目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8...目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8、10、16和20μg/mL)。细胞增殖-毒性检测(Cell counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术用于分析细胞周期和细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9),周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B(Cyclin B),转移蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin),p53信号通路中生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitors 1A,p21)和肿瘤蛋白p53(Tumor protein p53,TP53)的表达水平,研究SFN对细胞增殖以及p53信号通路的影响。结果:SFN以浓度依赖性的方式抑制PANC-1细胞增殖。与对照组相比,SFN处理后的PANC-1细胞增殖率显著降低(P<0.001);迁移及侵袭能力减弱(P<0.01,P<0.0001);阻滞PANC-1细胞在G2/M期(P<0.0001);同时促进细胞凋亡(P<0.0001);上调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,下调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。与SFN组相比,敲低TP53能显著下调SFN抑制PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和阻滞在G2/M期的能力,显著下调SFN促进PANC-1细胞凋亡的能力,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,上调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论:SFN抑制胰腺癌PANC-1细胞活性与激活p53信号通路相关。展开更多
文摘目的:探讨萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)对胰腺癌PANC-1细胞增殖、周期、转移和凋亡的影响及其机制。方法:将PANC-1细胞随机分为四组:对照组(sh-NC)、SFN组(sh-NC+SFN)、实验组(sh-TP53)和sh-TP53+SFN组,并制备不同浓度的SFN溶液(0、6、8、10、16和20μg/mL)。细胞增殖-毒性检测(Cell counting Kit-8,CCK-8)试剂盒检测细胞存活率,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术用于分析细胞周期和细胞凋亡能力,蛋白免疫印迹法(Western Blot,WB)检测凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma 2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Cysteinyl aspartate specific proteinase-9,Caspase-9),周期蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent protein kinase 1,CDK1)和细胞周期蛋白B(Cyclin B),转移蛋白基质金属蛋白酶-9(Matrix metallopeptidase-9,MMP-9)和E-钙粘蛋白(E-cadherin),p53信号通路中生长停滞与DNA损伤诱导蛋白45A(growth arrest and DNA damage inducible alpha,GADD45A),细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(cyclin-dependent kinase inhibitors 1A,p21)和肿瘤蛋白p53(Tumor protein p53,TP53)的表达水平,研究SFN对细胞增殖以及p53信号通路的影响。结果:SFN以浓度依赖性的方式抑制PANC-1细胞增殖。与对照组相比,SFN处理后的PANC-1细胞增殖率显著降低(P<0.001);迁移及侵袭能力减弱(P<0.01,P<0.0001);阻滞PANC-1细胞在G2/M期(P<0.0001);同时促进细胞凋亡(P<0.0001);上调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,下调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。与SFN组相比,敲低TP53能显著下调SFN抑制PANC-1细胞增殖、迁移、侵袭和阻滞在G2/M期的能力,显著下调SFN促进PANC-1细胞凋亡的能力,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9、E-cadherin、GADD45A、p21和TP53的蛋白水平,上调Bcl-2、CDK1、Cyclin B和MMP-9的蛋白水平(P<0.05,P<0.01,P<0.001,P<0.0001)。结论:SFN抑制胰腺癌PANC-1细胞活性与激活p53信号通路相关。
