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数字PCR技术在动物疫病检测中的应用
1
作者 孟晓琴 赵淑娟 张晓霞 《中兽医医药杂志》 2025年第2期54-59,共6页
近年来,随着纳米技术和微流体技术的进步,数字PCR(dPCR)技术逐渐突破瓶颈,展现出快速发展的趋势。dPCR通过将反应体系分割为数万个微小独立反应单元,实现核酸模板的绝对定量分析,具有无需标准曲线、对抑制剂耐受性高、灵敏度高、特异性... 近年来,随着纳米技术和微流体技术的进步,数字PCR(dPCR)技术逐渐突破瓶颈,展现出快速发展的趋势。dPCR通过将反应体系分割为数万个微小独立反应单元,实现核酸模板的绝对定量分析,具有无需标准曲线、对抑制剂耐受性高、灵敏度高、特异性强、重复性好等显著优势。目前,dPCR在猪、牛、羊、禽等动物疫病检测中展现出应用潜力,能够检测早期感染或混合感染,支持流行病学研究,监测治疗效果,并实现病原体核酸浓度的绝对定量分析。然而,与qPCR相比,dPCR在寄生虫病检测中的灵敏度和准确性有待进一步提高。另外,高成本也在一定程度上限制了dPCR技术的大规模推广应用。随着技术的进一步发展和检测成本的降低,dPCR有望在临床诊断、流行病学研究和无症状携带病原动物的识别等领域发挥更重要的作用。 展开更多
关键词 数字pcr技术 动物疫病诊断 定量检测 猪 牛 羊 禽
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基于PCR技术的高产木糖醇工程菌重组质粒的构建和鉴定
2
作者 肖宏伟 叶有员 刘欣 《生物学教学》 北大核心 2025年第2期53-58,共6页
通过“构建高产木糖醇工程菌”这一实际问题的研究,基于PCR实验原理,引导学生创新性地解决研究中的问题:在引物末端设计添加所需限制酶切位点,实现同源序列的扩增和阳性菌落的鉴定。在此过程中提升学生关键能力和生物学学科核心素养。PC... 通过“构建高产木糖醇工程菌”这一实际问题的研究,基于PCR实验原理,引导学生创新性地解决研究中的问题:在引物末端设计添加所需限制酶切位点,实现同源序列的扩增和阳性菌落的鉴定。在此过程中提升学生关键能力和生物学学科核心素养。PCR技术在基因工程实验教学中的应用,为高中生物实验教学提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 pcr技术 质粒构建 工程菌 高产木糖醇 高中生物学
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荧光定量PCR技术在猪病防治中的应用 被引量：1
3
作者 刘彩云 王冬娟 《中国畜牧业》 2024年第7期47-48,共2页
生猪感染疾病时会直接对养殖场或养殖户的经济造成巨大损失,因此,做好生猪疾病预防工作显得尤其重要。利用实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR技术)能有效利用微量的DNA进行扩增,提高检测精度,对猪病诊治和防治具有重要作用。一、猪病的诊断和... 生猪感染疾病时会直接对养殖场或养殖户的经济造成巨大损失,因此,做好生猪疾病预防工作显得尤其重要。利用实时荧光定量PCR技术(FQ-PCR技术)能有效利用微量的DNA进行扩增,提高检测精度,对猪病诊治和防治具有重要作用。一、猪病的诊断和防治现状猪病预防成效能直接影响养殖效益,在我国农村有大量的个体户进行生猪养殖,但个体农户往往缺乏足够的养殖经验,文化水平普遍偏低. 展开更多
关键词 疾病预防工作 实时荧光定量pcr技术 猪病防治 养殖经验 个体农户 生猪养殖 养殖效益
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实时荧光定量PCR技术在水产养殖研究中的应用 被引量：1
4
作者 陈向红 何瑜 +2 位作者 郑姣妹 耿相昌 奉佳 《当代水产》 2024年第10期70-72,共3页
实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在q... 实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实现PCR进程的实时监测,进而对未知模板进行定量分析的一种检测技术。qPCR是在普通PCR定性检测基础上发展而来的核酸定量技术。在qPCR技术发展的过程中,两项重要发现起到了关键作用:一是TaqDNA聚合酶的5’端核酸外切酶活性被发现,它能降解特异性荧光标记的探针,使得间接定量检测PCR产物成为可能;二是荧光双标记探针被使用在密闭的反应管中,能实时地监测PCR反应的全过程。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 核酸外切酶 定性检测 水产养殖 荧光基团 TAQDNA聚合酶 荧光信号 荧光标记
