实时荧光PCR检测技术在非洲猪瘟(ASF)防控中的应用

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作者 张晓玉 周美芳 《猪业科学》 2025年第9期88-89,共2页

非洲猪瘟(ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(ASFV)引发的、在猪群中具有极强传染性和高致病性的疾病。ASFV毒力极强,无论是家猪还是野猪感染后,其致死率可接近或达到100%。目前,全球范围内尚未研发出安全有效的商业化疫苗或特效治疗药物。一旦... 非洲猪瘟(ASF)是一种由非洲猪瘟病毒(ASFV)引发的、在猪群中具有极强传染性和高致病性的疾病。ASFV毒力极强,无论是家猪还是野猪感染后,其致死率可接近或达到100%。目前,全球范围内尚未研发出安全有效的商业化疫苗或特效治疗药物。一旦猪场发生疫情,极易导致恐慌性清场和大规模扑杀行动,这不仅给养殖者造成重大经济损失,还会严重威胁民生“菜篮子”工程,造成猪肉供应短缺和市场价格剧烈震荡。因此,养殖场防控非洲猪瘟的核心策略在于主动实施病原监测,及时识别病毒威胁,从而实现早期预警、精准防控和风险可控的目标。 展开更多

关键词 病原监测 早期预警 ASFV 实时荧光pcr检测技术

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食源性致病菌PCR检测技术研究进展 被引量：11

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作者 胡金强 雷俊婷 +6 位作者 景建洲 孙新城 高辉 耿尧 章银良 董彩文 姜春鹏 《轻工学报》 CAS 2016年第3期49-56,共8页

食源性致病菌是诱发食品安全问题的重要隐患,在众多食源性致病菌检测技术中,PCR检测技术因具有特异、敏感、简便、快速等优点而得以广泛应用.然而现有的包括多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、多重实时荧光定量PCR技术、IMS-多重实时... 食源性致病菌是诱发食品安全问题的重要隐患,在众多食源性致病菌检测技术中,PCR检测技术因具有特异、敏感、简便、快速等优点而得以广泛应用.然而现有的包括多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、多重实时荧光定量PCR技术、IMS-多重实时荧光定量PCR技术、PCR-ELISA技术、EMA/PMA-PCR技术和DPO-PCR技术等在内的食源性致病菌PCR检测技术及其衍生技术仍存在成本高、效率低、质控差等缺陷,未来应向高灵敏度、高特异性、高通量、高重复性、简易、经济方向发展,以适应食源性致病菌对检测技术的要求. 展开更多

关键词 食源性致病菌 pcr检测技术 食品安全

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兽用疫苗支原体污染的PCR检测技术的建立及应用 被引量：6

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作者 贾丽艳 李彦明 张映 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期55-58,共4页

根据支原体的16 S rRNA基因设计特异性引物,以兽用疫苗中常见的支原体DNA为模板进行PCR试验,优化反应体系,建立了兽用疫苗支原体污染的PCR 检测方法,并对市场上的兽用疫苗随机抽查检测,其检出率为24.4%(22/90)。结果表明该方法特异性强... 根据支原体的16 S rRNA基因设计特异性引物,以兽用疫苗中常见的支原体DNA为模板进行PCR试验,优化反应体系,建立了兽用疫苗支原体污染的PCR 检测方法,并对市场上的兽用疫苗随机抽查检测,其检出率为24.4%(22/90)。结果表明该方法特异性强,灵敏度高,有望成为兽用疫苗支原体污染的检测方法之一。 展开更多

关键词 兽用疫苗 支原体 pcr检测技术

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甘蔗内标基因PCR检测技术研究 被引量：2

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作者 肖乃衍 林冰 +8 位作者 刘迪 陈平华 许跃语 施桂姣 王恒波 郭晋隆 高三基 许莉萍 陈如凯 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期500-507,共8页

克隆鉴定甘蔗内源低拷贝基因鲜有研究,影响转基因甘蔗精确鉴定。根据其他作物已有的内标基因和内源低拷贝基因,按照内标基因的物种特异性和通用性原则,用12个有代表性甘蔗栽培品种对11个候选基因进行筛选与鉴定,获得了甘蔗特有的内源低... 克隆鉴定甘蔗内源低拷贝基因鲜有研究,影响转基因甘蔗精确鉴定。根据其他作物已有的内标基因和内源低拷贝基因,按照内标基因的物种特异性和通用性原则,用12个有代表性甘蔗栽培品种对11个候选基因进行筛选与鉴定,获得了甘蔗特有的内源低拷贝基因,并以该基因建立了甘蔗内标基因PCR检测技术体系,为转基因甘蔗的精确检测和转基因标准的制定奠定了基础。 展开更多

