-558,共6页
目的:筛选出PDCD4 siRNA的有效序列,并研究其对白血病K562细胞药物敏感性的影响。方法:利用生物信息学的方法设计并合成3条PDCD4 siRNA候选序列,将PDCD4 siRNA候选序列分别转染K562细胞,用实时定量RT-PCR的方法(Real-time RT-PCR)筛选... 目的:筛选出PDCD4 siRNA的有效序列,并研究其对白血病K562细胞药物敏感性的影响。方法:利用生物信息学的方法设计并合成3条PDCD4 siRNA候选序列,将PDCD4 siRNA候选序列分别转染K562细胞,用实时定量RT-PCR的方法(Real-time RT-PCR)筛选出能有效沉默PDCD4基因mRNA表达的序列,并用蛋白印迹法(Western blotting)检测该有效序列对细胞内PDCD4蛋白表达水平的影响。将有效序列转染k562细胞6 h后,分别与常用的抗白血病药物三氧化二砷(As2O3)、阿糖胞苷(Ara-c)、小檗碱(BB)联合作用72 h,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测PDCD4 siRNA对细胞药物敏感性的影响。结果:用实时定量PCR成功筛选出一条有效干扰PDCD4mRNA表达的序列,用Western blotting法检测该序列可显著降低PDCD4蛋白的表达水平(P<0.05);与ATO,Ara-c,BB联合作用72 h后,PDCD4表达的下调降低了细胞的药物敏感性(P<0.05)。结论:沉默PDCD4能够显著降低白血病细胞的药物敏感性,PDCD4 siRNA能够显著挽救药物作用后的细胞活性。 展开更多
关键词 pdcd4 siRNA 白血病K562细胞 三氧化二砷 阿糖胞苷 小檗碱 药物敏感性
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早期口腔鳞状细胞癌中异常表达PDCD4/eIF4A1的预后价值
10
作者 杨艳 陈盛 +2 位作者 张磊 叶传进 黄晓峰 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期711-713,共3页
目的探讨早期口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中PDCD4/eIF4A1异常表达的预后价值。方法对50例早期(T1/T2N0M0)OSCC标本进行免疫组化检测,分析早期OSCC中eIF4A1和PDCD4的表达及预后价值。结果50例OSCC组织的肿瘤细胞... 目的探讨早期口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中PDCD4/eIF4A1异常表达的预后价值。方法对50例早期(T1/T2N0M0)OSCC标本进行免疫组化检测,分析早期OSCC中eIF4A1和PDCD4的表达及预后价值。结果50例OSCC组织的肿瘤细胞中存在广泛的PDCD4和eIF4A1的表达,其中PDCD4高表达24例,低表达26例;eIF4A1高表达26例,低表达24例。肿瘤组织相同区域中的PDCD4与eIF4A1具有相反的表达趋势,低表达PDCD4与肿瘤分化程度较低、WPOI较差有关,而高表达eIF4A1与肿瘤分化程度低、WPOI较差相关。低表达PDCD4是早期OSCC的独立危险因素。结论早期OSCC中PDCD4/eIF4A1信号表达水平与分化程度和WPOI相关,异常的PDCD4/eIF4A1信号表达水平可预测早期OSCC的不良预后。 展开更多
关键词 口腔肿瘤 pdcd4 eIF4A1 预后 诊断
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PDCD4和MMP-14在宫颈鳞癌中的表达及其生物学意义
11
作者 高寒 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第A10期2023-2023,共1页
关键词 宫颈鳞癌 MMP-14 pdcd4 正常子宫颈 病理学类型 其在
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miR-150调控PDCD4对结核分枝杆菌H37Rv感染THP-1巨噬细胞的影响 被引量:7
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作者 杨盛娅 孙亚萍 +2 位作者 刘立宾 盛云峰 鲍志坚(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期547-552,563,共7页