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微滴式数字PCR技术在菜豆晕疫病菌检测中的应用
5
作者 刘晓宇 钱茱希 +5 位作者 郭静 杨静 李彬 吴翠萍 王振华 许剑涛 《安徽农业科学》 CAS 2024年第21期163-167,共5页
为了建立菜豆晕疫病菌(Pseudomonas savastanoi pv.phaseolicola)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,实现菜豆晕疫病菌的高效率、高精度的检疫鉴定和疫情监控,以菜豆晕疫病菌为研究对象,以位点特异性重组酶作为靶标基因,SSRP_F、SSRP_R、SSR... 为了建立菜豆晕疫病菌(Pseudomonas savastanoi pv.phaseolicola)微滴式数字PCR(ddPCR)检测方法,实现菜豆晕疫病菌的高效率、高精度的检疫鉴定和疫情监控,以菜豆晕疫病菌为研究对象,以位点特异性重组酶作为靶标基因,SSRP_F、SSRP_R、SSRP_P为特异性引物与探针,建立菜豆晕疫病菌ddPCR反应体系,结果表明,菜豆晕疫病菌的ddPCR检测体系的绝对定量检测低限为0.6 copies/μL,ddPCR的检测灵敏度比常规PCR高2个数量级。同时研究了种子携带菜豆晕疫病菌是否具有活性,提高了疫情检出率。 展开更多
关键词 微滴式数字pcr技术 菜豆晕疫病菌 快速检测
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基于实时荧光PCR技术检测葛根粉中植物源性成分
6
作者 张伊动 刘艳 +6 位作者 李诗瑶 朱必婷 张涛 林津 陈曦 朱力杰 张莉 《中南农业科技》 2024年第9期29-35,共7页
基于实时荧光PCR技术(Real-time fluorescence PCR,RT-PCR),利用不同种属植物之间基因组序列的差异,设计葛根、甘薯、马铃薯、玉米、薯蓣、木薯和豌豆7种典型含淀粉植物的特异性引物及探针,建立葛根粉中植物源性成分检测的RT-PCR检测方... 基于实时荧光PCR技术(Real-time fluorescence PCR,RT-PCR),利用不同种属植物之间基因组序列的差异,设计葛根、甘薯、马铃薯、玉米、薯蓣、木薯和豌豆7种典型含淀粉植物的特异性引物及探针,建立葛根粉中植物源性成分检测的RT-PCR检测方法。通过对豆薯、甘薯、大麦、小麦、黑麦、荞麦、菜豆等27种产品进行引物探针的特异性扩增,验证该方法的特异性,并检测7种引物探针的绝对灵敏度和相对灵敏度。结果表明,葛根、甘薯、木薯、玉米、豌豆成分检出的绝对灵敏度最低可达0.010 ng/μL,薯蓣和马铃薯的绝对灵敏度为0.001 ng/μL;7种引物探针的相对灵敏度低至0.1%(质量分数)。针对葛根粉掺假严重的状况,对市面上流通的40种葛根粉产品进行植物源性成分检测,其中25份样品不含葛根源性成分,占样品总数的62.5%;含葛根的15份样品中有5份样品掺有其他非葛根源性成分,占样品总数的12.5%。所检测到的非葛根源性成分以木薯和玉米居多,豌豆、薯蓣等也有检出。 展开更多
关键词 实时荧光pcr技术 葛根粉 植物源性成分 特异性 灵敏度
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定量PCR技术的研究现状及应用概述 被引量：12
7
作者 帅小蓉 夏庆友 朱勇 《蚕学通讯》 2002年第4期20-27,共8页
定量PCR的问世是继定性PCR(即常规PCR)后分子生物学方法学研究的一大飞跃 ,实现了对核酸信息量的分析比较 ,为疾病的诊断和治疗提供了更多、更有效的基因水平信息。本文旨在介绍定量PCR技术的研究现状 ,包括PCR产物定量检测的几种常用... 定量PCR的问世是继定性PCR(即常规PCR)后分子生物学方法学研究的一大飞跃 ,实现了对核酸信息量的分析比较 ,为疾病的诊断和治疗提供了更多、更有效的基因水平信息。本文旨在介绍定量PCR技术的研究现状 ,包括PCR产物定量检测的几种常用技术以及近年来研究和应用较多的几种重要的定量PCR方法。同时 ,对定量PCR技术在分子生物学和临床上的应用也作了探讨。 展开更多
