7种细菌性虫媒病病原体的反向线状印迹杂交检测技术的建立

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作者 李雅琪 叶得河 马永华 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期31-39,共9页

【目的】建立快速高效的细菌性虫媒病的检测方法。【方法】运用反向线状印迹杂交技术(reverse line blot,RLB),通过对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、福氏志贺菌(Shigella flexneri)、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)、创伤弧... 【目的】建立快速高效的细菌性虫媒病的检测方法。【方法】运用反向线状印迹杂交技术(reverse line blot,RLB),通过对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、福氏志贺菌(Shigella flexneri)、豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、肠沙门氏菌肠亚种鼠伤寒血清型(Salmonella enterica subsp.enterica serovar Typhimurium)、普通变形杆菌(Proteus vulgaris)、小肠结肠炎耶尔森菌(Yersinia enterocolitica)7种细菌的核糖体16S RNA进行序列比对,利用DNAStar和Primer premier软件设计出了用于PCR-RLB杂交反应的基因组DNA样品进行PCR扩增的通用引物(RLB-F,RLB-R),和特异性探针以及通用探针(Catch-all),通用下游引物(RLB-R)5'端用生物素标记和探针5'端连接氨基团(NH_(2)^(+))。【结果】成功建立高效、快速、特异且能同时检测7种细菌PCR-RLB的方法,并确定了通用引物最佳浓度为25μmol/L,金黄色葡萄球菌和福氏志贺菌探针的最佳浓度分别为50μmol/L,其他5种病原探针的最佳浓度为100μmol/L。使用PCR-RLB检测方法,可对上述7种细菌的检测敏感性可达到10^(-6)~10^(-11) ng/μL,远远高于PCR的10^(-3)~10^(-8) ng/μL。【结论】首次同时对7种细菌进行检测,并确定了不同引物及探针的最佳浓度。该方法不仅提高了检测效率,同时还提高了检测的灵敏度,为开发新的检测手段提供了理论依据。 展开更多

关键词 细菌性虫媒病 反向线状印迹杂交技术 PCR扩增

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Southern印迹杂交及其他相关印迹技术简介 被引量：5

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作者 姜永均 《生物学教学》 北大核心 2010年第11期64-65,共2页

Southern印迹杂交（Southern blot）是分子生物学领域中最常用的技术方法之一，该技术是1975年英国爱丁堡大学的E．M．Southern首创的，Southern印迹杂交故因此而得名。后来相继出现了三个原理、过程相似，但是操作对象不同的印迹方法... Southern印迹杂交（Southern blot）是分子生物学领域中最常用的技术方法之一，该技术是1975年英国爱丁堡大学的E．M．Southern首创的，Southern印迹杂交故因此而得名。后来相继出现了三个原理、过程相似，但是操作对象不同的印迹方法，缘于学界前辈的幽默分别将其称为Northern blot、Western blot和Eastern blot，这些技术的命名与发明人姓氏并没有关系。本文简要介绍了Southern印迹杂交及其相关生物技术。 展开更多

关键词 SoutIlem印迹杂交 Northem印迹杂交 Westem印迹杂交 Eastern印迹杂交

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基因重组乳链球菌防龋疫苗的研究　Ⅲ．乳链球菌重组质粒DNA的Southern印迹和点印迹杂交分析

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作者 凌均 樊明文 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期163-166,共4页

为了证实重组质粒ＤＮＡ分子中插入的外源ＤＮＡ确是来自变形链球菌拱体菌，检测受体菌中是否有探针同源的序列。本研究采用ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、点印迹杂交和切口平移制备生物素ＤＮＡ探针以及光敏基因检测技术，对乳链球... 为了证实重组质粒ＤＮＡ分子中插入的外源ＤＮＡ确是来自变形链球菌拱体菌，检测受体菌中是否有探针同源的序列。本研究采用ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、点印迹杂交和切口平移制备生物素ＤＮＡ探针以及光敏基因检测技术，对乳链球菌ＨＬ１０２，ＨＬ１０７中的重组质粒ＤＮＡｐＬＦ１０２，ｐＬＦ１０７作了进一步分析鉴定，ＤＮＡ点印迹杂交结果显示，含有ｐａｃ基因的ｐＰＣ４１ＰｓｔⅠ酶切ＤＮＡ探针均与上述质粒ＤＮＡ结合，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交提示重组质粒１．５ｋｂ的酶切片段与生物素探针杂交，证实该基因片段是从ｐＰＣ４１中获得的变形链球菌目的基因片段，重组乳链球菌ＨＬ１０２，ＨＬ１０７均携带变形链球菌表面蛋白抗原（ＰＡｃ）结构基因ｐａｃ。 展开更多

