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p27^Kip1在RA诱导人神经前体细胞分化中的作用 被引量:3
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作者 许秋岩 赵咏梅 +4 位作者 王一松 李卫红 刘扬 徐群渊 张海燕 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期219-222,共4页
目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹... 目的观察全反式视黄酸(RA)对体外培养的人神经前体细胞的诱导作用,研究在这个过程中细胞周期调节蛋白p27Kip1、p21Cip1及相关分子cdk2、cyclinE的变化,探讨p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中的作用。方法取12wk的人胚胎前脑纹状体,原代培养人神经前体细胞。在细胞进入对数生长期时给予1μmol·L-1RA诱导。在诱导的d1、3、7,用相差显微镜观察细胞形态的变化;用免疫细胞化学染色、RT-PCR等方法检测p27Kip1、p21Cip1及其相关的cdk2、cyclinE的变化。结果在RA诱导d3,人神经前体细胞形态发生变化,至d7时已接近成熟神经元形态。免疫细胞化学染色结果显示p27Kip1的表达在RA诱导d3增加,在RA诱导d7时明显增加,与未经RA诱导的细胞相比差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,p27Kip1 mRNA的表达在RA诱导d3增加,并在RA诱导d5达到高峰,而p21Cip1 mRNA的表达在RA诱导后略呈下降趋势。cdk2、cy-clinE的mRNA水平在RA诱导前后没有明显变化。结论p27Kip1在RA诱导的人神经前体细胞分化过程中具有重要作用,并且其表达增加是通过转录水平调节的。 展开更多
关键词 p27^KIp1 人神经前体细胞 RA 神经元分化
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小鼠p27^kip1真核表达载体的构建及其对单个核细胞周期的影响 被引量:2
2
作者 祝巍 陈萍 +1 位作者 赵海涛 孙丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1229-1232,共4页
目的构建小鼠p27kip1真核表达载体,探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响,为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上,并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中,应用MTT... 目的构建小鼠p27kip1真核表达载体,探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响,为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上,并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中,应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。结果经酶切分析和测序鉴定,成功构建了小鼠pcDNA3.0/p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0/p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多,其生长增殖不仅受到明显抑制,而且处于G1/G0期的细胞明显增加,处于S期的细胞明显减少。结论构建的pcDNA3.0/p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达,且高表达的pcD-NA3.0/p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长。 展开更多
关键词 p27^KIp1 单个核细胞 细胞周期
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p27^(Kip1)蛋白在子宫内膜癌中的表达及其意义 被引量:11
3
作者 王华 王靖华 +4 位作者 步宏 魏于全 李俸媛 雷松 杨秀英 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期265-268,共4页
目的 :探讨子宫内膜癌中 p2 7Kipl蛋白的表达情况及临床病理意义。方法 :采用免疫组化S P法检测 10 5例子宫内膜癌p2 7Kip1蛋白的表达 ,并运用流式细胞术检测 46例子宫内膜癌组织的DNA含量。结果 :子宫内膜癌 p2 7Kip1蛋白阳性表达率为6... 目的 :探讨子宫内膜癌中 p2 7Kipl蛋白的表达情况及临床病理意义。方法 :采用免疫组化S P法检测 10 5例子宫内膜癌p2 7Kip1蛋白的表达 ,并运用流式细胞术检测 46例子宫内膜癌组织的DNA含量。结果 :子宫内膜癌 p2 7Kip1蛋白阳性表达率为6 9 % (72 / 10 5例 ) ,明显低于正常增生期子宫内膜及单纯增生、复合增生子宫内膜总的阳性率 (91% ,P <0 0 1) ,而与不典型增生子宫内膜的 p2 7Kip1蛋白表达无明显差异 (P >0 0 5 )。p2 7Kip1蛋白阳性表达与子宫内膜癌的组织学分级、临床分期及DNA倍体有关 (P <0 0 5 )。组织分化差、临床期别晚以及异倍体细胞中 ,其 p2 7Kip1蛋白阳性表达明显下降。p2 7Kip1蛋白表达与子宫内膜癌组织学类型、肌层浸润、患者年龄及淋巴结转移无明显相关性。结论 :p2 7Kip1蛋白表达的下降可能与子宫内膜癌的发生发展有关 。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 p27^KIp1蛋白 DNA倍体 免疫组化