关键词 甘蔗 内标基因 鉴定 pcr检测技术

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荧光定量PCR技术检测尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染的结果分析 被引量：8

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作者 冯文曦 梅玲 +1 位作者 王宁 郑红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第13期1366-1366,1369,共2页

关键词 人乳头瘤病毒感染 荧光定量 pcr技术检测 女性生殖道尖锐湿疣 患者 HPV-6 早期发现 pcr) 检测分析 发病率 危害性 潜伏性 亚临床 临床期 DNA

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实时荧光定量PCR技术检测牙周致病菌的研究现状

6

作者 朱丽芳 郑瑜谦 闫福华 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期380-382,共3页

关键词 pcr技术检测 牙周致病菌 实时荧光定量 细菌培养 聚合酶链反应 微生物群 分子生物学 不良影响

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生理状态下外周血白细胞IL-2基因表达的荧光定量PCR检测 被引量：3

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作者 王茹 陈佩杰 董强刚 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期457-459,475,共4页

目的:建立白细胞介素2(IL-2)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法:应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员中IL-2mRNA的表达。主要结果和结论:应用实时定量PCR方法能够对健康受试者外周血白细胞自发性IL-2mRNA表达进行定量分析,相... 目的:建立白细胞介素2(IL-2)基因表达的绝对定量实时PCR检测技术。方法:应用实时定量PCR方法检测25名健康运动员中IL-2mRNA的表达。主要结果和结论:应用实时定量PCR方法能够对健康受试者外周血白细胞自发性IL-2mRNA表达进行定量分析,相关系数r>0.99。 展开更多

关键词 外周血白细胞 荧光定量pcr检测 基因表达 生理状态 实时定量pcr方法 IL-2MRNA pcr检测技术 mRNA表达 白细胞介素 健康受试者 绝对定量 定量分析 相关系数 运动员 自发性

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PCR检测甘蔗宿根矮化病研究简述 被引量：3

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作者 张荣跃 李文凤 +5 位作者 黄应昆 罗志明 申科 王晓燕 尹炯 单红丽 《中国糖料》 2014年第3期69-70,共2页

对甘蔗宿根矮化病的常规PCR、优化PCR、巢式PCR、荧光定量PCR等检测技术进行了简述,以期为甘蔗宿根矮化病的早期诊断、田间发生动态监测、脱毒种苗的生产及对外甘蔗品种/材料交换提供帮助。

关键词 甘蔗 宿根矮化病 pcr检测技术

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转基因水稻蛋白试纸条与PCR定性检测技术比较研究

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作者 刘倩琪 《热带农业工程》 2019年第1期7-9,共3页

以现有的5个转基因水稻品系汕优63(TT51-1)、科丰6号(KF6)、Ⅱ优科丰6号(Ⅱ优KF6)、克螟稻(KMD)、M12为研究材料,分别采用PCR定性法和蛋白试纸条法2种方法进行检测,比较了2种方法的一致性、灵敏度、准确性,并明确了2种检测方法的适用范围。

关键词 转基因水稻 pcr定性检测技术 蛋白试纸条检测技术

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非洲猪瘟病毒PCR检测在养殖环节的应用 被引量：1

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作者 刘敏 《中国猪业》 2022年第1期81-83,86,共4页

非洲猪瘟是一种对生猪养殖危害性极大的传染性疾病,其传染性极强,可通过多种途径传播,目前为止尚无特效治疗方法,并且疫苗防控的结果也并不理想,该病已对多个国家的生猪养殖业造成严重的经济损失,也是当前我国重点防控的生猪疫病之一。... 非洲猪瘟是一种对生猪养殖危害性极大的传染性疾病,其传染性极强,可通过多种途径传播,目前为止尚无特效治疗方法,并且疫苗防控的结果也并不理想,该病已对多个国家的生猪养殖业造成严重的经济损失,也是当前我国重点防控的生猪疫病之一。为缓解该病毒在我国的传播流行情况,通过实时荧光定量PCR检测技术,快速对猪场内的猪群进行病毒筛查检测,同时对进出养猪场的车辆、人员,猪场的环境以及使用的饲料等进行病毒含量检测,有效排除病毒传播的概率,以保证有效防范该病发生。本文针对非洲猪瘟病毒特性以及当前我国对非洲猪瘟病毒诊断技术的现状进行分析,介绍了实时荧光定量PCR在非洲猪瘟病毒检测中的应用技术以及注意事项,以帮助更多的基层兽医实验室建立起非洲猪瘟病毒的PCR检测技术体系。 展开更多