关键词 基因重组 乳链球菌 防龋疫苗 印迹杂交

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特异性蛋白质印迹杂交检测人和猪的旋毛虫感染

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作者 王蕾(编译) 《中国猪业》 2012年第12期72-72,共1页

旋毛虫病是人畜共患病，是由旋毛虫属寄生虫引起的，该病在全世界广泛分布。为了确诊，需用蛋白质印迹杂交检测验证人和猪血清样品EUSA检测阳性样品，因为ELISA检测结果有许多假阳性。这个研究的目的是鉴定在感染人和猪的血清中大量存... 旋毛虫病是人畜共患病，是由旋毛虫属寄生虫引起的，该病在全世界广泛分布。为了确诊，需用蛋白质印迹杂交检测验证人和猪血清样品EUSA检测阳性样品，因为ELISA检测结果有许多假阳性。这个研究的目的是鉴定在感染人和猪的血清中大量存在的旋毛虫特异抗原，界定一个检测旋毛虫的特异方法[通过蛋白质印迹杂交（westernblots）检测方法检测感染宿主血清]，可以将假阳性血清与真阳性血清分开。 展开更多

关键词 旋毛虫感染 蛋白质印迹 杂交检测 血清样品 猪 异性 印迹杂交 阳性血清

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琼脂糖凝胶直接杂交法 被引量：1

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作者 金顺钱 张伟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第3期240-241,共2页

DNA印迹(Southern blot)杂交法是研究DNA分子结构,变异及其组成的一种分子生物学技术。自1975年闻世以来,在分子生物学,遗传学及分子病毒学等研究领域得到广泛应用,对这些学科的发展起了重要作用。由于该技术均需要首先将电泳后已变性的... DNA印迹(Southern blot)杂交法是研究DNA分子结构,变异及其组成的一种分子生物学技术。自1975年闻世以来,在分子生物学,遗传学及分子病毒学等研究领域得到广泛应用,对这些学科的发展起了重要作用。由于该技术均需要首先将电泳后已变性的DNA从琼脂糖凝胶转移至支持膜上,因此,实验结果的好坏很大程度取决于吸印的效果。 展开更多

关键词 琼脂糖凝胶 DNA印迹杂交

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烟草花叶病毒辽宁分离物Northern杂交检测体系的建立 被引量：2

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作者 李艳丽 安梦楠 +1 位作者 王冠中 吴元华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期137-142,共6页

为了建立烟草花叶病毒辽宁分离物(TMV-LN)的高特异性、高灵敏度的分子杂交检测体系,从粗提纯的TMV-LN粒子中提取RNA,设计特异性引物通过RT-PCR扩增TMV-LN的CP和3'端非翻译区域,将片段连至p UC119载体获得重组质粒p UCTMV-PP,体外转... 为了建立烟草花叶病毒辽宁分离物(TMV-LN)的高特异性、高灵敏度的分子杂交检测体系,从粗提纯的TMV-LN粒子中提取RNA,设计特异性引物通过RT-PCR扩增TMV-LN的CP和3'端非翻译区域,将片段连至p UC119载体获得重组质粒p UCTMV-PP,体外转录获得地高辛(DIG)标记的TMV-LN正义链RNA杂交检测探针,同时构建DNA检测探针作为对照。采用点印迹(Dot-blot)杂交和Northern杂交对比RNA探针和DNA探针对TMV-LN的检测特异性和灵敏性。检测结果表明,RNA探针和DNA探针在点印记杂交和Northern杂交中均表现出良好的检测特异性,RNA探针在检测灵敏度方面要略好于DNA探针,且点印迹杂交体系在病毒定性方面较为快捷,Northern杂交体系在病毒基因组RNA的定量方面具有明显优势。 展开更多