关键词 定量pcr技术 研究现状 应用 发展 pcr技术
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应用PCR技术检测鸭疫里默氏杆菌的研究 被引量：63
8
作者 胡清海 刘晓文 +5 位作者 赵世华 张知良 丁铲 苗晋锋 刘华雷 赵东伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期471-473,共3页
根据已发表的鸭疫里默氏杆菌 15型CVL110 / 89株编码 4 2_kDa主要外膜蛋白的基因序列设计并合成一对引物 ,建立PCR方法 ,对 7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌及野外病死鸭病料组织进行检测。结果表明 ,7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培... 根据已发表的鸭疫里默氏杆菌 15型CVL110 / 89株编码 4 2_kDa主要外膜蛋白的基因序列设计并合成一对引物 ,建立PCR方法 ,对 7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌及野外病死鸭病料组织进行检测。结果表明 ,7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌DNA都可扩增出 80 9bp的DNA片段 ,而对照的 2株大肠杆菌和 1株沙门氏菌纯培养物DNA扩增结果为阴性 ;在对 2 4只不同鸭场病死鸭肝、脑的检测中 ,脑的检出率为 19/ 2 4 (高于细菌分离的 13/ 2 4 ) ,肝脏的检出率为 11/ 2 4 (高于细菌分离的 8/ 2 4 )。由此可见 ,建立的PCR技术可用于鸭疫里默氏杆菌的鉴定和快速诊断 (取脑组织 )。但此方法是否对其他血清型的鸭疫里默氏杆菌也适用 ,有待于收集这些血清型的菌株进行验证。 展开更多
关键词 pcr技术 鸭疫里默氏杆菌 检测 鸭 血清型
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实时荧光定量PCR技术在转基因玉米检测中的应用研究 被引量：43
9
作者 陈颖 徐宝梁 +2 位作者 苏宁 葛毅强 王曙光 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期602-607,共6页
采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对玉米中的内源基因Invertase和转基因玉米Mon810、Event 176中的外源基因进行了定量检测 ,建立了商业化转基因玉米Mon 810 (YieldGard)和Event 176 (Maximizer)的定量PCR检测方法... 采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对玉米中的内源基因Invertase和转基因玉米Mon810、Event 176中的外源基因进行了定量检测 ,建立了商业化转基因玉米Mon 810 (YieldGard)和Event 176 (Maximizer)的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度小于 0 .0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 转基因玉米 定量检测 食品安全
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实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立 被引量：55
10
作者 陈颖 徐宝梁 +3 位作者 苏宁 王媛 王丙武 葛毅强 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期65-69,共5页
采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <... 采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 检测 转基因大豆 内源基因Lectin 外源基因NEPSPS