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丙戊酸对HL-60/HT细胞P27^(Kip1)、P170表达水平及耐药性的影响 被引量:5
4
作者 李益清 尹松梅 +4 位作者 谢双锋 马丽萍 聂大年 王秀菊 吴裕丹 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期423-427,共5页
目的观察丙戊酸对白血病细胞P27Kip1、P170表达水平和耐药性的影响,探讨其可能的作用机制。方法递增压力选择培养法建立白血病耐药细胞株HL-60/HT,MTT法检测丙戊酸作用前后细胞的增殖情况及对Ara-C耐药性的改变,流式细胞术测定HL-60细胞... 目的观察丙戊酸对白血病细胞P27Kip1、P170表达水平和耐药性的影响,探讨其可能的作用机制。方法递增压力选择培养法建立白血病耐药细胞株HL-60/HT,MTT法检测丙戊酸作用前后细胞的增殖情况及对Ara-C耐药性的改变,流式细胞术测定HL-60细胞、HL-60/HT细胞中P27Kip1、P170的表达和细胞周期。结果成功诱导培养建立耐药HL-60/HT细胞,其对HT、VCR、DNR、Ara-C的耐药倍数分别为9.30、5.20、4.91、3.65倍,耐药性能稳定。HL-60/HT细胞P27Kip1表达水平明显低于正常人单个核细胞及HL-60细胞(P<0.05),P170表达水平则明显高于正常人单个核细胞及HL-60细胞(P<0.05)。丙戊酸+Ara-C联合用药对HL-60、HL-60/HT细胞的生长抑制率明显高于单独用药的丙戊酸组和Ara-C组,q值分别为1.37和1.51,说明合用具有协同作用。丙戊酸作用于HL-60、HL-60/HT细胞后,细胞中P27Kip1表达水平、G1期细胞比加药前增加(P<0.05);P170表达水平在加药前后无明显变化(P>0.05)。结论耐药白血病HL-60/HT细胞中P27Kip1的表达低于敏感细胞HL-60,丙戊酸能抑制HL-60/HT细胞增殖,并降低其对Ara-C的耐药性。作用机制可能与改变P27Kip1的表达、增加G1期细胞含量有关,与P170作用无关。 展开更多
关键词 丙戊酸 HL-60/HT细胞 p27^KIp1 多药耐药 p170
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子宫颈腺癌中COX-2与p27^(kip1)、MMP-2蛋白表达的关系 被引量:14
5
作者 王喜梅 湛丽 +3 位作者 吴勇军 孙雷 刘逢吉 张众 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期303-307,共5页
目的探讨子宫颈腺癌组织中环氧化酶2(COX2)与细胞周期调控因子p27kip1、基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达关系。方法采用组织微阵列技术结合免疫组化SP法检测106例子宫颈腺癌组织和22例慢性子宫颈炎组织中COX2与p27kip1、MMP2的表达。结果10... 目的探讨子宫颈腺癌组织中环氧化酶2(COX2)与细胞周期调控因子p27kip1、基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达关系。方法采用组织微阵列技术结合免疫组化SP法检测106例子宫颈腺癌组织和22例慢性子宫颈炎组织中COX2与p27kip1、MMP2的表达。结果106例子宫颈腺癌组织COX2和MMP2的阳性表达率分别为86.8%和70.8%,均高于慢性子宫颈炎组织(P<0.01);p27kip1阳性表达率为58.5%,低于慢性子宫颈炎组织81.8%(P<0.05)。COX2和MMP2在子宫颈腺癌的病理分级中,G3组阳性表达率均明显高于G1组(P<0.05)。MMP2和p27kip1表达与子宫颈腺癌组织学类型有关,透明细胞腺癌MMP2阳性表达率高于子宫颈内膜腺癌和子宫内膜样腺癌(P<0.05),p27kip1阳性表达率低于子宫颈内膜腺癌和子宫内膜样腺癌(P<0.05)。COX2阳性表达强度与MMP2的阳性表达强度呈正相关(P<0.01)。COX2阳性表达强度与p27kip1的阳性表达强度呈负相关(P<0.05)。结论COX2与p27kip1、MMP2在子宫颈腺癌组织中的表达密切相关,p27kip1低表达与COX2、MMP2增强表达在子宫颈腺癌的发生发展中起重要作用,三者可能作为子宫颈腺癌恶性化的分子标志。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶-2(MMp-2) 环氧化酶-2(COX-2) 蛋白表达 子宫颈腺癌组织 p27^KIp1表达 子宫内膜样腺癌 慢性子宫颈炎 阳性表达率 细胞周期调控因子 免疫组化S-p 组织微阵列技术 子宫颈内膜 透明细胞腺癌 组织学类型 表达关系
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PTEN基因稳定转染联合辐射对肿瘤细胞周期进程及G_1期激酶抑制蛋白P27^(kip1)表达的影响 被引量:4