关键词 非洲猪瘟 生猪养殖 pcr检测技术

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BRCA1基因全长mRNA序列分析技术

11

作者 徐红先 周冬仙 +1 位作者 熊文 邵超鹏 《实用医学杂志》 CAS 2005年第12期1340-1341,共2页

目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健... 目的:建立BRCA1基因全长mRNA序列测定方法。方法:根据文献和GenBank(U14680)报道的BRCA1基本序列设计6对特异性引物,建立6个特异性逆转录PCR(RT-PCR)技术,分段且扩增BRCA1全长mRNA,然后采用毛细管电泳进行cDNA测序,方法建立后用于3名健康女性样本。结果:6个特异性RT-PCR反应扩增片段相互覆盖,使序列分析结果包括全长BRCA1mRNA,共5000多bp。3名经PCR技术检测确定携带正常BRCA1基因的样本的mRNA分析结果显示,其BRCA1mRNA序列均与过往报道的正常mRNA序列完全一致。结论:所建立的RT-PCR特异性结合BRCA1基因,能用于其mRNA全长序列分析。 展开更多

关键词 BRCA1基因 RNA序列 全长 分析技术 pcr技术检测 MRNA RT-pcr 分析结果 特异性引物 DNA测序 毛细管电泳 pcr反应 特异性结合 测定方法 序列设计 pcr) 健康女性 方法建立 扩增片段 序列分析 逆转录 样本

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西沙海域长棘海星潜在鱼类捕食者鉴定 被引量：1

12

作者 张颖 杨栎潼 +8 位作者 苏南 陈慧真 高倩 胡建兴 郑凡昱 赖福香 袁运裕 傅亮 陈偿 《海洋学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期73-87,共15页

长棘海星的暴发对我国乃至印度−太平洋海域的珊瑚礁造成了严重的破坏。鱼类捕食者被认为是控制长棘海星种群暴发的重要因素,但我国对于可捕食长棘海星的鱼类的研究尚属空白。通过采集西沙5个长棘海星暴发礁区的珊瑚礁鱼类,利用PCR技术... 长棘海星的暴发对我国乃至印度−太平洋海域的珊瑚礁造成了严重的破坏。鱼类捕食者被认为是控制长棘海星种群暴发的重要因素,但我国对于可捕食长棘海星的鱼类的研究尚属空白。通过采集西沙5个长棘海星暴发礁区的珊瑚礁鱼类,利用PCR技术检测了鱼肠道内容物中的长棘海星DNA,并与已报道的长棘海星鱼类捕食者进行了比较分析。结果显示,本次调查共捕获了62尾鱼,共23科36属50种。在4种鱼的肠道内容物中检测到长棘海星DNA,分别是颊吻鼻鱼(Naso lituratus)、网纹宅泥鱼(Dascyllus reticulatus)、三叶唇鱼(Cheilinus trilobatus)和赤鳍裸颊鲷(Lethrinus erythropterus)。其中颊吻鼻鱼、三叶唇鱼和赤鳍裸颊鲷为首次报道的长棘海星潜在捕食者。本研究首次鉴定了我国长棘海星潜在鱼类捕食者种类,为开发长棘海星早期防控技术提供了重要参考。 展开更多

关键词 长棘海星 珊瑚礁鱼类 捕食者 肠道内容物 pcr检测技术

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一例猪链球菌与蓝耳病病毒混合感染的实验室诊断 被引量：4

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作者 陶巍夫 李超 +2 位作者 王浩先 黄培鑫 倪宏波 《现代畜牧兽医》 2018年第10期32-36,共5页

安达市某猪场仔猪大批发病,病猪出现精神萎靡、呼吸困难、采食量下降、体温升高。为对该场病猪进行确诊,运用临床诊断和病理解剖等手段,初步诊断是猪链球菌和蓝耳病病毒的混合感染,病猪感染本病早产和死胎率达30%、死亡率可达80%。通过... 安达市某猪场仔猪大批发病,病猪出现精神萎靡、呼吸困难、采食量下降、体温升高。为对该场病猪进行确诊,运用临床诊断和病理解剖等手段,初步诊断是猪链球菌和蓝耳病病毒的混合感染,病猪感染本病早产和死胎率达30%、死亡率可达80%。通过细菌学和PCR技术对放线杆菌、链球菌、猪瘟病毒、猪圆环病毒及蓝耳病病毒进行检测。发现血液琼脂培养基中出现针尖大小菌落,镜检为革兰氏阳性球菌,PCR检测蓝耳病病毒与链球菌为阳性,最终确诊为链球菌和蓝耳病病毒混合感染。通过对分离细菌进行药敏试验,结果显示,硫酸头孢喹肟、土霉素高度敏感。 展开更多