目的:探讨miR-150对结核杆菌H37Rv感染THP-1巨噬细胞炎症、细胞增殖及凋亡的影响。方法:结核杆菌H37Rv感染THP-1巨噬细胞24、36和48 h后,ELISA法检测细胞IFN-γ及炎症因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)含量。感染H37Rv的THP-1巨噬细胞转染miR-... 目的:探讨miR-150对结核杆菌H37Rv感染THP-1巨噬细胞炎症、细胞增殖及凋亡的影响。方法:结核杆菌H37Rv感染THP-1巨噬细胞24、36和48 h后,ELISA法检测细胞IFN-γ及炎症因子(IL-6、TNF-α、IL-1β)含量。感染H37Rv的THP-1巨噬细胞转染miR-150 mimic, miR-150 inhibitor及相应阴性对照物,CCK-8法检测细胞增殖,qPCR法检测细胞miR-150及程序性细胞死亡蛋白4 (PDCD4)表达水平。荧光素酶报告实验检测miR-150和PDCD4的靶向关系,miR-150 mimic与PDCD4-siRNA共同转染细胞,Western blot法检测THP-1巨噬细胞Bcl-1、Bax和Caspase-3蛋白表达。结果:IFN-γ、IL-6、TNF-α、IL-1β含量随H37Rv感染THP-1巨噬细胞作用时间增加而显著增加。双荧光素酶报告实验显示PDCD4是miR-150的直接靶基因,且在THP-1巨噬细胞中过表达miR-150时,PDCD4 mRNA表达水平显著降低,增强细胞活力;在THP-1巨噬细胞中miR-150表达被抑制时,PDCD4 mRNA表达水平显著升高,炎症因子表达及细胞活力降低。miR-150 inhibitor与PDCD4-siRNA共转染可显著增加炎症因子及Bcl-2蛋白表达水平而降低Bax和Caspase-3蛋白表达水平。结论:miR-150负调控PDCD4是其促进THP-1巨噬细胞的细胞活力且抑制巨噬细胞凋亡的关键分子机制之一。 展开更多
关键词 MiR-150 pdcd4 炎症 THP-1巨噬细胞 细胞凋亡
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PDCD4基因在胶质瘤细胞系的稳定表达及其对肿瘤细胞生长的影响 被引量:5
13
作者 张霞 王晓燕 +2 位作者 高琦 高飞 张利宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第4期347-350,共4页
目的:建立稳定表达程序性死亡4基因(programmed cell death4,PDCD4)的人神经胶质瘤U251细胞系,观察PDCD4基因对人神经胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法:将构建好的携带PDCD4重组真核表达载体pEGFP-PDCD4转染U251细胞,经过G418筛选... 目的:建立稳定表达程序性死亡4基因(programmed cell death4,PDCD4)的人神经胶质瘤U251细胞系,观察PDCD4基因对人神经胶质瘤细胞增殖及细胞周期的影响。方法:将构建好的携带PDCD4重组真核表达载体pEGFP-PDCD4转染U251细胞,经过G418筛选获得稳定细胞系;用RT-PCR及Western blotting检测PDCD4mRNA和蛋白的表达情况,通过锥虫蓝染色活细胞计数法及克隆形成实验检测外源PDCD4转染对细胞增殖和克隆形成能力的影响,以流式细胞术检测细胞周期。结果:成功建立稳定表达PDCD4的胶质瘤细胞U251-PDCD4。未转染的U251及空载体转染的U251细胞均不表达PDCD4,而pEGFP-PDCD4转染的U251-PDCD4细胞表达高水平的PDCD4mRNA和蛋白质;转染PDCD4基因的细胞生长速度明显减慢(P<0.01)、克隆形成率明显降低(P<0.01);细胞周期检测显示,转染PDCD4的细胞较其他两对照组细胞S期升高、G2/M期明显降低(P<0.05)。结论:PDCD4通过干扰细胞周期明显抑制胶质瘤U251细胞的细胞增殖及克隆形成能力。 展开更多
关键词 程序性死亡4基因 神经胶质瘤 转染 细胞周期 细胞增殖
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miR-21靶向PDCD4调控非小细胞肺癌A549细胞的增殖与迁移 被引量:8
14
作者 李明 裴晓宁 +3 位作者 岳恺 木亚林 张成辉 赵艳秋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期332-338,共7页
目的:探讨miR-21靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death factor 4,PDCD4)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法:采用脂质体转染技术分别将miR-21 mimics、miR-21inhib... 目的:探讨miR-21靶向程序性细胞死亡因子4(programmed cell death factor 4,PDCD4)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞增殖和迁移的影响及其作用机制。方法:采用脂质体转染技术分别将miR-21 mimics、miR-21inhibitors、miR-NC质粒转染到对数生长期的A549细胞,转染48 h后在荧光显微镜下观察转染效率,用qPCR法检测A549细胞中miR-21、PDCD4 mRNA的表达水平。