关键词 烟草花叶病毒辽宁分离物 RNA探针 DNA探针 点印迹杂交 NORTHERN杂交

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欧美杨108号转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白嵌合基因的研究 被引量：4

7

作者 遇文婧 邹传山 +1 位作者 王志英 张国财 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期603-606,共4页

以欧美杨108号为外植体材料,利用农杆菌介导法成功地将抗虫基因(蜘蛛杀虫肽+B t毒蛋白的嵌合基因)导入受体中。通过PCR检测,凝胶电泳结果显示8个卡那霉素抗性芽中,6个存在目的基因;经PCR-Southern印迹杂交检测,阳性率为50%,进一步表明... 以欧美杨108号为外植体材料,利用农杆菌介导法成功地将抗虫基因(蜘蛛杀虫肽+B t毒蛋白的嵌合基因)导入受体中。通过PCR检测,凝胶电泳结果显示8个卡那霉素抗性芽中,6个存在目的基因;经PCR-Southern印迹杂交检测,阳性率为50%,进一步表明目的基因成功整合到欧美杨108号基因组内。 展开更多

关键词 欧美杨108号 蜘蛛杀虫肽+Bt毒蛋白基因 pcr-southern印迹杂交

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PKC基因在人肺癌中的转录表达 被引量：9

8

作者 周清华 刘伦旭 +3 位作者 李潞 王允 陈军 杨金龙 《中国肺癌杂志》 CAS 2000年第5期351-354,共4页

目的　探讨PKC β1基因转录表达与肺癌临床病理生理特征的关系。方法　应用Northern印迹杂交方法检测 5 0例肺癌组织、癌旁肺组织、远癌肺组织和 30例肺良性病变肺组织PKC β1mRNA表达水平。结果　 (1)肺癌组织中PKC β1mRNA表达水平显... 目的　探讨PKC β1基因转录表达与肺癌临床病理生理特征的关系。方法　应用Northern印迹杂交方法检测 5 0例肺癌组织、癌旁肺组织、远癌肺组织和 30例肺良性病变肺组织PKC β1mRNA表达水平。结果　 (1)肺癌组织中PKC β1mRNA表达水平显著高于癌旁肺组织 ,远癌肺组织和肺良性病变肺组织 (P <0 .0 1) ;(2 )低分化肺癌中PKC β1表达水平显著高于中 高分化肺癌 (P <0 .0 5 ) ;(3)Ⅲ期肺癌PKC β1表达水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期肺癌 (P <0 .0 1) ;(4)伴有淋巴结转移肺癌PKC β1表达水平显著高于不伴淋巴结转移肺癌(P <0 .0 1)。结论　肺癌组织中存在PKC β1mRNA过度表达 ,它可能参与肺癌细胞分化以及肿瘤进展和转移过程的调控。 展开更多

关键词 肺肿瘤 PKC基因 RNA印迹杂交

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PEX法提取植物组织DNA 被引量：5

9

作者 雷海英 孙毅 +2 位作者 仪治本 段永红 王志军 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期178-180,共3页

介绍了一种简单而实用的DNA提取法,利用PEX试剂从高粱与转基因玉米的新鲜叶片中提取植物组织DNA。所得DNA经定量检测后,可满足AFLP分析及PCR-Southern杂交等要求。

关键词 DNA提取 PEX AFLP pcr-southern杂交

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甘蔗线虫病抗性基因的PCR检测研究 被引量：5

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作者 吴杨 周会 潘大仁 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期939-942,共4页