6
作者 田梅 吴丛梅 +2 位作者 刘林林 朴春姬 李修义 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期195-199,共5页
目的:研究辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外转染对人脑胶质瘤SHG-44细胞周期进程及G1期激酶抑制蛋白P27表达的影响。方法:脂质体包裹重组载体体外转染肿瘤细胞并经G418筛选稳定表达细胞株,光学显微镜和透射电镜观察稳定转染细胞形态,以We... 目的:研究辐射诱导表达载体pEgr-hPTEN体外转染对人脑胶质瘤SHG-44细胞周期进程及G1期激酶抑制蛋白P27表达的影响。方法:脂质体包裹重组载体体外转染肿瘤细胞并经G418筛选稳定表达细胞株,光学显微镜和透射电镜观察稳定转染细胞形态,以Western blotting法检测PTEN基因的辐射诱导表达情况,应用流式细胞术研究稳定转染联合0~10Gy X-射线照射对胶质瘤细胞周期进程及P27kip1的表达。结果:稳定转染PTEN基因的SHG-44细胞PTEN蛋白的相对表达量可被辐射诱导增强,5Gy以内PTEN蛋白的相对表达量随照射剂量增加而增加;稳定转染细胞超微结构有明显的退行性改变,可见核内染色质趋边的类似早期凋亡的改变;稳定转染联合X-射线照射细胞周期发生明显改变,细胞从G1期到S期发生阻滞,细胞周期相关蛋白P27表达上调。结论:PTEN基因稳定转染联合辐射可诱导肿瘤细胞G1期阻滞,并与P27kip1表达上调有关。 展开更多
关键词 pEgr-hpTEN X线 神经胶质瘤 p27^KIp1 细胞周期
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p27^(KIP1)和CyclinE在骨肉瘤中表达的意义 被引量:3
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作者 吕刚 韩壮 +4 位作者 王敏 孙传海 张学 姜彦多 崔军 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期204-207,共4页
目的:研究p27KIP1和CyclinE蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法:应用免疫组化S-P方法检测28例骨肉瘤石蜡标本中p27KIP1和CyclinE蛋白的表达情况。结果:p27KIP1蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为42.9%,在对... 目的:研究p27KIP1和CyclinE蛋白在骨肉瘤中的表达,探讨其在骨肉瘤发生、发展中的可能作用。方法:应用免疫组化S-P方法检测28例骨肉瘤石蜡标本中p27KIP1和CyclinE蛋白的表达情况。结果:p27KIP1蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为42.9%,在对照组20例骨软骨瘤中为75.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.05)。CyclinE蛋白在28例骨肉瘤中表达阳性率为67.9%,在20例骨软骨瘤中为10.0%,骨肉瘤与骨软骨瘤相比有显著差异(P<0.01)。p27KIP1蛋白在骨肉瘤中的表达阴性率为57.1%,与CyclinE蛋白在骨肉瘤中表达阴性率67.9%相比二者差异不显著(P>0.05)。结论:p27KIP1在骨肉瘤中表达降低,CyclinE在骨肉瘤中高表达,二者与骨肉瘤发生机制有关,且具有相关性。 展开更多
关键词 骨肉瘤 p27^KIp1蛋白 CYCLINE蛋白 免疫组织化学 临床意义
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庆大霉素诱导LLC-PK1细胞凋亡与p27^(Kip1)表达关系的研究 被引量:2
8
作者 傅鹏 崔若兰 +4 位作者 袁伟杰 周凤娟 梅小斌 戴建新 孙树汉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期485-489,共5页
目的 观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用 ;研究细胞周期调节蛋白 p2 7Kip1蛋白和mRNA表达在凋亡过程中的变化 ;并探讨细胞凋亡与p2 7Kip1之间的关系。方法 对体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株 (LLC PK1细胞 )... 目的 观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用 ;研究细胞周期调节蛋白 p2 7Kip1蛋白和mRNA表达在凋亡过程中的变化 ;并探讨细胞凋亡与p2 7Kip1之间的关系。方法 对体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株 (LLC PK1细胞 )予以不同浓度的庆大霉素溶液分别作用 2 4~ 96h ,以MTT法测定庆大霉素对LLC PK1细胞增殖的抑制率 ,抽提细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡条带 ,流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞增殖动力学 ,WesternBlot法检测细胞内p2 7Kip1的蛋白表达 ,RT PCR法检测细胞p2 7Kip1mRNA表达的变化。结果 庆大霉素对LLC PK1细胞增殖有抑制作用 ,具诱导LLC PK1细胞凋亡的作用 ,凋亡率呈药物浓度和作用时间依赖性 ;庆大霉素致细胞周期停滞于G1期。p2 7Kip1蛋白在细胞内的表达随着干预的庆大霉素浓度增加而逐渐上调 ,蛋白水平与凋亡率之间呈正相关 ,其mRNA表达趋势与其蛋白表达一致。结论 庆大霉素诱导的LLC PK1细胞凋亡与细胞周期蛋白p2 7Kip1表达密切相关。 展开更多