关键词 混合感染 蓝耳病病毒 pcr检测技术 猪链球菌

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肺结核病的快速实验室诊断 被引量：1

14

作者 袁俐 邢建新 +4 位作者 杨军 吴万贵 巫志坚 潘景峰 王宏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期F0003-F0003,共1页

关键词 实验室诊断 肺结核病 TUBERCULOSIS 结核分枝杆菌 pcr技术检测 肺结核患者 临床诊断 直接检测 痰培养 DNA检测

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兔骨髓基质细胞体外成骨分化鉴定及与煅烧骨复合培养的实验研究 被引量：4

15

作者 杨成林 毕郑钢 +3 位作者 王玉学 祁权 付春江 陶天遵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2005年第3期329-332,共4页

目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的... 目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的细胞行VonKossa染色观察钙结节形成;另制备细胞煅烧骨复合物,继续培养1、7、14d后取出,扫描电镜观察及X射线衍射仪检测。结果体外诱导培养2、4周后,兔骨髓基质细胞成功表达ALT和I型胶原,VonKossa染色可见钙结节形成。扫描电镜及X射线衍射分析证实细胞在煅烧骨表面大量贴附成活,14d后细胞铺满支架表面,合成并分泌胶原纤维及钙盐。结论兔骨髓基质细胞体外可成功向成骨细胞诱导分化,成骨特性表达佳;与牛煅烧骨体外复合培养显示良好的生物相容性。 展开更多

关键词 骨髓基质细胞 成骨细胞 煅烧骨 生物相容性 骨髓基质细胞 体外复合培养 牛煅烧骨 体外成骨 分化鉴定 pcr技术检测 实验研 细胞诱导分化 mRNA表达

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对无精子症和严重少精子症患者Y染色体畸变和微缺失的研究及评估 被引量：5

16

作者 金辛良 徐丹枫 +6 位作者 朱晓明 谭剑敏 周伟民 张涛亮 许嘉骏 高赟 闵志廉 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期460-462,共3页

目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermicfac-tor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法。对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系。方法对145例患者(无精子症102例,严... 目的研究无精子症和少精子症患者染色体畸变及Y染色体(Yq11区)无精子症因子(azoospermicfac-tor,AZF)微缺失情况,建立Y染色体微缺失的临床筛查方法。对原发性无精子及少弱精症患者与AZF微缺失的关系。方法对145例患者(无精子症102例,严重少精子症43例)经染色体核型分析及AZF的3个位点8对引物PCR扩增,检测染色体畸变和Y染色体微缺失率。选取6个Y染色体特异性序列标签位点(STS),用PCR技术检测145例精子发生障碍患者AZF区微缺失情况。结果145例中染色体核型异常12例,占8.3%。AZF区微缺失21例,缺失率为14.5%。无精子症和严重少精子症AZF缺失率分别为14.70%和11.62%。145例中AZF区微缺失21例,表现为无精子症。缺失均在AZFc区,7例为DAZ(sY254、sY255)缺失,另2例为DNA加sY157缺失。结论染色体畸变和Y染色体微缺失是导致无精子症和严重少精子症的主要原因之一。无精子症缺失率高于严重少精子症患者。AZF3个位点8对引物PCR扩增可作为Y染色体微缺失的临床筛查方法。 展开更多

关键词 严重少精子症 染色体畸变 患者 Y染色体微缺失 pcr技术检测 染色体核型异常 pcr扩增 无精子症因子 factor 序列标签位点 精子发生障碍 筛查方法 AZF区 缺失率 弱精症 原发性 分析及 特异性 DNA 临床 引物

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环氧合酶-2在卵巢癌组织中的表达 被引量：2

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作者 李晓艳 王泽华 《实用医学杂志》 CAS 2005年第20期2254-2255,共2页