以38份未经线虫病常规鉴定的甘蔗种质资源为供试材料,根据番茄抗根结线虫病基因和甜菜抗胞囊线虫病基因的保守序列区域,分别设计了2条上游引物2、条下游引物,对设计的引物进行组合后,应用PCR特异扩增从中分别筛选出各1对特异引物。用抗... 以38份未经线虫病常规鉴定的甘蔗种质资源为供试材料,根据番茄抗根结线虫病基因和甜菜抗胞囊线虫病基因的保守序列区域,分别设计了2条上游引物2、条下游引物,对设计的引物进行组合后,应用PCR特异扩增从中分别筛选出各1对特异引物。用抗根结线虫基因设计的特异引物进行扩增最终获得了1条大约460 bp大小的特异片段;用抗胞囊线虫基因设计的特异引物进行扩增最终获得了1条大约690 bp大小的特异片段,进一步进行了PCR-Southern杂交,确认了该2条特异引物的真实性。 展开更多

关键词 甘蔗 抗线虫基因 基因检测 pcr-southern杂交

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大鼠早期肝纤维化α_1(Ⅰ)、α_1(Ⅲ)前胶原mRNA及相应胶原蛋白表达的初步研究 被引量：7

11

作者 杜卫东 周筱梅 +4 位作者 张月娥 翟为溶 钱连芳 马捷 庄丽 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期324-328,T005,共5页

应用Northern杂交及免疫组化方法.观察CC1_4诱导的大鼠肝纤维化形成不同阶段α_1(Ⅰ)、α_1(Ⅲ)前胶原mRNA表达与相应Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白ColⅠ、ColⅢ及前Ⅲ型胶原端肽(PⅢP)表达间的变化规律及其相互关系。结果表明:①肝纤维化时α_1(Ⅰ... 应用Northern杂交及免疫组化方法.观察CC1_4诱导的大鼠肝纤维化形成不同阶段α_1(Ⅰ)、α_1(Ⅲ)前胶原mRNA表达与相应Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白ColⅠ、ColⅢ及前Ⅲ型胶原端肽(PⅢP)表达间的变化规律及其相互关系。结果表明:①肝纤维化时α_1(Ⅰ)、α_1(Ⅲ)前胶原mRNA表达增强,早期以α_1(Ⅲ)mRNA为主;α_1(Ⅰ)及α_1(Ⅲ)前胶原mRNA均于3～4周时呈一过性下降。②Ito细胞是肝纤维化过程中产生Col Ⅰ、ColⅢ及PⅢP的主要来源,肝细胞亦具有一定的合成ColⅢ及PⅢP的能力。③应用Northern杂交技术检测前胶原mRNA表达,能从基因水平了解肝内胶原含量的变化,能更敏感地反映肝纤维化的倾向。 展开更多

关键词 肝纤维化 前胶原 MRNA 胶原蛋白 印迹杂交

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激活素受体相互作用蛋白3的基因克隆及其免疫学特性研究 被引量：4

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作者 徐桂月 张鹏宇 +5 位作者 王奭骥 台桂香 劳凤学 杨煜 崔雪玲 柳忠辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期109-113,118,共6页

目的:研究新克隆的激活素受体相互作用蛋白3(ActR IP3)的免疫学特性和其介导Ser/Thr激酶型受体胞内信号传导的作用。方法:以酵母双杂交法发现的ActR IP基因片段作为探针,从小鼠脑cDNA文库中克隆ActR IP3基因。EIA法分析其与激活素ⅡA型... 目的:研究新克隆的激活素受体相互作用蛋白3(ActR IP3)的免疫学特性和其介导Ser/Thr激酶型受体胞内信号传导的作用。方法:以酵母双杂交法发现的ActR IP基因片段作为探针,从小鼠脑cDNA文库中克隆ActR IP3基因。EIA法分析其与激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)结合能力,W estern b lot杂交检测成熟蛋白在组织中的表达,免疫组化染色分析其在脑组织中的分布,采用pcDNA-ActR IP3与CAGA-lux报告基因质粒共转染HEK293细胞分析信号传导作用。结果:克隆的Ac-tR IP3基因全长1 197 bp,编码101个氨基酸残基,EIA分析显示ActR IP3与ActRⅡA具有特异性结合作用,这种作用与Ac-tR IP3的N末端氨基酸序列有关。W estern b lot杂交显示天然ActR IP3相对分子质量约为14 000,在多种组织表达,免疫组化染色显示其在脑组织中的分布以海马及下丘脑为主。通过表达ActR IP3可促进激活素诱导的特异性基因转录活性。结论:ActR IP3属于ActR IP家族新成员,具有特异结合ActRⅡA的能力,并具有促进激活素信号传导的作用。 展开更多