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应用微滴数字PCR技术快速检测食用菌中沙门氏菌 被引量：33
11
作者 赵新 兰青阔 +3 位作者 陈锐 朱珠 刘娜 王永 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期315-321,共7页
定量风险评估是整个风险评估体系的发展趋势和终极体现形式,而快速、准确、简便的定量技术则是保障整个体系顺利、有效完成的核心支撑。作者根据沙门氏菌inv A毒力基因序列,在前人对引物研究结果基础上,合成特异性引物和探针。以沙门氏... 定量风险评估是整个风险评估体系的发展趋势和终极体现形式,而快速、准确、简便的定量技术则是保障整个体系顺利、有效完成的核心支撑。作者根据沙门氏菌inv A毒力基因序列,在前人对引物研究结果基础上,合成特异性引物和探针。以沙门氏菌标准菌株为研究对象,建立沙门氏菌微滴数字PCR的快速定量检测方法,并对其特异性、灵敏度、样品实测等关键指标与传统培养法进行对照验证。结果表明,所建立的微滴数字PCR方法具有较好的特异性,检测灵敏度可达到10~2CFU/m L,样品实测与传统国标法对比,二者符合率100%。所建立的沙门氏菌微滴数字PCR定量检测方法,可以快速、准确、直接地分析沙门氏菌的含量,无需构建质粒和标准曲线,避免了因标准曲线量值偏差而影响样品定值的准确性,所建立的方法为食源性沙门氏菌污染的快速定量检测提供了技术支撑,为微生物风险评估体系的完善奠定了基础。 展开更多
关键词 微滴数字pcr技术 沙门氏菌 定量检测
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利用PCR技术鉴别普通小麦Glu-1位点的某些等位基因 被引量：18
12
作者 孙辉 刘志勇 +1 位作者 李保云 刘广田 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期734-737,共4页
Glu- 1位点的等位基因变异与普通小麦的烘烤品质有密切的关系 ,本文利用根据 Glu- Dly位点的基因序列设计的一对引物 ,通过 PCR技术 ,可以准确鉴别等位基因的变异 Glu- Dly10和 Glu- Dly12 ,同时还可以初步鉴定 Glu- B1位点的等位基因变... Glu- 1位点的等位基因变异与普通小麦的烘烤品质有密切的关系 ,本文利用根据 Glu- Dly位点的基因序列设计的一对引物 ,通过 PCR技术 ,可以准确鉴别等位基因的变异 Glu- Dly10和 Glu- Dly12 ,同时还可以初步鉴定 Glu- B1位点的等位基因变异 Glu- Blh(14+15 ) 。 展开更多
关键词 pcr技术 鉴别 等位基因 普通小麦 GLU-1位点 烘烤品质
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基于PCR技术的玉米CMS材料胞质类型的快速鉴定 被引量：19
13
作者 张祖新 方明镜 +2 位作者 杜何为 邓莉蓉 郑用琏 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1386-1388,共3页
关键词 雄性不育材料 胞质类型 CMS pcr技术 快速鉴定 玉米 限制性核酸内切酶 线粒体DNA 雄性不育基因
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多重PCR技术在动物疫病诊断中的应用 被引量：28
14
作者 曹洪志 颜其贵 +3 位作者 郭万柱 樊汶樵 肖雪 李成贤 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2007年第1期45-47,共3页
聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction．PCR）技术已经建立20余年．在这20多年里．它被广泛应用于生命科学各个领域．已经显示出了强大的工具性作用和旺盛的生命力。PCR技术的广泛应用同时也带动了自身的发展．而PCR的发展又产生... 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction．PCR）技术已经建立20余年．在这20多年里．它被广泛应用于生命科学各个领域．已经显示出了强大的工具性作用和旺盛的生命力。PCR技术的广泛应用同时也带动了自身的发展．而PCR的发展又产生了一些新的应用．多重PCR技术就是其中之一。在疾病的诊断方面．人们一直在梦想寻找一种高度特异、敏感和简便的方法能同时将需要鉴别诊断的疾病一次性地得到确诊．多重PCR技术的出现。无疑使之成为了可能。它不仅使疾病在分子水平上得到了确诊．而且在类症鉴别上具有其他诊断方法无可比拟的优越性。 展开更多