关键词 庆大霉素 LLC-pK1细胞 p27^KIp1 细胞凋亡 MTT法
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As_2O_3和/或TGF-β1诱导NB4细胞凋亡中P27^(Kip1)、cyclin E、内源性TGF-β1的变化及其意义 被引量:2
9
作者 梁颖 李艳 +3 位作者 王月 李霞 王萍萍 王柏勋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期74-79,共6页
本研究探讨三氧化二砷(As2O3)和/或转化生长因子-β1(TGF-β1)作用于NB4细胞后的细胞凋亡情况、P27Kip1、cyclin E及内源性TGF-β1mRNA水平的变化及其意义。用MTT法检测As2O3对NB4细胞的细胞毒性及IC50,用瑞氏-姬姆萨染色观察凋亡细胞... 本研究探讨三氧化二砷(As2O3)和/或转化生长因子-β1(TGF-β1)作用于NB4细胞后的细胞凋亡情况、P27Kip1、cyclin E及内源性TGF-β1mRNA水平的变化及其意义。用MTT法检测As2O3对NB4细胞的细胞毒性及IC50,用瑞氏-姬姆萨染色观察凋亡细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,半定量RT-PCR检测P27Kip1、cyclin E以及内源性TGF-β1的mRNA水平。结果表明:As2O3、TGF-β1均能明显抑制NB4细胞的生长,促进NB4细胞的凋亡;As2O3对NB4细胞的抑制及促凋亡作用均呈剂量-时间依赖关系,24小时的IC50约为12μmol/L,48小时的IC50约为5μmol/L,72小时的IC50约为3μmol/L。As2O3和/或TGF-β1均可使NB4细胞出现细胞周期阻滞,5μmol/L As2O3使NB4细胞阻滞在G2/M期,5ng/ml TGF-β1使NB4细胞阻滞在G1期,两者联合处理组主要使S期阻滞。As2O3、TGF-β1分别作用于NB4细胞时均可见P27Kip1及内源性TGF-β1的mRNA表达上调,而cyclin E的mRNA表达下调;联合处理组结果显示TGF-β1可增强As2O3上述作用。结论:As2O3及TGF-β1均可诱导NB4细胞凋亡,引起细胞周期分布异常;As2O3及外源性TGF-β1可能通过上调内源性TGF-β1使P27Kip1高表达以诱导细胞凋亡;TGF-β1可能直接抑制了cyclin E的表达,或者通过上调P27Kip1的表达而反馈抑制cyclin E的活性,从而导致NB4细胞周期阻滞。 展开更多
关键词 As2O3 TGF-Β1 NB4细胞 细胞凋亡 p27^KIp1 cyclin E 内源性 TGF-Β1
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p27^(kip1)和Skp2在损伤后大鼠坐骨神经中的表达变化 被引量:2
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作者 史淑贤 程纯 +3 位作者 陈梦玲 秦婧 高尚锋 沈爱国 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期20-24,共5页
为了探讨损伤后周围神经p27kip1和S期激酶相关蛋白2(Skp2)的定位表达和变化,本实验将成年SD大鼠随机分为正常对照组、夹伤组和切断组,运用Western blot结合免疫组织化学及免疫荧光双标,在大鼠坐骨神经损伤时,对p27kip1和Skp2表达的影响... 为了探讨损伤后周围神经p27kip1和S期激酶相关蛋白2(Skp2)的定位表达和变化,本实验将成年SD大鼠随机分为正常对照组、夹伤组和切断组,运用Western blot结合免疫组织化学及免疫荧光双标,在大鼠坐骨神经损伤时,对p27kip1和Skp2表达的影响进行了研究。结果表明:(1)坐骨神经夹伤后,p27kip1蛋白表达先逐渐下降,后又逐渐上升;坐骨神经切断后,远侧段p27kip1蛋白表达持续下降,而近侧段p27kip1蛋白表达在切断后6h明显下降,后又逐渐升高至正常水平,而Skp2表达变化与之相反;(2)免疫组织化学染色结果显示,坐骨神经切断后1w,远侧段从断端到末端,p27kip1阳性信号逐渐增加,而Skp2阳性信号逐渐减弱;(3)免疫荧光双标显示,正常和损伤坐骨神经的雪旺氏细胞中都有p27kip1和Skp2表达。以上结果提示:周围神经损伤后影响雪旺氏细胞中p27kip1和Skp2的表达变化,为进一步研究它们在周围神经损伤和修复中的作用机制奠定基础。 展开更多
关键词 p27^KIp1 SKp2 雪旺氏细胞 坐骨神经 Western BLOT 免疫组织化学 大鼠
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宫颈癌中p27^(Kip1)基因的表达与体外药物敏感性的关系 被引量:3
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作者 程玺 蔡树模 +2 位作者 李子庭 臧荣余 张太明 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第1期39-41,共3页