关键词 激活索 受体相互作用蛋白 信号传导 免疫印迹杂交 免疫组化

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美洲拟鲽抗冻蛋白基因遗传转化草莓的研究 被引量：2

13

作者 孙瑞芬 李天然 +4 位作者 安玉麟 李堃 石慧芹 牛素清 赵京惠 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期423-428,共6页

以草莓品种星都2号和全明星的无菌苗叶盘和叶柄基部为外植体,采用携带美洲拟鲽编码pre、pro和mature3种抗冻蛋白(AFP)基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行转化,获得7个Km抗性株系。经PCR扩增及PCR-Southern杂交检测,6个株系呈阳性,结果... 以草莓品种星都2号和全明星的无菌苗叶盘和叶柄基部为外植体,采用携带美洲拟鲽编码pre、pro和mature3种抗冻蛋白(AFP)基因的双元载体系统的根癌农杆菌进行转化,获得7个Km抗性株系。经PCR扩增及PCR-Southern杂交检测,6个株系呈阳性,结果表明,编码pre、pro和mature的AFP基因分别整合到了星都2号和全明星染色体DNA中,其中获得pre、pro和mature转星都2号株系各1个,转化率分别为1.56%、1.49%和1.67%;mature基因转全明星株系3个,转化率为4.05%。 展开更多

关键词 草莓 美洲拟鲽 抗冻蛋白(AFP)基因 遗传转化 pcr-southern杂交

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人乙肝病毒DNA在感染树鼠句肝细胞内状态的研究 被引量：3

14

作者 苏建家 王宇 +3 位作者 杨春 黄定瑞 冈本宏明 严瑞琪 《广西科学》 CAS 1997年第2期139-142,共4页

为探讨人乙肝病毒（ＨＨＢＶ）ＤＮＡ在树鼠句肝细胞内存在状态，对经血清学证明已被感染的树鼠句肝组织进行转移印迹杂交分析。结果，在实验感染早期的树鼠句肝细胞检出ＨＢＶＤＮＡ复制的中间体；在实验中晚期的动物肝细胞发现整合型... 为探讨人乙肝病毒（ＨＨＢＶ）ＤＮＡ在树鼠句肝细胞内存在状态，对经血清学证明已被感染的树鼠句肝组织进行转移印迹杂交分析。结果，在实验感染早期的树鼠句肝细胞检出ＨＢＶＤＮＡ复制的中间体；在实验中晚期的动物肝细胞发现整合型的ＨＢＶＤＮＡ。表明树鼠句肝对ＨＨＢＶ敏感，可成为乙肝和肝细胞癌发病机理研究及治疗乙肝药物筛选的较好的实验动物模型。 展开更多

关键词 DNA 印迹杂交 树QU 乙肝病毒 HHBV 肝细胞癌

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CTHRC1基因在胃癌组织中的表达 被引量：3

15

作者 何敖林 吴福荣 +3 位作者 李莎莎 刘瑞文 朱为伟 胡雨佳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第7期1149-1151,共3页

目的:通过检测三螺旋重复胶原蛋白Ⅰ(CTHRC1)在胃癌组织中的表达水平,初步研究其在胃癌发生发展中的意义。方法:应用Western-Blot方法,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,分别检测胃癌组织及与其相对应的远癌正常胃组织中CTHRC1的相... 目的:通过检测三螺旋重复胶原蛋白Ⅰ(CTHRC1)在胃癌组织中的表达水平,初步研究其在胃癌发生发展中的意义。方法:应用Western-Blot方法,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,分别检测胃癌组织及与其相对应的远癌正常胃组织中CTHRC1的相对表达水平。结果:33例胃癌组织中CTHRC1的相对表达量为0.315±0.234,与其对应的33例远癌正常胃组织中的CTHRC1的相对表达量为0.500±0.148,差异有统计学意义(t=6.482,P<0.01)。结论:CTHRC1在胃癌组织中的表达显著降低,提示CTHRC1可能与胃癌的发生、发展有关。 展开更多