用双荧光素酶报告基因验证miR-21与PDCD4的靶向关系,用MTT法检测细胞的增殖能力,用Transwell小室法检测细胞的迁移能力,用ELISA法检测各组细胞培养液中TNF-α水平,用WB法检测细胞中PDCD4、NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白的表达水平。结果:成功构建miR-21过表达和沉默的A549细胞系。双荧光素酶报告基因实验证实miR-21靶向抑制PDCD4表达。过表达miR-21可明显抑制A549细胞中PDCD4 mRNA表达(P<0.01),促进细胞的增殖与迁移能力(P<0.05或P<0.01),提高TNF-α分泌水平(P<0.01),下调PDCD4蛋白的表达(P<0.01),上调p-NF-κB p65蛋白的表达(P<0.05)。沉默miR-21对细胞的影响则与过表达miR-21的作用相反。结论:过表达miR-21可促进A549细胞增殖和迁移能力,该作用可能与其靶向抑制PDCD4、激活NF-κB/TNF-α通路有关。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡因子4 MIRNA-21 非小细胞肺癌 A549细胞 增殖 迁移
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程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在胃癌中作用的研究进展 被引量:6
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作者 张顺荣 何寄琴 李东芳 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第1期212-214,共3页
程序性细胞死亡因子4(PDCD4)是新发现的与细胞周期及凋亡相关的抑癌基因,主要通过蛋白转录及翻译过程来抑制肿瘤细胞生长,也是第1个被发现作用于蛋白翻译阶段的肿瘤抑制物,研究表明其与胃癌的发生发展及预后密切相关,从PDCD4抗肿瘤机制... 程序性细胞死亡因子4(PDCD4)是新发现的与细胞周期及凋亡相关的抑癌基因,主要通过蛋白转录及翻译过程来抑制肿瘤细胞生长,也是第1个被发现作用于蛋白翻译阶段的肿瘤抑制物,研究表明其与胃癌的发生发展及预后密切相关,从PDCD4抗肿瘤机制、胃癌中表达、多基因关系、中药干预治疗胃癌后影响等多方面对其进行综述,为未来胃癌的中西医治疗提供一个潜在分子靶点。 展开更多
关键词 PDCIM 胃癌 机制
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冠心病猝死心肌组织中PDCD4、端粒酶表达量与凋亡分子、间质分子表达的相关性 被引量:2
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作者 吴旭庭 陈刚 《海南医学院学报》 CAS 2017年第24期3350-3353,共4页
目的:研究冠心病猝死心肌组织中程序性细胞死亡因子4(PDCD4)、端粒酶表达量与凋亡分子、间质分子表达的相关性。方法:收集2014年3月~2017年3月期间在南方医科大学第五附属医院接受尸检的猝死病例资料,根据尸检结果并结合法医鉴定书分为... 目的:研究冠心病猝死心肌组织中程序性细胞死亡因子4(PDCD4)、端粒酶表达量与凋亡分子、间质分子表达的相关性。方法:收集2014年3月~2017年3月期间在南方医科大学第五附属医院接受尸检的猝死病例资料,根据尸检结果并结合法医鉴定书分为冠心病心源性猝死的A组、冠心病非心源性猝死的B组以及无冠脉病变的C组。收集心肌组织并测定PDCD4、端粒酶的mRNA表达量以及PDCD4、端粒酶、凋亡分子、间质分子的蛋白表达量。结果:A组心肌组织中PDCD4、端粒酶的mRNA表达量及蛋白表达量均显著高于B组和C组(P<0.05)。A组心肌组织中Bax、p53、SOCS1的蛋白表达量均高于B组和C组(P<0.05),且与PDCD4、端粒酶的蛋白表达量呈正相关;Bcl-2、N-cadherin、Cx40、Cx43、Cx45、FN的蛋白表达量均低于B组和C组(P<0.05),且与PDCD4、端粒酶的蛋白表达量呈负相关;B组和C组心肌组织中PDCD4、端粒酶的mRNA表达量、蛋白表达量以及Bax、Bcl-2、p53、SOCS1、N-cadherin、Cx40、Cx43、Cx45、FN的蛋白表达量无显著性差异(P>0.05)。结论:PDCD4、端粒酶的高表达与冠心病心源性猝死的发生有关,心肌组织中凋亡及间质分子的表达均受其调控。 展开更多
关键词 冠心病 心源性猝死 程序性细胞死亡因子4(pdcd4) 端粒酶 凋亡
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PDCD4在雄鼠生殖细胞中的表达研究
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作者 张茜 邵彬彬 +3 位作者 高亭亭 刘辰辰 蔡金洋 黄晓燕 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期191-194,265,共5页