背景与目的:p27K ip1基因是调控细胞周期并抑制细胞分裂的重要基因。它与诱导肿瘤细胞的凋亡和化疗药物的耐药也有关系。本文旨在探讨宫颈癌组织中p27K ip1基因的表达与体外药敏的关系。方法:采用MTT法检测了部分化疗药物在46例宫颈癌... 背景与目的:p27K ip1基因是调控细胞周期并抑制细胞分裂的重要基因。它与诱导肿瘤细胞的凋亡和化疗药物的耐药也有关系。本文旨在探讨宫颈癌组织中p27K ip1基因的表达与体外药敏的关系。方法:采用MTT法检测了部分化疗药物在46例宫颈癌组织中的抑制率,并采用免疫组织化学方法检测了癌组织中p27K ip1基因的表达。结果:宫颈癌组织中p27K ip1表达的阳性率为15.2%(7/46)。顺铂(DDP)、表柔比星(E-ADM)、替尼泊苷(VM26)、紫杉醇(Taxol)、吉西他滨(Gem zar)、氟尿嘧啶(5-FU)和BLM的平均抑制率分别为47.6%、38.0%、42.7%、27.4%、23.0%、26.3%和24.8%。DDP、VM26和Taxol在p27K ip1表达阴性的宫颈癌标本中的抑制率显著低于阳性标本(P<0.05),而在其他药物中差异无显著性。结论:p27K ip1的表达可作为判断肿瘤对化疗药物的敏感性的指标,指导临床用药。 展开更多
关键词 宫颈癌 p27^KIp1 MTT法 体外药敏 耐药
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p57^(Kip2)和p27^(Kip1)基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义 被引量:4
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作者 高红 张志波 尚海 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期525-526,529,共3页
目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RTPCR技术,分别检测p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在108例胃癌组织及60例癌旁组织中的表达。结果p57Kip2基因mRNA在胃癌组织中阳性表达... 目的研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在胃癌组织中的表达及意义。方法采用RTPCR技术,分别检测p57Kip2和p27Kip1基因mRNA在108例胃癌组织及60例癌旁组织中的表达。结果p57Kip2基因mRNA在胃癌组织中阳性表达率为28.70%,显著低于癌旁组织中的阳性表达率56.67%(P<0.05),p57Kip2基因mRNA相对含量检测胃癌组织为0.59±0.17,显著低于癌旁组织1.63±0.21(P<0.05);p27Kip1基因mRNA在胃癌组织中阳性表达率为23.15%,低于癌旁组织中的阳性表达率31.67%(P>0.05),p27Kip1基因mRNA相对含量检测胃癌组织为1.53±0.23,稍高于癌旁组织1.46±0.35(P>0.05)。结论胃癌组织中p57Kip2和p27Kip1基因蛋白表达的降低与转录机制有关,并在胃癌的发生中存在不同的抑癌途径或不同的调控机制。 展开更多
关键词 p57^Kip2基因 p27^KIp1基因 胃癌
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P27^(kip1)与细胞周期蛋白G在急性白血病中的表达及相关性研究 被引量:3
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作者 陈惠瑜 林东红 +1 位作者 罗玲清 胡建达 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期847-851,共5页
为了探讨P27kip1与细胞周期蛋白G(cyclin G)在急性白血病患者中的表达及其相关性,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G mRNA水平,采用Western blot检测39例急性白血病患者和10... 为了探讨P27kip1与细胞周期蛋白G(cyclin G)在急性白血病患者中的表达及其相关性,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测89例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G mRNA水平,采用Western blot检测39例急性白血病患者和10例正常人白细胞的P27kip1与cyclin G蛋白表达水平。结果显示:急性白血病初治/复发组的cyclin G mRNA与蛋白表达水平均明显高于缓解组和正常对照组(p<0.05或p<0.01);缓解组与正常对照组之间无显著差异(p>0.05)。急性白血病初治/复发组的P27kip1 mRNA水平与缓解组和正常对照组比较均无明显差异(p>0.05)。而急性白血病缓解组和正常对照组的P27kip1的蛋白表达水平高于初治/复发组(p<0.05),缓解组与正常对照组之间无显著差异(p>0.05)。P27kip1与cyclin G的表达呈低度负相关。结论:P27kip1与cyclinG在白血病患者中有异常表达,与白血病的发生发展有一定联系;P27kip1的低表达与cyclin G的异常高表达可能是白血病预后不良的因素之一。 展开更多