关键词 胃肿瘤 三螺旋重复胶原蛋白Ⅰ 免疫印迹杂交

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ACC合酶反义基因转化洋桔梗Double Mariachi Pink的研究 被引量：2

16

作者 孙晶 王轶 +5 位作者 陈崇顺 邹爱兰 廖静 赵晓潘 乔宁宁 邓文汉 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第4期27-31,共5页

以洋桔梗(Eustoma grandiflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121-ACC合酶反义基因片段(1 008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗... 以洋桔梗(Eustoma grandiflorum)品种Double Mariachi Pink为试验材料,在已建立的洋桔梗高频再生体系和高效稳定遗传转化体系的基础上,将PBI121-ACC合酶反义基因片段(1 008 bp)通过农杆菌介导法转化洋桔梗,通过高频再生获得116株抗性苗。再生抗性苗在生根培养基1/2MS+NAA 0.1 mg/L+Km 15 mg/L上生根筛选获得了55株正常生根的植株;对其中随机挑选的8个株系进行PCR鉴定和GUS表达检测,在增殖筛选培养基MS+6-BA0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L+Km 30 mg/L+Cb 100 mg/L上初步筛得到5个PCR阳性株系,其中4株GUS检测呈阳性:5个PCR阳性株系经PCR-Southern杂交鉴定得到1株阳性植株。将阳性株系出瓶移栽,其平均花期为24 d。 展开更多

关键词 洋桔梗 ACC合酶反义基因 遗传转化 PCR检测 pcr-southern杂交检测

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巨噬细胞移动抑制因子在大鼠坐骨神经损伤后表达的变化 被引量：3

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作者 陈云苏 陈峥嵘 +1 位作者 阎作勤 蒋淳 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第1期34-37,共4页

目的　研究巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)在大鼠周围神经损伤后的表达变化 ,探讨MIF在周围神经损伤后再生中的作用。方法　通过核酸印迹杂交的方法了解MIF在神经损伤后表达的变化 ,并对损伤后 4d的神经进行免疫组化分析 ,观察其表达部位... 目的　研究巨噬细胞移动抑制因子 (MIF)在大鼠周围神经损伤后的表达变化 ,探讨MIF在周围神经损伤后再生中的作用。方法　通过核酸印迹杂交的方法了解MIF在神经损伤后表达的变化 ,并对损伤后 4d的神经进行免疫组化分析 ,观察其表达部位的改变。结果　①MIF在神经损伤后出现空间和时间上的动态变化。在神经损伤后 4d ,其MIF表达的部位与正常坐骨神经表达的部位不同。在神经损伤的远端 ,MIF存在于吞饮髓鞘碎片的雪旺细胞中。而在损伤神经的近端 ,MIF不仅存在于雪旺细胞中 ,同时在轴突内也有较高水平。②对神经损伤后MIFmRNA的杂交定量分析显示 ,在损伤后的 12h内 ,MIF的mRNA水平维持在较低水平 ,2 4h后骤然上升至高水平并在 1周内维持较高水平 ,之后回落至正常水平。结论　MIF在周围神经损伤 展开更多