目的:验证程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在小鼠雄性生殖细胞中的表达。方法:RT-PCR检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸的基因表达情况;Western blot法检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸中蛋白表达水平;免疫荧光法检测PDCD4... 目的:验证程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)在小鼠雄性生殖细胞中的表达。方法:RT-PCR检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸的基因表达情况;Western blot法检测PDCD4在不同周龄小鼠睾丸中蛋白表达水平;免疫荧光法检测PDCD4在雄性生殖嵴以及在不同周龄小鼠睾丸的定位情况。结果:RT-PCR和Western blot结果均显示PDCD4在0周龄小鼠睾丸中开始有表达,并持续表达至成年;免疫荧光显示PDCD4在胚胎期雄性小鼠生殖细胞中也有表达;在出生后0周和1周龄小鼠睾丸中,PDCD4特异表达于精原细胞;在2周龄小鼠睾丸中,PDCD4分布于精原细胞和精母细胞;而在3、4和5周龄小鼠睾丸组织中,PDCD4主要分布于精原细胞、精母细胞与圆形精子细胞。结论:PDCD4分布于胚胎期和出生后各阶段生精细胞,这为进一步研究PDCD4在精子发生中的作用打下基础。 展开更多
关键词 程序性细胞死亡因子4 精子发生 凋亡
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何首乌R50部位诱导人结直肠癌细胞凋亡的作用机制 被引量:13
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作者 杨红莉 李瑞婧 +3 位作者 李子木 张瑞晨 李宝赛 孙震晓 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期51-56,共6页
目的考察何首乌R50部位对体外培养的人结直肠癌细胞活性的影响,探究其对人结直肠癌细胞周期和凋亡的作用。方法体外培养人结直肠癌HT29和HCT116细胞24 h,加入何首乌R50部位50-300 mg·L^-1继续培养24,48和72 h,MTT法检测细胞存活率... 目的考察何首乌R50部位对体外培养的人结直肠癌细胞活性的影响,探究其对人结直肠癌细胞周期和凋亡的作用。方法体外培养人结直肠癌HT29和HCT116细胞24 h,加入何首乌R50部位50-300 mg·L^-1继续培养24,48和72 h,MTT法检测细胞存活率;何首乌R50部位50,100和200 mg·L^-1分别与HCT116和HT29细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;何首乌R50部位100 mg·L^-1与HCT116和HT29细胞作用48 h,Giemsa染色检测细胞及核的变化,Western蛋白质印迹法检测胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白的表达。结果何首乌R50部位对HCT116和HT29细胞存活抑制作用显著,呈时间和浓度依赖性;不同浓度何首乌R50部位与HCT116和HT29细胞作用48 h后,对细胞周期的影响均不显著;但随着何首乌R50部位浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,200 mg·L^-1组HCT116细胞凋亡率由对照组的(5.85±0.35)%增加至(27.65±1.62)%(P〈0.05),HT29细胞的凋亡率由(10.25±0.77)%增加至(35.35±0.35)%(P〈0.05);何首乌R50部位100 mg·L^-1作用HCT116和HT29细胞48 h,Giemsa染色可见部分细胞出现细胞固缩、核染色质凝集、凋亡小体形成等细胞凋亡形态;胱天蛋白酶原3和Pdcd4蛋白表达均下降。结论何首乌R50部位主要通过诱导人结直肠癌HCT116和HT29细胞凋亡而使其存活率下降,并通过胱天蛋白酶依赖信号通路诱导人结直肠癌细胞凋亡,Pdcd4蛋白表达下调可能与其相关。 展开更多
关键词 何首乌R50部位 HCT116细胞 HT29细胞 细胞凋亡 胱天蛋白酶原3 pdcd4
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miR-590-5p和miR-590-3p参与肝细胞肝癌发展的机制 被引量:20
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作者 杨红飞 郑文宏 +2 位作者 赵文淘 关春燕 安靓 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期804-811,共8页