关键词 p27^KIp1 细胞周期蛋白G 急性白血病
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p27^(kip1)真核表达载体的构建及其对人胆管癌细胞生长的影响 被引量:2
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作者 罗昆仑 马宽生 +2 位作者 何振平 杨金亮 董家鸿 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期405-410,共6页
目的:构建p27^(kip1)真核表达载体并进行基因转染,研究其对人胆管癌细胞生长特性的影响。方法:将人p^(27kip1) cDNA克隆至真核表达载体pClneo的Not I酶切位点中,然后应用DOTAP脂质体将重组质粒转染人胆管癌QBC939细胞中,用G418筛... 目的:构建p27^(kip1)真核表达载体并进行基因转染,研究其对人胆管癌细胞生长特性的影响。方法:将人p^(27kip1) cDNA克隆至真核表达载体pClneo的Not I酶切位点中,然后应用DOTAP脂质体将重组质粒转染人胆管癌QBC939细胞中,用G418筛选抗性细胞克隆,采用PCR、RT-PCR和Western印迹法检测外源性目的基因在靶细胞基因组中的整合及表达,以及转基因细胞对裸鼠致瘤性能力的改变。结果:成功构建p^(27kip1)基因真核表达载体,并将其导入QBC939细胞中。经G418筛选得到稳定表达p^(27kip1)基因的细胞株,p^(27kip1)基因转染细胞生长速度明显减慢,并出现分化的迹象,其裸鼠致瘤性能力明显降低。结论:p^(27kip1)基因具有抑癌基因的作用,在未来胆管癌的基因治疗中可能具有应用前景。 展开更多
关键词 p27^KIp1 基因转染 基因治疗 QBC939 胆管癌 其核表达载体
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肾癌中cyclin D1和p27^(kip1)的表达及其意义 被引量:2
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作者 葛建荣 任国平 +1 位作者 俞雅萍 张巧英 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期171-174,共4页
目的探讨cyc lin D1、p27k ip1在普通型肾细胞癌(renal cell carc inom a,RCC)发生、发展中的作用。方法用半定量RT-PCR方法检测25例普通型RCC和10例肿瘤远端的正常肾组织中cyc lin D1的mRNA含量,用免疫组化方法检测76例普通型RCC中cyc ... 目的探讨cyc lin D1、p27k ip1在普通型肾细胞癌(renal cell carc inom a,RCC)发生、发展中的作用。方法用半定量RT-PCR方法检测25例普通型RCC和10例肿瘤远端的正常肾组织中cyc lin D1的mRNA含量,用免疫组化方法检测76例普通型RCC中cyc lin D1和p27k ip1蛋白的表达,并对cyc lin D1、p27k ip1蛋白表达与临床病理参数的关系进行分析。结果普通型RCC中cyc lin D1的mRNA含量0.488±0.399,高于正常对照组0.089±0.066(P<0.01)。cyc lin D1的表达与肿瘤体积大小有关,体积大者cyc lin D1高表达(P<0.05)。普通型RCC中p27k ip1表达低于正常对照组,随着p27k ip1表达的降低,肿瘤的细胞核Fu-hrm an分级、TNM分期增高。结论cyc lin D1高表达和p27k ip1的低表达与普通型RCC的发生有关;p27k ip1的低表达可能促进肿瘤的演进,p27k ip1的表达可作为评价普通型RCC预后的参考指标。 展开更多
关键词 肾肿瘤 细胞周期 CYCLIN D1 p27^KIp1蛋白
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P27^(Kip1)和TGF-β1在原代APL细胞凋亡中作用机制的研究 被引量:2
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作者 王蕾 李艳 +2 位作者 王萍萍 卢香兰 王柏勋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期324-330,共7页
本研究探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对原代APL细胞凋亡及周期的影响,As2O2作用前后P27Kip1、TGF-β1、cyclinE和bcl-2的变化以及P27Kip1在As2O3诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡中的作用。用细胞形态学及流式细胞仪分别检测... 本研究探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)对原代APL细胞凋亡及周期的影响,As2O2作用前后P27Kip1、TGF-β1、cyclinE和bcl-2的变化以及P27Kip1在As2O3诱导急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡中的作用。