关键词 巨噬细胞移动抑制因子 大鼠 免疫组化 核酸印迹杂交 周围神经损伤 神经再生

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食管癌相关基因片段的筛选与鉴定 被引量：5

18

作者 张云汉 殷智榕 +3 位作者 温洪涛 陈东 高冬玲 姜国忠 《河南医科大学学报》 北大核心 2001年第5期519-521,共3页

目的 :从已构建的中国人食管癌特异的消减cDNA文库中 ,初步筛选与鉴定食管癌相关基因片段。方法 :随机挑选 48个片段作反Northern印迹杂交分析 ,将杂交信号有差别的 15个片段送测序公司进行测序 ,用Gen BankBlast程序检索 ,以同源性很小... 目的 :从已构建的中国人食管癌特异的消减cDNA文库中 ,初步筛选与鉴定食管癌相关基因片段。方法 :随机挑选 48个片段作反Northern印迹杂交分析 ,将杂交信号有差别的 15个片段送测序公司进行测序 ,用Gen BankBlast程序检索 ,以同源性很小的cDNA片段作为新基因的候选基因 ,观察其在食管癌组织和正常食管粘膜组织中的表达情况。结果 :所获得的 7个序列中 :3y5 9与已知基因同源性很小 ,且 3y5 9在 30例食管癌及其配对正常食管粘膜组织中 ,19例 (6 3.3 % )表达有差别 ,11例 (36 .7% )表达无差别 (P <0 .0 5 )。 3y88与已知基因geminin基因部分同源。另外 5个片段 3y2 0 ,3y14,3y90 ,3y91和 3y92分别与核糖体蛋白RpL7a,TLH2 9蛋白驱动子 ,Hsp70 /Hsp90 organizingprotein ,Keratin6 (KRT6C)和内膜蛋白等已知基因序列高度同源。结论 :3y5 9可能是与食管癌的发生、发展有关的新的候选基因。首次发现 ,geminin基因 ,核糖体蛋白RpL7a,TLH2 9蛋白驱动子 ,Hsp70 /Hsp90 organizingpro tein ,Keratin6 (KRT6C) 。 展开更多

关键词 食管癌 消减抑制杂交 反Northern印迹杂交 反转录PCR CDNA文库

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耐多药结核分枝杆菌异烟肼耐药相关基因katG突变分析 被引量：11

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作者 甄伟 石大伟 +3 位作者 赵玉玲 李辉 李亮 朱国峰 《中国防痨杂志》 CAS 2013年第3期207-209,共3页

异烟肼（isoniazid,INH）是一种重要的抗结核药物,其在细菌体内被过氧化氢酶-过氧化物酶KatG氧化为乙酰异烟肼自由基和活性氧自由基等活性物质,进而攻击结核分枝杆菌多个靶位点来发挥杀菌作用[1]。Zhang等[1]通过Southern印迹杂交（Sout... 异烟肼（isoniazid,INH）是一种重要的抗结核药物,其在细菌体内被过氧化氢酶-过氧化物酶KatG氧化为乙酰异烟肼自由基和活性氧自由基等活性物质,进而攻击结核分枝杆菌多个靶位点来发挥杀菌作用[1]。Zhang等[1]通过Southern印迹杂交（Southernblot）发现结核分枝杆菌katG基因缺失和异烟肼耐药相关。 展开更多

关键词 耐多药结核分枝杆菌 乙酰异烟肼 耐药相关基因 KATG 突变分析 Southern印迹杂交 活性氧自由基 过氧化物酶

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宏基因组技术及其在奶牛乳房炎诊断中的应用 被引量：2

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作者 于景丽 希尼尼根 赵吉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期567-570,共4页

现代医学认为,疾病的发生发展与菌群结构变化密切相关[1-4]。Aebi等利用DNA印迹杂交（Southern-blot hybridization）技术证明特定牛群支原体乳腺炎暴发和奶源介导的支原体群落感染有关[5]。发展不依赖于培养（Culture-independent）而... 现代医学认为,疾病的发生发展与菌群结构变化密切相关[1-4]。Aebi等利用DNA印迹杂交（Southern-blot hybridization）技术证明特定牛群支原体乳腺炎暴发和奶源介导的支原体群落感染有关[5]。发展不依赖于培养（Culture-independent）而且能够准确跟踪疾病发生发展过程中全部菌群变化的宏基因组学（Metagenomics）鉴别技术对疾病的早期防控至关重要。 展开更多

关键词 牛乳房炎 宏基因组 菌群结构 微生物群落 牛群 亚临床型乳房炎 DNA 细菌群落 变形菌 印迹杂交

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