目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在卵巢癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化和RT-PCR技术检测正常卵巢和卵巢癌组织中COX-2的表达情况。结果:检测的38例卵巢癌组织COX-2蛋白表达阳性23例,阳性表达率61%,33例表达COX-2... 目的:探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在卵巢癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组化和RT-PCR技术检测正常卵巢和卵巢癌组织中COX-2的表达情况。结果:检测的38例卵巢癌组织COX-2蛋白表达阳性23例,阳性表达率61%,33例表达COX-2mRNA,阳性表达率为87%;20例正常卵巢组织COX-2蛋白与COX-2mRNA均呈阴性表达。结论:COX-2在卵巢癌组织高表达,并在其发生发展中起重要作用。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 环氧化酶-2 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应 卵巢癌组织 环氧合酶-2 COX-2MRNA pcr技术检测 阳性表达率 COX-2蛋白

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一例猪瘟病毒与大肠杆菌混合感染的实验室诊断 被引量：2

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作者 魏欣宇 曾澳 +1 位作者 赵妍 张晓轩 《现代畜牧兽医》 2020年第3期34-38,共5页

肇东市某商品猪场内仔猪大批发病,病猪精神状态极差、发热、食欲下降、拉白色糊状并伴有腥臭味的粪便,有些迅速死亡但死亡率不高。为确诊此批病猪,运用临床分子生物学诊断和病理解剖观察等手段初步判定为大肠杆菌与猪瘟病毒混合感染。... 肇东市某商品猪场内仔猪大批发病,病猪精神状态极差、发热、食欲下降、拉白色糊状并伴有腥臭味的粪便,有些迅速死亡但死亡率不高。为确诊此批病猪,运用临床分子生物学诊断和病理解剖观察等手段初步判定为大肠杆菌与猪瘟病毒混合感染。根据其剖解现象使用细菌学检测和PCR技术对蓝耳病病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、大肠杆菌、放线杆菌及链球菌进行检测。SS培养基培养出的菌落形态为圆形半透明的小凸起,革兰氏染色镜检后观察到是革兰氏阴性杆菌。PCR检测结果显示猪瘟病毒为阳性。最终确诊为大肠杆菌和猪瘟病毒混合感染。通过对分离细菌进行药敏试验结果显示该菌对环丙沙、硫酸阿米卡星、恩诺沙星、阿莫西林等药物较为敏感。 展开更多

关键词 混合感染 猪瘟病毒 pcr检测技术 大肠杆菌

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猪圆环病毒3型引起母猪流产病例的诊断与分析 被引量：1

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作者 段汝亮 《现代畜牧兽医》 2022年第8期44-46,共3页

研究旨在对猪圆环病毒3型(PCV3)引起母猪流产病例进行诊断和分析。试验对某养殖场母猪流产胎儿进行细菌分离、提取DNA/RNA,并利用PCR/RT-PCR检测技术进行检测。结果显示,母猪流产胎儿猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病... 研究旨在对猪圆环病毒3型(PCV3)引起母猪流产病例进行诊断和分析。试验对某养殖场母猪流产胎儿进行细菌分离、提取DNA/RNA,并利用PCR/RT-PCR检测技术进行检测。结果显示,母猪流产胎儿猪瘟病毒(CSFV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PrV)、猪乙脑病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)均呈阴性,仅PCV3为阳性。PCV3阳性PCR产物进行基因测序,发现其核苷酸序列与其他PCV3存在较高的同源性,相似度超过98%。研究表明,PCV3可能为此次母猪流产的主要病因。 展开更多

关键词 猪圆环病毒3型 母猪流产 pcr/RT-pcr检测技术

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一例保育猪圆环病毒2型与链球菌混染调查分析

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作者 莫添麟 韦成威 韦志文 《中国畜禽种业》 2019年第6期87-88,共2页

2019年1月广西某规模化猪场,保育猪大量发病,病猪出现精神萎靡、体温升高、关节肿大等症状,对送检的一例病猪进行剖检、分子学检测、细菌学检测后,最终确诊为猪圆环病毒2型与链球菌的混合感染。分离细菌的药敏试验结果显示,对头孢曲松... 2019年1月广西某规模化猪场,保育猪大量发病,病猪出现精神萎靡、体温升高、关节肿大等症状,对送检的一例病猪进行剖检、分子学检测、细菌学检测后,最终确诊为猪圆环病毒2型与链球菌的混合感染。分离细菌的药敏试验结果显示,对头孢曲松钠、头孢拉定、头孢噻肟、阿莫西林、氨苄西林等高度敏感。针对检测结果,及时调整猪场免疫程序,加强饲养管理,减少经济损失。 展开更多

关键词 圆环病毒2型 链球菌 细菌学检测 pcr检测技术 混合感染 诊断

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