关键词 多重pcr技术 疫病诊断 应用 聚合酶链式反应 动物 生命科学 鉴别诊断
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双重抑制PCR技术分离鹅微卫星标记 被引量：13
15
作者 杜文兴 虞德兵 +3 位作者 刘红林 练春兰 候水生 王林云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期63-67,共5页
用双重抑制PCR技术分离11对鹅的特异微卫星引物,应用于浙东白鹅和太湖鹅的基因组PCR扩增。结果表明:11对引物在浙东白鹅和太湖鹅中分别扩增出37和36个清晰条带,20个等位基因为两品种所共有,11对引物中有5对呈中等多态、6对呈高度多态。... 用双重抑制PCR技术分离11对鹅的特异微卫星引物,应用于浙东白鹅和太湖鹅的基因组PCR扩增。结果表明:11对引物在浙东白鹅和太湖鹅中分别扩增出37和36个清晰条带,20个等位基因为两品种所共有,11对引物中有5对呈中等多态、6对呈高度多态。各位点产生2～6个等位基因,各位点的平均杂合度为0.456～0.772,以G07位点为最高,G06位点为最低;平均多态信息为0.375～0.737,以G07位点为最高,G01、G03和G11位点为最低。浙东白鹅和太湖鹅有效等位基因数分别为2.655和2.558,与实际测得的两品种平均值3.364和3.273较接近。研究结果表明,两品种的等位基因分布较为均匀,与鹅的实际品种特征一致,因此,双重抑制PCR技术适合于鹅的基因组结构研究。 展开更多
关键词 双重抑制pcr技术 微卫星标记 鹅
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PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 被引量：37
16
作者 刘华伟 郭蔼光 +1 位作者 马立农 邱立 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期55-58,共4页
PCR是一种体外核酸扩增技术 ,具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点 ,在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。文章系统地阐述了PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 ,并对引物基因设计、PCR扩增过程中的技术参数和常见疑难问题做... PCR是一种体外核酸扩增技术 ,具有敏感性强、特异性高、快速、简便等优点 ,在医学、生物学等领域中得到了广泛应用。文章系统地阐述了PCR技术在沙门氏菌快速检测中的应用 ,并对引物基因设计、PCR扩增过程中的技术参数和常见疑难问题做了归纳总结。同时简要介绍了PCR技术的研究进展 。 展开更多
关键词 pcr技术 沙门氏菌 检测技术 聚合酶链式反应
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电化学发光PCR技术检测转基因植物 被引量：18
17
作者 刘晋峰 邢达 +1 位作者 沈行燕 朱德斌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期375-378,共4页
随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合... 随着转基因植物种类的增多 ,转基因植物的检测也成了当今的热门话题 .电化学发光法是将电化学与化学发光两种高灵敏度方法相结合 ,实现了检测的高效、准确、无毒害 .电化学发光PCR法首次将电化学发光技术、PCR技术和双探针杂交技术结合起来 ,用于检测CaMV (cauliflowermosaicvirus) 35S启动子 ,从而判断其是否含有转基因成分 .PCR产物与生物素标记的探针杂交 ,可以起到筛选的作用 ;与三联吡啶钌标记的探针杂交则可用于电化学发光检测 .两种探针同时与转基因样品PCR产物杂交 ,使结果避免假阳性的影响而更加准确 .实验表明 :此方法可以准确地检测到 35S启动子的存在 .该方法灵敏度高 ,可靠性强 ,操作简便 ,结果准确 ,有望成为一种高效的转基因检测方法 . 展开更多