目的研究miR-590的两个臂—miR-590-5p和miR-590-3p对肝癌细胞增殖能力的影响,以及参与肿瘤发生发展的机制。方法利用miRNA芯片、QPCR对肝癌标本和各细胞株miR-590的表达谱系进行分析和验证。通过脂质体将miR-590 mimic或inhibitor转染... 目的研究miR-590的两个臂—miR-590-5p和miR-590-3p对肝癌细胞增殖能力的影响,以及参与肿瘤发生发展的机制。方法利用miRNA芯片、QPCR对肝癌标本和各细胞株miR-590的表达谱系进行分析和验证。通过脂质体将miR-590 mimic或inhibitor转染正常肝细胞或肝癌细胞,MTT生长曲线分析和软琼脂克隆形成实验检测转染后细胞增殖及存活能力的变化。Targetscan预测miR-590-5p和miR-590-3p的靶基因,并通过萤光素酶报告系统以及western blot进行验证。结果 miRNA芯片结果显示3个肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织相对于癌旁正常组织,miR-590-5p和miR-590-3p表达上调。通过QPCR验证了10例临床HCC肿瘤标本发现80%的HCC组织相对于癌旁组织miR-590-5p和miR-590-3p均同步显著上调。QPCR结果进一步发现,HepG2、Hep3B、Huh7三株HCC细胞株相对于正常肝细胞株L-O2 miR-590-5p/3p同样表达上调。MTT和软琼脂克隆形成结果显示,L-O2分别过表达miR-590-5p和miR-590-3p,细胞的增殖能力都显著增加(P<0.05);而HepG2、Hep3B、Huh7分别下调miR-590-5p和miR-590-3p的表达后,细胞的增殖能力也都显著降低(P<0.05)。Targetscan预测,PDCD4和PTEN分别作为miR-590-5p和miR-590-3p的潜在靶基因。萤光素酶报告系统以及western blot结果显示miR-590-5p和miR-590-3p可以分别直接下调靶基因PDCD4和PTEN的表达(P<0.05)。进一步我们发现miR-590-3p通过下调PTEN激活PI3K-AKT信号通路,促进AKT1-S473的磷酸化水平。结论在HCC发展过程中miR-590扮演着重要的致癌因子角色,我们结果发现miR-590的两个臂都具有促进肿瘤发生的生物学功能,它们分别通过靶向调节抑癌基因PDCD4和PTEN的表达来促进HCC细胞的增殖和存活,并激活核心的PI3K-AKT肿瘤信号通路。由此可见miR-590在HCC发生发展过程中具有重要的意义,也可作为临床诊治潜在的新靶标。 展开更多
关键词 miR-590 miR-590-5p miR-590-3p 肝细胞肝癌 pdcd4 PTEN 增殖
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启膈散协同顺铂抑制食管癌EC9706细胞生长与miR-21的关系 被引量:10
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作者 吴耀松 杨联河 +5 位作者 郭彬 赵雪艳 牛春玲 陈玉龙 尹素改 任闪闪 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第12期3098-3101,共4页
目的:观察启膈散含药血清联合顺铂对人食管癌细胞EC9706的增殖效应,从miR-21探讨其作用机制。方法:制备启膈散含药血清,MTT法筛选其最佳作用浓度;PCR检测miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;Western-blot检测蛋白PDCD4、PTEN的表... 目的:观察启膈散含药血清联合顺铂对人食管癌细胞EC9706的增殖效应,从miR-21探讨其作用机制。方法:制备启膈散含药血清,MTT法筛选其最佳作用浓度;PCR检测miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA的表达情况;Western-blot检测蛋白PDCD4、PTEN的表达水平。结果:5%含药血清的浓度作用效果最为显著(q>1)。与5%对照血清组比较,除5%含药血清PDCD、PTEN mRNA和0.5μg/m L顺铂组的PTEN mRNA表达量下降外,其余各组的miR-21、PDCD4 mRNA和PTEN mRNA表达均升高(P<0.05);顺铂联合含药血清后,两组miR-21表达和联合高浓度顺铂组的PDCD4 mRNA均比其单用下降(P<0.05),而两组PTEN mRNA和联合低浓度组的PDCD4 mRNA的表达则升高(P<0.05)。与对照组相比,各组PDCD4蛋白表达量升高P<0.05;高浓度顺铂联合含药血清组比单用高顺铂组PDCD4蛋白表达量升高(P<0.05),低浓度顺铂的两组变化不明显(P>0.05);两个浓度顺铂联合含药血清时PTEN的表达量均高于单独使用顺铂(P<0.05)。结论:启膈散能够增加EC9706对顺铂的敏感性,可能是通过miR-21与其调控的下游基因PDCD4与PTEN共同参与完成。 展开更多
关键词 食管癌 启膈散 顺铂 MIR-21 pdcd4 PTEN
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