用细胞形态学及流式细胞仪分别检测原代APL细胞凋亡和细胞周期改变,免疫组织化学法和RT-PCR技术检测药物处理前后细胞P27Kip1、TGF-β1、cyclinE以及BCL-2蛋白和基因表达的变化。结果表明:As2O3与APL细胞共同培养24小时,浓度为1、5、10μmol/L时,凋亡细胞所占比例分别为1.42%、4.57%、10.67%;至48小时,凋亡细胞分别为8.92%、16.07%和18.90%,明显高于相同浓度的As2O3作用24小时(p<0.05);至72小时,细胞以碎片为主。同一时段随着As2O3浓度的增加,APL细胞凋亡不断增多;同一浓度As2O3作用于APL细胞,随着作用时间的延长,APL细胞凋亡也随之增多。5、10μmol/L的As2O3作用于APL细胞24、48、72小时可见细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例均明显高于对照组(p<0.05),而1μmol/LAs2O3作用后的细胞周期无明显变化。1、5和10μmol/LAs2O3作用于APL细胞,P27Kip1蛋白表达增高,P27Kip1mRNA与β-actin灰度值之比(P27Kip1/β-actin)分别为0.181、0.489和0.921,表明随着As2O3浓度的增高,P27Kip1mRNA表达水平显著上调(p<0.05),P27Kip1表达与凋亡细胞数之间存在正相关(r=0.55,p<0.05);与对照组相比,TGF-β1蛋白和mRNA表达上调,伴有CyclinE、BCL-2蛋白和mRNA表达下调,TGF-β1表达与凋亡细胞数之间存在正相关(r=0.51,p<0.05),TGF-β1表达与P27Kip1表达之间也存在正相关(r=0.31,p<0.05)。结论:As2O3体外可诱导原代APL细胞凋亡,存在时间-剂量依赖关系,并使细胞周期阻滞于G1期。P27Kip1表达的变化情况与As2O3诱导细胞凋亡的作用效果密切相关,As2O3诱导原代APL细胞凋亡的机制可能是通过上调TGF-β1,从而上调P27Kip1,拮抗CyclinE和BCL-2的作用,抑制细胞增殖,使细胞周期阻滞于G1期,从而诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 p27^KIp1 TGF-Β1 急性早幼粒细胞白血病 细胞凋亡 CYCLIN E 三氧化二砷
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P27^(kip1)在肾癌中的表达及临床意义 被引量:4
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作者 吴芃 郑少斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1883-1886,1889,共5页
目的检测细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白p27kip1在肾癌中的表达及临床意义。方法采用基于组织芯片的免疫组化方法、Westernblotting及RT-PCR检测80例肾癌组织、40例配对的癌旁肾组织及786-0细胞系中p27kip1蛋白及mRNA的表达情况,观... 目的检测细胞周期素依赖性蛋白激酶抑制蛋白p27kip1在肾癌中的表达及临床意义。方法采用基于组织芯片的免疫组化方法、Westernblotting及RT-PCR检测80例肾癌组织、40例配对的癌旁肾组织及786-0细胞系中p27kip1蛋白及mRNA的表达情况,观察其表达与肿瘤临床参数之间的关系,并对3种检测方式(免疫组织化学、Westernblotting及RT-PCR)在p27kip1基因及蛋白水平上的检测结果进行分析和评价。结果免疫组化及Westernblotting检测显示,p27kip1蛋白主要在细胞核中表达,肾癌组表达率明显低于正常组(P<0.05),且在肿瘤不同的临床分期及病理分级间的表达有显著差异(P<0.05);p27kip1mRNA的表达在正常组织和肾癌组织中无明显差异。Westernblotting与免疫组化法检测蛋白表达有较一致的效果。结论正常肾组织与肾癌组织之间p27kip1的基因水平并无差异,而肾癌中p27kip1蛋白阳性表达率低于正常肾组织,其表达的调控可能是基于翻译阶段的蛋白降解。p27kip1低表达可能促进肿瘤的演进与发展。检测p27kip1蛋白可能成为评价肾癌预后的参考指标,为肾癌诊治的研究提供了新的思路。 展开更多
关键词 肾肿瘤 p27^KIp1 免疫组织化学 WESTERN BLOTTING RT-pCR
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TGF-β1和(或)三氧化二砷作用于HL-60细胞后P27^(Kip1)表达及凋亡情况的研究 被引量:2
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作者 于锦香 孟艳立 李艳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期893-897,共5页