关键词 转基因植物 电化学发光 pcr技术 CaMV35 S启动子 蛋白质
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PCR技术检测熟肉制品中沙门氏菌的研究 被引量：17
18
作者 尹荣焕 尹荣兰 +3 位作者 杨玉英 潘树德 苏振山 白文林 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第2期222-222,226,共2页
进行了PCR技术检测熟肉制品中的沙门氏菌的试验。电泳扩增产物表明:人工污染沙门氏菌的熟肉制品检测呈阳性,而无菌去离子水对照呈阴性。该检测方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可快速、准确地检测熟肉制品中沙门氏菌,从而提高... 进行了PCR技术检测熟肉制品中的沙门氏菌的试验。电泳扩增产物表明:人工污染沙门氏菌的熟肉制品检测呈阳性,而无菌去离子水对照呈阴性。该检测方法具有快速、特异性强、灵敏度高等特点,可快速、准确地检测熟肉制品中沙门氏菌,从而提高食品安全评估的效率。 展开更多
关键词 沙门氏菌 pcr技术 检测
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PCR技术战略 被引量：22
19
作者 朱新产 张涌 廖祥儒 《生物技术通报》 CAS CSCD 1998年第3期29-33,共5页
ＰＣＲ技术战略朱新产张涌廖祥儒（西北农业大学分子生物学研究室陕西杨陵７１２１００）ＰＣＲ技术已成为分子生物学研究领域极为重要的工具，在几小时内沙克级的ＤＮＡ，甚至单拷贝基因能在体外扩增放大。其过程的广泛性预示着ＰＣＲ... ＰＣＲ技术战略朱新产张涌廖祥儒（西北农业大学分子生物学研究室陕西杨陵７１２１００）ＰＣＲ技术已成为分子生物学研究领域极为重要的工具，在几小时内沙克级的ＤＮＡ，甚至单拷贝基因能在体外扩增放大。其过程的广泛性预示着ＰＣＲ技术不仅能分离ＤＮＡ片段，也能修饰... 展开更多
关键词 pcr技术 模板 引物 多聚酶 试剂
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Taq Man-PCR技术诊断结核病的临床应用研究 被引量：11
20
作者 张金福 李传友 +7 位作者 陈效友 张健源 田苗 张旭霞 赵兵 王淑霞 高微微 马玙 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期250-253,共4页
目的　探讨TaqMan -聚合酶链反应 (TaqMan -PCR)技术在结核病快速诊断中的临床价值。方法　对 15 5例活动性肺结核患者的痰和外周血、130例结核性胸膜炎患者的胸腔积液和外周血以及 6 1例结核性脑膜炎患者的脑脊液和外周血应用TaqMan -... 目的　探讨TaqMan -聚合酶链反应 (TaqMan -PCR)技术在结核病快速诊断中的临床价值。方法　对 15 5例活动性肺结核患者的痰和外周血、130例结核性胸膜炎患者的胸腔积液和外周血以及 6 1例结核性脑膜炎患者的脑脊液和外周血应用TaqMan -PCR检测结核分支杆菌DNA ,痰、胸腔积液和脑脊液进行抗酸染色涂片检查 ,另外 ,痰标本还进行了BACTEC和改良罗氏培养 ;同期以5 2例肺癌患者的痰和外周血、5 0例恶性胸腔积液患者的胸腔积液以及 33例健康人的外周血作为对照进行TaqMan -PCR检测。 结果　 15 5例活动性肺结核患者的痰和外周血、130例结核性胸膜炎患者的胸腔积液和外周血以及 6 1例结核性脑膜炎患者的脑脊液和外周血TaqMan -PCR的阳性率分别为 4 9.0 %和 5 1.6 %、4 5 .4 %和 38.5 %以及 5 0 .8%和 4 2 .6 % ,痰、胸腔积液和脑脊液TaqMan -PCR的阳性率显著高于抗酸染色涂片以及BACTEC和罗氏培养 (P <0 .0 5 )。TaqMan -PCR检测痰、胸腔积液和外周血的特异性分别为 96 .2 %、98%和 96 .5 %。结论　TaqMan -PCR具有较高的敏感性和特异性 ,对结核病的快速诊断具有一定的价值。 展开更多
关键词 TaqMan—pcr技术 诊断 结核病 临床应用 结核分支杆菌 脑脊液
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