本研究观察三氧化二砷(As2O3)和/或TGF-β1对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响,以及作用前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE和BCL-2的变化情况。As2O3和/或TGF-β1作用于HL-60细胞,用细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期... 本研究观察三氧化二砷(As2O3)和/或TGF-β1对HL-60细胞凋亡及细胞周期的影响,以及作用前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE和BCL-2的变化情况。As2O3和/或TGF-β1作用于HL-60细胞,用细胞形态学观察及流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期改变情况,应用免疫组织化学检测药物处理前后P27Kip1、内源性TGF-β1、cyclinE以及BCL-2表达的变化情况。结果表明:As2O3和TGF-β1单用均可以诱导HL-60细胞发生凋亡,联合处理对HL-60细胞生长抑制作用强于单药处理,其中5μmol/LAs2O3作用最强,5ng/mlTGF-β1处理可引起HL-60细胞的细胞周期阻滞于G1期(p<0.05)。5ng/mlTGF-β1和联合处理组P27Kip1的表达较对照组增强(p<0.05);5μmol/LAs2O3处理组P27Kip1的表达与对照组比较无明显差异(p>0.05)。5ng/mlTGF-β1和联合处理组均可见cyclinE蛋白表达下调(p<0.05)。5μmol/LAs2O3和联合处理组可见内源性TGF-β1表达上调(p<0.05)。结论:As2O3、外源性TGF-β1均可诱导HL-60细胞凋亡,联合处理组诱导凋亡作用强于对照组和单药处理组,TGF-β1处理可引起HL-60细胞周期阻滞于G1期。TGF-β1诱导HL-60细胞凋亡过程中P27Kip1表达增强,拮抗cyclinE和BCL-2的作用,细胞周期阻滞,诱导细胞发生凋亡,这表明P27Kip1是TGF-β引起细胞周期阻滞的关键效应物,外源性TGF-β1又通过上调内源性TGF-β1的表达增强As2O3诱导原代APL细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 TGF-Β1 CYCLIN E 三氧化二砷 BCL-2 HL-60细胞 p27^KIp1 细胞凋亡
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CCK对胆管癌细胞增殖及P21^(WAF1)、P27^(KIP1)基因表达的影响 被引量:1
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作者 马宽生 罗昆仑 +2 位作者 何振平 王曙光 董家鸿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期93-95,共3页
目的 探讨胆囊收缩素 (Cholecystokinin ,CCK)促进胆管癌细胞增殖的可能机制。方法 采用细胞增殖计数法及流式细胞仪分析CCK对胆管癌细胞生长、增殖及细胞周期的影响 ,RT PCR、Western印迹法检测CCK对P2 1WAF1 、P2 7KIP1 基因表达的... 目的 探讨胆囊收缩素 (Cholecystokinin ,CCK)促进胆管癌细胞增殖的可能机制。方法 采用细胞增殖计数法及流式细胞仪分析CCK对胆管癌细胞生长、增殖及细胞周期的影响 ,RT PCR、Western印迹法检测CCK对P2 1WAF1 、P2 7KIP1 基因表达的影响。结果 CCK具有显著促进无血清培养的胆管癌细胞的生长和增殖 ,加速细胞周期的进程 ,P2 1WAF1 、P2 7KIP1 mRNA和蛋白水平表达明显降低。结论 CCK促进胆管癌细胞增殖可能与下调细胞周期相关蛋白P2 1WAF1 、P2 7KIP1 展开更多
关键词 CCK p21^WAF1 p27^KIp1 细胞周期 胆管癌 细胞增殖
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应用组织芯片技术研究p27^(kip1)和Skp2在星形胶质细胞瘤及增生中的表达和意义 被引量:2
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作者 李丹阳 戚基萍 张春庆 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期245-248,共4页
目的:探讨p27kip1和Skp2在星形胶质细胞增生及星形胶质细胞瘤中的表达及其与肿瘤发生发展的关系。方法:利用组织芯片技术及PV6000通用型二步法免疫组化方法检测p27kip1和Skp2在正常脑组织,星形胶质细胞增生,低和高级别星形胶质细胞瘤中... 目的:探讨p27kip1和Skp2在星形胶质细胞增生及星形胶质细胞瘤中的表达及其与肿瘤发生发展的关系。方法:利用组织芯片技术及PV6000通用型二步法免疫组化方法检测p27kip1和Skp2在正常脑组织,星形胶质细胞增生,低和高级别星形胶质细胞瘤中的表达。结果:正常脑组织中p27kip1阳性表达率91.7%,Skp2表达阴性;增生组中p27kip1和Skp2阳性表达率分别为86.4%、28.6%,与正常组比较,p27kip1无统计学意义;Skp2有统计学意义;低级别肿瘤组中二者阳性表达率分别为64.3%、46.7%,与增生组比较,p27kip1有统计学意义;Skp2无统计学意义;高级别肿瘤组中二者阳性表达率分别为42.6%、69.6%,与低级别肿瘤组比较,差异均有统计学意义;p27kip1和Skp2与组织学分级密切相关。结论:p27kip1有可能成为鉴别星形胶质细胞增生与低级别星形胶质细胞瘤的客观指标,且p27kip1和Skp2在星形胶质细胞瘤的发生发展过程中有重要作用。 展开更多
关键词 星形胶质细胞增生 星形胶质细胞瘤 组织芯片 p27^KIp1 SKp2
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